一種從牛樟芝中提取三萜類化合物的方法
【專利摘要】本發明涉及一種從牛樟芝中提取三萜類化合物的方法。所述的方法包括以下步驟：先將牛樟芝粉末及硅藻土混合，加入提取溶劑，超聲提取，過濾；再加入溶劑定容并揮干溶劑，得三萜類化合物粗提物浸膏；然后在三萜類化合物粗提物浸膏中加入溶劑加熱溶解，加入加壓溶劑進行加壓萃取，將萃取液過濾，最后進行減壓旋轉蒸發，得到三萜類化合物精提物。本發明中在提取前先對牛樟芝進行預處理，包括干燥粉碎，減壓蒸發，然后再進行加壓萃取，對牛樟芝中的三萜類化合物可充分提取，且整個操作條件溫和，可充分保留三萜類化合物的生理活性，此外，操作中經過兩次過濾，通過硅藻土的助濾作用，可有效濾除有效雜質，從而避免牛樟芝中其他成分干擾萃取效果。
【專利說明】一種從牛樟芝中提取三萜類化合物的方法
【技術領域】
[0001]本發明屬于生物領域，具體涉及一種從牛樟芝中提取三萜類化合物的方法。
【背景技術】
[0002]牛樟芝(Taiwanofungus camphorates),又名牛樟燕或樟芝，是一種原產于我國臺灣省的珍稀藥用菌。牛樟芝主要存在于我國臺灣省的名貴樹木牛樟樹cinnamomumkanehirae hayata的樹干空洞內。牛樟芝具有抗腫瘤、增加免疫能力、抗細菌、抗病毒、抗過敏、抗高血壓、降血糖、降膽固醇、抑制血小板凝集及保護肝臟等生理活性，而且不良反應很少。因此牛樟芝在臺灣素有藥中之王臺灣森林中之紅寶石的美譽。現代研究表明樟芝生理活性物質包括許多，如維生素、固醇類、麥角留醇、多糖、三萜類、超氧化物歧化酶S0D、腺苷、小分子蛋白質等。其中三萜類化合物是其主要的生理活性物物，它能夠直接抑制癌細胞的增長和具有抗氧化的活性，存在于菇菌類植物中，只是不同菌類植物中三鐵化合物的含量不同，三萜類化合物為牛樟芝主要化學成分之一，也是牛樟芝萃取苦味成分的來源，實驗證明，靈芝內大約含有20——50多種三萜類指紋，各種靈芝總計發現兩百多種三萜類指紋，而牛樟芝單一種就有二百多種三萜類指紋，含量之多是靈芝的數多倍。目前研究發現，每種靈芝三萜類含量大約為1%—3%，而牛樟芝一種三萜類含量就達15%—45%。因此，牛樟芝被稱為“靈芝之王”。三萜類化合物不僅能抑制癌細胞的生長，抑制組織胺的釋放，還具有防止過敏，保護肝臟，促進血小板凝集、降低血脂等功能。三萜類含量越高則醫用價值越高。實驗證實，高血壓患者因為血壓高，導致腦血管破裂而中風，三萜類物質中的ACE活性成分可以有效降低血壓，從而達到預防中風的目的。
[0003]目前，三萜類化合物的提取方法主要包括有大孔吸附樹脂法及色譜柱制備法兩種，但此方法三萜類化合物的提取易受到牛樟芝中其他成分的影響，導致提取效果差，且操作繁瑣。加壓溶劑萃取術是新發展的一種技術，其具有回收率高、快速等優點。
【發明內容】
[0004]針對上述現有技術的不足，本發明提供一種從牛樟芝中提取三萜類化合物的方法。
[0005]本發明的技術方案如下:
一種從牛樟芝中提取三萜類化合物的方法，包括以下步驟:
(1)稱取牛樟芝粉末10-20g及硅藻土10-20g，混合，加入提取溶劑，超聲提取，過濾，取濾液；
(2)取步驟(I)中制得的濾液，加入50ml量瓶中，加入溶劑定容至刻度，減壓旋轉蒸發，揮干溶劑，制得三萜類化合物粗提物浸膏；
(3)取步驟(2)中的制得的三萜類化合物粗提物浸膏，加入溶劑加熱溶解，加入加壓溶齊U，加入到萃取儀的萃取池中，進行萃取，將萃取液過濾，取濾液；
(4)將步驟(4)中制得的濾液再次進行減壓旋轉蒸發，得到三萜類化合物精提物。
[0006]步驟(I)中所述的牛樟芝粉末制備的具體方法為:將牛樟芝子實體切成薄片，干燥粉碎，干燥溫度為55-60°C，粉碎粒度為60-80目，制得牛樟芝粗粉。
[0007]步驟(I)中所述的提取溶液為濃度為5%_10%的碳酸氫鈉溶液。
[0008]步驟(I)與步驟(3)中的過濾為采用0.45um的微孔濾膜過濾。
[0009]步驟(I)中所述的超聲提取的次數為3-5次，超聲提取的時間為每次5-10min。
[0010]步驟(2)中定容所采取的溶劑選自氯仿或甲醇中的一種。
[0011]步驟(2)中所述的減壓旋轉蒸發時的壓力為(4.2-8.5)Kpa，溫度為30_50°C。
[0012]步驟(3)中所述的溶劑選自氯仿或甲醇中的一種，所述的加壓溶劑為80%_85%的乙醇溶液。
[0013]步驟(3)中所述的萃取溫度為55_60°C，所述的萃取壓力為5_8Mpa。
[0014]本發明與現有技術相比，有益效果體現在以下幾點:
1.本發明中在提取前先對牛樟芝進行預處理，包括干燥粉碎，減壓蒸發制得三萜類粗提物浸膏，再進行加壓萃取，對牛樟芝中的三萜類化合物可充分提取，與現在技術相比，操作更為簡單，提取更為有效，且整個操作條件溫和，可充分保留三萜類化合物的生理活性。
[0015]2.本發明中，對牛樟芝粉末采用氯仿定容溶解，5%_10%的碳酸氫鈉溶液超聲提取
3-5次，80%_85%的乙醇溶液加壓萃取，可提高提取及萃取效果，而且本發明將牛樟芝粉末與硅藻土混勻，經過兩次過濾，通過硅藻土的助濾作用，可有效濾除有效雜質，從而避免牛樟芝中其他成分干擾萃取效果。
【具體實施方式】
[0016]下面結合實施例對本發明做進一步說明。
[0017]實施例1
一種從牛樟芝中提取三萜類化合物的方法，包括以下步驟:
(1)稱取牛樟芝粉末1g及娃藻土1g,混合,加入5%的碳酸氫鈉溶液,超聲提取3次，每次5min,提取后經0.45um的微孔濾膜過濾,取濾液；
(2)取步驟(I)中制得的濾液，加入50ml量瓶中，加入氯仿定容至刻度，減壓旋轉蒸發，揮干氯仿，制得三萜類化合物粗提物浸膏；
(3)取步驟(2)中的制得的三萜類化合物粗提物浸膏，加入溶劑加熱溶解，加入80%的乙醇溶液，加入到萃取儀的萃取池中，進行萃取，萃取溫度為55°C，所述的萃取壓力為5Mpa，將萃取液過濾，取濾液；
(4)將步驟(4)中制得的濾液再次進行減壓旋轉蒸發，壓力為4.2Kpa，溫度為30°C，得到三萜類化合物精提物。
[0018]步驟(I)中所述的牛樟芝粉末制備的具體方法為:將牛樟芝子實體切成薄片，干燥粉碎，干燥溫度為55°C，粉碎粒度為60目，制得牛樟芝粗粉。
[0019]實施例1
一種從牛樟芝中提取三萜類化合物的方法，包括以下步驟:
(1)稱取牛樟芝粉末20g及娃藻土20g,混合,加入10%的碳酸氫鈉溶液，超聲提取5次，每次1min,提取后經0.45um的微孔濾膜過濾,取濾液；
(2)取步驟(I)中制得的濾液，加入50ml量瓶中，加入甲醇定容至刻度，減壓旋轉蒸發，揮干甲醇，制得三萜類化合物粗提物浸膏；
(3)取步驟(2)中的制得的三萜類化合物粗提物浸膏，加入溶劑加熱溶解，加入85%的乙醇溶液，加入到萃取儀的萃取池中，進行萃取，萃取溫度為60°C，所述的萃取壓力為8Mpa,將萃取液過濾,取濾液；
(4)將步驟(4)中制得的濾液再次進行減壓旋轉蒸發，壓力為8.5Kpa，溫度為50°C，得到三萜類化合物精提物。
[0020]步驟(I)中所述的牛樟芝粉末制備的具體方法為:將牛樟芝子實體切成薄片，干燥粉碎，干燥溫度為60°C，粉碎粒度為-80目，制得牛樟芝粗粉。
[0021]實施例1
一種從牛樟芝中提取三萜類化合物的方法，包括以下步驟:
(1)稱取牛樟芝粉末15g及娃藻土15g,混合,加入8%的碳酸氫鈉溶液,超聲提取4次，每次8min,提取后經0.45um的微孔濾膜過濾,取濾液；
(2)取步驟(I)中制得的濾液，加入50ml量瓶中，加入氯仿定容至刻度，減壓旋轉蒸發，揮干氯仿，制得三萜類化合物粗提物浸膏；
(3)取步驟(2)中的制得的三萜類化合物粗提物浸膏，加入溶劑加熱溶解，加入82%的乙醇溶液，加入到萃取儀的萃取池中，進行萃取，萃取溫度為58°C，所述的萃取壓力為6Mpa,將萃取液過濾,取濾液；
(4)將步驟(4)中制得的濾液再次進行減壓旋轉蒸發，壓力為6Kpa，溫度為40°C，得到三萜類化合物精提物。
[0022]步驟(I)中所述的牛樟芝粉末制備的具體方法為:將牛樟芝子實體切成薄片，干燥粉碎，干燥溫度為58°C，粉碎粒度為80目，制得牛樟芝粗粉。
[0023]上述實施例僅為本發明的優選實施方式，并不應理解為對本發明的限定，本領域技術人員根據本發明的揭示，不脫離本發明范疇所做出的改進和修改都應該在本發明的保護范圍之內。
【權利要求】
1.一種從牛樟芝中提取三萜類化合物的方法，其特征在于，包括以下步驟: (1)稱取牛樟芝粉末10-20g及硅藻土10-20g，混合，加入提取溶劑，超聲提取，過濾，取濾液； (2)取步驟(I)中制得的濾液，加入50ml量瓶中，加入溶劑定容至刻度，減壓旋轉蒸發，揮干溶劑，制得三萜類化合物粗提物浸膏； (3)取步驟(2)中的制得的三萜類化合物粗提物浸膏，加入溶劑加熱溶解，加入加壓溶齊U，加入到萃取儀的萃取池中，進行萃取，將萃取液過濾，取濾液； (4)將步驟(4)中制得的濾液再次進行減壓旋轉蒸發，得到三萜類化合物精提物。
2.根據權利要求1所述的一種從牛樟芝中提取三萜類化合物的方法，其特征在于，步驟(I)中所述的牛樟芝粉末制備的具體方法為:將牛樟芝子實體切成薄片，干燥粉碎，干燥溫度為55-60°C，粉碎粒度為60-80目，制得牛樟芝粗粉。
3.根據權利要求1所述的一種從牛樟芝中提取三萜類化合物的方法，其特征在于，步驟(I)中所述的提取溶液為濃度為5%-10%的碳酸氫鈉溶液。
4.根據權利要求1所述的一種從牛樟芝中提取三萜類化合物的方法，其特征在于，步驟(I)與步驟(3)中的過濾為采用0.45um的微孔濾膜過濾。
5.根據權利要求1所述的一種從牛樟芝中提取三萜類化合物的方法，其特征在于，步驟(I)中所述的超聲提取的次數為3-5次，超聲提取的時間為每次5-10min。
6.根據權利要求1所述的一種從牛樟芝中提取三萜類化合物的方法，其特征在于，步驟(2)中定容所采取的溶劑選自氯仿或甲醇中的一種。
7.根據權利要求1所述的一種從牛樟芝中提取三萜類化合物的方法，其特征在于，步驟(2)中所述的減壓旋轉蒸發時的壓力為(4.2-8.5)Kpa，溫度為30_50°C。
8.根據權利要求1所述的一種從牛樟芝中提取三萜類化合物的方法，其特征在于，步驟(3)中所述的溶劑選自氯仿或甲醇中的一種，所述的加壓溶劑為80%-85%的乙醇溶液。
9.根據權利要求1所述的一種從牛樟芝中提取三萜類化合物的方法，其特征在于，步驟(3)中所述的萃取溫度為55-60°C，所述的萃取壓力為5-8Mpa。
【文檔編號】A61K36/07GK104127447SQ201410400614
【公開日】2014年11月5日 申請日期:2014年8月15日 優先權日:2014年8月15日
【發明者】劉巴寧, 鄭安喬 申請人:中山安蕎生物科技有限公司