羅勒多糖用作抗腫瘤化療藥增效劑在制備抗腫瘤藥物中的應用的制作方法
【專利摘要】本發明公開了一種純中藥制劑羅勒多糖的新用途，即羅勒多糖用作抗腫瘤化療藥增效劑在制備抗腫瘤藥物中的應用，所述化療藥為順鉑、鹽酸吡柔比星或氟尿嘧啶。本發明試驗研究表明，羅勒多糖可以增加多種化療藥對于多個不同組織來源的腫瘤細胞具有抑制腫瘤增殖和活性的作用，包括肺癌、喉癌、胃癌等，且羅勒多糖體外細胞實驗中工作濃度未見毒性，羅勒多糖對化療藥的增效作用呈劑量依賴性，具有臨床應用前景。
【專利說明】羅勒多糖用作抗腫瘤化療藥增效劑在制備抗腫瘤藥物中的 應用
【技術領域】
[0001] 本發明具體涉及羅勒多糖在制備抗腫瘤化療藥增效劑中的新用途，即羅勒多糖用 作抗腫瘤化療藥增效劑在制備抗腫瘤藥物中的應用，屬于中藥對腫瘤化療藥增效的技術領 域。
【背景技術】
[0002] 腫瘤是嚴重危害人類健康和生命的疾病。化療是利用化學藥物殺滅癌細胞的一種 全身性治療手段，廣泛應用于腫瘤患者的臨床治療。但在殺滅癌細胞的同時也會不可避免 地損傷人體正常細胞，從而出現多種不良反應，影響腫瘤患者的生存時間和生活質量。增強 化療藥物的療效，提高患者的生活質量，延長腫瘤患者的生存時間一直是抗腫瘤藥物研究 領域的熱點。盡管有研究報道表明部分中藥或中藥提取物具有抗腫瘤作用，但目前中藥提 取物作為化療藥增效劑類的藥物應用比較少見。羅勒多糖應用于抗腫瘤轉移方面的作用已 有文獻報道，可用于多種腫瘤轉移，然而，尚未有報道表明羅勒多糖具有增強多種化療藥治 療腫瘤療效的作用。
【發明內容】
[0003] 本發明提供了一種純中藥制劑羅勒多糖的新用途，即羅勒多糖用作抗腫瘤化療藥 增效劑在制備抗腫瘤藥物中的應用。
[0004] 本發明是通過以下技術方案實現的： 本發明試驗研究表明，羅勒多糖可以增加多種化療藥對于多個不同組織來源的腫瘤細 胞具有抑制腫瘤增殖和活性的作用，包括肺癌、喉癌、胃癌等。
[0005] 羅勒多糖用作抗腫瘤化療藥增效劑在制備抗腫瘤藥物中的應用，其特征在于，所 述化療藥為順鉬、鹽酸吡柔比星或氟尿嘧啶。
[0006] 所述羅勒多糖與順鉬有效活性成分的重量比為1:50-100。
[0007] 所述羅勒多糖與鹽酸吡柔比星有效活性成分的重量比為1:2000-4000。
[0008] 所述羅勒多糖與氟尿嘧啶有效活性成分的重量比為1:20-40。
[0009] 本發明所使用的羅勒多糖是從植物羅勒（Ocimum basilicum L.)單味藥中采用以 下方法提取分離得到的： 將羅勒藥材用粉碎機粉碎，將粉碎的羅勒粉用85%乙醇脫脂兩次后真空脫水干燥，得 到脫脂羅勒粉。在脫脂羅勒粉中加入適量的水煎煮兩遍后，過濾收集煎煮液，將兩次收集的 煎煮液合并后，放入濃縮罐中進行濃縮，使其相對密度達到1. 08?1. 10,然后將濃縮液冷 卻至4°C，加入5倍液體量的95%乙醇靜置沉淀48小時，收集沉淀物得到羅勒多糖粗品，再 將羅勒多糖粗品加適量水溶解，過濾后濃縮，使其相對密度達到1. 08?1. 10,然后冷卻至 4°C，在濃縮液中加入5倍量95%乙醇靜置沉淀48小時，收集沉淀物，真空干燥脫水即得到 羅勒多糖成品。
[0010] 本發明所使用的羅勒多糖可以是常規藥劑學上的任一種劑型。
[0011] 本發明的有益效果是：本發明首次發現羅勒多糖與順鉬、鹽酸吡柔比星或氟尿嘧 啶同時使用可以增加化療藥治療腫瘤的效果。研究發現，羅勒多糖與化療藥聯用對于多個 不同組織來源的腫瘤細胞具有抑制腫瘤增殖和活性的作用，包括肺癌、喉癌、胃癌等，且羅 勒多糖體外細胞實驗中工作濃度未見毒性，羅勒多糖對化療藥的增效作用呈劑量依賴性， 具有臨床應用前景。
【具體實施方式】
[0012] 下面結合具體實施例對本發明做進一步的詳細說明。
[0013] 實施例1 羅勒多糖對三種腫瘤細胞的作用 實驗材料：羅勒多糖為采用本發明提供的提取分離方法得到的羅勒多糖成品；常規培 養于含10%新生牛血清（NBS)的RPMI1640培養基中的人肺癌細胞株A549、人喉癌細胞株 Ifep-2和人胃癌細胞株SGC-7901。
[0014] 實驗方法：將羅勒多糖成品溶于適量去離子水中配制成l〇mg/ml濃度的溶液，滅 菌后分裝凍存于_20°C冰箱備用。人肺癌細胞株A549、人喉癌細胞株H印-2和人胃癌細胞 株SGC-7901常規培養于含10%新生牛血清（NBS)的RPMI1640培養基中，于37°C、5%C0 2、飽 和濕度的細胞培養箱中培養。用0.25%胰蛋白酶消化傳代。取培養的對數生長期細胞，用 0. 25 %胰蛋白酶消化，收集細胞，細胞計數，用含10%NBS的RMPI 1640培養液調整細胞密度 至4X104/ml，將細胞懸液加入96孔板內，每孔內加lOOiil。同時在3個孔中只加10%NBS 的RMPI 1640培養液作為空白孔，用于調零。將鋪有細胞的96孔板置于37°C、5%C02、飽和 濕度的細胞培養箱中培養過夜，待細胞貼壁后，加入待檢藥物羅勒多糖，并設陰性對照孔， 繼續培養48小時，然后在每孔中加入5mg/ml的MTT lOiil繼續培養4小時后，吸棄培養 液，每孔加150 yl DMS0,振蕩10分鐘，至結晶完全溶解，用酶標儀檢測A490光吸收值。按 下列公式計算腫瘤細胞生長抑制率：腫瘤細胞生長抑制率=(1-藥物組0D值/對照組0D 值）X100%。實驗結果見表1.1。
[0015] 表1. 1單獨應用羅勒多糖對幾種腫瘤細胞株的抑瘤作用
【權利要求】
1. 羅勒多糖用作抗腫瘤化療藥增效劑在制備抗腫瘤藥物中的應用，其特征在于，所述 化療藥為順鉬、鹽酸吡柔比星或氟尿嘧啶。
2. 根據權利要求1所述的應用，其特征在于，所述羅勒多糖與順鉬有效活性成分的重 量比為1:50-100。
3. 根據權利要求1所述的應用，其特征在于，所述羅勒多糖與鹽酸吡柔比星有效活性 成分的重量比為1:2000-4000。
4. 根據權利要求1所述的應用，其特征在于，所述羅勒多糖與氟尿嘧啶有效活性成分 的重量比為1:20-40。
5. 根據權利要求1所述的應用，其特征在于，所述羅勒多糖可以是常規藥劑學中任何 一種劑型。
【文檔編號】A61K33/24GK104382928SQ201410569118
【公開日】2015年3月4日 申請日期:2014年10月23日 優先權日:2014年10月23日
【發明者】朱慶均, 肖麗, 張丹, 李路, 于華靜 申請人:山東中醫藥大學