一種抗動脈粥樣硬化的藥物及其制備方法
【專利摘要】本發明提供了一種抗動脈粥樣硬化的藥物及其制備方法。藥物由以下成分組成：按重量計，普洱茶20-30份，山楂20-30份，白菊花10-20份，陳皮10-20份，烏梅10-20份。藥物的制備方法為：步驟A：按照配方，取普洱茶、山楂、白菊花、陳皮和烏梅；步驟B：提取普洱茶、山楂、白菊花、陳皮和烏梅中的有效成分后，制成粉劑、丸劑或湯劑等。不僅具有較好的抗As作用，可以改善血脂代謝紊亂、血小板異常狀態、胰島素異常和異常增高的DNA甲基化水平，可以降低患者體重，而且所用的藥材均采用常用食材，沒有毒副作用和不良反應。
【專利說明】一種抗動脈粥樣硬化的藥物及其制備方法
【技術領域】
[0001] 本發明涉及中藥領域，具體而言，涉及一種抗動脈粥樣硬化的藥物及其制備方法。
【背景技術】
[0002] 動脈粥樣硬化（Atherosclerosis，As)，作為心腦血管疾病的共同病理基礎，長期 以來始終是心血管病研宄領域的重點和熱點之一，As也是心血管疾病致殘致死的主要原 因。因此，預防As對于心血管疾病患者的治療及遠期預后的改善至關重要。此外，As患者 常伴有血小板活性異常和胰島素水平異常。血栓素 A2 (thromboxane，TXA2)是前列腺素中 的一種，由血小板產生，具有血小板凝聚及血管收縮作用，與前列腺素 I2(PGI2)作用相反， 兩者動態平衡以維持血管收縮功能及血小板聚集作用。血栓素 A2水平異常見于動脈粥樣 硬化、心絞痛、冠心病、糖尿病、高脂血癥等，TXA2/PGI2比值升高易于導致血小板聚集、血栓 形成，促使動脈粥樣硬化和冠心病。
[0003] 而由于生活方式尤其是飲食方式的改變，導致患者出現胰島素抵抗，常出現肥胖、 胰島素水平異常和高脂血癥等現象，即代謝綜合征，而目前具有綜合調整血脂、改善體重、 改善胰島素水平和血小板狀態的藥物并不多見，僅有的藥物（例如，阿托伐他汀鈣）都有毒 副作用，且常伴有不良反應；所以研發一種毒副作用小，安全可靠的，并且從多重角度預防 和改善As的藥物具有廣闊的市場。
[0004] 有鑒于此，特提出本發明。
【發明內容】
[0005] 本發明的第一目的在于提供一種抗動脈粥樣硬化的藥物，所述的藥物不僅具有較 好的抗As作用，可以改善血脂代謝紊亂、血小板異常狀態、胰島素異常和異常增高的DNA 甲基化水平，可以降低患者體重，而且所用的藥材均采用常用食材，沒有毒副作用和不良反 應。
[0006] 本發明的第二目的在于提供一種所述的抗動脈粥樣硬化的藥物的制備方法，該方 法簡單，有效成分提取率高。
[0007] 為了實現本發明的上述目的，特采用以下技術方案：
[0008] -種抗動脈粥樣硬化的藥物，由以下成分組成：
[0009] 按重量計，普洱茶20-30份，山楂20-30份，白菊花10-20份，陳皮10-20份，烏梅 10-20 份。
[0010] 上述藥物選用普洱茶、山楂、白菊花、陳皮和烏梅五種常見的茶飲食材，以特定的 比例組合而成，各藥材的功效發生協同效應，產生抗動脈粥樣硬化的顯著功效。同時，由于 均選用食材，因此該藥物無毒副作用，無不良反應。
[0011] 其中，普洱茶溫和，具有暖胃、減肥、降脂、防止動脈硬化、防止冠心病、降血壓之功 效；山楂具有開胃消食、活血化瘀之功效，可強心、降血脂、降血壓，適用于動脈粥樣硬化和 冠心病患者；白菊花性涼，味甘苦，具有疏風清熱、明目解毒的功效，可調整血脂；陳皮理氣 開胃、燥濕化痰、可減肥降脂。烏梅斂肺、澀腸、生津、安蛔，可改善血脂和血壓。
[0012] 另外，由于長期服用本發明的藥物，并不會產生毒副作用，反而對身體有保健作 用，改善健康狀態，因此，飲用人群更廣泛。
[0013] 經試驗證明，上述藥物對As有顯著療效，能顯著降低血脂水平和As指數，顯著降 低TXA2/PGI2比值，顯著降低體重和血清胰島素水平，以及血清DNA甲基化水平。
[0014] 進一步地，普洱茶25-30份，山楂20-25份，白菊花10-20份，陳皮10-20份，烏梅 10-20 份。
[0015] 進一步地，普洱茶25-30份，山楂20-25份，白菊花10-15份，陳皮10-20份，烏梅 10-20 份。
[0016] 進一步地，普洱茶25-30份，山楂20-25份，白菊花10-15份，陳皮15-20份，烏梅 10-20 份。
[0017] 進一步地，普洱茶25-30份，山楂20-25份，白菊花10-15份，陳皮15-20份，烏梅 15-20 份。
[0018] 進一步地，普洱茶25份，山楂25份，白菊花15份，陳皮15份，烏梅15份。
[0019] 進一步地，山楂為生山楂，和/或，普洱茶為熟普洱，和/或，白菊花為杭白菊，和/ 或，烏梅為制烏梅。采用這些優異品種的茶葉制成的藥物的口味更具濃郁的茶香味。
[0020] 上述抗動脈粥樣硬化的藥物的制備方法，包括下列步驟：
[0021] 步驟A :按照配方，取普洱茶、山楂、白菊花、陳皮和烏梅；
[0022] 步驟B :提取普洱茶、山楂、白菊花、陳皮和烏梅中的有效成分后，制成中藥制劑。
[0023] 上述制備方法中，提取方法根據中藥制劑（粉劑、丸劑、湯劑等）的類型有所不同。
[0024] 其中，優選的制劑類型為湯劑，即方便飲用，又能以茶飲料的形式擴大消費者群。
[0025] 在提取有效成分時，即可采用藥物領域常規的提取方法，也可以采用以下經過創 新改進的提取方法：
[0026] 將山楂、白菊花、陳皮和烏梅混合，再加入9. 5-10. 5倍量的水，進行煎煮，得到第 一煎液和藥渣；
[0027] 向所述藥渣中加入6-7倍量的水，進行煎煮，得到第二煎液；
[0028] 合并所述第一煎液和所述第二煎液后，加入普洱茶，在90-100°C下浸泡8-12min， 再過濾，得到藥液；
[0029] 將所述藥液濃縮，得到湯劑。
[0030] 利用該方法既可以提高有效成分的提取率，有不會發生普洱茶煮沸時間過久易傷 及脾胃的問題。
[0031] 進一步地，將所述藥液濃縮至原體積的1/4?1/5。濃縮至該程度后，藥物既有濃 香、香甜的口味，又有較高的生物利用度。
[0032] 進一步地，在濃縮之后還可以加入白糖、冰糖或蜂蜜，以增加藥物的甜味，改善藥 物的適口度。
[0033] 與現有技術相比，本發明的有益效果為：
[0034] (1)對動脈粥樣硬化（As)有明顯療效，并且能夠綜合調整As伴隨的各種異常指 標，例如，降低血脂水平，降低TXA2/PGI2比值，降低超長體重，改善胰島素水平，降低血清 DNA甲基化水平。
[0035] (2)無毒副作用和不良反應，安全性高。
[0036] (3)原料均為常見食材，來源廣泛，原料成本低。
[0037] (4)制備方法簡單，生產成本低。
[0038] (5)藥物的生物利用度高。
[0039] (6)制劑類型可選擇湯劑，口感類似涼茶，具有茶的濃香味，避免了服用者對藥物 的抵觸情，擴大了消費人群。
[0040] (7)長期飲用無不良反應，反而具有強身健體的效果。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0041] 為了更清楚地說明本發明實施例或現有技術中的技術方案，以下將對實施例或現 有技術描述中所需要使用的附圖作簡單地介紹。
[0042] 圖1為實驗例中尚脂喂養12周后ApoE Z小鼠主動脈出現典型的As斑塊圖；
[0043] 圖2為實驗例中給藥后各組小鼠血脂水平的比較；
[0044] 圖3為實驗例中給藥后各組小鼠動脈粥樣硬化指數（Al)的比較；
[0045] 圖4為實驗例中IPP圖像分析后各組小鼠校正后主動脈斑塊面積比較；
[0046] 圖5為實驗例中茶飲料對高脂喂養12周ApoE+小鼠主動脈斑塊內細胞外脂質成 分的影響；
[0047] 圖6為實驗例中IPP圖像分析后各組小鼠校正后主動脈斑塊內膠原成分的比較；
[0048] 圖7為實驗例中HPLC法檢測各組小鼠血清DNA甲基化水平；
[0049] 圖8為實驗例中ELISA法檢測各組小鼠血清DNMT水平；
[0050] 圖9為實驗例中茶飲料對高脂喂養12周ApoE+小鼠血清胰島素水平的影響；
[0051] 圖10為實驗例中ELISA法檢測各組小鼠血清TXAJP PGI2水平；
[0052] 圖11為實驗例中間接換算得到的各組小鼠血清TXA2/PGI2比值。
【具體實施方式】
[0053] 下面將結合實施例對本發明的實施方案進行詳細描述，但是本領域技術人員將會 理解，下列實施例僅用于說明本發明，而不應視為限制本發明的范圍。實施例中未注明具體 條件者，按照常規條件或制造商建議的條件進行。所用試劑或儀器未注明生產廠商者，均為 可以通過市售購買獲得的常規產品。
[0054] 實施例1
[0055] -種抗動脈粥樣硬化的藥物，由以下成分組成：
[0056] 按重量計，普洱茶20份，山楂20份，白菊花10份，陳皮10份，烏梅10份。
[0057] 實施例2
[0058] -種抗動脈粥樣硬化的藥物，由以下成分組成：
[0059] 按重量計，普洱茶22份，山楂21份，白菊花11份，陳皮11份，烏梅11份。
[0060] 實施例3
[0061] -種抗動脈粥樣硬化的藥物，由以下成分組成：
[0062] 按重量計，普洱茶24份，山楂23份，白菊花13份，陳皮13份，烏梅14份。
[0063] 實施例4
[0064] -種抗動脈粥樣硬化的藥物，由以下成分組成：
[0065] 按重量計，普洱茶25份，山楂24份，白菊花14份，陳皮14份，烏梅15份。
[0066] 實施例5
[0067] -種抗動脈粥樣硬化的藥物，由以下成分組成：
[0068] 按重量計，普洱茶26份，山楂22份，白菊花13份，陳皮15份，烏梅15份。
[0069] 實施例6
[0070] -種抗動脈粥樣硬化的藥物，由以下成分組成：
[0071] 按重量計，普洱茶28份，山楂24份，白菊花15份，陳皮16份，烏梅16份。
[0072] 實施例7
[0073] -種抗動脈粥樣硬化的藥物，由以下成分組成：
[0074] 按重量計，普洱茶30份，山楂26份，白菊花16份，陳皮15份，烏梅15份。
[0075] 實施例8
[0076] -種抗動脈粥樣硬化的藥物，由以下成分組成：
[0077] 按重量計，普洱茶25份，山楂25份，白菊花15份，陳皮15份，烏梅15份。
[0078] 實施例9
[0079] 抗動脈粥樣硬化的藥物的制備方法，包括下列步驟：
[0080] 按照配方，取普洱茶、山楂、白菊花、陳皮和烏梅，分別磨粉，再混合、過篩，得到粉 劑。
[0081] 該粉劑可以沖泡服用。
[0082] 實施例10
[0083] 抗動脈粥樣硬化的藥物的制備方法，包括下列步驟：
[0084] 按照配方，取普洱茶、山楂、白菊花、陳皮和烏梅，分別磨粉，再混合、過篩；再以面 糊為粘合劑，經過起膜、成丸、蓋面、干燥、選丸制成丸劑。
[0085] 該丸劑可直接服用。
[0086] 實施例11
[0087] 抗動脈粥樣硬化的藥物的制備方法，包括下列步驟：
[0088] 將山楂、白菊花、陳皮和烏梅混合，再加入10倍量的水，進行煎煮，得到第一煎液 和藥渣；
[0089] 向所述藥渣中加入6-7倍量的水，進行煎煮，得到第二煎液；
[0090] 合并所述第一煎液和所述第二煎液后，加入普洱茶，在90-100°C下浸泡lOmin，再 過濾，得到藥液；
[0091] 將所述藥液濃縮至原體積的1/5,得到湯劑。
[0092] 該湯劑可直接服用。
[0093] 為詳細說明本發明的技術效果，以下提供了具體的動物試驗例。
[0094] 實驗方法
[0095] 1.實驗動物及處理
[0096] ApoE^小鼠（C57BL/6J家系），鼠齡6-8周，體重18-20g。飼以含脂肪21 % (wt/ wt)、膽固醇0. 15%的西方類型膳食飼料，然后在喂養的第6周開始給予藥物干預，6周后處 死，眶下靜脈叢取血，保留血清，無菌條件下取心臟，心臟用4%多聚甲醛固定。
[0097] 2.藥物來源、成分
[0098] 阿托伐他汀鈣，商品名立普妥，上海輝瑞制藥公司，批號H20051408。配方采用實施 例8,煎煮方法如下：
[0099] 將茶飲料（普洱茶除外）分別浸泡于不銹鋼鍋中，按10g/100ml的比例加入自來 水（液面最終至少超過藥物2-3cm)，浸泡Ih ;將電磁爐為溫度設置在180°C，使藥液迅速 煮沸，本過程大概需要IOmin ;待藥液煮沸后5min將溫度降至130°C，保持藥液微沸狀態 30min-lh，至藥液量大致100-150ml時倒出第一煎藥液；再次添水，本次添水量大致為第一 次所加水量之三分之二，煎煮方法同第一煎；將兩次所煎藥液混勻，加入普洱茶，電磁爐溫 度設置在l〇〇°C，浸泡lOmin，然后將普洱茶濾出，然后對其濃縮，溫度設置在130°C ;目測濃 縮量，待藥液冷卻后用量筒測其體積，至體積為67±5ml時停止濃縮，本次濃縮完成。將濃 縮液倒入IOOml試劑瓶中，密封保存于4°C冰箱保存，于瓶身注明熬制日期備用。
[0100] 3.實驗試劑
[0101] 血清總膽固醇（TC)和血清甘油三酯（TG)氧化酶法測定試劑盒；血清低密度脂蛋 白膽固醇（LDL-C)測定試劑盒和血清高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C)測定試劑盒。高效液 相色譜法（HPLC)法測定小鼠血清DNA甲基化水平，和雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試 驗（ELISA)法檢測小鼠血清DNA甲基化轉移酶（DNMT)試劑盒。VG染色試劑盒。油紅0染 色試劑盒。小鼠（Mouse)胰島素（INS) ELISA檢測試劑盒；小鼠（Mouse)血栓素 A2(TX-A2) ELISA檢測試劑盒；小鼠（Mouse)兒茶酚胺（CA) ELISA檢測試劑盒；小鼠（Mouse)前列環素 (PGI2) ELISA檢測試劑盒。
[0102] 4.實驗分組及給藥劑量
[0103] ?模型組：η = 10。
[0104] ?立普妥（陽性對照組）：3mg/kg，η = 10。
[0105] ?茶飲料組：405. 5mg/kg, η = 10。
[0106] 所有給藥組劑量根據成人每日用藥臨床推薦的常用劑量，并按成人與小鼠的給藥 劑量換算系數折算成小鼠用量灌胃給藥，每日1次，灌胃給藥6周。模型組給予等量的生理 鹽水。另設正常組同品系小鼠6只。
[0107] 5.檢測方法與指標
[0108] 5. 1采用氧化酶法和直接法檢測茶飲料對高脂喂養12周Ap0E+小鼠血清TC、TG、 LDL-C和HDL-C水平以及對動脈粥樣硬化指數（Al)的影響。
[0109] 動脈粥樣硬化指數（atheroslcerosis index, Al) = (TC-HDL-C)/HDL-C
[0110] 5. 2采用ELISA法檢測茶飲料對高脂喂養12周Ap0E+小鼠血清胰島素水平、血清 血栓素 A2(TXA2)、前列環素 I2(PGI2)和DNA甲基化轉移酶（DNMT)水平的影響。
[0111] 5. 3采用高效液相色譜法（HPLC)法檢測茶飲料對高脂喂養12周ApoE-/-小鼠血 清DNA甲基化水平的影響。
[0112] 5. 4采用HE病理染色和IPP圖像軟件分析測量小鼠主動脈As斑塊面積，具體如 下：
[0113] ?測量管腔面積（lumen area, LA, mm2)、內彈力膜圍繞面積（internal elastic laminal area. IELa, mm2)，并計算斑塊面積、校正后斑塊面積。公式換算如下：
[0114] ?斑塊面積（plaque area, PA, mm2) = IELa - LA
[0115] ?校正后斑塊面積=PA/IELa
[0116] 5. 5采用油紅O染色和IPP圖片分析軟件測量小鼠主動脈斑塊內脂質成分面積。
[0117] ?斑塊內脂質成分面積（lipid area, LA, mm2)
[0118] ?斑塊面積（plaque area, PA, mm2)
[0119] ?校正后斑塊內脂質面積=LA/PA
[0120] 5. 6采用VG染色和IPP圖像軟件分析觀察茶飲料對高脂喂養12周ApoE-/-小鼠 主動脈As斑塊內膠原成分的影響。
[0121] ?斑塊內膠原成分面積（collagen area, CA, mm2)
[0122] ?斑塊面積（plaque area, PA, mm2)
[0123] ?校正后斑塊內膠原面積=CA/PA
[0124] 6.統計學方法
[0125] 所有數據均用；士S形式表示，采用SPSS11·5軟件，組間比較用單因素 AN0VA* 析。
[0126] 實驗結果
[0127] 注：所有結果的附圖中，表示與模型組相比，P〈0. 01 表示與模型組相比， P〈0.05。
[0128] 1.高脂喂養12周后，ApoE-/-小鼠主動脈出現典型的As斑塊
[0129] 與正常組同品系C57小鼠（圖1A)相比，高脂飼料喂養12周后的ApoE-/-小鼠主 動脈管壁上可觀察到典型的富含膽固醇酯的As斑塊（圖1B，黑箭頭所示），斑塊有成熟的 纖維帽覆蓋。說明復制As模型成功。
[0130] 2.茶飲料對高脂喂養12周ApoE-/-小鼠血清血脂水平和動脈粥樣硬化指數的影 響
[0131] 采血后，室溫放置1小時后，3500轉離心15分鐘后，血液分層。各組小鼠上清液數 碼相機拍照后可見：模型組小鼠上清液呈白色乳糜狀，而茶飲料組小鼠血清與模型組相比， 比較清澈，透明度較高。
[0132] 檢測各組小鼠血清血脂，結果顯示：與模型組相比，茶飲料組和立普妥組小鼠血清 TC和TG水平明顯降低，小鼠血清HDL-C水平明顯升高，具有統計學差異（P〈0. 01)(圖2)。 至于間接換算的動脈粥樣硬化指數AI，與模型組相比，茶飲料組和立普妥組小鼠 AI均顯著 降低（P〈0. 01)(圖3)。兩給藥組之間數據無顯著差異（P > 0. 05)。
[0133] 3.茶飲料對高脂喂養12周ApoE-/-小鼠校正后主動脈斑塊面積的影響
[0134] 藥物干預6周后，經HE染色和IPP圖像軟件分析結果顯示：與模型組相比，立普妥 組和茶飲料組小鼠的校正后主動脈As斑塊面積顯著降低（P〈0. 05)，兩給藥組之間無顯著 差異（Ρ>0· 05)(圖 4)。
[0135] 4.茶飲料對高脂喂養12周ApoE-/-小鼠主動脈斑塊內細胞外脂質成分的影響
[0136] 藥物干預6周后，經油紅0染色和IPP圖像軟件分析結果顯示：與模型組相比，立 普妥組和茶飲料組的校正后主動脈As斑塊內細胞外脂質成分顯著降低（P〈0. 01)，兩給藥 組之間無顯著差異（Ρ>〇· 05)(圖5)。
[0137] 5.茶飲料對高脂喂養12周ApoE-/-小鼠主動脈斑塊內膠原成分的影響
[0138] 藥物干預6周后，經VG染色和IPP圖像軟件分析結果顯示：與模型組相比，立普妥 組和茶飲料組的校正后主動脈As斑塊膠原成分顯著降低（P〈0. 01)，兩給藥組之間無顯著 差異（Ρ>0· 05)(圖 6)。
[0139] 6.茶飲料對高脂喂養12周ApoE-/-小鼠血清DNA甲基化水平和DNMT水平的影響
[0140] 藥物干預6周后，處死米血后經HPLC法檢測小鼠血清DNA甲基化水平和米用 ELISA法檢測血清DNMT水平。結果顯示：與模型組相比，立普妥組和茶飲料組小鼠血清DNA 甲基化水平及DNMT水平顯著降低（P〈0. 01)，兩給藥組之間無顯著差異（P>0. 05)(圖7和 8) 〇
[0141] 7.茶飲料對高脂喂養12周ApoE-/-小鼠體重的影響
[0142] 藥物干預6周后，處死前稱量小鼠體重，結果顯示：與模型組相比，茶飲料組小鼠 體重明顯降低，并且優于陽性對照藥立普妥組（表1)。
[0143] 表1.茶飲料對高脂喂養12周ApoE-/-小鼠體重的影響（克，均數土標準差）
[0144]
【權利要求】
1. 一種抗動脈粥樣硬化的藥物，其特征在于，由以下成分組成： 按重量計，普洱茶20-30份，山楂20-30份，白菊花10-20份，陳皮10-20份，烏梅10-20 份。
2. 根據權利要求1所述的抗動脈粥樣硬化的藥物，其特征在于，普洱茶25-30份，山楂 20-25份，白菊花10-20份，陳皮10-20份，烏梅10-20份。
3. 根據權利要求1所述的抗動脈粥樣硬化的藥物，其特征在于，普洱茶25-30份，山楂 20-25份，白菊花10-15份，陳皮10-20份，烏梅10-20份。
4. 根據權利要求1所述的抗動脈粥樣硬化的藥物，其特征在于，普洱茶25-30份，山楂 20-25份，白菊花10-15份，陳皮15-20份，烏梅10-20份。
5. 根據權利要求1所述的抗動脈粥樣硬化的藥物，其特征在于，普洱茶25-30份，山楂 20-25份，白菊花10-15份，陳皮15-20份，烏梅15-20份。
6. 根據權利要求1所述的抗動脈粥樣硬化的藥物，其特征在于，普洱茶25份，山楂25 份，白菊花15份，陳皮15份，烏梅15份。
7. 權利要求1所述的抗動脈粥樣硬化的藥物的制備方法，其特征在于，包括下列步驟： 步驟A :按照配方，取普洱茶、山楂、白菊花、陳皮和烏梅； 步驟B :提取普洱茶、山楂、白菊花、陳皮和烏梅中的有效成分后，制成中藥制劑。
8. 根據權利要求7所述的抗動脈粥樣硬化的藥物的制備方法，其特征在于，所述中藥 制劑為粉劑、丸劑、湯劑中的一種。
9. 根據權利要求7所述的抗動脈粥樣硬化的藥物的制備方法，其特征在于，所述步驟B 的方法為： 將山楂、白菊花、陳皮和烏梅混合，再加入9. 5-10. 5倍量的水，進行煎煮，得到第一煎 液和藥渣； 向所述藥渣中加入6-7倍量的水，進行煎煮，得到第二煎液； 合并所述第一煎液和所述第二煎液后，加入普洱茶，在90-KKTC下浸泡8-12min，再過 濾，得到藥液； 將所述藥液濃縮，得到湯劑。
10. 根據權利要求9所述的抗動脈粥樣硬化的藥物的制備方法，其特征在于，將所述藥 液濃縮至原體積的1/4?1/5。
【文檔編號】A61K36/82GK104491186SQ201510004984
【公開日】2015年4月8日 申請日期:2015年1月6日 優先權日:2015年1月6日
【發明者】周明學, 康群甫, 劉衛紅, 劉紅旭, 李萍, 王寧 申請人:北京市中醫研究所