一種利拉魯肽的注射用緩釋微球制劑的制作方法
【專利摘要】本發明公開了一種利拉魯肽的注射用緩釋微球制劑，由利拉魯肽、聚乙丙交酯和聚乙烯醇組成，其中利拉魯肽、聚乙丙交酯和聚乙烯醇的重量比為1:15:30。其制備方法采用復乳法制備，離心得緩釋微球后凍干既得。本發明的制劑穩定性良好，載藥量大，包封率高，加速試驗條件不發生降解、聚集，且體內安全性良好。
【專利說明】一種利拉魯肽的注射用緩釋微球制劑
【技術領域】
[0001] 本發明涉及一種藥物制劑，尤其涉及一種多肽類藥物利拉魯肽的注射用緩釋微球 制劑。
【背景技術】
[0002] 利拉魯肽，英文通用名為liraglutide，是一種人工合成的人胰高血糖素樣肽-1 類似物，由31個氨基酸殘基構成，其氨基酸序列為：H-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser -Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys(N-ε-(Ν-α -Palmitoyl-L-y-glu tamyl))-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Arg-Gly-Arg-Gly-〇H 〇
[0003] 目前市場上可以獲得的利拉魯肽制劑為注射劑，給藥途徑為皮下注射。由于多肽 藥物進入體內易被降解，血漿半衰期較短，因此需要每日給藥三次，由此導致患者順應性較 低，容易忘記給藥，不利于患者自行給藥。
[0004] 多肽藥物的緩釋制劑通常采用化學修飾方法或采用緩釋制劑技術。其中對多肽藥 物進行PEG修飾或融合蛋白修飾對延長多肽藥物的體內半衰期較為有效，但所制備的緩釋 制劑價格昂貴，導致患者經濟負擔過重。
[0005] 緩釋制劑技術在多肽藥物中的應用目前僅有及少數案例獲得成功。其中一種人胰 高血糖素樣肽-1類似物艾塞那肽（Exenatide)的緩釋制劑（商品名BYDURE0N)已在國外 被批準上市。其緩釋制劑采用聚乙丙交酯和蔗糖作為輔料，具有顯著的緩釋效果，能夠有效 降低用藥頻率。但近年研宄證實，BYDURE0N與艾塞那肽的普通注射劑相比能夠顯著增加甲 狀腺C細胞癌的風險，因此存在顯著的不良作用。該藥目前已被美國食品藥品管理局在說 明書中標識黑框警告。
[0006] 關于利拉魯肽的緩釋制劑目前尚無該類產品上市。國內公開的專利文獻 CN102429876A(
【公開日】2012年5月2日）公開了一種利拉魯肽的緩釋微球制劑，由利拉魯 肽和生物可降解材料組成，其中生物可降解材料選自聚乳酸、聚乳酸-羥基乙酸嵌段共聚 物，乙交酯-丙交酯共聚物，聚乙醇酸、聚己內酯、聚乳酸-羥基乙酸-聚己內酯共聚物或 PLCG-聚己內酯，或其中任意兩種或兩種以上的混合物。該緩釋微球制劑的體外累計釋放實 驗顯示其緩釋可達28-30天。但該文獻說明書附圖部分給出的體內藥效學實驗結果顯示， 該緩釋微球給藥后第1、7、14、28天采血樣測定血糖濃度，結果采樣日均表現出顯著的血糖 峰谷現象，說明其體內藥物釋放存在不穩定的突釋現象，從而導致了血糖忽高忽低的問題， 以上問題在體外累計釋放實驗中未能被發現，且上述制劑的體內安全性尚未得到證實。對 于緩釋效果達到28-30天的緩釋制劑而言，隨有利于降低給藥頻率，但由于載藥量過大， 一旦出現藥物突釋即會導致血糖的急劇降低誘發低血糖昏迷等問題，因此，目前治療糖尿 病的多肽藥物的緩釋劑型或者經化學修飾的緩釋多肽，通常設計為每日或每周給藥一次， 每月給藥一次的降血糖藥物，相對于其突釋風險而言，其緩釋效果的收益已不再重要，因此 此類緩釋制劑尚見被批準上市。
[0007] 本發明人對利拉魯肽的緩釋微球制劑進行了研宄，發現使用現有技術中的方法和 常規方法制備的利拉魯肽緩釋制劑存在不穩定，突釋、包封率和載藥量不理想等諸多缺點， 而目前藥物緩釋微球制劑的研宄中，雖然根據藥物的理化性質解決微球的載藥量和包封率 等技術問題已有一定的經驗可供遵循，但對提高微球的穩定性以及有效避免藥物突釋問 題，尚缺乏可供普遍遵循的經驗和技術教導。尤其是對于人胰高血糖素樣肽-1類似物多肽 乙交酯-丙交酯共聚物緩釋微球制劑引發的甲狀腺C細胞癌風險，尚未見降低其發病率的 有效手段。
【發明內容】
[0008] 針對上述現有技術，本發明的目的在于提供一種利拉魯肽的緩釋制劑，具體的說 是一種利拉魯肽的注射用緩釋微球制劑。
[0009] 本發明的另一方面還提供了一種利拉魯肽注射用緩釋微球制劑的制備方法。
[0010] 為實現上述目的，本發明采用的技術方案為：
[0011] 一種利拉魯肽的注射用緩釋微球制劑，其配方中包括利拉魯肽、聚乙丙交酯和聚 乙烯醇，其中，利拉魯肽、聚乙丙交酯和聚乙烯醇的重量比為1:15:30。
[0012] 所述聚乙丙交酯中乙交酯、丙交酯的摩爾比例為30:70。
[0013] 本發明還提供本發明利拉魯肽的注射用緩釋微球制劑的制備方法，包括以下步 驟：
[0014] 1)將利拉魯肽溶于滅菌注射用水，調整溶液濃度為6mg/ml，用pH調節劑調節pH 為 8. 0 ?8. 3 ;
[0015] 2)將聚乙丙交酯溶于二氯甲燒，調整溶液濃度為90mg/ml，用pH調節劑調節pH為 8. 0 ?8. 3 ;
[0016] 3)將內水相與油相混合，冰浴條件下15000轉/分鐘攪拌30分鐘，4°C下靜置24 小時得初乳；
[0017] 4)將聚乙烯醇溶于滅菌注射用水，用pH調節劑調節pH為8. 0?8. 3 ;
[0018] 5)將步驟4)所得溶液加入步驟3)所得初乳，30000轉/分鐘攪拌30分鐘得復 乳；
[0019] 6)將步驟5)所得復乳6000轉/分鐘離心30分鐘，收集微球，用滅菌注射用水沖 洗，凍干得利拉魯肽注射用緩釋微球。
[0020] 所述步驟1)中調節pH值采用的調節劑為碳酸氫鈉溶液；
[0021] 所述步驟2)中調節pH值采用的調節劑為氫氧化鈉溶液；
[0022] 所述步驟4)中調節pH值采用的調節劑為磷酸二氫鈉緩沖溶液。
[0023] 本發明人對利拉魯肽的緩釋制劑進行了大量研宄。在研宄過程中，本發明人驚奇 的發現，采用利用緩釋微球技術結合特殊材料的使用可獲得利拉魯肽的穩定性良好、載藥 量大、包封率高的緩釋微球制劑，且采用本發明組方和制備工藝，能夠有效提高利拉魯肽緩 釋微球的穩定性，避免藥物體內突釋，且體外致突變實驗表明本發明的緩釋微球制劑無誘 癌風險。本發明所采用的制備方法簡單，工藝條件易控制，適于大規模工業化生產，并易于 得到質量穩定的產品，批間差異小，便于質量控制。
【專利附圖】
【附圖說明】：
[0024] 附圖I :本發明實施例1制備的利拉魯肽緩釋微球制劑的藥時曲線，橫坐標給藥后 時間-小時，縱坐標血藥濃度-ng/ml，采血時間點為給藥后第0、12、24、48、72、96、120、144、 168、192、216、240h ;
[0025] 附圖2 :本發明實施例2制備的利拉魯肽緩釋微球制劑的藥時曲線，橫坐標給藥后 時間-小時，縱坐標血藥濃度-ng/ml，采血時間點為給藥后第0、12、24、48、72、96、120、144、 168、192、216、240h ;
[0026] 附圖3本發明實施例3制備的三種利拉魯肽緩釋微球制劑對比制劑的藥時曲線， 橫坐標給藥后時間-小時，縱坐標血藥濃度-ng/ml，采血時間點為給藥后第0、12、24、48、 72、96、120、144、168、192、216、240h。
【具體實施方式】
[0027] 下面結合實施例對本發明作進一步的解釋。應當理解的是，以下實施例僅用于解 釋本發明，而不是限制本發明的保護范圍。
[0028] 實施例1利拉魯肽注射用緩釋微球的制備
[0029] 配方
[0030] 利拉魯肽 IOmg
[0031] 聚乙丙交酯 150mg
[0032] 聚乙稀醇 300mg
[0033] 制備方法
[0034] 1)將利拉魯肽溶于滅菌注射用水，調整溶液濃度為6mg/ml，用碳酸氫鈉溶液調節 pH 為 8. 0 ?8. 3 ;
[0035] 2)將聚乙丙交酯溶于二氯甲烷，調整溶液濃度為90mg/ml，用氫氧化鈉溶液調節p 為 8. 0 ?8. 3 ;
[0036] 3)將內水相與油相混合，冰浴條件下15000轉/分鐘攪拌30分鐘，4°C下靜置24 小時得初乳；
[0037] 4)將聚乙烯醇溶于滅菌注射用水，用磷酸二氫鈉緩沖溶液調節pH為8. 0?8. 3 ;
[0038] 5)將步驟4)所得溶液加入步驟3)所得初乳，30000轉/分鐘攪拌30分鐘得復 乳；
[0039] 6)將步驟5)所得復乳6000轉/分鐘離心30分鐘，收集微球，用滅菌注射用水沖 洗，
[0040] 凍干得利拉魯肽注射用緩釋微球。
[0041] 實施例2利拉魯肽注射用緩釋微球的制備
[0042] 配方
[0043] 利拉魯肽 IOmg
[0044] 聚乙丙交酯 150mg
[0045] 聚乙稀醇 300mg
[0046] 制備方法
[0047] 1)將利拉魯肽溶于滅菌注射用水，調整溶液濃度為6mg/ml，用磷酸二氫鈉緩沖溶 液調節pH為8. 0?8. 3 ;
[0048] 2)將聚乙丙交酯溶于二氯甲烷，調整溶液濃度為90mg/ml，用碳酸氫鈉溶液溶液 調節pH為8.0?8.3 ;
[0049] 3)將內水相與油相混合，冰浴條件下15000轉/分鐘攪拌30分鐘，4°C下靜置24 小時得初乳；
[0050] 4)將聚乙烯醇溶于滅菌注射用水，用磷酸二氫鈉緩沖溶液調節pH為8. 0?8. 3 ;
[0051] 5)將步驟4)所得溶液加入步驟3)所得初乳，30000轉/分鐘攪拌30分鐘得復 乳；
[0052] 6)將步驟5)所得復乳6000轉/分鐘離心30分鐘，收集微球，用滅菌注射用水沖 洗，凍干得利拉魯肽注射用緩釋微球。
[0053] 實施例3利拉魯肽注射用緩釋微球的處方對比
[0054] 以利拉魯肽組方，制備成不同的緩釋制劑，測定包封率和載藥量等技術指標，為對 比效果，設對比制劑三種，分別如下：
[0055] A :利拉魯肽，乙交酯、丙交酯摩爾比為50:50的聚乙丙交醋，聚乙烯醇三者重量比 為1:0. 5:20,采用實施例1的制備方法制備。
[0056] B :利拉魯肽，乙交醋、丙交醋摩爾比為10:90的聚乙丙交醋，聚乙烯醇三者重量比 為1:10:70,采用實施例2的制備方法制備。
[0057] C:利拉魯肽，乙交酯、丙交酯摩爾比為40:60的聚乙丙交醋，聚乙烯醇三者重量比 為1:30:10,采用實施例1的制備方法制備。
[0058] 實施例1和實施例2的制劑分別用D、E代表。包埋率（％)按照如下公式計算包 埋率（％)=(微球載藥量/頭要比）X100%，其中投藥比（％)=[處方中藥物量八處 方中藥物量+處方中輔料量）]X100%。載藥量（％)按照如下公式計算：載藥量（％)= (微球中藥物含量/微球重量）X100%。
[0059]
【權利要求】
1. 一種利拉魯肽的注射用緩釋微球制劑，其特征在于，由利拉魯肽、聚乙丙交酯和聚乙 烯醇組成，其中利拉魯肽、聚乙丙交酯和聚乙烯醇的重量比為1:15:30。乙交酯丙交酯。
2. 根據權利要求1所述的利拉魯肽注射用緩釋微球制劑，其特征在于，所述聚乙丙交 酯中乙交酯、丙交酯的摩爾比例為30:70。
3. 權利要求1或2所述的利拉魯肽注射用緩釋微球制劑的制備方法，其特征在于，包括 以下步驟： 1) 將利拉魯肽溶于滅菌注射用水，調整溶液濃度為6mg/ml，用pH調節劑調節pH為 8. 0 ?8. 3 ; 2) 將聚乙丙交酯溶于二氯甲燒，調整溶液濃度為90mg/ml，用pH調節劑調節pH為 8. 0 ?8. 3 ; 3) 將內水相與油相混合，冰浴條件下15000轉/分鐘攪拌30分鐘，4°C下靜置24小時 得初乳； 4) 將聚乙烯醇溶于滅菌注射用水，用pH調節劑調節pH為8. 0?8. 3 ; 5) 將步驟4)所得溶液加入步驟3)所得初乳，30000轉/分鐘攪拌30分鐘得復乳； 6) 將步驟5)所得復乳6000轉/分鐘離心30分鐘，收集微球，用滅菌注射用水沖洗，凍 干得利拉魯肽注射用緩釋微球。
4. 根據權利要求3所述的利拉魯肽注射用緩釋微球制劑的制備方法，其特征在于，所 述步驟1)中調節pH值采用的調節劑為碳酸氫鈉溶液；所述步驟2)中調節pH值采用的調 節劑為氫氧化鈉溶液；所述步驟4)中調節pH值采用的調節劑為磷酸二氫鈉緩沖溶液。
【文檔編號】A61K47/34GK104434817SQ201410475284
【公開日】2015年3月25日 申請日期:2014年9月17日 優先權日:2014年9月17日
【發明者】蘇慶, 冷國慶, 厲保秋, 張琪, 蘇宏健, 趙麗, 劉懷萍 申請人:黑龍江泰華源生物技術有限責任公司