一種穩定藥物組合物的輔劑及含有該輔劑的藥物組合物的制作方法
【專利摘要】本發明申請提供一種穩定藥物組合物的輔劑及含有該輔劑的藥物組合物，特別是一種高穩定性的以降纖酶為主藥的藥物組合物。在原有降纖酶粉針和注射液組方中添加了酶活力保護劑，其藥品活性成分是降纖酶，處方中其他的非活性成分為穩定劑和賦形劑右旋糖酐和酶活力保護劑，酶活力保護劑為小分子酶活力保護劑或大分子酶活力保護劑、或小分子酶活力保護劑和大分子酶活力保護劑的組合，以保證生產、儲存、銷售過程中降纖酶效價的穩定，減少了生產投料比、保證了成品的效價穩定、提高了臨床用藥的安全性和療效。
【專利說明】一種穩定藥物組合物的輔劑及含有該輔劑的藥物組合物
【技術領域】
[0001] 本發明申請涉及一種輔劑及含有該輔劑的藥物組合物，特別是一種高穩定性以降 纖酶為主藥的藥物組合物，屬于生物和生化制藥領域。
【背景技術】
[0002] 降纖酶是從我國獨有的白眉蝮蛇或尖吻蝮蛇蛇毒中提取的一種類凝血酶樣酶，用 它制成的藥物靜脈滴注到人體內，有降低血漿纖維蛋白原濃度、降低血液粘度和抑制血小 板聚集的作用。臨床上用于腦梗塞、血栓閉塞性脈管炎、股動脈栓塞、肺栓塞等疾病的治療 與預防。其市售藥品劑型為凍干粉針（主要組成成分為降纖酶，加適量穩定劑和賦形劑右 旋糖酐）和注射液。每種劑型的規格有5U/支和10U/支。
[0003] 純化的降纖酶是高比活的蛋白酶，其降纖酶比活可以達到2500-3000U/mg，在降纖 酶凍干粉針和注射液中，每支藥品中降纖酶的含量極少，通常為十微克級以下。由此導致藥 品中低濃度的降纖酶極易受氧化、溫度、pH值、自身聚合和降解等多重因素的影響，其酶活 的穩定性大大降低。導致從藥品生產（溶解、配制、稀釋定容、分裝、凍干等步驟）到終端銷 售的各環節中，降纖酶制劑的效價極易失活，酶活的穩定性存在諸多關聯問題：在降纖酶制 劑的生產過程中，為了保證成品含量符合藥品質量標準，各生產廠家根據自己的制劑生產 工藝按酶活力的標示量140% -180%超限投料，加大了企業的生產成本、浪費了寶貴的生 物酶資源、加大了成品效價的不確定性和臨床用藥的風險；在生產、儲存、運輸、銷售、臨床 使用的過程中，由于酶活力的降低，嚴重影響了按處方劑量合理用藥的療效和安全性。
[0004] 已有的技術方案之一是在降纖酶制劑的生產過程中在藥品組方中添加0. 01-5% 的人血白蛋白作為酶活保護劑。然而，由于血清白蛋白潛在的血源性病原體污染、資源的稀 缺性和較高的成本限制了其作為保護劑的應用。
【發明內容】
[0005] 本發明申請的目的在于解決目前藥物組合物（尤其是降纖酶制劑）在生產、儲存、 銷售的過程中存在的上述缺陷，其技術問題的核心是提高藥物組合物中的活性酶（尤其是 降纖酶制劑）在生產和流通過程中的穩定性。
[0006] 本發明申請的一個目的在于提供一種穩定藥物組合物的輔劑，該輔劑含有下述成 分：
[0007] 右旋糖酐：1% -5% (W/V% ) ;w/v%表示單位體積藥物組合物內含有的該物質的 質量；
[0008] 酶活力保護劑：小分子酶活力保護劑、大分子酶活力保護劑或小分子酶活力保護 劑和大分子酶活力保護劑的組合。
[0009] 進一步的，所述的小分子酶活力保護劑為甘露醇或甘氨酸，其含量為0. 1% -5% (W/V% ) 〇
[0010] 進一步的，所述的大分子酶活力保護劑為部分水解明膠或水解明膠，其含量為 0. 001% -0. 5% (ff/V% ) 〇
[0011] 進一步的，所述部分水解明膠或水解明膠是由十八種氨基酸組成的、其分子量在 3000-20000的多肽，其中以甘氨酸的含量最高，通過多重保護機制使得降纖酶制劑的酶活 力保持穩定。
[0012] 本發明申請的另一個目的是提供含有上述輔劑的藥物組合物，所述藥物組合物含 有下述成分：
[0013] 降纖酶：主藥；
[0014] 右旋糖酐：1% -5% (W/V% );
[0015] 酶活力保護劑：小分子酶活力保護劑、大分子酶活力保護劑或小分子酶活力保護 劑和大分子酶活力保護劑的組合。
[0016] 其中（W/V% )的含量計算以每支藥品的藥液灌裝量為依據，指每毫升配制好的藥 液中所含某一組分的質量（以g表示），單位為g/ml。
[0017] 進一步的，所述的小分子酶活力保護劑為甘露醇或甘氨酸，其含量為0. 1% -5% (W/V% ) 〇
[0018] 進一步的，所述的大分子酶活力保護劑為部分水解明膠或水解明膠，其含量為 0. 001% -0. 5% (W/V% ) 〇
[0019] 進一步的，所述部分水解明膠或水解明膠是由十八種氨基酸組成的、其分子量在 3000-20000的多肽，其中以甘氨酸的含量最高，通過多重保護機制使得降纖酶制劑的酶活 力保持穩定。
[0020] 在實際應用中，也可根據需要，在本發明申請所述的藥物組合物中添加抑菌劑。常 用的抑菌劑有三氯叔丁醇、硫柳汞等。
[0021] 具體地，本發明申請的酶活力保護劑可以有如下不同的組合：
[0022] 1、甘露醇：0· 1% -5% (W/V% )
[0023] 2、甘氨酸：0· 1% -5% (W/V% )
[0024] 3、部分水解明膠：0· 001% -0· 5% (W/V% )
[0025] 4、水解明膠：0· 001% -0· 5% (W/V% )
[0026] 5、甘露醇 0· 1% -5% (W/V% )和部分水解明膠 0· 001% -0· 5% (W/V% )組合；
[0027] 6、甘露醇 0· 1% -5% (W/V% )和水解明膠 0· 001% -0· 5% (W/V% )組合；
[0028] 7、甘氨酸 0· 1% -5% (W/V% )和部分水解明膠 0· 001% -0· 5% (W/V% )組合；
[0029] 8、甘氨酸 0· 1% -5% (W/V% )和水解明膠 0· 001% -0· 5% (W/V% )組合。
[0030] 上述的輔劑，使酶蛋白受水分子的影響減少，酶液粘度增大，使酶液體系更加均 一、穩定，提高液體酶的穩定性。甘露醇作為凍干保護劑，通過無定型結構的形成而阻止蛋 白質藥物的聚集，保持了酶活的穩定。甘氨酸通過抑制緩沖液pH值的改變而阻止降纖酶 變性。凍干過程中的甘氨酸還可阻止凍干過程中降纖酶分子的聚集。上述的輔劑，部分水 解明膠（或水解明膠）由明膠水解得到，具有聚合物穩定蛋白酶的多重保護作用，優先從 蛋白酶表面析出、表面活性、使蛋白酶溶液黏度升高從而阻止其他小分子（如糖及多羥基 化合物）的結晶、抑制凍干過程中pH值的劇烈變化等。水解明膠可以市售得到或通過下面 文獻中所描述的方法制備得到：（關云山.酸法水解明膠的試制[J].青海大學學報（自然 科學版），2001，19(1) :32?34.)。部分水解明膠可利用明膠通過下面文獻中所描述的方 法制備得到：（K. Stocker and G. H. Barlow The coagulant enzyme from Bothrops atrox venom(Batroxobin)Methods in Enzymology,1976, V01.45, p214-233, L. Lorand(Ed), Academic. New York)〇
[0031] 上述的藥物組合物，可以各種臨床適合的劑型使用，包括但不限于凍干粉針劑和 注射劑。
[0032] 本發明申請還要求保護所述的藥物組合物在制備治療或預防血栓栓塞性疾病的 藥物中的用途。
[0033] 本發明申請所述的藥物組合物，在原有降纖酶凍干粉針和注射液中添加酶活力保 護劑或其組合、經過篩選的保護劑組合，以保證生產、儲存、銷售過程中降纖酶效價的穩定， 減少了生產投料比、保證了成品的效價穩定、提高了臨床用藥的安全性和療效。
【具體實施方式】
[0034] 以下結合具體的實施方案，對所述技術內容進行非限制性的描述，目的為了公眾 更好理解所述技術。
[0035] 實施例1
[0036] 降纖酶注射液（規格10U/支）
[0037] 降纖酶總量 2000 U 右旋糖酐 20 4g ( 2% ( W/V% )) 甘氨酸 4g(2%(W/V%)) 加注射用水至 200ml
[0038] 用天平秤取4. 0g右旋糖酐20,加適量注射用水溶解，加入5%的針用活性炭，共同 煮沸30-60分鐘，待冷卻到室溫后過濾除去活性炭，濾液待用。準確秤取甘氨酸4g，用適量 注射用水溶解后待用。取2000U的降纖酶原料凍干粉，用少量無菌生理鹽水靜置溶解，之后 加入上述處理好的右旋糖酐20溶液和甘氨酸溶液合并混勻，用注射用水定容至200ml，用 0. 22 μ m的濾膜濾器過濾除菌，處理好的藥液按1. 0ml/支分裝到處理好的2R西林瓶中，壓 塞、乳蓋、貼簽備用。
[0039] 實施例2
[0040] 降纖酶注射液（規格10U/支）
[0041] 降纖酶總量 2000 U 右旋糖酐 20 4g(2%(W/V%)) 甘氨酸 10g ( 5% ( W/V% ))
[0042] 加注射用水至 200ml
[0043] 用天平秤取4. 0g右旋糖酐20,加適量注射用水溶解，加入5%的針用活性炭，共同 煮沸30-60分鐘，待冷卻到室溫后過濾除去活性炭，濾液待用。準確秤取甘氨酸10g，用適量 注射用水溶解后待用。后續步驟同實施例1。
[0044] 實施例3
[0045] 降纖酶注射液（規格10U/支）
[0046] 降纖酶總量 2000 U 右旋糖酐 20 4g ( 2% ( W/V% )) 甘氨酸 0.4g ( 0.2% ( W/V% )) 加注射用水至 200ml
[0047] 用天平秤取4. 0g右旋糖酐20,加適量注射用水溶解，加入5%的針用活性炭，共同 煮沸30-60分鐘，待冷卻到室溫后過濾除去活性炭，濾液待用。準確秤取甘氨酸0. 4g，用適 量注射用水溶解后待用。后續步驟同實施例1。
[0048] 實施例4
[0049] 降纖酶注射液（規格10U/支）
[0050] 降纖酶總量 5000 U 右旋糖酐 20 10g ( 2% ( W/V% )) 部分水解明膠B3 2.5g ( 0.5% ( W/V% )) 加注射用水至 500ml
[0051] 具體操作過程同實施例1。
[0052] 實施例5
[0053] 降纖酶注射液（規格10U/支）
[0054] 降纖酶總量 5000 U 右旋糖酐 20 10g ( 2% ( W/V% )) 部分水解明膠 B3 0.1g(0.02%( W/V%)) 加注射用水至 500ml
[0055] 具體操作過程同實施例1。
[0056] 實施例6
[0057] 降纖酶注射液（規格10U/支）
[0058] 降纖酶總量 5000 U 右旋糖酐 20 10g ( 2% ( W/V% )) 部分水解明膠 B3 0.025g ( 0.005% ( W/V% )) 加注射用水至 500ml
[0059] 具體操作過程同實施例1。
[0060] 實施例7
[0061] 降纖酶凍干粉針（規格5U/支）
[0062] 降纖酶總量 5000U 右旋糖酐 20 30g ( 3% ( W/V% )) 甘氨酸（藥用） 20g ( 2% ( W/V% >) 加注射用水至 1000ml
[0063]
[0064] 用天平秤取30g右旋糖酐20,加適量注射用水溶解，加入5%的針用活性炭，共同 煮沸30-60分鐘，待冷卻到室溫后過濾除去活性炭，濾液待用。準確秤取甘氨酸20g，用適 量注射用水溶解后待用。取5000U的降纖酶原料凍干粉，用少量無菌生理鹽水靜置溶解，之 后加入上述處理好的右旋糖酐20溶液和甘氨酸溶液合并混勻，用注射用水定容至1000ml， 用0. 22 μ m的濾膜濾器過濾除菌，處理好的藥液按1. 0ml/支無菌分裝到處理好的2R西林 瓶中，加膠塞，入凍干機凍干，凍干結束后，壓塞、乳蓋、貼簽備用。
[0065] 實施例8
[0066] 降纖酶凍干粉針（規格10U/支）
[0067] 降纖酶總量 5000 U 右旋糖酐 20 30g ( 3% ( W/V% )) 甘氨酸（藥用） 20g ( 2% ( W/V% )) 部分水解明膠 B6 200mg ( 0.02% ( W/V% )) 加注射用水至 1000ml
[0068] 用天平秤取30g右旋糖酐20,加適量注射用水溶解，加入5%的針用活性炭，共 同煮沸30-60分鐘，待冷卻到室溫后過濾除去活性炭，濾液待用。準確秤取部分水解明膠 200mg和甘氨酸20g，用適量注射用水溶解后待用。取5000U的降纖酶原料凍干粉，用少量 無菌生理鹽水靜置溶解，之后加入上述處理好的右旋糖酐20溶液和部分水解明膠溶液合 并混勻，用注射用水定容至1000ml。后續步驟同實例7。
[0069] 試驗例一各種不同保護劑組合對降纖酶注射液酶活力的保護作用
[0070] 表-1
[0071]
【權利要求】
1. 一種穩定藥物組合物的輔劑，其特征在于，所述輔劑含有下述成分： 右旋糖酐含量為1% -5% (W/V% )和酶活力保護劑；w/v%為單位體積藥物組合物內 含有的該物質的質量； 所述的酶活力保護劑為小分子酶活力保護劑、大分子酶活力保護劑或小分子酶活力保 護劑和大分子酶活力保護劑的組合。
2. 根據權利要求1所述的穩定藥物組合物的輔劑，其特征在于，所述小分子酶活力保 護劑為甘露醇或甘氨酸，其含量為〇. 1% -5% (W/V% )。
3. 根據權利要求1所述的穩定藥物組合物的輔劑，其特征在于，所述的大分子酶活力 保護劑為部分水解明膠或水解明膠，其含量為0. 001% -0. 5% (W/V% )。
4. 根據權利要求3所述的穩定藥物組合物的輔劑，其特征在于：所述的部分水解明膠 或水解明膠是由十八種氨基酸組成的、其分子量在3000-20000的多肽，其中以甘氨酸的含 量最高，通過多重保護機制使得降纖酶制劑的酶活力保持穩定。
5. 含有權利要求1-4所述輔劑的藥物組合物，其特征在于，所述組合物含有權利要求 1-4所述的酶活力保護劑成分或其組合； 降纖酶 右旋糖酐：1% -5% (W/V% ); 酶活力保護劑：小分子酶活力保護劑、大分子酶活力保護劑或小分子酶活力保護劑和 大分子酶活力保護劑的組合。
6. 根據權利要求5所述的藥物組合物，其特征在于：所述小分子酶活力保護劑為甘露 醇或甘氨酸，其含量為〇. 1% -5% (W/V% )。
7. 根據權利要求5或6所述的藥物組合物，其特征在于：所述的大分子酶活力保護劑 為部分水解明膠或水解明膠，其含量為0. 001% -0. 5% (W/V% )。
8. 根據權利要求7所述的藥物組合物，其特征在于：所述部分水解明膠或水解明膠是 由十八種氨基酸組成的、其分子量在3000-20000的多肽，其中以甘氨酸的含量最高，通過 多重保護機制使得降纖酶制劑的酶活力保持穩定。
9. 權利要求5-8中任一項所述的藥物組合物，該組合物為凍干粉針或注射液。
10. 權利要求5-8所述的藥物組合物在制備治療或預防血栓栓塞性疾病的藥物中的用 途。
【文檔編號】A61P7/02GK104083756SQ201410348725
【公開日】2014年10月8日 申請日期:2014年7月22日 優先權日:2014年7月22日
【發明者】張慶宇 申請人:張慶宇