專利名稱:治療疼痛的羥苯基－亞哌啶－4－基－甲基－苯甲酰胺衍生物的制作方法
發明領域本發明涉及新化合物及其制備方法、應用以及包含所述新化合物的藥用組合物。此新化合物用于治療、尤其是用于治療疼痛。
發明背景已發現δ受體在許多身體機能如循環和疼痛系統中具有作用。因而δ受體配體具有止痛藥物和/或抗高血壓藥物的潛在用途。還證實δ受體配體有免疫調節活性。
目前充分鑒定了至少三種不同的阿片樣物質受體(μ、δ和κ)，三種阿片樣物質受體都主要存在于包括人類在內的許多物種的中樞系統和外周神經系統。當在各種動物模型中激活一種或多種這些受體時，可觀察到痛覺缺失。
目前可應用的選擇性阿片樣物質δ配體本質上幾乎無一例外地是肽，不適于經全身途徑給藥。一個非肽類δ激動劑的例子是SNC80(Bilsky E.J.等，Journal of Pharmacology and ExperimentalTherapeutics，273(1)，pp.359-366(1995))。但是仍然需要選擇性提高而副作用減少的選擇性δ-激動劑。
因此，本發明要解決的問題是尋找與目前的μ激動劑相比，不僅止痛效果增強而且副作用減少以及提高全身性作用的新止痛藥物。
已經鑒定和現有技術領域：
已有的止痛藥物存在許多缺點，它們的藥代動力學差，當全身途徑給藥時沒有止痛作用。同時，有資料證明，現有技術中所述的優選δ激動劑化合物全身給藥時表現出明顯的驚厥作用。
現已發現，WO 98/28270包括但未具體公開的某些化合物表現出驚人的δ-激動劑性質及體內效力增強。
發明概述本發明的新化合物用以下結構式I定義 其中R1選自(i)苯基 (ii)吡啶基 (iii)噻吩基
(iv)呋喃基 (v)咪唑基 (vi)三唑基 (vii)噻唑基 其中各R1苯環和R1雜芳環可任選并獨立地被選自以下的1、2或3個取代基進一步取代直鏈和支鏈C1-C6烷基、NO2、CF3、C1-C6烷氧基、氯、氟、溴和碘。苯環和雜芳環上的取代可發生在所述環系的任何位置。
本發明的一個優選實施方案是依照式I的化合物，其中R1如上定義，每個R1苯環和R1芳香雜環可以獨立地被甲基進一步取代。
本發明的一個更優選實施例是依照式I的化合物，其中R1是吡啶基、噻吩基和呋喃基。
式I化合物的鹽和對映體也屬本發明范圍內，包括對映體的鹽。
當苯環和芳香雜環被取代時，優選取代基選自CF3、甲基、碘、溴、氟和氯。
在方案1的反應步驟g(見下頁)如下進行用鈀催化劑如Pd(PPh3)4，在堿如Na2CO3存在下，使通式II中間體化合物 其中PG是氨基甲酸乙酯或苯甲基樣保護基團如Boc，與3-羥苯基硼酸反應得到通式III化合物， 然后，在標準條件下此化合物去保護，在還原條件下用通式R1-CHO化合物烷基化，得到通式I化合物。
合適的鈀催化劑包括但不限于PdCl2(和磷化氫)、Pd(OAc)2(和磷化氫)、Pd(dba)2、PdCl2(dppf)CH2Cl2、Pd(PPh3)4、Pd/C。
合適的堿包括但不限于三乙基胺、碳酸鉀和碳酸鈉。
可以使用的合適還原劑包括但不限于氰基硼氫化鈉和三乙酰氧基硼氫化鈉。
本發明新化合物可用于治療、尤其是用于治療各種疼痛，例如慢性疼痛、神經性疼痛、急性疼痛、癌痛、類風濕性關節炎性疼痛、偏頭痛、內臟痛等。但所列未能盡述。
本發明化合物可用作免疫調節劑，尤其可用于自身免疫疾病(如關節炎)；皮膚移植、器官移植及類似的外科需要；膠原性疾病；各種變態反應；用作抗腫瘤藥和抗病毒藥。
本發明化合物可用于所述范例中存在或涉及阿片樣物質受體退變或功能障礙的疾病。包括在診斷技術和成像如正電子發射成像術(PET)中應用同位素標記形式的本發明化合物。
本發明化合物可用于治療腹瀉、抑郁癥、焦慮癥、尿失禁、各種精神疾病、咳嗽、肺水腫、各種胃腸道疾病、脊柱損傷和藥物成癮(包括酒精、尼古丁、阿片樣物質和其它藥物治療性成癮)以及交感神經系統疾病如高血壓。
本發明化合物可用作在全身麻醉和監控麻醉護理時使用的止痛藥物。常常聯合使用不同性質的藥物，以達到維持麻醉狀態(例如記憶缺失、痛覺缺失、肌肉松弛和鎮靜)所需的平衡作用。聯合用藥包括吸入麻醉劑、安眠藥、抗焦慮藥、神經肌肉阻滯劑和阿片樣物質。
應用任何上式I化合物生產治療上述任何疾病的藥物也屬于本發明的范圍。
本發明再一方面是治療患有任何上述疾病的患者的治療方法，其中對需要這種治療的患者給予有效量的上式I化合物。
本發明另一方面是通式II中間體， 其中PG是氨基甲酸乙酯或苯甲基樣保護基，如Boc，
制備方法可按照下述文獻描述的方法，制備根據本發明的化合物例如“Advanced Organic Chemistry”，第三版.Jerry March，John Wiley andsons Inc，；New York(1985)步驟(a)第848頁；步驟(b)第848頁；步驟(c)第657頁；步驟(d)第875頁；步驟(e)第371-373頁；步驟(f)第364-366頁；步驟(g)N.Miyaura and A.Suzuki，Chem.Rev，95，2457-2483(1995)；步驟(h)“用于有機合成的保護基團”第327-329頁，Theodora W.Greene和Peter G.M Wuts著，第二版，John Wiley和Sons Inc.；New York(1991)。這些參考文獻通過引用結合到本文中。
實施例現在通過下列實施例更詳細地描述本發明，不應理解為對本發明的限制。
流程1
實施例1N，N-二乙基-4-(3-羥苯基-亞哌啶-4-基-甲基)-苯甲酰胺(化合物7)的制備(i)4-(4-甲氧羰基-苯亞甲基)-哌啶-1-羧酸叔丁基酯(化合物3)的制備將化合物1(11.2g，49mmol)和三甲基亞磷酸酯(25ml)的混合物在氮氣下回流5小時。與甲苯共蒸餾除去過量三甲基亞磷酸酯，定量得到化合物21H NMR(CDCl3)δ3.20(d，2H，J＝22Hz)，3.68(d，3H10.8 Hz)，3.78(d，3H，11.2Hz)，3.91(s，3H)，7.38(m，2H)，8.00(d，2H，J＝8Hz)。
(ii)將上述產物(化合物2)溶于干THF(200ml)中，在-78℃逐滴加入二異丙基氨基化鋰(32.7ml 1.5M的己烷溶液，49mmol)。使反應混合物溫熱至室溫，再加入N-叔丁氧羰基-4-哌啶酮(9.67g，49mmol，100ml的THF溶液)。12小時后，反應混合物用水(300ml)猝滅并用乙酸乙酯(3×300ml)萃取。將合并的有機相用MgSO4干燥并蒸發，得到粗產物，經快速色譜純化后得白色固體化合物3(5.64g，35％)。
IR(NaCl)3424，2974，2855，1718，1688，1606，1427，1362，1276cm-1；1H NMR(CDCl3)δ1.44(s，1H)，2.31(t，J＝5.5Hz，2H)，2.4.22(t，J＝5.5Hz，2H)，3.37(t，J＝5.5Hz，2H)，3.48(t，J＝5.5Hz，2H)，3.87(s，3H)，6.33(s，1H)，7.20(d J＝6.7Hz，2H)，7.94(d，J，＝6.7Hz，2H)；13C NMR(CDCl3)δ28.3，29.2，36.19，51.9，123.7，127.8，128.7，129.4，140.5，142.1，154.6，166.8.
(iii)4-溴-4-[溴-(4-甲氧羰基-苯基)-甲基]-哌啶-1-羧酸叔丁基酯(化合物4)的制備將溴(2.9g，18mmol)溶于30ml二氯甲烷中，于0℃加入化合物3(5.2g，16mmol)和K2CO3(1.0g)的二氯甲烷(200ml)溶液中。室溫1.5小時后，溶液用K2CO3濾過濃縮。然后用乙酸乙酯(200ml)溶解殘留物，用水(200ml)、0.5M HCl(200ml)、鹽水(200ml)清洗，用MgSO4干燥。除去溶劑得粗品，置于甲醇中重結晶得白色固體化合物4(6.07g，78％)IR(NaCl)3425，2969，1725，1669，1426，1365，1279，1243cm-1；1H NMR(CDCl3)δ1.28(s，9H)，1.75(m，2H)，1.90(m，2H)，2.1(m，4H)，3.08(br，4H)，3.90(s，3H)，4.08(br，4H)，5.14(s，1H)，7.57(d，J＝8.4Hz，2H)7.98(d，J＝8.4Hz，2H)；13C NMR(CDCl3)δ28.3，36.6，38.3，40.3，52.1，63.2，72.9，129.0，130.3，130.4，141.9，154.4，166.3.
(iv)4-[溴-(4-羧基(caboxy)-苯基)-亞甲基]-哌啶-1-羧酸叔丁基酯(化合物5)的制備化合物4(5.4g 11mmol)溶于甲醇(300ml)和2.0M NaOH(100ml)溶液中，40℃加熱3小時。過濾收集固體，真空干燥過夜。此干鹽溶解于40％乙腈/水，用濃鹽酸調至pH2。過濾分離得白色粉末狀目的產物化合物5(3.8g，87％)1H NMR(CDCl3)δ1.45(s，9H)，2.22(dd，T＝5.5Hz，6.1Hz，2H)，2.64(dd，J＝5.5Hz，6.1Hz，2H)，3.34(dd，J＝5.5Hz，6.1Hz，2H)，3.54(dd，J＝5.5Hz，6.1Hz，2H)，7.35(d，J＝6.7Hz，2H)，8.08(d，J＝6.7Hz，2H)；13C NMR(CDCl3)δ28.3，31.5，34.2，44.0，115.3，128.7，129.4，130.2，137.7，145.2，154.6，170.3；(v)4-[溴-(4-二乙基氨甲酰基-苯基)-亞甲基]-哌啶-1-羧酸叔丁基酯(化合物6)的制備將化合物5(1.0g，2.5mmol)于-20℃溶于無水二氯甲烷(10ml)中，加入異丁基氯甲酸酯(450mg，3.3mmol)。20分鐘后于-20℃加入二乙胺(4ml)使反應物溫熱至室溫。1.5小時后蒸干溶劑，殘余物在乙酸乙酯和水間分配。有機相用鹽水清洗并用MgSO4干燥。除去溶劑得粗品，經快速色譜純化后得到白色針狀化合物6(800mg，73％)IR(NaCl)3051，2975，1694，1633，1416，1281，1168，1115cm-1；1HNMR(CDCl3)δ1.13(br，3H)，1.22(br，3H)，1.44(s，9H)，2.22(t，J＝5.5Hz，2H)，2.62(t，J＝5.5Hz，2H)，3.33(m，4H)，3.55(m，2H).7.31(d，J＝8.0Hz，2H)，7.36(d，J＝8.0Hz，2H)；13C NMR(CDCl3)δ12.71，14.13，28.3，31.5，34.2，39.1，43.2，79.7，115.9，126.3，129.3，136.8，137.1，140.6，154.6，170.5.
(vi)3-羥苯基硼酸的制備3-溴苯酚(8.65g，50mmol)溶于干THF(150ml)中，用氫化鈉(60％，2.4g，60mmol)室溫處理。1小時后，于-78℃往反應液中逐滴加入仲丁基鋰(1.3M，50ml，65mmol)。相同溫度下攪拌反應混合物30分鐘，然后加入三甲基硼酸酯(15ml)。溫熱至室溫2小時后，用水(50ml)猝滅反應混合物，用二氯甲烷(2×100ml)萃取。將合并的有機相用MgSO4干燥，蒸干后得到白色固體標題化合物(4.0g，58％)，不經進一步純化可直接用于Suzuki偶合反應。
(vii)N，N-二乙基-4-(3-羥苯基-亞哌啶-4-基-甲基)-苯甲酰胺(化合物7)的制備氮氣下，將化合物6(451mg，1.0mmol)、3-羥苯基硼酸(230mg，1.7mmol)、2M Na2CO3(2.5ml)和四(三苯基磷化氫)鈀(O)(20mg)的混合物在甲苯(脫氣，5ml)和乙醇(脫氣，5ml)中于90℃回流4小時。然后反應混合物冷卻至室溫，并用乙酸乙酯(2×100ml)萃取。用MgSO4干燥合并的有機相并蒸干得粗品。
上述產物于50℃在二噁烷中用4.0M HCl處理2小時。蒸干后用1M HCl(100ml)溶解殘渣并用二乙酯(3×100ml)萃取雜質。水相用NH4OH堿化并用二氯甲烷(3×100ml)提取。用鹽水清洗合并的有機相，用MgSO4干燥并蒸干得標題化合物7(305mg，88％)1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.12(3H，br m，CH3CH2-)，1.23(3H，br m，CH3CH2-)，2.33(4H，m，哌啶CH-)，2.89(4H，m，哌啶CH-)，3.29(3H，brm，NH & CH3CH2N-)，3.53(2H，br m，CH3CH2N-)，4.71(1H，s，OH)，6.57(2H，m，ArH)，6.65(1H，m，ArH)，7.09(1H，m，ArH)，7.12(2H，d，J＝8.0Hz，ArH)，7.28(2H，d，J＝8.0Hz，ArH)；其鹽酸鹽m.p.＞130℃(Dec.)；IR(NaCl)2975，1598，1442，1293cm-1。
實施例2N，N-二乙基-4-(3-羥苯基-N-芐基-亞哌啶-4-基-甲基)-苯甲酰胺(化合物9)的制備(i)N，N-二乙基-4-(溴-N-芐基-亞哌啶-4-基-甲基)-苯甲酰胺(化合物8)的制備室溫下在二氯甲烷(25ml)中用TFA(25ml)處理上述實施例1(v)中制備的化合物6(2.26g，5.0mmol)。2小時后，濃縮反應混合物得殘余物，將其溶于乙腈(20ml)中，與芐基溴(5.0mmol)室溫反應2小時。濃縮反應混合物，然后將其溶于乙酸乙酯(100ml)中。有機溶液用1NNH4OH和鹽水沖洗，用MgSO4干燥。除去溶劑得粗品，用快速色譜純化后得油狀化合物8(1.0g，45％)IR(NaCl)2971，1630，1427，1287，1094cm-1；1H NMR(CDCl3)δ1.13(br，3H)，1.23(br，3H)，2.28(m，2H)，2.37(m，2H)，2.55(m，2H)，2.69(m，2H)，3.27(m，2H)，3.53(br，4H)，7.31(m，4H).
(ii)N，N-二乙基-4-(3-羥苯基-N-芐基-亞哌啶-4-基-甲基)-苯甲酰胺(化合物9)的制備氮氣下，將上述步驟(i)中制備的化合物8(600mg，1.36mmol)、3-羥苯基硼酸(414mg，3.0mmol)、2M Na2CO3(3.0ml)和四(三苯基磷化氫)鈀(O)(20mg)在甲苯(脫氣，5ml)和乙醇(脫氣，5ml)中的混合物于90℃回流4小時。反應混合物冷卻至室溫，并用乙酸乙酯(2×100ml)萃取。合并有機相用鹽水洗滌，然后用MgSO4干燥。除去溶劑得粗品，用快速色譜純化后得所要標題化合物9(482mg，78％)IR(NaCl)3350，2974，1606，1442，1291cm-1；1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.11(3H，br m，CH3CH2-)，1.24(3H，br m，CH3CH2-)，2.36(4H，m，哌啶CH-)，2.46(4H，m，哌啶CH-)，3.26(2H，brm，CH3CH2N-)，3.53(4H，br m，PhCH2N & CH3CH2N-)，6.53(1H，m，ArH)，6.57(1H，m，ArH)，6.63(1H，m，ArH)，7.07(3H，m，ArH)，7.25(7H，m，ArH)。
實施例3-11實施例3-11的化合物10-18按照以下流程2合成方法制備。
流程21(3)
流程22(3)
流程23(3)
實施例3N，N-二乙基-4-{(3-羥苯基)[1-(2-噻吩基甲基)-4-亞哌啶基]甲基}苯甲酰胺(化合物10)的制備室溫下，向溶于甲醇(15ml)的二級胺(600mg；1.65mmol)溶液中加入噻吩-2-甲醛(153.8ul；1.65mmol)，然后加入乙酸(1ml)。混合物攪拌2小時后加入氰基硼氫化鈉(311mg；4.95mmol)。反應混合物攪拌過夜，然后加水并用二氯甲烷萃取混合物。合并的二氯甲烷提取物用無水硫酸鈉干燥，過濾并減壓濃縮。反相提純。
(M+1)計算值461.64，(M+1)觀測值461.06分析(C28H32N2O2S×1.60 C2HO2F3×0.20 H2O)的計算值C57.95％；H5.30％；N4.33％；實測值C57.90％；H5.34％；N4.36％1HNMR(CD3OD)7.54(dd，1H，J＝5.2，1.6Hz)，7.25(d，2H，J＝8Hz)，7.23-7.24(m，1H)、7.15(d，2H，J＝8Hz)，7.03-7.08(m，2H)，6.58-6.62(dd，1H，J＝8.0，2.8Hz)，6.52-6.55(dd，1H，J＝7.6，1.6Hz))，6.44-6.46(dd，1H，J＝2.8，1.6Hz)，4.50(s，2H)，3.40-3.50(m，4H)，3.15-3.25(m，2H)，2.95-3.05(m，2H)，2.60-2.80(m，2H)，2.35-2.45(m，2H)，1.10-1.15(m，3H)，1.00-1.05(m，3H)實施例4N，N-二乙基-4-{(3-羥苯基)[1-(3-噻吩甲基)4-亞哌啶基]甲基}苯甲酰胺(化合物11)的制備室溫下，向溶于甲醇(13ml)的二級胺(500mg；1.37mmol)溶液中加入噻吩-3-甲醛(144.0ul；1.65mmol)，然后加入乙酸(1ml)。混合物攪拌3小時后加入氰基硼氫化鈉(258mg；4.11mmol)。反應混合物攪拌過夜，然后加水并用二氯甲烷萃取混合物。水相用碳酸氫鉀中和并再次用二氯甲烷萃取。合并的二氯甲烷提取物用無水硫酸鈉干燥，過濾并減壓濃縮。反相提純。
(M+1)計算值461.64，(M+1)觀測值461.07分析(C28H32N2O2S×1.10 C2HO2F3×0.50 H2O)的計算值C60.96％；H5.78％；N4.71％；實測值C60.97％；H5.78％；N4.65％1HNMR(CD3OD)7.59(dd，1H，J＝3.2，1.6Hz)，7.49(dd，1H，J＝5.2，3.2Hz)，7.26(d，2H，J＝8.0Hz)，7.16(d，2H，J＝8.0Hz)，7.15(m，1H)，7.07(dd，1H，J＝8.0，7.2Hz)，6.61(dd，1H，J＝8.0，2.0Hz)，6.55(d，1H，J＝7.2Hz)，6.47(dd，1H，J＝2.0，1.6Hz)，4.29(s，2H)，3.40-3.50(m，4H)，3.15-3.25(m，2H)，2.95-3.05(m，2H)，2.60-2.80(m，2H)，2.35-2.45(m，2H)，1.15-1.20(t，3H，J＝6.4Hz)，1.00-1.05(t，3H，J＝6.4Hz)實施例5N，N-二乙基-4-[[1-(2-呋喃基甲基)-4-亞哌啶基](3-羥苯基)甲基]苯甲酰胺(化合物12)的制備室溫下，向溶于甲醇(13ml)的二級胺(500mg；1.37mmol)溶液中加入2-糠醛(136.0μl；1.65mmol)，然后加入乙酸(1ml)。混合物攪拌3小時后加入氰基硼氫化鈉(258mg；4.11mmol)。反應混合物攪拌過夜，然后加水并用二氯甲烷萃取混合物。水相用碳酸氫鉀中和并再次用二氯甲烷萃取。合并的二氯甲烷提取物用無水硫酸鈉干燥，過濾并減壓濃縮。反相提純。
(M+1)計算值445.57，(M+1)觀測值445.13分析(C28H32N2O3×1.30 C2HO2F3×0.10 H2O)的計算值C61.81％；H5.68％；N4.71％；實測值C61.88％；H5.74％；N4.73％1HNMR(CD3OD)7.58(d，1H，J＝1.6Hz)，7.26(d，2H，J＝8.0Hz)，7.16(d，2H，J＝8.0Hz)，7.07(t，1H，J＝8.0Hz)，6.62-6.64(m，1H)，6.60-6.61.(m，1H)，6.53-6.55(m，1H)，6.46-6.47(m，1H)，6.43-6.45(m，1H)，4.34(s，2H)，3.40-3.50(m，4H)，3.15-3.25(m，2H)，2.95-3.05(m，2H)，2.55-2.80(m，2H)，2.35-2.50(m，2H)，1.15-1.20(t，3H，J＝6.4Hz)，1.00-1.05(t，3H，J＝6.4Hz)實施例6N，N-二乙基-4-[[1-(3-呋喃基甲基)-4-亞哌啶基](3-羥苯基)甲基]苯甲酰胺(化合物13)的制備室溫下，向溶于甲醇(8ml)的二級胺(300mg；0.82mmol)溶液中加入3-糠醛(214.0μl；2.47mmol)，然后加入乙酸(0.5ml)和氰基硼氫化鈉(155mg；2.47mmol)。反應混合物攪拌過夜，然后用碳酸氫鈉猝滅并用二氯甲烷萃取。合并的二氯甲烷提取物用無水硫酸鈉干燥，過濾并減壓濃縮。反相提純。
(M+1)計算值445.57，(M+1)觀測值445.15分析(C28H32N2O3×0.5 C2HO2F3×0.10 H2O)的計算值C69.20％；H6.55％；N5.56％；實測值C69.14％；H6.57％；N5.28％1HNMR(CD3OD)7.75(s，1H)，7.61-7.62(m，1H)，7.33(d，2H，J＝8.0Hz)，7.23(d，2H，J＝8.0Hz)，7.13(dd，1H，J＝8.4，8.0Hz)，6.66-6.69(m，1H)，6.57-6.63(m，2H)，6.51-6.53(m，1H)，4.22(s，2H)，3.45-3.55(m，4H)，3.25-3.30(m，2H)，2.95-3.10(m，2H)，2.65-2.85(m，2H)，2.40-2.55(m，2H)，1.15-1.25(m，3H)，1.05-1.15(m，3H)實施例7N，N-二乙基-4-{(3-羥苯基)[1-(2-吡啶基甲基)4-亞哌啶基]甲基}苯甲酰胺(化合物14)的制備室溫下，向溶于甲醇(10ml)的二級胺(384.3mg；1.05mmol)溶液中加入2-吡啶甲醛(201.0μl；2.11mmol)，然后加入乙酸(1ml)。混合物攪拌30分鐘后加入氰基硼氫化鈉(199mg；3.16mmol)。反應混合物攪拌過夜，然后加入水并用二氯甲烷萃取混合物。水相用碳酸氫鈉中和并再次用二氯甲烷萃取。合并的二氯甲烷提取物用無水硫酸鈉干燥，過濾并減壓濃縮。反相提純。
(M+1)計算值456.60，(M+1)觀測值456.12分析(C29H33N3O2×1.70 C2HO2F3×0.40 H2O)的計算值C59.26％；H5.45％；N6.40％；實測值C59.21％；H5.46％；N6.35％1HNMR(CD3OD)8.57(d，1H，J＝5.2Hz)，7.78(dt，1H，J＝8.0，1.2Hz)，7.38(d，1H，J＝8.0Hz)，7.34(dd，1H，J＝8.0，5.2Hz)，7.24(d，2H，J＝8.0Hz)，7.15(d，2H，J＝8.0Hz)，7.05(t，1H，J＝8.0Hz)，6.59(dd，1H，J＝8.0，2.4Hz)，6.54(d，1H，J＝8.0Hz)，6.45(dd，1H，J＝2.4，1.2Hz)，4.39(s，2H)，3.40-3.46(m，2H)，3.26-3.34(m，4H)，3.16-3.22(m，2H)，2.54-2.64(m，4H)，1.13(t，3H，J＝6.4Hz)，1.01(t，3H，J＝6.4Hz)
實施例8N，N-二乙基-4-{(3-羥苯基)[1-(4-吡啶基甲基)-4-亞哌啶基]甲基}苯甲酰胺(化合物15)的制備室溫下，向溶于甲醇(8ml)的二級胺(300mg；0.82mmol)溶液中加入4-吡啶甲醛(236μl；2.47mmol)，然后加入乙酸(0.5ml)。混合物攪拌30分鐘后加入氰基硼氫化鈉(155mg；2.47mmol)。反應混合物攪拌過夜，然后用碳酸氫鈉猝滅并用二氯甲烷萃取。合并的二氯甲烷提取物用無水硫酸鈉干燥，過濾并減壓濃縮。反相提純。
(M+1)計算值456.60，(M+1)觀測值456.10分析(C29H33N3O2×1.80 C2HO2F3×0.40 H2O)的計算值C58.61％；H5.37％；N6.29％；實測值C58.64％；H5.32％；N6.46％1HNMR(CD3OD)8.64(s，2H)，7.61(d，2H，J＝5.2Hz)，7.25(2H，J＝8.0Hz)，7.14(d，2H，J＝8.0Hz)，7.05(t，1H，J＝8.0Hz)，6.59(dd，1H，J＝8.0，1.6Hz)，6.53(d，1H，J＝8.0Hz)，6.43-6.46(m，1H)，4.34(s，2H)，3.42-3.44(m，2H)，3.18-3.24(m，6H)，2.54-2.57(m，4H)，1.13(t，3H，J＝6.4Hz)，1.02(t，3H，J＝6.4Hz)實施例9N，N-二乙基-4-{(3-羥苯基)[1-(1H-咪唑-2-基甲基)-4-亞哌啶基]甲基}-苯甲酰胺(化合物16)的制備室溫下，向溶于甲醇(8ml)的二級胺(300mg；0.82mmol)溶液中加入2-咪唑甲醛(237.3mg；2.47mmol)，然后加入乙酸(0.5ml)和氰基硼氫化鈉(155mg；2.47mmol)。反應混合物攪拌過夜，然后用碳酸氫鈉猝滅并用二氯甲烷萃取。合并的二氯甲烷提取物用無水硫酸鈉干燥，過濾并減壓濃縮。反相提純。
(M+1)計算值445.58，(M+1)觀測值445.16分析(C27H32N4O2×2.10 C2HO2F3×0.50 H2O)的計算值C54.07％；H5.11％；N8.08％；實測值C54.04％；H5.05％；N8.09％
1HNMR(CD3OD)7.38(s，2H)，7.20-7.22(m，2H)，7.11(d，2H，J＝8.0Hz)，7.0(t，1H，J＝8.0Hz)，6.55(dd，1H，J＝8.0，3.6Hz)，6.49-6.50(m，1H)，6.42-6.43(m，1H)，4.08(s，2H)，3.41-3.43(m，2H)，3.18-3.20(m，3H)，2.79-2.82(m，4H)，2.39-2.45(m，4H).1.08-1.16(m，3H)，0.96-1.16(m，3H)實施例10N，N-二乙基-4-{(3-羥苯基)[1-(1H-咪唑-4-基甲基)-4-亞哌啶基]甲基}苯甲酰胺(化合物17)的制備室溫下，向溶于甲醇(8ml)的二級胺(300mg；O.82mmol)溶液中加入4(5)-咪唑甲醛(94.9mg；0.99mmol)，然后加入乙酸(O.5ml)。反應混合物攪拌1小時后加入氰基硼氫化鈉(62.1mg；O.99mmol)。反應混合物攪拌過夜，然后用碳酸氫鈉猝滅并用二氯甲烷萃取。合并的二氯甲烷提取物用無水硫酸鈉干燥，過濾并減壓濃縮。反相提純。
(M+1)計算值445.58，(M+1)觀測值445.16分析(C27H32N4O2×2.20 C2HO2F3)的計算值C54.23％；H4.96％；N8.06％；實測值C54.43％；H4.99％；N7.73％1HNMR(CD3OD)8.54(s，1H)，7.57(s，1H)，7.23(d，2H，J＝8.4Hz)，7.13(d，2H，J＝8.0Hz)，7.03(dd，1H，J＝8.0，7.6Hz)，6.57-6.59(m，1H)，6.51-6.53(m，1H)，6.43-6.44(m，1H)，4.35(s，2H)，3.41-3.43(m，2H)，3.18-3.23(m，8H)，2.53-2.56(m，4H)，1.08-1.16(m，3H)，0.96-1.04(m，3H)實施例11N，N-二乙基-4-{(3-羥苯基)[1-(1，3-噻唑-2-基甲基)-4-亞哌啶基]甲基}苯甲酰胺(化合物18)的制備室溫下，向溶于甲醇(4ml)的二級胺(143.2mg；0.39mmol)溶液中加入2-噻唑甲醛(41.4μl；0.47mmol)，然后加入乙酸(0.2ml)。反應混合物攪拌1小時后加入氰基硼氫化鈉(129.6mg；1.48mmol)。反應混合物攪拌過夜，然后用碳酸氫鈉猝滅并用二氯甲烷萃取。合并的二氯甲烷提取物用無水硫酸鈉干燥，過濾并減壓濃縮。反相提純。
(M+1)計算值462.63，(M+1)觀測值462.10分析(C27H31N3O2S×1.10 C2HO2F3×1.10 H2O)的計算值C57.79％；H5.70％；N6.92％；實測值C57.75％；H5.60％；N7.13％1HNMR(CD3OD)7.86(d，1H，J＝4.0Hz)，7.68(d，1H，J＝4.0Hz)，7.26(d，2H，J＝8.0Hz)，7.16(d，2H，J＝8.0Hz)，7.07(dd，1H，J＝8.4，8.0Hz)，6.60-6.62(m，1H)，6.54-6.56(m，1H)，6.46-6.47(m，1H)，4.65(s，2H)，3.21-3.45(m，8H)，2.56-2.58(m，4H)，1.12-1.20(m，3H)，1.00-1.08(m，3H)藥用組合物根據本發明的新化合物可口服、肌內、皮下、局部、鼻內、腹膜內、胸腔內、靜脈內、硬膜外、鞘內、腦室內給藥及注射入關節給藥。
優選給藥途徑為口服、靜脈內或肌內給藥。
當為具體患者確定最佳個體給藥方案和劑量水平時，其劑量取決于給藥途徑、疾病嚴重性、患者的年齡和體重以及主治醫師通常考慮的其它因素。
為了用本發明化合物制備藥用組合物，藥學上可接受的惰性載體既可為固體也可為液體。固體制劑包括粉劑、片劑、可分散顆粒劑、膠囊劑、扁囊劑和栓劑。
固體載體可以為能起稀釋劑、調味劑、增溶劑、潤滑劑、懸浮劑、粘合劑或片劑崩解劑作用的一種或多種物質；也可為包囊材料。
如果為粉劑，載體為磨成細粉的固體，它可與磨成細粉的活性成分混合。如果為片劑，活性成分與具有必要粘合性的載體按適當比例混合，并壓制成需要的形狀和規格。
為了制備栓劑組合物，首先熔解低熔點蠟如脂肪酸甘油酯和可可脂的混合物，例如通過攪拌將活性成分分散于其中。然后將熔融的均勻混合物傾入常用規格模型中，使其冷卻固化。
合適的載體有碳酸鎂、硬脂酸鎂、滑石粉、乳糖、糖、果膠、糊精、淀粉、西黃蓍膠、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉、低熔點蠟、可可脂等。
鹽包括但不限于藥學上可接受的鹽。本發明范圍的藥學上可接受的鹽包括乙酸鹽、苯磺酸鹽、舉甲酸鹽、碳酸氫鹽、酒石酸氫鹽、溴化物、乙酸鈣、樟腦磺酸鹽、碳酸鹽、氯化物、檸檬酸鹽、二鹽酸鹽、乙二胺四乙酸鹽、乙二磺酸鹽、丙酸酯十二烷基硫酸鹽、乙磺酸鹽、富馬酸鹽、glucaptate、葡萄糖酸鹽、谷氨酸鹽、乙醇酰阿散酸鹽、己基間苯二酚鹽、哈胺(hydrabamine)、氫溴酸鹽、鹽酸鹽、羥基萘甲酸鹽、羥乙磺酸鹽、乳酸鹽、乳糖酸鹽、蘋果酸鹽、馬來酸鹽、扁桃酸鹽、甲磺酸鹽、溴代甲烷、甲基硝酸鹽、甲基硫酸鹽、粘酸鹽、萘磺酸鹽、硝酸鹽、雙羥萘酸鹽(embonate)、泛酸鹽、磷酸鹽/二磷酸鹽、聚半乳糖醛酸鹽、水楊酸鹽、硬脂酸鹽、堿式乙酸鹽、琥珀酸鹽、硫酸鹽、單寧酸鹽、酒石酸鹽、8-氯茶堿(teoclate)、三乙基碘、苯乍生、氯普魯卡因、膽堿、二乙醇胺、1，2-乙二胺、葡甲胺、普魯卡因、鋁、鈣、鋰、鎂、鉀、鈉和鋅的鹽。
本發明范圍中藥學上不可接受的鹽實例包括氫碘化物、高氯酸鹽、四氟硼酸鹽。
藥學上可接受的鹽優選為鹽酸鹽、二鹽酸鹽、硫酸鹽、酒石酸鹽二(三氟乙酸鹽)和檸檬酸鹽。特別優選鹽酸鹽和硫酸鹽。
術語組合物包括所述活性成分與作為載體的包囊材料的制劑，在包囊材料產生的包囊中活性成分(與或不與其它載體一起)被所述載體所包圍，因此載體與活性成分締合。同樣，扁囊劑也包括在內。
片劑、粉劑、扁囊劑和膠囊劑可用作適于口服給藥的固體劑型。
液體組合物包括溶液、懸浮液和乳液。適于不經胃腸給藥的液體制劑實例有所述活性化合物的無菌水溶液或水-丙二醇溶液。也可將液體組合物制成聚乙二醇水溶液。
通過將活性組分溶解于水中并按要求加入適當的著色劑、調味劑、穩定劑和增稠劑，可制備口服給藥的水溶液劑。通過將細分散的活性組分和粘性原料如天然合成樹膠、樹脂、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉和其它藥用制劑領域已知的懸浮劑分散于水中，可制備口服用藥的水性懸浮液。
優選的藥用組合物是單位劑型。單位劑型時，所述組合物分成含適量活性組分的單位劑量。所述單位劑型可為包裝制劑，包裝制劑包含不同數量的單位制劑，例如包裝型片劑、膠囊劑和用管形瓶或安瓿包裝的粉劑。單位劑型也可為一粒膠囊劑、一粒扁囊劑或一片藥物本身，或者它可為適當數量的任何這類包裝形式。
生物學評價體外模型細胞培養A.37℃、5％CO2下，在含有無鈣DMEM、10％FBS、5％BCS、0.1％Pluronic F-68和600μg/ml遺傳霉素的振搖瓶中，懸浮培養表達克隆的人μ、δ和K受體和新霉素抗性的人293S細胞。
B.稱定小鼠大腦和大鼠大腦重，用冰冷的PBS(含有2.5mMEDTA，pH7.4)清洗。在冰冷的裂解緩沖液中(50mM Tris，pH7.0，2.5mMEDTA，臨用前用0.5M苯甲磺酰氟的DMSO乙醇儲備液加入至0.5mM)用polytron對大腦勻化15秒(小鼠)或30秒(大鼠)。
膜制備沉淀細胞，將其重懸浮于裂解緩沖液中(50mM Tris，pH7.0，2.5mMEDTA，臨用前用0.1M PMSF的乙醇母液加入至0.1mM)，在冰上溫育15分鐘，然后用polytron勻化30秒。在4℃下以1000g(最大)旋轉該懸浮液10分鐘。將其上清液收集于冰上，重懸浮沉淀后如上旋轉。將兩次旋轉所得的上清液混合，以46,000g(最大)旋轉30分鐘。將沉淀物重懸浮于冷Tris緩沖液(50mM Tris/Cl，pH7.0)中，再旋轉。將最終的沉淀物重懸浮于膜緩沖液(50mM Tris、0.32M蔗糖、pH7.0)中。聚丙烯管中的等份物(1ml)冰凍于干冰/乙醇中并在使用前貯存于-70℃。用SDS通過改良Lowry測定法測定蛋白濃度。
結合測定于37℃解凍膜，并冷卻于冰上，通過25-號針頭三次，稀釋入結合緩沖液(50mM Tris、3mM MgCl2、1mg/ml BSA(Sigma A-7888)，pH7.4，稀釋液經0.22m濾紙過濾后貯存于4℃，并向其中加入5μg/ml抑肽酶、10μM苯丁抑制素、10μM diprotinA，無DTT)。將100μl等份液加入冰凍的裝有100μl適當放射性配體和100μl各種濃度的試驗化合物的12×75mm聚丙烯管中。分別測定包含和不含10μM納洛酮的總的結合(TB)和非特異性(NS)結合。將所述試管渦旋并于25℃溫育60-75分鐘，之后，快速真空-過濾內容物，以約12ml/管的冰冷洗滌緩沖液(50mM Tris、pH7.0、3mM MgCl2)通過GF/B濾紙(Whatman)(在0.1％聚環乙亞胺中預浸漬至少2小時)洗滌。將濾紙在包含6-7ml閃爍液的微管中浸漬至少12小時后，用β計數器測量保留在濾紙上的放射性(dpm)。如果所述測定在96-位深孔板中進行，過濾物過濾在96位PEI-浸漬的單濾紙(96-place PEI-soaked unifilters)(用3×1ml洗滌緩沖液洗后)上，并于55℃烤箱中干燥2小時)。加入50μl MS-20閃爍液體/孔后，用TopCount(Packard)計數濾板。
功能分析通過確定化合物受體復合物刺激GTP和與受體偶合的G-蛋白的結合程度來計算本化合物的激動劑活性。在GTP結合分析中，GTP[γ]35S與受試化合物和來自表達克隆的人阿片樣物質受體的HEK-293S細胞細胞膜或來自于勻化的大鼠和小鼠大腦的細胞膜相混合。激動劑刺激GTP[γ]35S結合在這些膜上。本化合物的EC50值和Emax值根據劑量-效應曲線確定。δ頡抗劑naltrindole引起的劑量效應曲線右移用來驗證激動劑活性是通過δ受體介導的。
數據分析以TB-NS計算出特異性結合(SB)，存在各種測試化合物時的SB表示為對照SB的百分比。根據對數值圖或曲線擬合程序例如Ligand、GraphPad Prism、SigmaPlot或ReceporFit計算置換特異性結合放射性配體的配體IC50值和Hill系數(nH)。用Cheng-Prussoff方程計算Ki值。用至少三個置換曲線，反映測試配體的均值±S.E.M的IC50、Ki和nH值。生物學數據列于下表1中。
表1(續)生物學數據受體飽和實驗用濃度為0.2-5倍于估計Kδ的適當放射性配體(如果所需放射配體量適宜的話，可高達10倍)對細胞膜進行結合試驗，從而測定放射性配體Kδ值。特異性放射性配體結合表示為pmole/mg膜蛋白。根據單點模式(one-site model)由各個試驗的特異性結合(B)與nM游離(F)放射性配體的非線性擬合曲線獲得具體實驗的Kδ和B最大值。
用Von Frey試驗測定機械-異常性疼痛用Chaplan等(1994)所述的方法在08:00及16:00進行試驗。將大鼠置于金屬絲網底(可接觸到其爪)之上的Plexiglas籠中，讓其適應10-15分鐘。試驗區域為左后爪的足底中部，避開較不敏感的足墊部分。用一系列呈對數遞增硬度(0.41、0.69、1.20、2.04、3.63、5.50、8.51和15.14克；Stoelting，III，USA)的8 Von Frey毛發接觸其爪。從網狀底板的下面，垂直于足底表面使用Von Frey毛發，其用力足以使Von Frey毛發對爪產生輕微彎曲并保持約6-8秒。如爪急劇縮回則為陽性反應。毛發一移開立即退縮也認為是陽性反應。走開是不明確的反應，需要重復刺激。
試驗方案FCA處理組在手術后一天對動物進行試驗。用Dixon(1980)的上-下方法確定50％縮回閾值。用2.04g(處于毛發系列刺激中間)毛發開始試驗。無論刺激強度是上升或下降，一直連續刺激。爪對最初選定的毛發刺激無回縮反應時，就逐漸增強刺激；若爪回縮，則選擇更弱的刺激。應用這種方法計算最優閾值需要6個極為接近50％閾值的反應，當反應發生第一個變化時，例如首次與閾值交叉，才開始計數這6個反應。如果閾值落在刺激范圍之外，各確定出其值為15.14(正常敏感度)或0.41(最大異常性疼痛)。常規(X＝未縮回；O＝縮回)對陽性和陰性反應產生模式制表，用以下公式
50％閾值(g)＝10(Xf+kδ)/10,000內推出50％縮回閾值，其中Xf＝最后使用的Von Frey毛發值(對數單位)；k＝陽性/陰性反應模式的表格數值(Chaplan等(1994)；而δ＝刺激的平均差值(對數單位)。此處δ＝0.224。
根據Chaplan等(1994)，將Von Frey閾值轉化為最大可能作用的百分比(％MPE)。下列方程用于計算％MPE 試驗物質的給藥在Von Frey試驗前將試驗物質注射(皮下、腹膜內、靜脈內或口服)給予大鼠，試驗化合物給藥與Von Frey試驗時間間隔取決于所試驗的化合物的性質。
扭體試驗對小鼠腹膜內給藥時，乙酸會引起腹部收縮。然后呈現典型的機體伸展。用了止痛藥后，則較少觀察到所述運動，則該藥選作潛在的良好侯選物。
只有出現下列情況才認為是完全典型的扭體反射所述動物未運動；后背略微降低；雙爪足底表面可觀察到。在該測定時，口服給予1-100μmol/kg本發明化合物后，證實其明顯抑制扭體反應。
(i)溶液制備乙酸(AcOH)將120μl乙酸加入19.88ml的蒸餾水中以得到最終體積為20ml、最終濃度為0.6％的AcOH。再將該溶液混合(渦旋)以備注射用。
化合物(藥物)根據標準方法制備各化合物并溶解于最適當的載體中。
(ii)溶液劑的給藥在試驗前20、30或40分鐘(根據化合物的種類及其特性)，以10ml/kg(考慮平均小鼠體重)將所述化合物經口、腹膜內(i.p.)、皮下(s.c.)或靜脈內(i.v.)給藥。當所述化合物中樞性腦室內(i.c.v.)或鞘內(i.t.)給藥時，給藥量為5μl。
臨試驗前以10ml/kg(考慮平均小鼠體重)AcOH在兩側腹膜內(i.p.)給藥。
(iii)試驗觀察所述動物(小鼠)20分鐘，記錄(扭體反射)發生次數，實驗結束時進行數據匯集。將小鼠放置在帶接觸襯墊的單個“鞋盒”狀籠中。通常同時觀察4只小鼠一只為對照，三只為三個劑量的藥物。
權利要求
1.一種式I化合物或其鹽， 其中R1選自以下任一基團(i)苯基 (ii)吡啶基 (iii)噻吩基 (iv)呋喃基 (v)咪唑基 (vi)噻唑基
2.根據權利要求
1的化合物或其鹽，其中R1是吡啶基、噻吩基或呋喃基。
3.根據權利要求
1的化合物或其鹽，它選自以下任何一種化合物或其鹽●N，N-二乙基-4-(3-羥苯基-N-芐基-亞哌啶-4-基-甲基)-苯甲酰胺；●N，N-二乙基-4-{(3-羥苯基)[1-(2-噻吩基甲基)-4-亞哌啶基]甲基}苯甲酰胺；●N，N-二乙基-4-{(3-羥苯基)[1-(3-噻吩基甲基)-4-亞哌啶基]甲基}苯甲酰胺；●N，N-二乙基-4-[[1-(2-呋喃基甲基)-4-亞哌啶基](3-羥苯基)甲基]苯甲酰胺；●N，N-二乙基-4-[[1-(3-呋喃基甲基)-4-亞哌啶基](3-羥苯基)甲基]苯甲酰胺；●N，N-二乙基-4-{(3-羥苯基)[1-(2-吡啶基甲基)-4-亞哌啶基]甲基}苯甲酰胺；●N，N-二乙基-4-{(3-羥苯基)[1-(4-吡啶基甲基)-4-亞哌啶基]甲基}苯甲酰胺；●N，N-二乙基-4-{(3-羥苯基)[1-(1H-咪唑-2-基甲基)-4-亞哌啶基]甲基}苯甲酰胺；●N，N-二乙基-4-{(3-羥苯基)[1-(1H-咪唑-4-基甲基)-4-亞哌啶基]甲基}苯甲酰胺；●N，N-二乙基-4-{(3-羥苯基)[1-(1，3-噻唑-2-基甲基)-4-亞哌啶基]甲基}苯甲酰胺。
4.根據權利要求
1-3中任一項的化合物或其鹽，它為其鹽酸鹽、二鹽酸鹽、硫酸鹽、酒石酸鹽、二(三氟乙酸)鹽或檸檬酸鹽形式。
5.一種制備權利要求
1的式I化合物的方法，該方法包括用鈀催化劑在堿存在下，使通式II化合物 其中PG是氨基甲酸乙酯或叔丁氧羰基，與3-羥苯基硼酸反應，得到通式III化合物， 然后使通式III化合物去保護，在還原條件下用通式R1-CHO的化合物烷基化，得到所述通式I化合物，其中R1的定義與權利要求
1中相同。
6.權利要求
1-4任一權項的式I化合物或其鹽在制備治療疼痛、胃腸道疾病、脊柱損傷或交感神經系統疾病的藥物中的用途。
7.一種藥用組合物，它包含作為活性成分的權利要求
1-4任一權項的式I化合物或其鹽以及藥學上可接受的載體。
專利摘要
本發明公開并要求保護以下通式(I)化合物，其中R
文檔編號C07D211/68GKCN1185228SQ01810593
公開日2005年1月19日 申請日期2001年3月30日
發明者W·布朗, C·沃波爾, Z·韋 申請人:阿斯特拉曾尼卡有限公司導出引文BiBTeX, EndNote, RefMan