以山綠茶總?cè)茷樵系目鼓[瘤藥物制劑的制作方法
【專利摘要】以山綠茶總?cè)茷樵系目鼓[瘤藥物制劑，涉及醫(yī)藥【技術領域】，本發(fā)明制劑包括山綠茶總?cè)坪椭辽僖环N藥用賦形劑。本發(fā)明利用山綠茶總?cè)茖Χ喾N人體腫瘤細胞具有很強的細胞毒作用，該化合物可劑量依賴性的將人肝癌細胞阻滯在G1-S期，但不影響人體正常細胞的活力和功能。同樣，此化合物對人癌細胞株裸鼠移植瘤模型A375和HepG2實體瘤具有強力抑制作用，抑瘤率均在50%以上，次作用下未引起荷瘤裸鼠重要臟器的病理損害。
【專利說明】以山綠茶總?cè)茷樵系目鼓[瘤藥物制劑
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及醫(yī)藥【技術領域】，尤其涉及抗腫瘤藥物的研究技術。
【背景技術】
[0002] 山綠茶是冬青科冬青屬植物海南冬青的葉，山綠茶總?cè)茷樯骄G茶提取的有效部 位。如專利文獻CN2012103974798公開了一種從山綠茶中提取山綠茶總?cè)频姆椒ǎ⑶遥?還公開了山綠茶總?cè)圃谥委熜难芗膊》矫?，特別是動脈粥樣硬化方面具有潛在的開發(fā) 價值。
[0003] 但至今未見有文獻報道山綠茶的總?cè)圃诳鼓[瘤藥物方面的應用技術。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0004] 本發(fā)明目的在于提出一種以山綠茶總?cè)茷樵系目鼓[瘤藥物制劑。
[0005] 本發(fā)明制劑包括山綠茶總?cè)坪椭辽僖环N藥用賦形劑。
[0006] 按藥劑學方法，可以將本發(fā)明的山綠茶總?cè)浦苽涑啥鄠€臨床藥物劑型用于抗 腫瘤，包括口服制劑和非腸道給藥的劑型。所指的口服制劑選自于膠囊劑、片劑、丸劑、顆 粒劑、懸浮劑、滴丸劑、口服液體制劑中的任何一種，所指的非腸道給藥劑型為注射劑、氣霧 齊U、栓劑或皮下給藥制劑的任何一種。
[0007] 本發(fā)明的抗腫瘤藥物中的輔料是指常規(guī)的賦形劑，如溶劑、崩解劑、矯味劑、防腐 齊IJ、著色劑、粘合劑等。本發(fā)明抗腫瘤藥物中的其他配伍用的藥物，指的是有效劑量的山綠 茶總?cè)茷橐欢ǖ乃幬镌希倥湮槠渌言试S合用的中藥或化學藥品。
[0008] 本發(fā)明所指的抗腫瘤活性為抗肝癌、胃癌、肺癌、大腸癌、宮頸癌、皮膚癌等多種腫 瘤的抑制活性。山綠茶總?cè)茖Χ喾N人體腫瘤細胞具有很強的細胞毒作用。該化合物可劑 量依賴性的將人肝癌細胞阻滯在Gl-S期，但不影響人體正常細胞的活力和功能。同樣，此 化合物對人癌細胞株裸鼠移植瘤模型A375和H印G2實體瘤具有強力抑制作用，抑瘤率均 在50%以上，次作用下未引起荷瘤裸鼠重要臟器的病理損害?？梢?，山綠茶總?cè)凭哂懈咝?抗癌且低毒等特點。據(jù)此，山綠茶總?cè)朴糜谥苽淇鼓[瘤藥物和預防腫瘤發(fā)生的藥品或保 健食品。
[0009] 本發(fā)明所述山綠茶總?cè)普贾苿┛傎|(zhì)量的1%?99%，優(yōu)選為30%?80%，更優(yōu)選為 60% ?70%。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0010] 圖1為人肝細胞癌HepG2細胞周期的流式細胞儀分析圖。
[0011] 圖2為在人肝細胞癌!fepG2中加入25μg/mL山綠茶總?cè)坪蠹毎芷诘牧魇郊?胞儀分析圖。
[0012] 圖3為在人肝細胞癌!fepG2中加入50μg/mL山綠茶總?cè)坪蠹毎芷诘牧魇郊?胞儀分析圖。
[0013] 圖4為在人肝細胞癌H印G2中加入100μg/mL山綠茶總?cè)坪蠹毎芷诘牧魇郊?胞儀分析圖。
[0014] 圖5為在人肝細胞癌H印G2中加入200μg/mL山綠茶總?cè)坪蠹毎芷诘牧魇郊?胞儀分析圖。
[0015] 圖6是山綠茶總?cè)茖θ烁伟〩印G2細胞周期的影響圖。
[0016] 圖7為模型組和山綠茶總?cè)?5、50、100、200 11^/1^4個劑量組的山綠茶總?cè)?對裸鼠移植瘤模型A375實體瘤的生長抑制率關系圖。
[0017] 圖8為模型組和山綠茶總?cè)?5、50、100、200 11^/1^4個劑量組對裸鼠移植瘤模 型A375實體瘤抑制作用后的瘤重散點圖。
[0018] 圖9是山綠茶總?cè)茖β闶笾匾K器組織學切片的影響對比圖。
【具體實施方式】
[0019] 下面通過具體實例對本發(fā)明作進一步說明，但這些實例只是為了說明，而不是對 本發(fā)明的限制。
[0020] 一、各制劑的制備： 實施例1 :膠囊的制備工藝：山綠茶總?cè)?50g，干燥淀粉2500g，將淀粉與山綠茶總?cè)?萜充分混合，過120目篩，充分混勻后制備膠囊1000粒，每粒含山綠茶總?cè)?50mg。
[0021] 實施例2 :滴丸的制備工藝：600g聚乙二醇水浴溶化后加入200g山綠茶總?cè)疲?充分攪拌后置于保溫管中，后采用液體石蠟包裹，吸干石蠟油后加入少量滑石粉混勻，制備 滴丸1000丸。
[0022] 實施例3 :片劑制備工藝：山綠茶總?cè)?00g，淀粉lOOOg，糖粉200g，適量乙醇， 混合制粒后，經(jīng)整粒機處理后，壓片分裝。
[0023] 實施例4 :注射劑制備工藝：山綠茶總?cè)?0g，丙二醇20ml，聚乙二醇40ml，注射 用水200ml，將各原料混合后水浴加熱0. 5h，注射用水加至500ml，超聲處理10min，水浴加 熱0. 5h，調(diào)節(jié)pH值至5. 5?6. 5,過濾澄清，灌封滅菌即得。
[0024] 二、山綠茶總?cè)茖θ烁渭毎〩EPG2細胞活力的影響試驗： 取對數(shù)生長期的肝癌細胞株H印G2,0. 25 %胰蛋白酶消化，收集消化狀態(tài)下的細胞，計 數(shù)細胞，用DMEM培養(yǎng)基稀釋成IO3-IO4個/100μ1濃度的單細胞懸液，每孔100μ1，接種 到96孔板上，置37°C，5%CO2，飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)24h后，空白對照組加入緩沖 液PBS，陰性對照組用等體積DMEM培養(yǎng)液，陽性對照組加入不同濃度順鉬溶液，實驗組加入 不同濃度山綠茶總?cè)疲?2. 5，25，50，100和200μg/mL),每個濃度設6個復孔,每孔 20μ?。96孔板置37 °C、5 %CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)4h后，加入5mg/ml MTT，每孔10μ1，培養(yǎng)4h，每孔加入150μIDMS0,搖床振蕩10min，酶標儀測定吸光度，吸 收波長為570nm。
[0025] 測定48h0·D.值，根據(jù)GraphPadPrism軟件計算山綠茶三廠對人肝癌細胞的半 數(shù)抑制濃度（IC5tl),結果見表1。
[0026]表1:山綠茶總?cè)茖κN人腫瘤細胞株的抑制作用。
【權利要求】
1. 以山綠茶總?cè)茷樵系目鼓[瘤藥物制劑，其特征在于所述制劑包括山綠茶總?cè)?和至少一種藥用賦形劑。
2. 根據(jù)權利要求1所述藥物制劑，其特征在于所述山綠茶總?cè)普贾苿┛傎|(zhì)量的1%? 99%。
3. 根據(jù)權利要求2所述藥物制劑，其特征在于所述山綠茶總?cè)普贾苿┛傎|(zhì)量的 30% ?80%。
4. 根據(jù)權利要求3所述藥物制劑，其特征在于所述山綠茶總?cè)普贾苿┛傎|(zhì)量的 60% ?70%。
5. 根據(jù)權利要求1或2或3或4所述藥物制劑，其特征在于所述制劑的劑型為顆粒劑、 膠囊劑、片劑、滴丸劑、口服液體制劑或注射劑。
【文檔編號】A61K36/185GK104398546SQ201410764972
【公開日】2015年3月11日 申請日期:2014年12月15日 優(yōu)先權日:2014年12月15日
【發(fā)明者】孫云, 王德俊, 劉暢, 張亞琦 申請人:揚州大學