Hdac抑制劑與血小板減少癥藥物的組合的制作方法

Hdac抑制劑與血小板減少癥藥物的組合的制作方法
【專利摘要】本發明涉及一種包含(a)HDAC抑制劑和(b)抗血小板減少癥藥的組合，該組合是用于同時、并列、獨立或相繼的使用，特別是用于增殖性疾病的治療。本發明還涉及包含這一組合的藥用組合物或產品，或者使用這一組合的方法。
【專利說明】HDAC抑制劑與血小板減少癥藥物的組合
[0001] 本發明專利申請是國際申請號為PCT/US2011/049842,國際申請日為2011年8月 31日，進入中國國家階段的申請號為201180042418. 3,名稱為"HDAC抑制劑與血小板減少 癥藥物的組合"的發明專利申請的分案申請。

【技術領域】
[0002] 本發明涉及一種包含
[0003] (a)組蛋白去乙酰化酶抑制劑（HDACi);和 [0004] (b)用于治療血小板減少癥（TCP)的藥物，
[0005] 的組合，該組合同時、并列、獨立或相繼使用，特別是用于增殖性疾病，例如癌癥， 如實體腫瘤或者血癌（如白血病、淋巴瘤、多發性骨髓瘤（MM)、霍奇金病、骨髓增生異常綜 合征（MDS)或急性髓細胞白血病（AML))的治療。本發明還涉及包含這一組合的藥用組合 物、以及在接受組蛋白去乙酰化酶（HDAC)抑制劑藥物治療的患者中治療血小板減少癥的 方法。本發明還涉及一種包含這一組合的商業包裝或產品。

【背景技術】
[0006] 可逆的組蛋白的乙酰化是基因表達的一個主要調控方法，該調控方法是通過改變 轉錄因子對DNA的可達性而起作用。在正常細胞中，組蛋白去乙酰化酶（HDAC)與組蛋白乙 酰轉移酶共同地控制組蛋白的乙酰化水平從而維持平衡。對組蛋白去乙酰化酶的抑制導致 過乙酰化組蛋白的蓄積，從而導致多種細胞反應。已有人對HDAC抑制劑（HDACi)針對癌細 胞的治療效果進行了研究。HDACi研究領域中的近期開發提供了高度有效且穩定的適于治 療腫瘤的活性化合物。
[0007] 逐漸增加的證據提示當與其它化學治療劑聯合使用時HDACi甚至更加有效。在療 效和安全性兩個方面，均存在協同和相加的優點。化學治療劑與HDACi的組合的治療效果 可以導致該組合中各組分的安全劑量范圍較低。


【發明內容】

[0008] 本發明涉及一種用于治療增殖性疾病或者延遲該疾病發展的HDACi與血小板減 少癥（TCP)治療藥的藥用組合。"增殖性疾病"包括實體腫瘤癌癥或者血癌（諸如白血病、淋 巴瘤、多發性骨髓瘤、霍奇金病、骨髓增生異常綜合征（MDS)或急性髓細胞白血病（AML))。 優選地，增殖性疾病是多發性骨髓瘤、MDS和/或AML。更優選地，增殖性疾病是多發性骨髓 瘤。
[0009] 當與抗血小板減少癥藥聯合使用時HDAC抑制劑是有效的，特別是在患有組 蛋白去乙酰化酶引起的血小板減少癥的患者中。優選的HDAC抑制劑包括帕比司他 (panobinostat)和伏立諾他（vorinostat)。最優選的是帕比司他。HDAC抑制劑可以任選 地與其它活性劑（諸如蛋白酶體抑制劑、抗代謝藥以及有效治療多發性骨髓瘤、MDS和/或 AML的藥物）聯合用藥。與HDAC抑制劑聯合用藥的優選藥物包括保特佐米（bortezomib) 和地塞米松。優選的抗代謝藥包括5-氮雜胞苷和/或地西他濱。適用于本發明的抗血小 板減少癥藥包括：血小板生成素（TPO)模擬物，優選羅米司亭（romiplostim)和/或艾特博 中白（etrombopag)。
[0010] 在根據本發明的一個優選方法中，提供（a)N-羥基-3-[4-[[[2-(2-甲基-IH-吲 哚-3-基）乙基]氨基]甲基]苯基]-2E-2-丙烯酰胺或其藥學上可接受鹽與（b)抗血小 板減少癥藥的組合在制備用作多發性骨髓瘤藥的藥物中的用途。術語"用途"也可以包括治 療方法，例如提供治療多發性骨髓瘤的方法，該方法包括帕比司他與保特佐米更優選地與 地塞米松的聯合用藥。在本發明的又一優選實施方式中，提供用于治療MDS和/或AML的 方法，該方法包括帕比司他（panobinostat)與5-氮雜胞苷和/或地西他濱（decitabine) 的聯合用藥。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0011] 圖1示出了對血小板凋亡無效。
[0012] 圖2提供證據證明HDACi引起的血小板減少癥有可能是異常的血小板生成的結 果。
[0013] 圖3提供證據證明TPO模擬物可有效地改善帕比司他引起的血小板減少癥。
[0014] 圖4提供證據證明TPO模擬物可有效地改善羅米地辛（romidepsin)引起的血小 板減少癥。

【具體實施方式】
[0015] 本發明提供一種用于延遲增殖性疾病（優選血癌，更優選MDS或AML，最優選多發 性骨髓瘤）的發展或治療該疾病的方法。該方法將可有效治療增殖性疾病的藥物與有效治 療TCP的藥物的給藥加以合并。優選地，該方法將HDAC抑制劑與抗TCP藥的給藥加以聯 合。更優選地，該方法將HDACi與抗TCP藥進而與另一種抗癌藥（諸如抗代謝藥）的給藥 加以聯合。本文中使用的術語疾病的"發展的延遲"是相對于在沒有任何治療存在下所觀 察或預計的發展。
[0016] HDAC抑制劑
[0017] 本發明的一個實施方式提供一種在需要這種治療的對象中延遲增殖性疾病（優 選多發性骨髓瘤）的發展或治療該疾病的方法，該方法包括給該對象給予有效量的化學式 (I)的羥肟酸類的HDAC抑制劑：
[0018] (a)化學式（I)的HDAC抑制劑：
[0019] 其中，R1是11;鹵素；或者直鏈C1-C6烷基，特別是甲基、乙基或正丙基，其中甲基、乙 基和正丙基取代基是未取代的或者被下述的一個或多個烷基取代基取代；
[0020] R2是選自HA-C1。烷基，優選C1-C6烷基，例如甲基、乙基或-CH2CH2-OH;C4-C9環烷 基；C4-C9雜環燒基；C4-C9雜環燒基燒基；環燒基燒基，例如環丙基甲基；芳基；雜芳基；芳基 烷基，例如芐基；雜芳基烷基，例如吡啶基甲基；-(CH2)nC(O)R6 ;-(CH2)n0C(0)R6 ;氨基酰基； H0N-C(0)-CH=C(R1)-芳基-燒基-;和-(CH2)nR7 ;
[0021] R3和R4是相同或不同的，并且獨立為HA-C6烷基；酰基；或酰基氨基，或者
[0022] R3和R4連同它們所鍵結的碳代表C= 0、C=S或C=NR8，或者
[0023] R2連同它所鍵結的氮與R3連同它所鍵結的碳可以形成C4-C9雜環烷基；雜芳基；多 雜芳基；非芳香族多雜環；或者芳基與非芳基混合的多雜環；
[0024] R5是選自HA1-C6烷基；C4_C9環烷基；C4_C9雜環烷基；酰基；芳基；雜芳基；芳基烷 基，例如芐基；雜芳基烷基，例如吡啶基甲基；芳香族多環；非芳香族多環；芳基與非芳基混 合的多環；多雜芳基；非芳香族多雜環；以及芳基與非芳基混合的多雜環；
[0025] 和n3是相同或不同的，并且獨立地選自0-6,當Ii1為1-6時各碳原子可以 任選地且獨立地被R3和/或R4取代；
[0026] X和Y是相同或不同的并且獨立地選自H;齒素；C「C4烷基，諸如CH3和CF3 ;N02 ; C(O)R1 ;OR9 ;SR9 ;CN;和NRltlR1i;
[0027] R6是選自HA-C6烷基；C4_C9環烷基；C4_C9雜環烷基；環烷基烷基，例如環丙基 甲基、芳基、雜芳基；芳基烷基，例如芐基和2-苯基乙烯基；雜芳基烷基，例如吡啶基甲基； OR12 ;和NR13R14 ;
[0028] R7 是選自OR15 ;SR15;S(0)R16 ;S02R17 ;NR13R14 ;和NR12SO2R6 ;
[0029] R8是選自H;0R15 ;NR13R14A1-C6烷基；C4_C9環烷基；C4_C9雜環烷基；芳基；雜芳基； 芳基烷基，例如芐基；以及雜芳基烷基，例如吡啶基甲基；
[0030] R9 是選自C1-C4 烷基，例如CH3 和CF3;C(0)-烷基，例如C(0)CH3 ;和C(0)CF3 ;
[0031] Rltl和R11是相同或不同的并且獨立地選自HA1-C4烷基；和-C(O)-烷基；
[0032] R12是選自HK1-C6烷基；C4_C9環烷基；C4_C9雜環烷基；C4_C9雜環烷基烷基；芳基； 芳基與非芳基混合的多環；雜芳基；芳基烷基，例如芐基；和雜芳基烷基，例如吡啶基甲基；
[0033] R13和R14是相同或不同的并且獨立地選自HK1-C6烷基；C4_C9環烷基；C4_C9雜環 烷基；芳基；雜芳基；芳烷基，例如芐基；雜芳基烷基，例如吡啶基甲基；氨基酰基，或者
[0034] R13和R14連同它們所鍵結的氮原子是C4-C9雜環烷基；雜芳基；多雜芳基；非芳香 族多雜環；或者芳基與非芳基混合的多雜環；
[0035] R15是選自H;CrC6烷基；C4_C9環烷基；C4_C9雜環烷基；芳基；雜芳基；芳基烷基； 雜芳基烷基；和（CH2)mZR12 ;
[0036] R16是選自C1-C6烷基；C4_C9環烷基；C4_C9雜環烷基；芳基；雜芳基；多雜芳基；芳 基烷基；雜芳基烷基；和（CH2)mZR12 ;
[0037] R17是選自C1-C6烷基；C4_C9環烷基；C4_C9雜環烷基；芳基；芳香族多環；雜芳基；芳 基烷基；雜芳基烷基；多雜芳基和NR13R14 ;
[0038] M為選自0-6的整數；并且
[0039] Z是選自 0、NR13、S、和S(0)，
[0040] 或者其藥學上可接受鹽，聯合抗TCP藥。該組合還可任選地包含給予抑制細胞增 殖的抗癌藥，如抗代謝藥。
[0041] 適當時，藥學上可接受鹽包括：藥學上可接受的堿加成鹽和酸加成鹽，例如金屬鹽 (諸如堿金屬鹽和堿土金屬鹽）、銨鹽、有機胺加成鹽以及氨基酸加成鹽和磺酸鹽。酸加成 鹽包括：無機酸加成鹽（諸如鹽酸鹽、硫酸鹽和磷酸鹽）；以及有機酸加成鹽（諸如烷基磺 酸鹽、芳基磺酸鹽、醋酸鹽、馬來酸鹽、富馬酸鹽、酒石酸鹽、檸檬酸鹽和乳酸鹽）。優選乳酸 鹽。金屬鹽的例子是：堿金屬鹽（諸如鋰鹽、鈉鹽和鉀鹽）；堿土金屬鹽（諸如鎂鹽和鈣鹽、 鋁鹽和鋅鹽）。銨鹽的例子是銨鹽和四甲基銨鹽。有機胺加成鹽的例子是與嗎啉和哌啶形 成的鹽。氨基酸加成鹽的例子是與甘氨酸、苯丙氨酸、谷氨酸和賴氨酸形成的鹽。磺酸鹽包 括：甲磺酸鹽、對甲苯磺酸鹽和苯磺酸鹽。
[0042] 在一實施方式中，達西司特（dacinostat)是HDAC抑制劑。在本發明的一個優 選實施方式中，HDAC抑制劑是帕比司他（panobinostat)(即，N-輕基-3-[4-[[[2-(2-甲 基-IH-吲哚-3-基）-乙基]氨基]甲基]苯基]-2E-2-丙烯酰胺）或者其藥學上可接 受鹽，優選化學式（III)的乳酸鹽（即帕比司他）。本發明還延及非羥肟酸類的HDAC抑 制劑的使用。例如，本發明涉及二環四肽Istodax? (羅米地辛）和辛二酰苯胺異羥肟酸 Zolinza?(伏立諾他）的使用。
[0043]抗TCP藥
[0044] 本發明涉及用于治療血癌的抗血小板減少癥藥與HDAC抑制劑的組合。"抗血小板 減少癥藥"包括血小板生成素（TPO)(包含重組ΤΡ0)和聚乙二醇化重組人巨核細胞生長發 育因子（PEG-rhMGDF)以及所謂的TPO模擬物，該模擬物被設計作為TPO受體激動劑而有效 地治療血小板減少癥。TPO模擬物包括非肽類分子以及肽類。Nplate? (羅米司亭，AMG 531堿金屬鹽）例如是最新開發的TPO模擬物之一并且是TPO受體結合肽以及IgGl抗體的Fc結構域的融合蛋白。艾曲波帕（Eltrombopag)是示例性的非肽類TPO模擬物。
[0045]US7, 160, 870中描述了其它合適的TPO模擬物，例如：3' -{Ν' -[3-環丙 基-1- (3, 4-二甲基苯基）-5-氧代-1，5-二氫吡唑-4-亞基]肼基} -2' -羥基聯苯基-3-甲 酸；[1- (4-氟-3-甲基苯基）-3-甲基-5-氧代-1，5-二氫吡唑-4-亞基]-肼基} -2' -羥基 聯苯基-3-甲酸；3'-{Ν'-[3-甲基-5-氧代-1-(4-三氟甲基苯基）-1，5-二氫吡唑-4-亞 基]肼基}_2'_羥基聯苯基-3-甲酸；3-{N'-[1-(3,4-二甲基苯基）-3-甲基-5-氧 代-1，5-二氫吡唑-4-亞基]肼基} -2-羥基-3' -四唑-5-基聯苯基；3' - {Ν' -1- (3, 4-二 甲基苯基）-3-甲基-5-氧代-1,5-二氫吡唑-4-亞基]肼基}-2'-羥基聯苯基-3-甲 酸；3'_{N'-[1-(3-氟-4-甲基苯基）-3-甲基-5-氧代-1,5-二氫吡唑-4-亞基]肼 基}-2'-羥基聯苯基-3-甲酸；3'_{N'-[1-(3,4-二甲基苯基）-3-乙基-5-氧代-1,5-二 氫吡唑-4-亞基]肼基}-2'-羥基聯苯基-3-甲酸；和3-{Ν'-[1-(3,4-二甲基苯基）-3-乙 基-5-氧代-1，5-二氫吡唑-4-亞基]-肼基}-2_羥基-3' -四唑-5-基聯苯基，優選 3' - {Ν' - [1- (3, 4-二甲基苯基）-3-甲基-5-氧代-1，5-二氫吡唑-4-亞基]肼基} -2' -羥 基聯苯基-3-甲酸，以及它們的藥學上可接受鹽、水合物、溶劑化物、和酯。
[0046] 如本文中所述，HDAC抑制劑與抗血小板減少癥藥物的組合可以進一步與另一種藥 物（優選抗癌藥）聯合用藥。更優選地，該抗癌藥是有效地治療血癌（諸如多發性骨髓瘤、 MDS和/或AML)的藥物。這種藥物可以包括抗代謝藥（諸如Vidaza? (5-氮雜胞苷）和/ 或Dacogen? (地西他丨兵）、以及蛋白酶體抑制劑（諸如Ygicade? (保特佐米））。
[0047] 血小板減少癥是任何血小板數異常低的疾病，例如每微升血小板數低于50, 000 或者低于特定人群正常（平均值或中間值）血小板計數的2. 5%。血小板減少癥具有許多 原因，但導致HDAC抑制劑引起的TCP的病因尚未得到闡明。本發明人已發現HDAC抑制劑 引起的TCP是由于血小板生成或巨核細胞釋放血小板的減少所致，而并非由于本領域所一 般認為的骨髓抑制、骨髓細胞清除或血小板壽命（例如，凋亡）所致。因此，不受任何理論 所束縛，本發明用特異性地解決血小板生成減少問題的抗TCP藥提供對HDAC抑制劑治療中 觀察到的TCP的治療。這樣，可以抑制或避免最常規抗TCP藥物的給藥中觀察到的副作用。
[0048] 在本發明的一優選實施方式中，用于治療TCP的藥物是艾曲波帕或者羅米司亭。 在一優選實施方式中，將艾曲波帕或羅米司亭與HDAC抑制劑（諸如帕比司他或其藥學上可 接受鹽）聯合用藥。
[0049] 此外，本發明提供HDAC抑制劑或者其藥學上可接受鹽或前藥在制備治療增殖性 疾病的與抗血小板減少癥藥聯合用藥的藥物中的用途。
[0050] "聯合"是指把一定量的HDAC抑制劑與一定量的抗血小板減少癥藥組合起來用藥， 以便產生協同效果，在沒有獨立、同時或相繼的抗血小板減少癥藥給藥的情況下HDAC抑制 劑的給藥將不會獲得該協同效果。抗血小板減少癥藥的給藥可以是連續、相繼或分散的。因 此，本文中使用的"藥物"不應局限于包含本發明組合的單個制劑，而是包括包含在不同劑 型中的本發明組合的活性劑給藥的方案或治療。
[0051] 優選地，聯合是指一定量的HDAC抑制劑與一定量的抗血小板減少癥藥的聯合給 藥，以便產生協同的抗增殖效果和/或克隆源性細胞殺傷效果，如果在以下情況下不會獲 得該協同效果：
[0052] a)在沒有之前、同時或后繼的抗TCP藥給藥的情況下施用HDAC，其中給藥可以是 連續、相繼或分散的；
[0053] b)在沒有之前、同時或后繼的HDAC抑制劑給藥的情況下施用抗血小板減少癥藥， 其中給藥可以是連續、相繼或分散的。
[0054] 因此，在下文中將包含下述組分的組合（產品）稱為本發明組合（產品）：
[0055] (a)HDAC抑制劑，該抑制劑采用游離的形態或者采用藥學上可接受鹽的形態，還有 任選的至少一種藥學上可接受的載體；以及
[0056] (b)抗血小板減少癥藥。
[0057] 在HDAC抑制劑與抗TCP藥之間可以觀察到協同作用，因而比沒有HDAC抑制劑聯 合用藥所需劑量更低劑量的抗TCP藥可以有效地治療TCP。例如，羅米司亭的推薦劑量在 lmg/kg至10mg/kg的范圍內。因此，抗血小板減少癥藥與HDAC抑制劑的彼此相對劑量優 選地為產生協同效果的比率。在本發明的一實施方式中，HDAC抑制劑的聯合用藥可以減小 TCP的有效劑量達5%或10%、優選15%或20%、最優選30%至40%。
[0058] 相反地，在HDAC抑制劑與抗TCP藥之間也可以觀察到協同作用，因而比沒有抗TCP 藥聯合給藥所需劑量更低劑量的HDAC抑制劑可有效地治療癌癥。例如，帕比司他的推薦劑 量可以表示為20-40mg每周三次或者15mg/kg至20mg/kg。在本發明的一優選實施方式中， 抗TCP藥的聯合用藥可以減小帕比司他的有效劑量達5%或10%、優選15%或20%、最優 選30%至40%。例如，羅米司亭的聯合用藥可以將帕比司他的有效劑量從20mg/kg減小至 15mg/kg〇
[0059] 當把HDAC抑制劑與抗TCP藥聯合用藥時，在HDAC抑制劑與另一種藥物之間也可 以觀察到協同作用。例如，在帕比司他與地塞米松之間可觀察到協同作用，因而比沒有地塞 米松聯合用藥所需劑量更低劑量的HDAC抑制劑可以有效地治療多發性骨髓瘤。在本發明 的一實施方式中，與另一藥物（例如地塞米松）的進一步的組合可以減小HDAC抑制劑的有 效劑量達5%或10%、優選15%或20%、最優選30%至40%。
[0060] 在本發明的組合中，HDAC抑制劑和藥學上可接受鹽及前藥衍生物，優選地采用藥 物制劑的形態而使用，該藥物制劑含有相關治療有效量的活性成分、任選地連同或者與適 合于施用的無機或有機的固體或液體的藥學上可接受載體混合。優選地，HDAC藥用組合物 適合于口服給藥。
[0061] HDAC抑制劑與抗TCP藥的藥用組合物，在單獨用藥或者聯合用藥的情況下，可以 是例如：用于腸內給藥（例如口服給藥、直腸給藥、霧化吸入或鼻內給藥）的組合物、用于胃 腸外給藥（例如靜脈給藥或皮下給藥）的組合物、或者用于經皮給藥（例如，被動的或離子 電滲入）的組合物、或者用于局部給藥的組合物。
[0062] MM
[0063] 可以通過任何已知方式來制備根據本發明的藥用組合物，并且本發明的藥用組合 物適合于對哺乳動物（溫血動物）包括人的腸內給藥（例如口服給藥或直腸給藥）和胃腸 外給藥，該藥用組合物包含治療有效量的至少一種具有藥理學活性的組合成分（單獨或者 連同一種或多種藥學上可接受載體），并且特別適合于腸內或胃腸外使用。
[0064] 該新型藥用組合物包含例如大約10%至大約100%、優選大約20%至大約60%的 活性成分。用于腸內給藥或胃腸外給藥的聯合治療的藥物制劑是例如采用單位劑型（諸如 包糖衣片、片劑、膠囊或栓劑及安瓿）的制劑。除非另有說明，這些制劑是通過已知方式（例 如通過常規的混合、制粒、包糖衣、溶解或冷凍干燥工藝）制備。應當理解的是，各劑型的單 獨劑量中所包含組合成分的單位含量無需自身為有效量，這是因為可以通過多個劑量單位 的給藥而達到必需的有效量。
[0065] 在制備用于口服劑型的組合物中，可使用任何常用的藥用介質，諸如水、二醇類、 油類、醇類、調味劑、防腐劑、著色劑；或者載體，諸如在口服固體制劑的情況下（例如粉劑、 膠囊和片劑）為淀粉類、糖類、微晶纖維素、稀釋劑、制粒劑、潤滑劑、粘合劑、崩解劑等，并 且固體口服制劑優于液體制劑。由于給藥方便，片劑和膠囊代表最有利的口服劑量單位劑 型，在此情況下顯然是使用固體藥用載體。
[0066] 治療有效量的本發明組合的各組合組分可以同時或相繼地按任意順序給藥，并且 各組分可以獨立地或者以固定組合產品的形式給藥。例如，根據本發明的延遲疾病發展或 者治療疾病的方法可包括：
[0067] (i)第一組合組分的給藥；以及
[0068] (ii)第二組合組分的給藥，
[0069] 其中組合組分的給藥可以以共同地治療有效量、優選協同地有效量（例如對應于 本文中所述量的每日或每周劑量）而同時給藥或者按任何順序相繼給藥。本發明組合的單 個組合組分可以獨立地在治療過程中的不同時間給藥或者同時給藥。在一優選實施方式 中，以預先給藥的方式（即在開始HDAC抑制劑治療之前）施用抗血小板減少癥藥；在規定 的時段將抗血小板減少癥藥單獨給患者施用。
[0070] 繪藍
[0071] 此外，術語"給藥"還包括HDAC抑制劑或抗血小板減少癥藥的前藥的使用，該前藥 在體內轉變成上述組合組分。因此，本發明應理解成包括所有這種同時或交替治療的方案， 并且如此解釋術語"給藥"。
[0072] 如果溫血動物是人，那么化學式（I)的化合物的合適劑量優選在100-1，500mg/日 (例如 200-l，000mg/ 日）的范圍內，諸如 200、400、500、600、800、900 或者l，000mg/ 日，每 日一次或二次給藥。死亡受體配體的合適劑量和給藥頻率將取決于如下因素：所治療適應 癥的性質和嚴重程度、期望的反應、患者的狀態等。
[0073] 主治醫師可基于患者的具體情況（特別是年齡、體重、生活方式、活動水平等）來 向選擇具體的給藥模式以及HDAC抑制劑的劑量。類似地，HDAC抑制劑的劑量可取決于各 種因素，諸如活性成分的有效性和作用持續時間、給藥模式、電離輻射的有效性和作用持續 時間以及/或者治療對象的性別、年齡、體重和個體狀況。
[0074] 電離輻射的劑量可取決于各種因素，諸如電離輻射的有效性和作用持續時間、給 藥模式、給藥位置、HDAC抑制劑的有效性和作用持續時間以及/或者治療對象的性別、年 齡、體重和個體狀況。一般是根據輻射吸收劑量、時間和分數來確定電離輻射的劑量，并且 必須由主治醫師仔細地確定該電離輻射劑量。
[0075] 在本發明的一優選實施方式中，本發明的組合包含抗血小板減少癥藥，諸如艾曲 波帕以及上述化學式（III)的N-羥基-3-[4-[[[2-(2-甲基-IH-吲哚-3-基）-乙基] 氨基]甲基]苯基]-2E-2-丙烯酰胺或其藥學上可接受鹽。在本發明的另一優選實施方 式中，本發明的組合包含抗血小板減少癥藥，諸如羅米司亭以及上述化學式（III)的N-羥 基-3-[4-[[[2-(2-甲基-IH-吲哚-3-基）乙基]氨基]甲基]苯基]-2E-2-丙烯酰胺或 其藥學上可接受鹽。在這兩個實施方式中，本發明的組合還可優先地包含抑制細胞增殖的 藥物（諸如保特佐米）。
[0076] 此外，本發明涉及一種對患有增殖性疾病的溫血動物進行治療的方法，該方法包 括以共同地有效治療增殖性疾病的方式給人類患者施用，并且其中組合組分也可以采用它 們的藥學上可接受鹽的形式。該組合可以以抑制血小板減少癥或其相關癥狀的方式而起作 用。
[0077] 此外，本發明有關于用于延遲增殖性疾病的發展或治療該疾病的本發明的組合在 用于延遲增殖性疾病的發展或治療該疾病的藥物的制備中的用途。
[0078] 實施例
[0079] 以下的實施例僅僅是說明性的，而并非意圖以任何方式限制本發明的范圍：
[0080] 實施例1:霍奇金淋巴瘤患者中化學式III的化合物與艾曲波帕的組合
[0081] 向患有霍奇金淋巴瘤的患者給予推薦劑量的化合物III。該患者的血小板計數開 始降低。然后向該患者給予艾曲波帕并且患者的血小板計數開始升高到可接受的水平。
[0082] 實施例2:霍奇金淋巴瘤患者中化學式III的化合物與艾曲波帕的組合
[0083] 對患有霍奇金淋巴瘤的患者的血小板減少癥進行測試。發現該患者具有低血細胞 計數或者血小板減少癥的生物標記。對該患者實施化合物III聯合艾曲波帕的治療方案。 患者不形成血小板減少癥。
[0084] 實施例3 :多發性骨髓瘤患者中化學式III的化合物與艾曲波帕的組合
[0085] 向患有多發性骨髓瘤的患者給予推薦劑量的化合物III。該患者的血小板計數開 始降低。然后向該患者給予艾曲波帕并且該患者的血小板計數開始升高到可接受的水平。
[0086] 實施例4 :多發性骨髓瘤患者中化學式III的化合物與艾曲波帕的組合
[0087] 對患有霍奇金淋巴瘤的患者的血小板減少癥進行測試。發現該患者具有低血細胞 計數或者血小板減少癥的生物標記。對該患者實施化合物III連同艾曲波帕的治療方案。 患者不形成血小板減少癥。
[0088] 實施例5 :血小板清除分析和網織血小板染色
[0089] 前后間隔1小時，用溶解于磷酸鹽緩沖生理鹽水（PBS)和10%二甲基亞砜（DMSO) 的600μgNHS-生物素給小鼠靜脈（IV)注射2次。在各時間點從尾部分離外周血，將1μ1 的血在PBS和IOmMEDTA中清洗2次。在冰上用藻紅蛋白結合的大鼠抗⑶41以及別藻藍 蛋白結合的鏈霉菌抗生物素蛋白（APC-A)對血小板進行30分鐘染色。再次對該試樣進行 清洗并且在添加〇. 125μg/ml噻唑橙后進行90分鐘保溫培養，該試樣對含有高RNA的血小 板、染色幼小的網織血小板的攝取增加。然后，在LSR流式細胞儀中執行流式細胞分析。通 過繪制生物素化血小板數與時間的關系圖，而利用線性外推法獲得壽命的估計值，同時利 用噻唑橙陽性的非生物素化血小板數而提供新血小板生成的估計值。
[0090] 實施例6 :HDAC抑制劑引起的血小板減少癥不歸因于直接血小板凋亡
[0091] 為了進一步證實直接血小板凋亡并非HDAC抑制劑引起的血小板減少癥的原因， 在通過給小鼠靜脈注射NHS-生物素而用HDAC抑制劑處理的小鼠中確定小鼠血小板壽命。 然后，用l〇mg/kg的帕比司他（腹腔注射）或lmg/kg的羅米地辛（腹腔注射）每日或者賦 形劑對小鼠進行7天處理，測定外周血中生物素化血小板數。隨著時間的推移，帕比司他或 羅米地辛處理的小鼠的標記的血小板的減小仍然類似于用賦形劑治療的小鼠。相反，在用 ABT-737處理小鼠后生物素化血小板數快速地減小，在施用該化合物2小時后發現血小板 數減小50%。ABT-737是抑制Bcl-xL從而引起直接血小板凋亡的BH3模擬物。卡鉬，一種 能夠通過巨核細胞清除而引起血小板減少癥的化學治療劑，不影響血小板壽命（圖1)。巨 核細胞是存在于骨髓中的負責血小板生成的造血細胞。
[0092] 實施例7 :HDAC抑制劑引起的血小板減少癥是由于血小板生成減小所致
[0093] 為了評價血小板生成，而用帕比司他、卡鉬和ABT-737對C57BL/6小鼠進行處理， 并且通過用噻唑橙進行染色而確定含RNA的血小板的分數（即新的血小板）（圖2)。在賦 形劑處理小鼠中，在6天的實驗期間新的網織血小板數保持相對恒定。相反，在用帕比司他 處理的小鼠中，網織血小板的絕對數顯著減小。在整個實驗過程中，血小板計數始終保持低 于基線水平。作為快速引起血小板凋亡的補償反應，ABT-737導致新血小板的生成顯著增 力口。用卡鉬對小鼠進行處理在治療的前4天內不顯著影響新的血小板生成，然而在治療開 始6天后絕對網織血小板數顯著減小。綜合這些數據，表明ABT-737、卡鉬和帕比司他通過 不同的機制而導致血小板減少癥。我們假設HDAC抑制劑引起的血小板減少癥是由于血小 板生成不足或巨核細胞釋放血小板不良所致，而不是由于骨髓細胞清除或者直接血小板凋 亡所致（如分別在同卡鉬和ABT-737處理的小鼠中所見）。
[0094] 實施例7:帕比司他與羅米司亭的組合
[0095] 用10mg/kg帕比司他（腹腔注射）每日對野生型C57BL/6小鼠進行處理從而引起 12天內持續的血小板減少癥（與以前的結果一致），或者在第3和第6天用血小板生成素 模擬物AMP-4(20yg/kg)進行處理。為了確定血小板生成素模擬物的給藥是否可以改善血 小板減少癥，而于第〇天和第6天對部分帕比司他處理小鼠實施與20μg/kgAMP-4的聯合 用藥（圖3)。AMP-4是另一個TPO模擬物，該模擬物具有與羅米司亭相同的結合肽但具有 小鼠Fc受體。
[0096] 實施例8 :羅米地辛與羅米司亭的組合
[0097] 類似地，用10mg/kg羅米地辛（腹腔注射）每日對野生型C57BL/6小鼠進行處理， 從而在12天內引起持續的血小板減少癥（與以前的結果一致）、或者于第3和第6天用 20 μ g/kg血小板生成素模擬物AMP-4進行處理。為了確定血小板生成素模擬物的施用是 否可以改善血小板減少癥，而于第〇天和第6天對部分羅米地辛處理小鼠實施與20 μ g/kg AMP-4的聯合給藥（圖4)。AMP-4是另一個TPO模擬物，該模擬物具有羅米司亭相同的結合 肽但具有小鼠Fc受體。
[0098] 這些數據提供第一證據以證明該治療方案可改善HDAC抑制劑引起的TCP。
【權利要求】
1. (a)N-羥基-3-[4-[[[2-(2-甲基-1H-吲哚-3-基）乙基]氨基]甲基]苯 基]-2E-2-丙烯酰胺或其藥學上可接受鹽與（b)抗血小板減少癥藥的組合在制備用作多發 性骨髓瘤藥的藥物中的用途。
2. 如權利要求1所述的用途，其中所述抗血小板減少癥藥是TPO模擬物。
3. 如權利要求1或權利要求2所述的用途，其中所述抗血小板減少癥藥是艾曲波帕、羅 米司亭、或者兩者。
4. 如權利要求1至3中任一項所述的用途，其中所述組合還包含有效治療多發性骨髓 瘤的另一種藥物。
5. 如權利要求4所述的用途，其中所述藥物是蛋白酶體抑制劑。
6. 如權利要求5所述的用途，其中所述蛋白酶體抑制劑是保特佐米。
7. 如權利要求1至6中任一項所述的用途，其中所述組合還包含地塞米松。
8. 以下組合： (a) HDAC抑制劑，選自帕比司他、羅米地辛、伏立諾他、以及它們的組合； (b) 抗血小板減少癥藥，選自艾曲波帕、羅米司亭、或者兩者；以及任選的 (c) 抗代謝藥，選自5-氮雜胞苷、地西他濱、或者兩者， 在制備用作MDS和/或AML藥的藥物中的用途。
【文檔編號】A61K31/4152GK104399081SQ201410719941
【公開日】2015年3月11日 申請日期:2011年8月31日 優先權日:2010年9月1日
【發明者】P·W·阿塔德亞, R·W·約翰斯通, H·M·普林斯, M·J·比什頓, S·J·哈里森 申請人:諾華有限公司