一種制備具有抗氧化活性的青錢柳提取物的方法及其作為醛糖還原酶抑制劑的應用的制作方法
【專利摘要】本發明公開了一種制備具有抗氧化活性的青錢柳提取物的方法及該提取物作為醛糖還原酶抑制劑的應用，包括步驟粉碎、浸泡、提取和冷凍干燥，與傳統熱回流提取法相比，本發明采用的超聲提取法有效成分破壞少，提取率高，提取時間短、能耗低。所得提取物具有良好的抗氧化及抑制醛糖還原酶的作用，對醛糖還原酶的抑制機理為反競爭性抑制，該提取物具有預防或治療糖尿病并發癥包括糖尿病腎病、糖尿病神經病變和糖尿病眼病等的前景。并且作為天然提取物，具有副作用小，安全性高，活性好，工藝簡便等優點。
【專利說明】一種制備具有抗氧化活性的青錢柳提取物的方法及其作為 醛糖還原酶抑制劑的應用
【技術領域】
[0001] 本發明涉及醫藥【技術領域】，尤其涉及一種制備具有抗氧化活性的青錢柳提取物的 方法及制備的提取物作為醛糖還原酶抑制劑的應用。
【背景技術】
[0002] 糖尿病（diabetes mellitus，DM)是一組由多病因引起的以慢性高血糖為特征的 終身性代謝性疾病。糖尿病本身不一定造成危害，但長期血糖增高，大血管、微血管受損并 危及心、腦、腎、周圍神經、眼睛、足等，據世界衛生組織統計，糖尿病并發癥高達100多種， 是目前已知并發癥最多的一種疾病。為此預防糖尿病的并發癥是至關重要的社會問題。
[0003] 目前，糖尿病并發癥的治療依賴于對血糖的控制，然而，隨著胰島素等藥物的使 用，糖尿病患者的血糖水平雖可以得到很好的控制，但臨床上仍有許多患者相繼出現進展 性的腎臟、神經、視網膜等損害。因此標準的抗糖尿病藥物并不適合作為糖尿病并發癥治療 的藥物選擇，迫切需要用于糖尿病并發癥的藥物和治療方式。
[0004] 多元醇通路（polyol pathway，PP)是機體葡萄糖代謝的重要途徑之一，多元醇 通路的參與是由高濃度葡萄糖誘導的多種器官損傷的機制。其中醛糖還原酶（aldose redUCtaSe，AR)是該通路的關鍵限速酶。已經認為高氧化應激是多元醇通路參與細胞損傷 的機制之一，即DM患者受體內高糖環境影響，糖氧化的增加和PP等通路的激活，導致機體 氧化和抗氧化失衡，活性氧自由基產生過多，造成對組織和細胞的損傷，最終導致糖尿病 眼病、糖尿病腎病、糖尿病神經病變等多種DM并發癥的發生。另一方面，AR活性的增強又 可激活PP，造成大量代謝產物山梨醇在細胞內堆積，使細胞結構的完整性和功能受到影響， 最終引發一系列病變。但是目前可供臨床使用的醛糖還原酶抑制劑依然很少，且多由人工 合成，有些已經由于臨床試驗存在問題而退出。可見，具有AR抑制活性的天然抗氧化物質， 在DM及其并發癥治療方面具有潛在的應用價值，且具有高效低毒的優點。
[0005] 青錢柳，又名搖錢樹、麻柳，胡桃科，我國南方多省均有發現，多以零星分布。據《中 國中藥資源志要》記載，其樹皮、樹葉具有清熱消腫和止痛等功能。青錢柳因含有大量生物 活性物質而具有獨特的保健和藥用價值。但是其對AR的抑制作用以及通過干預氧化應激 和抑制AR而用于糖尿病并發癥的防治，在國內外均未見相關研宄報道。本發明可進一步擴 大青錢柳藥材的開發和利用，同時也為糖尿病患者的健康提供新的保障，可產生良好的社 會效益和可觀的經濟效益。
【發明內容】
[0006] 本發明所要解決的技術問題是提供一種制備具有抗氧化活性的青錢柳提取物的 方法。
[0007] 為解決上述技術問題，本發明的技術方案是：
[0008] 制備具有抗氧化活性的青錢柳提取物的方法，包括步驟：
[0009] 1)粉碎：青錢柳葉70?80°C烘干，粉碎機粉碎，過篩；
[0010] 2)浸泡：按照藥材與水重量比為1:10?30加水浸泡過夜；
[0011] 3)提取：將步驟2)的混合溶液，以400?600W功率超聲處理30?50分鐘，溫度 45?55°C ;趁熱用四層100?200目濾布過濾，再用布氏漏斗抽濾，收集濾液，加入1 %? 3%的活性炭脫色，減壓濃縮；
[0012] 4)冷凍干燥：_15?_25°C，-〇. 02kPa以下冷凍干燥，得掠褐色粉末，即為所述具 有備抗氧化活性的青錢柳提取物，簡稱CP。
[0013] 作為對上述技術方案的改進，所述步驟1)中，所述粉碎機粉碎具體為將干燥青錢 柳葉粉碎后過40目篩。
[0014] 作為對上述技術方案的改進，所述步驟2)中，藥材與水重量比為1:20,加水浸泡 10 ?14h〇
[0015] 作為優選的技術方案，所述步驟3)中，所述超聲處理功率為600W，提取時間為 40min，提取溫度為50°C。
[0016] 作為對上述技術方案的改進，所述步驟3)中，減壓濃縮壓力為-0· 09?-0· llMPa， 溫度為60?70°C，濃縮至原體積1/10?1/12。
[0017] 作為對上述技術方案的改進，所述步驟4)中，冷凍干燥具體為：_20°C，-0. OlkPa。
[0018] 作為對上述技術方案的改進，將所述制備的具有抗氧化活性的青錢柳提取物再次 加水溶解后，75?80%醇濃度下，醇沉10?14h，抽濾，沉淀用無水乙醇洗滌，干燥即得具有 抗氧化活性的青錢柳提取物多糖，簡稱CPP。
[0019] 作為優選的技術方案，所述75?80%醇濃度是加質量濃度為95%的乙醇使醇濃 度達到75?80%。
[0020] 表1、青錢柳提取實驗因素水平表
[0021]
【權利要求】
1. 一種制備具有抗氧化活性的青錢柳提取物的方法，其特征在于，包括步驟： 1) 粉碎：青錢柳葉70?80°C烘干，粉碎機粉碎，過篩； 2) 浸泡：按照藥材與水重量比為1:10?30加水浸泡過夜； 3) 提取：將步驟2)的混合溶液，以400?600W功率超聲處理30?50分鐘，溫度45? 55°C ;趁熱用四層100?200目濾布過濾，再用布氏漏斗抽濾，收集濾液，加入1 %?3%的 活性炭脫色，減壓濃縮； 4) 冷凍干燥：_15?-25°C，-0? 02kPa以下冷凍干燥，得棕褐色粉末，即為所述具有備 抗氧化活性的青錢柳提取物。
2. 如權利要求1所述的制備具有抗氧化活性的青錢柳提取物的方法，其特征在于：所 述步驟1)中，粉碎機粉碎具體為將干燥青錢柳葉粉碎后過40目篩。
3. 如權利要求1所述的制備具有抗氧化活性的青錢柳提取物的方法，其特征在于：所 述步驟2)中，藥材與水重量比為1:20,加水浸泡10?14h。
4. 如權利要求1所述的制備具有抗氧化活性的青錢柳提取物的方法，其特征在于：所 述步驟3)中，所述超聲處理功率為600W，提取時間為40min，提取溫度為50°C。
5. 如權利要求1所述的制備具有抗氧化活性的青錢柳提取物的方法，其特征在于：所 述步驟3)中，所述減壓濃縮壓力為-0. 09?-0. llMPa，溫度為60?70°C，濃縮至原體積 1/10 ?1/12〇
6. 如權利要求1所述的制備具有抗氧化活性的青錢柳提取物的方法，其特征在于：所 述步驟4)中，冷凍干燥具體為：-20°C，-0? 01kPa〇
7. 如權利要求1所述的制備具有抗氧化活性的青錢柳提取物的方法，其特征在于：將 所述制備的具有抗氧化活性的青錢柳提取物再次加水溶解后，75?80%醇濃度下，醇沉 10?14h，抽濾，沉淀用無水乙醇洗滌，干燥即得具有抗氧化活性的青錢柳提取物多糖。
8. 如權利要求2所述的制備具有抗氧化活性的青錢柳提取物的方法，其特征在于：所 述具有抗氧化活性的青錢柳提取物中多糖重量含量為（47. 93±0. 98) %。
9. 如權利要求1所述的制備具有抗氧化活性的青錢柳提取物的方法，其特征在于：所 述具有抗氧化活性的青錢柳提取物中多酚重量含量為（3. 83±0. 23) %。
10. 如權利要求1所述的方法制備的具有抗氧化活性的青錢柳提取物作為醛糖還原酶 抑制劑的應用。
【文檔編號】A61K36/52GK104490993SQ201510024645
【公開日】2015年4月8日 申請日期:2015年1月16日 優先權日:2015年1月16日
【發明者】王曉紅 申請人:濰坊醫學院