專利名稱：喜樹鹼精氨酸鹽制劑的制備方法
技術領域：
本發明屬于新制劑喜樹鹼精氨酸鹽的一種制備方法。
喜樹鹼為從珙
科植物喜樹中提取的抗腫瘤生物鹼，我國喜樹鹼植物資源豐富。喜樹鹼從1970年開始在國內臨床應用，因其在水中溶解度低于0.001%，而多以喜樹鹼的鈉鹽用于臨床。據上海報導喜樹鹼治療胃癌、直腸癌、絨癌、肝癌、肺癌、食道癌等1000余例，證明對胃癌、直腸癌、絨癌等有較好的近期療效，胃癌有效率達60%左右，對腫塊縮小，幽門梗阻癥狀消除較5-氟脲嘧啶、噻
哌等化療藥物佳;對惡性葡萄胎、絨毛膜上皮癌也有較高療效，切除原發病灶后，轉移灶有消退可能，較化療藥物6-巰基嘌呤、5-氟脲嘧啶、氨甲
呤優越，(醫藥工業第7期1頁，1972);據武漢報導喜樹鹼治療23例晚期胃癌，對胃底賁門癌療效最好，高達87.5%。喜樹鹼除有較高抑瘤活性外，對抑制腫瘤疼痛亦有明顯效果。喜樹鹼的臨床毒性主要表現在泌尿系統、心血管系統及消化系統等，以泌尿系統最為突出，如發生尿頻、尿痛及血尿等較為嚴重，一般出現在200mg累積量時最為明顯。其次是消化道反應，如腹瀉、上消化道出血、局限性腹脹等(武漢新醫藥第1期20頁，1972)。
70年代后期，國內開始把重點放在治療原發性肝癌和白血病上，將喜樹鹼結晶制成靶向型混懸液，靜脈注射后能使藥物濃集于肝、脾和骨髓。據上海報導，在有統計的肝區或腫塊縮小的224例中，165例縮小大于2cm，使一些處于切除邊緣或根本不能切除的患者經喜樹鹼治療后獲得切除機會。大量臨床資料證明喜樹鹼的抗癌作用是肯定的，特別是對消化道癌及淋巴細胞性白血病療效尤為顯著。可惜由于藥物制劑等因素不能消除喜樹鹼固有的毒副反應，例如喜樹鹼鈉鹽注射液容易氧化，而氧化后毒性增大，而供靜脈注射肝靶向型喜樹鹼混懸液粒子直徑要求十分嚴格，一般在2.0μm以下，但制品貯存中粒徑增大，故迄今未能進行大批量生產。
本發明的目的在于尋找并制備喜樹鹼的一種新的有機鹽類，既能增加在水中的溶解度，提高其在人體內的抗腫瘤活性，又能降低其毒副作用，其化學性質又比較穩定，使喜樹鹼在臨床上的作用得到充分發揮，為腫瘤患者提供一種療效可靠、用藥安全、價格低廉的藥物。
KagitaniYoshio等〔JapanKokai76，44623(C、A、85∶68297)〕報導了乙酰水楊酸精氨酸鹽的工業化制法。乙酰水楊酸在水中溶解度很低(0.3%)，無法制成注射液，只是將乙酰水楊酸與鹼性游離氨基酸L-精氨酸結合成鹽，該鹽極易溶解于水中，在水中溶解度大于40%，可供制成粉針劑。該鹽不穩定，每0.9g需加入0.1g精氨酸作穩定劑。
但至今尚未見到關于喜樹鹼有機鹽類的報導。
本發明的目的是這樣實現的將喜樹鹼初生態的微晶體與游離L-精氨酸的水溶液在溶劑中反應，在適宜的溫度與PH值下，使喜樹鹼分子中內酯環開裂，裂環產生的羥基與L-精氨酸的鹼性較強的氨基相結合生成鹽，得喜樹鹼精氨酸鹽。
該工藝的關鍵是反應液的鹼性及L-精氨酸的用量。反應必須是在鹼性條件下進行，否則內酯環不能開裂，也不可能與L-精氨酸形成有機鹽。
由于喜樹鹼的精氨酸鹽與L-精氨酸的溶解度相似，用一般方法很難將反應過量的L-精氨酸分離除凈。而在制劑中只有過量的L-精氨酸的存在(鹼性)，此鹽才能穩定。L-精氨酸本身又有保肝作用，因此不必將過量的L-精氨酸分離除去。
本發明所制得的喜樹鹼精氨酸鹽具有以下特點1、該鹽的毒性比喜樹鹼鈉鹽明顯降低，其LD50值是喜樹鹼鈉鹽的4、17倍(喜樹鹼鈉鹽LD50為47、5mg/kg，喜樹鹼精氨酸鹽LD50為198、5mg/kg)，臨床應用價值遠比喜樹鹼鈉鹽和喜樹鹼混懸液為高。
2、該鹽給藥后有明顯的體內分布靶向性，單獨給藥后主要濃集于肝臟和消化道，而且持續的時間長，在其它器官組織中的分布量較少。L-精氨酸為保肝藥物，能保護正常肝細胞不受傷害。將該鹽制成注射液或包封于脂質體內，則能進一步提高對肝、肺的靶向性，實驗證明能使喜樹鹼在肝、肺中的濃度分別比其它組織提高10和100倍。因此，適用于治療肝癌和肺癌。
3、實驗證明該鹽的抑瘤活性較強。對S180抑瘤率分別為52%(5mg/kg，單獨使用)和74%(5mg/kg，包封于脂質體內);對肝癌實體瘤抑瘤率分別為53.1%(5mg/kg，單獨使用)和82%(5mg/kg，包封于脂質體內)，對EAC(艾氏腹水癌)有顯著的抑制作用，可使小鼠生命延長率達到126%，部分小鼠腹水消失，能長期存活。說明該鹽的抑瘤活性比喜樹鹼鈉鹽稍強。腫瘤相伴免疫測定證實，該鹽對機體免疫系統的抑制作用遠比喜樹鹼鈉鹽輕微。
4、該鹽的理化穩定性比喜樹鹼鈉鹽和喜樹鹼混懸液高，不僅熱穩定性高，而且受-OH離子催化作用減弱，室溫貯存兩年不變色，也不析出結晶，能克服喜樹鹼鈉鹽氧化毒性增大的問題。
5、該鹽極易溶于水，常溫下溶解度超過10%，比喜樹鹼鈉鹽的水溶性高得多，除可制備脂質體等肝靶向型制劑外，尚可制備多種高濃度喜樹鹼。
6、該鹽采用一次開環反應制備，方法簡便，收率高達100%，不會出現副反應和殘留有機溶劑問題。
實施例一、取喜樹鹼5.0g(0.0143摩爾)，加入氯仿-甲醇(1∶1)混合液50ml，置水浴上加溫至溶解，在回流攪拌下，緩緩滴加L-精氨酸水溶液〔25g(0.143摩爾)L-精氨酸溶于30ml蒸餾水中〕，繼續回流30分鐘至反應液基本澄明后，趁熱過濾，濾液回收氯仿、甲醇。取殘留水溶液冷凍干燥，得喜樹鹼精氨酸鹽針片狀黃色結晶，共30g(含過量L-精氨酸)。
化學結構式
喜樹鹼精氨酸鹽喜樹鹼紅外光譜cm-11750cm-1(內酯環上的羰基)1650cm-1(雜環上的羰基)喜樹鹼精氨酸鹽紅外光譜cm-11580cm-1(羧基中的羰基)1650cm-1(雜環上羰基)二、取喜樹鹼0.5g(0.000143摩爾)，加入二甲基亞砜10ml，置水浴中加溫至溶解，在回流攪拌下，緩緩滴加0.25g(0.000143摩爾)L-精氨酸溶于蒸餾水的溶液，繼續回流至溶液澄明，10分鐘后，減壓回收二甲基亞砜。將得到的干涸物與2.5g(0.00143摩爾)L-精氨酸混合，加入少量水加溫溶解后，趁熱過濾，濾液冷凍干燥，得喜樹鹼精氨酸鹽針片狀黃色結晶3.25g(含過量的L-精氨酸鹽)。
三、取喜樹鹼3.0g(0.00862摩爾)，加氯仿-乙醇(1∶2)混合液20ml，置水浴中加溫溶解，在回流攪拌下，一次加入L-精氨酸水溶液(將18g(0.1034摩爾)L-精氨酸溶于50ml蒸餾水中)，繼續回流至反應液澄明。回收氯仿，剩余水溶液冷凍干燥。得喜樹鹼精氨酸鹽針片狀黃色結晶21g(含過量L-精氨酸)。
權利要求
1.一種喜樹鹼精氨酸鹽制劑的制備方法，其特征是以喜樹鹼和L-精氨酸水溶液為原料進行反應制得。
2.根據權利要求1所述的制備方法，其特征是在成鹽反應中所用的原料喜樹鹼與L-精氨酸的分子比為1∶10～12。
3.根據權利要求1所述的制備方法，其特征是所用溶劑可分別采用氯仿-甲醇、氯仿-乙醇、二甲基亞砜及水。
4.根據權利要求1所述的制備方法，其特征是在成鹽反應時，反應溫度為溶劑回流溫度。
全文摘要
本發明涉及的是抗癌藥物新制劑喜樹鹼的L-精氨酸鹽的制備方法。它的特點是喜樹鹼與L-精氨酸水溶液，在適當的溶劑中，在一定的溫度和pH值下，反應得喜樹鹼精氨酸鹽。反應中精氨酸是過量的，其作用是可增加該鹽在水溶液中的穩定性，同時又是有保肝作用。該鹽抑癌作用比喜樹鹼鈉鹽稍強，具有明顯的肝靶向性。不僅克服了喜樹鹼鈉鹽毒性大，穩定性差等缺點，而且向臨床提供了一種療效確切的肝靶向型抗腫瘤藥物。
文檔編號A61K31/44GK1042151SQ8810514
公開日1990年5月16日 申請日期1988年10月22日 優先權日1988年10月22日
發明者顧學裘, 張永恒, 顧茂健 申請人:沈陽藥學院