生酮作用促進劑組合物的制作方法
【專利摘要】本發明提供一種生酮作用促進劑組合物，其包含非水溶性β-羥基短～中鏈脂肪酸聚合物。本發明的生酮作用促進劑組合物適用于通過促進生酮作用能夠治療或預防的各種疾病的預防或治療。
【專利說明】生鋼作用巧進劑組合物
[0001] 本申請是申請日為2008年3月31日、申請號為200880018061. 3的中國發明申請 "生麗作用促進劑組合物"的分案申請。
【技術領域】
[0002] 本發明提供新的生麗作用促進劑組合物W及促進生麗作用的方法。
【背景技術】
[0003] 術語麗體是指：因脂肪酸的分解而在肝臟產生、并釋放到血液中的丙麗、己醜己 酸、目-輕基下酸的總稱。該其中，丙麗具有揮發性而易被排出到呼出的氣體中，因而在測 定時，將血中的己醜己酸和目-輕基下酸的合計量作為總麗體的量。麗體與葡萄糖、游離脂 肪酸、氨基酸等一樣均具有能量源的作用，可W在肝臟W外的腦、也臟、腎臟、骨骼肌等多個 組織中使用。特別是，在腦中僅能利用葡萄糖和麗體，是重要的能量源。與其他成分維持狹 窄范圍的血中濃度不同，麗體的特征是其生理濃度因食物攝入、運動狀況等變化大。
[0004] 傳統上已知高脂低糖食物作為麗體誘導食物對于癒痛的治療是有用的。已知通過 促進生麗作用化etogenesis)或者施用麗體來使血中麗體水平提高，能夠取得各種治療和 預防效果。
[0005] 例如非專利文獻1顯示，輕度麗病（mild ketosis)、即血中麗體濃度的穩步增加 對各種癥狀、疾病的治療或預防是有用的。非專利文獻1報告稱，生麗體食物可W用于抑 制頑固性癒痛的發作、減少體重、W及作為輔助癌化學療法；麗體的鹽可用于在接受輸液療 法的患者中治療葡萄糖、游離脂肪酸和甘油濃度的減少、W及己醜CoA脫氨酶缺損引起的 遺傳疾病的治療中是有用的；而且，有報告稱，動物實驗中平緩的麗體濃度的提高對II型 糖尿病中典型的膜島素抵抗狀態、葡萄糖輸送和P皿活性的遺傳性缺損、低血糖發作、低氧 癥、也肌病、遺傳性肌萎縮癥、帕金森氏病等起因于自由基的疾病、阿爾茨海默病等神經變 性疾病等的預防或治療是有用的。
[0006] 從該種觀點考慮，提出了用于調節麗體水平的物質。其中之一就是麗體誘導食 物一高脂低糖品，通過持續攝取該種食品，能夠刺激肝臟中麗體的生成，提高血中麗體濃 度。然而，因為持續攝取高脂肪成分，所W存在誘發高脂血癥等其它疾病的危險性。此外， 作為麗體誘導食物，尚不能滿足味覺要求，從患者WL的觀點來看并非優選。
[0007] 另一個方案是：點滴注射、口服或腸內施用諸如己醜己酸、D-目-輕基下酸該樣的 麗體，來使血中麗體濃度增加。但是，將作為酸的該些物質直接施用到血中，對于將血液的 抑保持在中性附近并非優選。此外，直接攝取酸是困難的，因此作為麗體前體，提出了其鹽、 醋、環狀低聚物、聚合物、代謝前體等各種衍生物（專利文獻1?4、非專利文獻2)。
[0008] 專利文獻1披露，通過施用麗體的低聚物或者聚合物或醋等麗體的前體，血中麗 體濃度提高，對提高也臟效率、治療和/或逆轉糖尿病和膜島素抗性狀態、延緩或者預防神 經變性疾病W及癒痛的效果是有用的。專利文獻1中雖然記載聚合物的聚合度為2?100， 但在實施例中施用的僅是平均聚合度3. 75的低聚物或者目-輕基下酸的軸鹽，且分別對 大鼠W 0. lmL/體重IOOg的用量施用2M溶液，施用后測定120分鐘內血中輕基了酸濃度。 其結果是；施用低聚物時的血中輕基下酸濃度的峰比施用D-目-輕基下酸鹽時的峰出現的 晚，在施用后60分鐘附近出現。血中輕基下酸濃度在給藥2小時后仍增加5?12倍，攝取 后數小時血中濃度顯著提高。
[0009] 專利文獻2披露；通過D-目-輕基下酸的直鏈或環式低聚物、醋等能夠提高血液輕 基下酸濃度，具有減輕蛋白質異化、抑制食欲、增強強也效果的效果，此外，對于除糖尿病外 的其它膜島素抵抗狀態、阿爾茨海默病、皮克病相關額顯病變、血管性癡呆、盧伊體型老年 性癡呆、伴有額葉萎縮的震顫麻瘍癡呆、進行性核上性麻瘍和大腦皮質基底神經節變性癥、 唐氏綜合征相關阿爾茨海默、重癥肌無力癥W及肌營養不良的處置是有用的。在實施例中， 當給犬口服施用1日所需卡路里的5%的環狀H聚體（IOg)時，觀察到血中輕基下酸濃度在 90分鐘到達峰值（提高5倍W上），并在其后的6小時內呈降低趨勢（實施例2)。此外， 當使犬攝取將相當于1日所需卡路里的10%的環狀H聚體23. 5g混合在肉Illg中而成的 巧料（134. 5g)、9小時內攝取4次時，在第1次攝取30分鐘W內血中輕基下酸濃度提高了 約50倍。確認第3次化小時后）口服施用后，麗體有約30倍的提高，但在第二天早晨之 前又恢復到正常值（實施例3)。此外，實施例7中披露：當在5天內使大鼠攝取平均分子 量200和1000的低聚物（混合量W卡路里計為25% )時，輕基下酸血中濃度方面，平均分 子量200的低聚物為對照的9倍、平均分子量1000的低聚物為對照的2倍值，該說明水溶 性降低，則輕基了酸血中濃度也降低。
[0010] 如上述，通過1次施用可W在短時間內將血中濃度提高數倍W上，并能夠維持數 小時。
[0011] 專利文獻3披露；通過施用目-輕基下酸衍生物或者2?10聚體來提高血中麗體 濃度，能夠得到腦功能改善作用。專利文獻3中雖然記載使用2?10聚體也可得到下述效 果，即與單體的鹽、醋同樣能夠提高麗體濃度W及由此得到腦功能改善作用，但實施例中使 用的僅是目-輕基下酸單體的鹽或醋。
[0012] 專利文獻4披露；施用目-輕基下酸（3-輕基下酸）的環狀醋，能夠提高麗體 目-輕基下酸和/或己醜己酸的血中濃度。還公開了；通過提高血中麗體濃度，對于治療因 自由基、毒性作用物質例如膚和蛋白質的作用、對細胞代謝有害的遺傳缺陷、膜島素抗性或 其它葡萄糖代謝缺陷或血管誘發性狀態、缺血、頭部外傷引起的處于功能不全狀態的細胞， 和/或提高細胞效率是有用的，因此，相關施用對阿爾茨海默病、帕金森氏病、萎縮性側索 硬化癥、癒痛、自由基疾病、也衰竭、II型糖尿病、丙麗酸脫氨酶缺乏或阻斷、1種或1種W上 的細胞類型中不能實施糖酵解W及迪謝內肌營養不良的治療是有用的。在專利文獻4中公 開了使用環狀H聚體作為環狀低聚物的實施例，并且確認到；給大鼠施用后（占巧料的11 重量％ ) 80分鐘和150分鐘的時間點上，血中麗體濃度分別提高至1. 8倍和2. 4倍。
[0013] 非專利文獻1公開了通過采用點滴注射的方式將麗體直接導入血中，來進行各種 疾病的預防或治療的可能性。非專利文獻2披露；通過將水溶性目-輕基下酸低聚物直接 點滴注射到血液中，能夠提高血中麗體濃度，此外，通過水溶性低聚物的口服施用也能取得 相同效果。
[0014] 如上述，傳統技術中均是喂食聚合度低的目-輕基下酸的低聚物或醋等衍生物， 并確認到血中麗體濃度增加。該些現有技術中，血中麗體濃度均在施用后迅速提高，可W認 為該是施用的目-輕基下酸的低聚物等衍生物在胃或小腸中被水解和吸收的結果，或者它 們直接進入血中并被水解等的結果。目P，該些傳統技術中使用的麗體前體基本上是W水溶 性為前提的。此外，非專利文獻1和2中記載：用于提高血中麗體濃度的物質必須是水溶性 的。
[0015] 本 申請人:首先掲示；當給動物口服施用非水溶性目-輕基短?中鏈脂肪酸聚合物 時，其不會在胃或腸中分解，而是被輸送至大腸，并在大腸中被腸內菌群分解，從而發揮生 理活性（專利文獻5)。
[0016]
[0017] 專利文獻 1 ;特表 2001-515510
[0018] 專利文獻 2 ;特表 2002-521330
[0019] 專利文獻3 ;特開平10-95730
[0020] 專利文獻 4 ;特表 2002-524506
[0021] 專利文獻5 ;國際公開W02005/021013號公報
[0022] 非專利文獻 1 ;Veech, Prostaglandins, Leukotriens and Essential Fatty Acids 70(2004)309-319
[0023] 非專利文獻 2 ;Rich, Prceedings of the Nutrition Society (1990) 49, 361-373 上述文獻均通過引用并入本申請。
【發明內容】
[0024] 發明所要解決的問題
[00巧]本發明的目的是提供一種生麗作用促進劑組合物，通過W比較少的量口服施用該 生麗作用促進劑組合物，能夠發揮持續效果。
[002引解決問題的方法
[0027] 本發明提供；包含非水溶性目-輕基短?中鏈脂肪酸聚合物的生麗作用促進劑組 合物。
[0028] 本發明的生麗作用促進劑組合物通過口服施用或類似于口服施用的施用方法來 施用。
[0029] 此外，本發明還涉及促進生麗作用的方法，該方法包括：將非水溶性目-輕基短? 中鏈脂肪酸聚合物通過口服或與口服施用類似的施用方法施用給有必要促進生麗作用的 對象。
[0030] 通過對短?中鏈脂肪酸的目-輕基化物進行縮聚而得的聚合物，在胃或小腸基本 上不被分解，或者只有很少一部分被分解，其大部分被輸送至大腸。輸送至大腸的聚合物被 腸內菌群所含的細菌分解成水溶性的目-輕基短?中鏈脂肪酸單體或低聚物，并被大腸吸 收，從而發揮生理作用（專利文獻5)。
[0031] 當將含有5重量％的本發明的生麗作用促進劑組合物的巧料給與大鼠時，與給與 不含生麗作用促進劑組合物的巧料的對照組相比，大鼠的血中麗體濃度在開始給與巧料后 的12小時內沒有差異。然而，當繼續給與大鼠相同巧料時，可W確認2星期后，己醜己酸和 輕基下酸該兩者的濃度穩步提高。與現有技術中引起施用后數小時麗體濃度大幅提高不 同，通過本發明的組合物，血中麗體濃度的穩步提高可W長時間保持。該種水平比較低的 濃度提高同樣顯示對腦卒中易發性高血壓大鼠具有腦卒中發病預防效果。此外，對人類而 言，在施用本發明的生麗作用促進劑組合物的例子中，對于腦卒中后遺癥在數日后也顯現 出效果。
【發明者】不希望拘泥于理論，但可W推測；在大腸中被分解成單體或水溶性低聚物的 目-輕基短?中鏈脂肪酸聚合物，并不是被吸收而直接進入血中，而是被大腸吸收或在大腸 中被腸內細菌、大腸上皮細胞作為能量源加W利用后，通過某種機制來刺激肝臟中的生麗 作用。
[0032] 通過將本發明的生麗作用促進劑組合物口服施用或采用與口服施用類似的 施用方法施用于動物，能夠促進生麗作用。本發明的組合物，對于能夠通過促進生麗 作用來治療或預防的疾病的預防或治療是有用的。目P，本發明的生麗作用促進劑組合 物可W示例出：選自神經變性疾病（neurodegenerative disease)(選自阿爾茨海默 病（Alzheimer' S disease)、皮克病相關額顯病變（fronto-temperal degeneration associated with Pick's disease)、血管性癡呆（vascular dementia)、盧伊體型老年性 癡呆（senile dementia of Lewy body type)、伴有額葉萎縮的震顫麻瘍癡呆（dementia of Parkinsonism with frontal atrophy)、進行性核上性麻瘍和大腦皮質基底神經節 變性癥（progressive supranuclear palsy and corticobasal degeneration)、唐氏綜 合征相關阿爾茨海默值own's syn化ome associated Alzheimer's disease)、重癥肌無 力癥（myasthenia gravis) W及肌營養不良（mus州Iar dystro地y))、肌萎縮性側索硬 化癥（amyotro 地 ic lateral sclerosis)、癒痛（巧 il 巧 sy)、帕金森氏病（Parkinson's disease)、自由基疾病（free radical disease)、也衰竭化 eart failure)、也肌梗塞 (myocardial infarction)、也絞痛（angina pectoris)、II 型糖尿病（type II diabetes mellitus)、丙麗酸脫氨酶缺乏或阻斷（lack or blockage of pyruvate dehy化ogenase)、 I種或I種W上的細胞類型中不能實施糖酵解W及迪謝內肌營養不良值uchenne mus州Iar dystrophy)、對細胞代謝有害的遺傳缺陷、膜島素抗性（insulin resistance)或其它葡萄 糖代謝缺陷或者缺陷誘發性狀態、GABA預防的發作（GABA preventing attack,由于Y-氨 基下酸的量減少或作用減弱而導致的發作）中的疾病或癥狀的治療或預防；缺血或頭部外 傷引起的腦疾病狀態的抑制或治療；或者，選自抑制腦浮腫、保護腦功能、調整腦能量代謝 和減輕腦卒中程度中的腦功能改善等。
[0033] 本發明的組合物特別是對起因于腦細胞損傷的疾病的治療和/或預防、特別是腦 卒中的預防或治療是有用的。此外，本發明的組合物對于促進從腦卒中后遺癥中獲得恢復 是有用的。
[0034] 發明的具體連施方式
[00巧]在本發明中，目-輕基短?中鏈脂肪酸是指骨架碳原子數為3?12的飽和脂肪酸。 優選可W示例出目-輕基下酸、目-輕基丙酸、目-輕基戊酸、目-輕基己酸、目-輕基辛酸 和目-輕基癸酸。
[0036] 作為本發明的目-輕基短?中鏈脂肪酸聚合物，也可W是上述單體的均聚物，也 可W是2種W上的短?中鏈脂肪酸的共聚物。特別是適合使用目-輕基下酸的均聚物或 目-輕基下酸與其它1種W上的目-輕基短?中鏈脂肪酸的共聚物。作為共聚物，特別是適 合使用目-輕基下酸與目-輕基戊酸的共聚物。
[0037] 本發明的目-輕基短?中鏈脂肪酸聚合物中還可W包含其它單體單元，前提是不 妨礙目-輕基脂肪酸或其低聚物的生理作用。
[0038] 在本發明的組合物中，目-輕基短?中鏈脂肪酸聚合物只要是非水溶性的即可，對 其聚合度沒有特殊限定。如果聚合物是水溶性的，則口服施用會直接在到達大腸之前被吸 收，或者在胃、小腸中的酸、堿性條件下被水解、并在到達大腸之前被吸收，因而不能發揮本 發明的效果。
[0039] 對于目-輕基短?中鏈脂肪酸聚合物而言，聚合度基本上為10 W上，則其是非水 溶性的。因而，例如對目-輕基下酸聚合物而言，適合使用重均分子量1，000 W上的目-輕 基下酸聚合物、特別是重均分子量1，500 W上的目-輕基下酸聚合物。對于聚合物分子量 的上限沒有特殊限制，只要可W作為聚合物生產，則均可W在本發明中使用。例如報告稱： 利用微生物獲得了重均分子量20, 000, 000 W上的目-輕基下酸聚合物（Appl. Microbiol. Biotechnol. ,47,140-143(1997))。作為本發明中使用的目-輕基短?中鏈脂肪酸聚合物， 優選可W示例出聚合物的聚合度為20?100, 000、更優選聚合度為20?20, 000的目-輕 基短?中鏈脂肪酸聚合物。
[0040] 本發明的目-輕基短?中鏈脂肪酸聚合物可W采用任何公知的方法來制備。具體 的目-輕基短?中鏈脂肪酸聚合物制備方法，例如可W采用對作為原料的目-輕基短?中 鏈脂肪酸單體進行脫水縮聚的常規聚醋合成方法來獲得。
[0041] 此外，也可W使用利用微生物或高等生物生產的目-輕基短?中鏈脂肪酸聚合 物。
[0042] 已知有許多細菌能夠產生目-輕基短?中鏈脂肪酸聚合物（Microbiol. Rev.，54, 450-472 (1990)和 Biotechnol. Bioeng.，49,1-14 (1996)，該些文獻通過引用并入 本申請）。由該些細菌產生的目-輕基短?中鏈脂肪酸聚合物也是適合使用的。細菌產生 的目-輕基短?中鏈脂肪酸聚合物，可W從菌體中分離出來使用，也可W與菌體一起使用。 細菌的蛋白質含有率通常較高，當采用本發明的組合物作為飼料或功能性食品時，細菌作 為蛋白源也是有用的。
[0043] 已知在公知的微生物中，真養雷爾氏菌（Ralstonia eutropha)、廣泛產堿桿菌 (Alcaligenes Ia化S)大量生產目-輕基下酸聚合物。特別是真養雷爾氏菌（Ralstonia eutropha)，在過去曾作為微生物蛋白對其進行研究，其菌體自身的成分中蛋白質所占的含 有率高，此外，傳統添加來促進成長的絲氨酸、甘氨酸等氨基酸的含有率也高。因而，其不僅 能提供目-輕基下酸聚合物等，還可W作為高效的蛋白源，在混合到飼料、食品中時是特別 優選的。
[0044] 本發明的目-輕基短?中鏈脂肪酸聚合物還可W是由螺旋藻屬（Spirulina)產 生的。螺旋藻是生長于熱帶或亞熱帶地區的淡水中的藍藻類，非洲的化ad湖、墨西哥的 Texcoco湖等地區，自古W來為原住民所食用。現在更是作為W高營養價值（高蛋白/高礦 物質/高維生素）為特征的健康食品在市場上銷售。
[0045] 作為健康食品在市場上銷售的螺旋藻，通常僅含有其干重的0. 1重量％左右W下 的目-輕基下酸聚合物。本發明中適合使用經調節培養條件等而使得目-輕基下酸聚合物 含有量有所增加的螺旋藻（參照例如J. Biotechnol.，172, 2791-2792 (1990)，該文獻通過 引用并入本申請）。在本發明的組合物中，作為目-輕基短?中鏈脂肪酸聚合物，可W將其 從螺旋藻中分離出來使用，也可W W螺旋藻的形式直接混合。
[0046] 作為目-輕基短?中鏈脂肪酸聚合物含有量增加的螺旋藻，適合使用干重中含有 的目-輕基短?中鏈脂肪酸聚合物、特別是目-輕基下酸聚合物為0. 2重量％ ^上、優選1 重量％ ^上、更優選3重量％W上的螺旋藻。作為螺旋藻中含有的目-輕基短?中鏈脂肪 酸聚合物的量，越多越優選，只要通過調節培養條件等能夠增加含有量，則對上限沒有特殊 限制。例如，可W使用干重中含20重量％^上、甚至例如高達40重量％的目-輕基下酸聚 合物的螺旋藻。
[0047] 此外，已經開發出通過基因重組技術使本來不生產輕基脂肪酸聚合物的微生物、 植物能夠生產輕基脂肪酸聚合物的技術（J. Bacteriol.，170,4432-4436、5837-5847 (1988) 和Science, 256, 520-523 (1992)，該些文獻通過引用并入本申請）。作為在本發明中使用的 目-輕基短?中鏈脂肪酸聚合物，也可W使用通過該基因重組技術得到的微生物、植物產生 的聚合物。聚合物可W從微生物、植物中分離出來使用，或者也可W使用含有該聚合物的微 生物、植物本身。
[0048] 本發明的生麗作用促進劑組合物促進動物體內麗體的生成。在本說明書中，"動 物"不僅是指包含人在內的哺乳動物，還包括魚類、鳥類等脊椎動物。
[0049] 已知在脊椎動物的大腸內生活著多個種類的許多細菌，它們形成了菌群，該些 細菌通過發酵將未在胃、小腸中消化的食物轉變為短鏈脂肪酸等，脊椎動物吸收該些，并 作為能量、營養素加 W 利用。（J. Exp. Zool. Su卵 1.，3, 55-60 (1989) ;Physiol. Rev.，78， 393-427(1998))。在大腸內的菌群方面，不僅對于人、豬、羊等哺乳類，對于雞、鴨等鳥 類，纏魚等魚類也進行了許多研究，并且已經闡明全體脊椎動物具有腸內菌群（Physiol. Res. ,47,259-263 (1998) ;Comp. Biochem.化ysiol. A ;Mol. Integr.化ysiol.，131， 657-668 (2002) ;Comp. Biochem. Physiol. A ;Mol.Integr.曲ysiol.，132, 333-340(2002); Appl. Environ. Microbiol. ,68,1374-1380(2002)，該些文獻通過引用并入本申請）。因而， 本發明的組合物對脊椎動物是有效的，特別是對哺乳類、鳥類、魚類是有用的。
[0050] 在本申請中，"口服施用或者與口服施用類似的施用方法"除了指口服施用W外， 還指包括經鼻管施用W及胃內施用、大腸內直接灌腸等消化管內施用的施用方法等。
[0051] 在本發明中，包含目-輕基短?中鏈脂肪酸聚合物的組合物通過口服施用或者與 口服施用類似的施用方法來施用，但口服施用更加容易，因而是實用上優選的。正如本申請 人在專利文獻5中報告的那樣，目-輕基短?中鏈脂肪酸聚合物在動物體內被腸內細菌分 解。因而，即使在口服施用的情況下，也不會在小腸中被消化吸收而導致血中麗體濃度提 高，而是W聚合物的形式被輸送至大腸，并在大腸中被分解和利用。
[0052] 本發明的目-輕基短?中鏈脂肪酸聚合物分解生成的水溶性單體或者低聚物，在 大腸中被分解、吸收或利用，可W認為其結果是刺激了肝臟中的生麗作用。由于刺激生麗作 用，所W在例如施用目-輕基下酸聚合物時，己醜己酸和目-輕基下酸該兩者在血中濃度從 施用開始至少經過12小時后、特別是數日后開始平緩地增加。
[0053] 另一方面，如專利文獻5所示，用于本發明的目-輕基短?中鏈脂肪酸聚合物即使 長期施用，也未確認對身體有不良影響。因而，本發明的生麗作用促進劑組合物，可W出于 治療或預防疾病W及在健康對象中維持健康狀態的目的來施用。
[0054] 已知用于本發明的目-輕基短?中鏈脂肪酸聚合物存在于真核生物的細胞膜、線 粒體中。而且，還已知其在動物的血液中W與白蛋白等結合的形式存在。巧ur.J. Biochem.， 224,317-328(1994))
[0055] 通過本發明的生麗作用促進劑組合物的口服施用，能夠獲得傳統上認為能夠通過 生麗作用促進獲得的各種治療或預防效果W及健康維持效果。作為該些效果，可W示例出： 選自阿爾茨海默病、皮克病相關額顯病變、血管性癡呆、盧伊體型老年性癡呆、伴有額葉萎 縮的震顫麻瘍癡呆、進行性核上性麻瘍和大腦皮質基底神經節變性癥、唐氏綜合征相關阿 爾茨海默、重癥肌無力癥W及肌營養不良中的神經變性疾病、肌萎縮性側索硬化癥、癒痛、 帕金森氏病、自由基疾病、也衰竭、也肌梗塞、也絞痛、II型糖尿病、丙麗酸脫氨酶缺乏或者 阻斷、1種或1種W上的細胞類型中不能實施糖酵解W及迪謝內肌營養不良、對細胞代謝有 害的遺傳缺陷、膜島素抗性或其它葡萄糖代謝缺陷或者缺陷誘發性狀態、GABA預防的發作 的治療或預防，W及缺血、頭部外傷引起的腦疾病狀態的抑制或治療、腦浮腫的抑制、腦功 能的保護、腦能量代謝的調整、腦卒中程度的減輕等腦功能改善等。
[0056] 本發明的組合物特別是對腦細胞損傷引起的疾病的治療和/或預防，特別是腦卒 中的預防或治療是有用的。此外，本發明的組合物適合用于促進從腦卒中的后遺癥中恢復， 例如促進從麻瘍、麻木、疼痛、語言障礙、視覺障礙、感覺障礙、尿失禁和情緒障礙等、特別是 麻瘍、麻木、疼痛、尿失禁中恢復。
[0057] 含有本發明的目-輕基短?中鏈脂肪酸聚合物的組合物，可W混合在飼育或養殖 哺乳動物、鳥類、魚類等時的飼料、飲料等中，或者也可W W用于混合在該些飼料、飲料等中 的添加物的形式提供。
[0058] 此外，本發明的組合物還適合用作W健康狀態的維持管理或疾病預防為目的的功 能性食品。在本申請中，"功能性食品"包括滋補品、腸內營養劑、成分營養劑、醫療食品和術 后食品、高齡人±用食品或妊產婦/哺乳期婦女用食品、嬰幼兒用食品，或者向上述食品中 添加的添加劑等。此外，功能性食品不僅包含用于人的功能性食品，還包含用于寵物、家畜 等人W外的動物的功能性食品。
[0059] 當本發明的組合物作為W特定疾病的治療為目的的、用于包括人在內的動物的藥 物組合物提供時，或者作為針對包括人在內的動物、用于特定疾病的預防或維持或改善綜 合健康狀態的功能性食品或者向食品、飼料中添加的添加物提供時，均包含在本發明的范 圍內。
[0060] 當本發明的組合物W用于包括人在內的動物的藥物組合物或功能性食品的形式 提供時，可W是粉末、顆粒、片劑、膠囊劑、舌下劑、含片、可巧嚼片劑、混息液等、能夠口服施 用或者能夠通過口服攝取的任何形態。該些施用制劑可W采用常規方法來制備。此外，本 發明的組合物還可W用于混合在食品、飲料等中來口服攝取。
[0061] 本發明的組合物中可W含有醫藥可接受的適當的添加劑。對于添加劑沒有特別限 定，可W從賦形劑、稀釋劑、填充劑、溶劑、潤滑劑、輔助劑、粘合劑、崩解劑、包覆劑、膠囊化 齊u、乳化劑、分散劑、混息劑、增粘劑、等滲化劑、緩沖劑、止痛劑、防腐劑、抗氧化劑、矯味劑、 芳香劑、著色劑等制劑學相關的一般書籍中記載的添加劑中視需要適宜地選擇。
[0062] 而且，在不違反本發明的目的的前提下，本發明的組合物中可W適宜含有其它種 類的藥效成分。
[0063] 當制備本發明的組合物作為飼料時，對于飼料的組成沒有特殊限制，可W根據目 的對象在傳統上已知的飼料中適宜地混合目-輕基短?中鏈脂肪酸聚合物。在不背離本發 明的目的的前提下，本發明的飼料組合物中還可W混合其它生理活性物質。
[0064] 此外，還可W作為混合在飼料中、用于給動物施用的飼料添加劑來制備。
[0065] 當用于本發明的聚合物是由微生物、螺旋藻等藍藻類或者植物等高等生物產生的 時，可W連同含有目-輕基短?中鏈脂肪酸聚合物的微生物、藍藻類、植物等高等生物一起 混合。該種情況下，微生物、藍藻類、植物等高等生物本身也可W作為營養源而被有效利用。
[0066] 對于包含在本發明的生麗作用促進組合物中的目-輕基短?中鏈脂肪酸聚合物 的量，沒有特殊規定，應該根據施用對象的種類、體重、性別、健康狀態、施用目的等來適宜 確定。用量可W為每1日Img?500mg/kg體重。可W 1次給與，也可W分數次給與。或者， 還可W W 0. Ol?20重量％、優選0. 1?10重量％混合在飼料、飲料、食品中。當然可W根 據目的進行增減。
[0067] 在其它實施方式中，本發明提供一種生麗作用促進劑組合物，該生麗作用促進劑 組合物W能夠輸送至大腸的形態含有目-輕基短?中鏈脂肪酸的單體或其低聚物或者它 們的生理可接受的衍生物。"目一輕基短?中鏈脂肪酸的低聚物巧日無特別說明是指水溶性 的低聚物。可W示例出聚合度優選小于10、特別是小于6、更優選聚合度為3 W下的制品。
[0068] 作為"生理可接受的衍生物"，可W列舉出目-輕基短?中鏈脂肪酸或其低聚物的 可接受的鹽、在生理條件下可水解的衍生物例如醋和醜胺、還有輕基被磯酸化而得到的化 合物。
[0069] 作為鹽，可W是與無機離子或有機堿形成的鹽。作為無機離子，可W列舉出軸、鐘、 鎮、巧、鋒、鐵、猛等等堿金屬、堿±金屬或過渡金屬的陽離子。作為有機堿，可W列舉出H甲 胺、H己胺、己醇胺、二己醇胺、H己醇胺等、精氨酸、賴氨酸、鳥氨酸等堿性氨基酸等。
[0070] 作為醋，可W列舉出例如甲基醋、己基醋、異丙基醋等焼基醋，例如輕基己基醋等 輕基焼基醋等。此外，還適合使用與單糖、寡糖等糖類，己二醇、甘油、聚己二醇或聚丙二醇 等聚醇化合物形成的醋。
[0071] 而且，還適合使用與核巧酸等磯酸化合物形成的磯酸醋。
[0072] 作為醜胺，可W列舉出例如二己醜胺等焼基醜胺、與寡膚形成的醜胺等。
[0073] 作為"W能夠輸送至大腸的形態含有的組合物"，可W示例出將目-輕基短?中鏈 脂肪酸的單體或低聚物或者它們的生理可接受衍生物制備成傳統已知的大腸溶解性制劑、 緩釋劑、膠囊劑等而得到的制品。
[0074] 當口服施用目-輕基短?中鏈脂肪酸聚合物時，其能夠在大腸中被腸內菌群分解 直至成為目-輕基短?中鏈脂肪酸的單體或低聚物，并被加W利用（專利文獻5)，因而，W 能夠輸送至大腸的形式含有目-輕基短?中鏈脂肪酸或其低聚物或者它們的生理可接受 衍生物的組合物，與本發明的含有目-輕基短?中鏈脂肪酸聚合物的組合物具有相同的作 用。因此，W能夠輸送至大腸的形式含有目-輕基短?中鏈脂肪酸或其低聚物或者它們的 生理可接受衍生物的生麗作用促進劑組合物，能夠在與上述相同的用途中、W與上述相同 的用量使用。
[0075] W下，通過實施例更具體地說明本發明。
[0076] 逼施例1 ;分子量、氷溶巧、氷解巧
[0077] 將發酵生產的（目-輕基下酸-目-輕基戊酸）共聚物（GPC聚苯己帰換算重均分 子量Mw = 560, 000。數均分子量Mn = 238, 000。目-輕基戊酸=5. 4摩爾％ <NMR測定〉。 P皿V-1) IOg溶解在氯仿250ml中，加入濃鹽酸2ml，加熱回流7小時。然后，添加30%雙氧 水水溶液6. 4ml，再繼續加熱回流8小時。用水清洗至中性后，回收氯仿層，并進行旋轉蒸 發來回收P皿v-2((e-輕基了酸-目-輕基戊酸）共聚物-2)。采用凝膠滲透色譜（東曹 (株）GPC HLC-8020/柱TSKgel Multipor細XkM)測定重均分子量=13, 600、數均分子量 =5,600(聚苯己帰換算）。
[007引將回收得到的P皿V-2中的Sg溶解在200ml氯仿中，重復2次下述操作；添加 30%雙氧水水溶液2. 56ml，加熱回流8小時；然后像上述那樣得到了 P皿V-3((e -輕基下 酸-目-輕基戊酸）共聚物-3)。P皿V-3的重均分子量=3, 700、數均分子量=1，250 (聚苯 己帰換算）。
[0079] 將回收得到的P皿V-3中的2g溶解在50ml氯仿中，添加濃鹽酸0. 2ml，并每4小時 添加30 %雙氧水水溶液0. 64ml，進行加熱回流，重復4次，得到了重均分子量=860、數均分 子量=490 (聚苯己帰換算）的P皿V-4 ((目-輕基了酸-目-輕基戊酸）共聚物-4)。
[0080] 分別稱量IOOmg左右的P皿V-I?P皿V-4,將其加入到37 C的水50ml中，振蕩6 小時。對于P皿V-UP皿V-2和P皿V-3,在6小時后進行過濾回收，并在干燥后測定重量，結 果為；與加入到水中的重量相比，減少量小于4%，加入到水中的聚合物重量與回收的聚合 物重量的差值在誤差范圍內。因此，P皿V-I、P皿V-2和P皿V-3是不溶于水的。
[0081] 另一方面，當將P皿V-4加入到水中2小時后，通過目測可W確認其基本上完全溶 解，因此可W確認P皿V-4是水溶性的。
[0082] 接下來，考察了經確認為不溶于水的P皿V-I?P皿V-3在胃和小腸中的水解性和 酶分解性。
[008引分別稱量IOOmg左右，將其加入到W下的模擬胃或小腸的抑環境的酶水溶液（0. 1 重量％濃度）50ml中，于37C振蕩一定時間（模擬胃；6小時、模擬小腸；10小時）后進行 過濾回收。P皿V-UP皿V-2和P皿V-3中的任何一種的回收率均在96% W上，在操作誤差范 圍內，未確認到分解。
[0084] 通過本實驗，確認了具有不溶于水的分子量的聚合物，在胃、小腸的酸/堿性環境 或消化酶的作用下不發生分解。
[0085] 使用的市售的酶的水溶液如下。
[008引胃蛋白酶：模擬胃液（鹽酸水溶液抑=1. W
[0087] 淀粉酶：模擬胃液（鹽酸水溶液抑=5. 5、氯化巧0. 03重量％ )
[0088] 膜蛋白酶：模擬腸液（碳酸氨軸水溶液抑=8. 0)
[0089] 脂肪酶：模擬腸液（碳酸氨軸水溶液抑=7. 5、氯化巧0. 03重量％ )
[0090] 連施例2 :攝取（目-時某T酸-目-時某巧酸）共聚物后目-時某T酸血中濃麼 的巧化
[0091] 使用動物；Sprague-Dawl巧系雄性SPF大鼠（日本化C(株）、浜松）8周齡（n = 3)
[0092] 基礎飼料；市售粉末飼料CE-2 (日本CLEA (株），東京）
[0093] 給水；自由攝取
[0094] 飼育環境；溫度23C、濕度50%、每日8時?20時日光燈照明。
[0095] 飼育；在設施中馴化4天后進行分組，對于對照組和實驗組，均進行有時間限制地 給與巧料，即從10時起至17時止使之自由攝取基礎飼料，進行7天馴化。在實驗開始日將 要給與巧料之前，從尾部采集外周血。對照組繼續有時間限制地給與基礎飼料，而實驗組則 有時間限制地給與在基礎飼料中添加5wt%的（目-輕基下酸-目-輕基戊酸）共聚物（GPC 聚苯己帰換算重均分子量=560, 000。目-輕基戊酸=5. 4摩爾％。P皿V-1)而成的飼料。 每4小時從尾部采集外周血，觀察血中目-輕基下酸的濃度變化。血中目-輕基下酸濃度 是從采用常規方法獲得的外周血中分離出血清，將其用PBS(抑7. 4)稀釋后，在（株）日本 醫學臨床檢查研究所（京都）采用酶循環法測定的。
[0096] 結果；即將給與巧料之前（0小時）的目-輕基下酸濃度高。該是因為在禁食17小 時后發生了 W目-輕基了酸為空腹時的能量源的代謝。雖然自由攝取了 7小時的含P皿V-I 的飼料，但攝取中W及直到攝取開始后12小時，目-輕基下酸濃度在實驗組和對照組之間 沒有差異。
[0097] [表 1]
[0098] 目-輕基了酸的血中濃度變化單位；iimol/L
[0099]
【權利要求】
1. 聚合度為10以上的非水溶性聚合物在制備肝的酮體生成促進劑組合物中的應用， 所述聚合度為10以上的非水溶性聚合物選自β -羥基丁酸的均聚物、β -羥基丁酸與 碳原子數為3?12的β -羥基飽和脂肪酸的共聚物。
2. 根據權利要求1所述的應用，其中，所述碳原子數為3?12的β-羥基飽和脂肪酸 選自β-羥基丙酸、β-羥基戊酸、β-羥基己酸、β-羥基辛酸、β-羥基癸酸及它們的混 合物。
3. 根據權利要求1所述的應用，其中，所述聚合度為10以上的非水溶性聚合物為 β-羥基丁酸的均聚物.
4. 根據權利要求1所述的應用，其中，所述聚合度為10以上的非水溶性聚合物為 β-羥基丁酸和β-羥基戊酸的共聚物。
5. 根據權利要求1所述的應用，其中，所述選自β_羥基丁酸的均聚物、β_羥基丁酸 與碳原子數為3?12的β -羥基飽和脂肪酸的共聚物的聚合度為10以上的非水溶性聚合 物的重均分子量為1，〇〇〇?20, 000, 000。
6. 根據權利要求1所述的應用，其中，所述選自β_羥基丁酸的均聚物、β_羥基丁酸 與碳原子數為3?12的β -羥基飽和脂肪酸的共聚物的聚合度為10以上的非水溶性聚合 物是由螺旋藻產生的。
7. 根據權利要求1所述的應用，其中，所述酮體生成促進劑組合物通過口服或者與口 服類似的方法來使用。
8. 權利要求7所述的應用，其中，所述酮體生成促進劑組合物為動物飼料或動物飼料 添加物。
9. 權利要求7所述的應用，其中，所述酮體生成促進劑組合物為功能性食品。
10. 根據權利要求1所述的應用，其中，所述酮體生成促進劑組合物為用于包括人在內 的動物的藥物組合物。
11. 根據權利要求1?10中任一項所述的應用，其中，所述酮體生成促進劑組合物用 于： 選自以下疾病或癥狀的治療或預防：神經變性疾病、肌萎縮性側索硬化癥、癲癇、帕金 森氏病、自由基疾病、心衰竭、心肌梗塞、心絞痛、II型糖尿病、丙酮酸脫氫酶缺乏或阻斷、1 種或1種以上的細胞類型中不能實施糖酵解以及迪謝內肌營養不良、對細胞代謝有害的遺 傳缺陷、胰島素抗性或其它葡萄糖代謝缺陷或者缺陷誘發性狀態、GABA預防的發作；其中， 所述神經變性疾病選自阿爾茨海默病、皮克病相關額顳病變、血管性癡呆、盧伊體型老年性 癡呆、伴有額葉萎縮的震顫麻痹癡呆、進行性核上性麻痹和大腦皮質基底神經節變性癥、唐 氏綜合征相關阿爾茨海默癥、重癥肌無力癥以及肌營養不良； 伴有缺血或頭部外傷的腦疾病狀態的抑制或治療；或者， 選自抑制腦浮腫、保護腦功能、調整腦能量代謝和減輕腦卒中程度的腦功能改善。
12. 根據權利要求1?10中任一項所述的應用，其中，所述酮體生成促進劑組合物用于 起因于腦細胞損傷的疾病的治療和/或預防。
13. 權利要求12所述的應用，其中，所述酮體生成促進劑組合物用于腦卒中的預防或 治療。
14. 權利要求12所述的應用，其中，所述酮體生成促進劑組合物用于促進腦卒中后遺 癥的恢復。
【文檔編號】A61P25/28GK104224823SQ201410370016
【公開日】2014年12月24日 申請日期:2008年3月31日 優先權日:2007年3月30日
【發明者】栗山昌樹 申請人:有限會社愛澤世