一種疫苗保護劑預混輔料及其制備方法
【專利摘要】本發明提供了一種疫苗保護劑預混輔料及其制備方法，它包括如下重量配比的成分：海藻糖：50-100份、蔗糖：5-50份、乳糖：5-40份、氯化鈉：8.5份、十二水合磷酸氫二鈉：3.5份、二水合磷酸二氫鈉：0.25份。該預混輔料不含明膠和人血白蛋白，組成成分之間不會發生相互反應，使用方便，可直接用于疫苗的制備，在疫苗制備和貯存過程中能夠有效起到保護作用。
【專利說明】一種疫苗保護劑預混輔料及其制備方法
【技術領域】
[0001] 本發明涉及一種疫苗保護劑預混輔料及其制備方法，屬于疫苗生產工藝技術生物 醫藥領域。
【背景技術】
[0002] 為了便于活菌疫苗的運輸和儲存，通常將其制成凍干制劑。為了確保活菌疫苗在 凍干過程以及在運輸和儲存過程中的活菌率，現有技術在制備活菌疫苗的過程中一般會使 用凍干保護劑。傳統的凍干保護劑配方中往往含有明膠或人血白蛋白，但是使用明膠和人 血白蛋白有一定的安全隱患，也受到一定的限制。
[0003] 明膠或明膠的衍生物能直接引起被接種者的變態反應。明膠既可以引起細胞介導 免疫反應，也可以引起非細胞介導免疫反應；另外，明膠中細菌內毒素含量很高，可導致人 體產生發熱反應。國家藥典會病毒類制品專業委員會也在2007年7月17日至7月19日 北京會議紀要中明確要求，"作為穩定劑成分的明膠注射到人體后可發生過敏反應，生產企 業應進行取代明膠成分的相關研究工作，以進一步提高制品的安全性"。而且明膠批間質量 差異較大，不利于制得均一穩定的產品。人血白蛋白雖然源于檢測合格的健康人血，但是受 到現在檢測技術水平的限制，可影響某些病原體的檢測如肝炎方面等，由此可能對疫苗造 成隱性污染，最終對被接種者造成潛在的危害。人血白蛋白來源于健康人血，其來源有限。 因此必須開發無明膠、人血白蛋白的凍干保護劑。
[0004] 目前，已有報道利用其它合適的物質替代明膠和人血白蛋白作為疫苗的保護劑， 如專利CN 102228687B報道了一種不含明膠、不含人血白蛋白的冷凍干燥甲型肝炎減毒活 疫苗保護劑及其制備方法。該保護劑含有海藻糖、右旋糖酐40、L-半胱氨酸、精氨酸、谷氨 酸、甘氨酸、氯化鎂、硫酸鎂、山梨醇、甘露醇、三羥甲基氨基甲烷。專利CN 102921002 A公 開了一種乙型腦炎減毒活疫苗凍干保護劑，該凍干保護劑以Earl's液為溶劑，各成分的濃 度為：蔗糖 6 - 28g/100ml、海藻糖 3 -12g/100ml、右旋糖酐 5 - 24g/100ml。
[0005] 以上報道雖然解決了明膠和人血白蛋白引起的問題，但是在制備疫苗的過程中， 需臨時選擇各種成分配置穩定劑，而且要花費大量的時間研究所配置的穩定劑對活菌疫苗 的穩定性能，以及各添加成分之間是否會發生相互作用，這不利于新型疫苗的研制和快速 投產。
[0006] 在片劑制備領域，近年來出現了一種新型的藥用輔料一預混輔料，它并不是對幾 種單一的藥用輔料簡單的相互混合，而是通過大量的試驗，將多種具備特定功能的單一輔 料通過優選配比以及特殊工藝，制成一種整體發揮要求性能的輔料。預混輔料僅進行物理 形態的改變，并未產生化學性質的變化。因此，預混輔料保留原來各個成分的輔料性質，是 一種多功能的混合體。
[0007] 目前，未見疫苗保護劑預混輔料的相關報道。本發明提供了一種疫苗保護劑預混 輔料及其制備方法，該預混輔料不含明膠和人血白蛋白，組成成分之間不會發生相互反應， 實際使用方便，而且該預混輔料較各輔料單一混合具有更優的凍干保護效果。
【發明內容】
[0008] 本發明提供了一種疫苗保護劑預混輔料及其制備方法，該預混輔料組成簡單，使 用方便，可直接用于疫苗的制備，在疫苗制備和貯存過程中能夠有效起到保護作用。
[0009] 本發明的有益之處是通過以下步驟實現的： 一種疫苗保護劑預混輔料包括如下重量配比的成分：海藻糖：50-100份、鹿糖：5-50 份、乳糖：5-40份、氯化鈉：8. 5份、十二水合磷酸氫二鈉：3. 5份、二水合磷酸二氫鈉：0. 25 份。
[0010] 一種疫苗保護劑預混輔料的制備方法，包括以下步驟制成： a、糖液制備：分別稱取海藻糖、蔗糖、乳糖，加入純化水溶解，再加入活性炭，攪拌 30min，再通過0. 22 μ m的過濾膜過濾，濾液再經裝有中空纖維超濾膜的超濾器超濾； 步驟a海藻糖、蔗糖、乳糖的添加量為：海藻糖50-100份、蔗糖5-50份、乳糖5-40份。 [0011] b、鹽溶液制備：分別稱取氯化鈉、十二水合磷酸氫二鈉、二水合磷酸二氫鈉，加入 純化水溶解，再加入活性炭，攪拌30min，再通過0. 22 μ m的過濾膜過濾，濾液再經裝有中空 纖維超濾膜的超濾器超濾； 步驟b氯化鈉、十二水合磷酸氫二鈉、二水合磷酸二氫鈉的添加量為：氯化鈉8. 5份、 十二水合磷酸氫二鈉3. 5份、二水合磷酸二氫鈉0. 25份。
[0012] 步驟a和步驟b的目的是除去各原料有色雜質以及內毒素，其中所述的中空纖維 超濾膜的分子截留范圍為5000 - 10000 ;所述的活性炭，其用量一般為溶液中含有成分質 量的0. 5%。
[0013] C、將步驟a所得糖液和步驟b所得鹽溶液分別在真空壓為-0. 085Mpa，溫度為 50°C的條件下，濃縮結晶得混合糖晶和混合鹽。
[0014] 將混合糖晶是3中糖共結晶生成，混合鹽是三種鹽共結晶生成，共結晶的有益之 處在于使各單一物料能夠成分混合。
[0015] d、將步驟c所得的混合鹽加純化水溶解后，再加入步驟c所得的混合糖晶，溶解后 經噴霧干燥既得。
[0016] 步驟d中混合鹽和混合糖分的添加質量比為1:4. 5~8。
[0017] 按上述組成和方法制得的疫苗保護劑預混輔料在使用時，只需加入預混輔料8-14 倍重量的注射用水，再加入一定量的疫苗，即可制成相應的疫苗制劑。
[0018] 本發明提供了一種疫苗保護劑預混輔料及其制備方法，其特點在于： (1)本發明提供的疫苗保護劑預混輔料包含明膠、人血白蛋白成分，而且預混輔料中各 組成成分均無毒，使用更加安全； (2 )預混輔料可直接用于制備疫苗，疫苗生產企業和研制單位使用更加方便。
[0019] (3)本發明提供的預混輔料經共結晶、噴霧干燥制得，使用時較單一輔料簡單混合 具有更優的效果。
[0020] 具體實施實例 以下結合數個實施例進一步說明本發明以及創新之處。應當理解，所列出的實施例僅 用于具體說明本發明而非對本發明的進一步限定，本領域技術人員在充分理解之后可以對 實施例進行適當調整，這些仍然在本發明的保護范圍之內。
[0021] 實施例1 糖液準備：分別稱取海藻糖60g、蔗糖10g、乳糖10g，加入200ml純化水溶解，再加入 活性炭〇. 4g，攪拌30min，再通過0. 22 μ m的過濾膜過濾，濾液再經裝有分子截留范圍為 5000-10000d的中空纖維超濾膜的超濾器超濾。
[0022] 鹽溶液制備：分別稱取氯化鈉8. 5g、十二水合磷酸氫二鈉3. 5g、二水合磷酸二氫 鈉0. 25g，加入50ml純化水溶解，再加入活性炭0. lg，攪拌30min，再通過0. 22 μ m的過濾膜 過濾，濾液再經裝有分子截留范圍為5000 - 10000d的中空纖維超濾膜的超濾器超濾。
[0023] 將以上所得糖液和所得鹽溶液分別在真空壓為_0.085Mpa，溫度為50°C的條件 下，濃縮結晶得混合糖晶和混合鹽。
[0024] 將以上所得的混合鹽10g加50ml純化水溶解后，再加入所得的混合糖晶70g，加適 量水完全溶解后，經過噴霧裝置進行霧化，霧化裝置可以采用壓力式噴霧器、氣流式噴霧器 和尚心式噴霧器。霧化后的料液再干燥塔中進行干燥，干燥溫度為60_80°C，干燥后的粉末 收集到專用容器中既得預混輔料。
[0025] 實施例2 取實施例1疫苗保護劑預混輔料l〇g，加入l〇〇ml注射用水，0. lum過濾除菌，4°C備 用。再按每人份裝量〇. 6ml，內含病毒量7. 00-7. 38 lgCCID5(l/ml，加入甲型肝炎病毒活病毒 原液，攪拌混勻后所得到疫苗混合物于-20°C- -50°C的溫度預冷3-5小時，凍干箱擱板溫 度-35°C- -50°C，開真空、升華，二次凍干箱擱板溫度15°C- 30°C，即制成冷凍干燥甲型肝 炎減毒活疫苗。
[0026] 實施例3 取與實施例1疫苗保護劑預混輔料等組成等量的各輔料混合后，加入l〇〇ml注射用水， 按實施例2的方法制得冷凍干燥甲型肝炎減毒活疫苗。
[0027] 實施例4 按本發明方法冷凍干燥制成的凍干甲型肝炎減毒活疫苗，感染性滴度檢測證明，冷凍 干燥后與凍前相比較，疫苗的病毒感染性滴度沒有明顯下降，預混輔料配方制得疫苗的病 毒感染性滴度下降幅度明顯低于原含明膠的生產配方，表明本發明提供的疫苗保護劑在凍 干過程中的保護效果較好。同時，預混輔料病毒感染性滴度下降幅度明顯低于單一輔料簡 單混合，對比結果表明本發明提供的預混輔料使用時較單一輔料簡單混合具有更優的效 果。見表1。
[0028] 表1.實施例2、3與原含明膠的生產配方的比較
【權利要求】
1. 一種疫苗保護劑預混輔料，其特征在于，它包括如下重量配比的成分：海藻糖： 50-100份、蔗糖：5-50份、乳糖：5-40份、氯化鈉：8. 5份、十二水合磷酸氫二鈉：3. 5份、二水 合磷酸二氫鈉：〇. 25份。
2. -種疫苗保護劑預混輔料的制備方法，其特征在于，它包括以下步驟制成： a、 糖液制備：分別稱取海藻糖、蔗糖、乳糖，加入純化水溶解，再加入活性炭，攪拌 30min，再通過0. 22 μ m的過濾膜過濾，濾液再經裝有中空纖維超濾膜的超濾器超濾； b、 鹽溶液制備：分別稱取氯化鈉、十二水合磷酸氫二鈉、二水合磷酸二氫鈉，加入純化 水溶解，再加入活性炭，攪拌30min，再通過0. 22 μ m的過濾膜過濾，濾液再經裝有中空纖維 超濾膜的超濾器超濾； c、 將步驟a所得糖液和步驟b所得鹽溶液分別在真空壓為-0. 085Mpa，溫度為50°C的 條件下，濃縮結晶得混合糖晶和混合鹽； d、 將步驟c所得的混合鹽加純化水溶解后，再加入步驟c所得的混合糖晶，溶解后經噴 霧干燥既得。
3. 根據權利要求2所述的一種疫苗保護劑預混輔料的制備方法，其特征在于，步驟a海 藻糖、蔗糖、乳糖的添加量為：海藻糖50-100份、蔗糖5-50份、乳糖5-40份。
4. 根據權利要求2所述的一種疫苗保護劑預混輔料的制備方法，其特征在于，步驟b氯 化鈉、十二水合磷酸氫二鈉、二水合磷酸二氫鈉的添加量為：氯化鈉8. 5份、十二水合磷酸 氫二鈉3. 5份、二水合磷酸二氫鈉0. 25份。
5. 根據權利要求2所述的一種疫苗保護劑預混輔料的制備方法，其特征在于，步驟a和 步驟b所述的中空纖維超濾膜的分子截留范圍為5000 - 10000。
6. 根據權利要求2所述的一種疫苗保護劑預混輔料的制備方法，其特征在于，步驟d中 混合鹽和混合糖分的添加質量比為1:4. 5~8,噴霧干燥溫度為60-80°C。
7. 根據權利要求1或2其中之一，其特征在于，所述的一種疫苗保護劑預混輔料在使用 時，只需加入預混輔料8-14倍重量的注射用水，再加入一定量的疫苗，即可制成相應的疫 苗制劑。
【文檔編號】A61P31/22GK104083767SQ201410309647
【公開日】2014年10月8日 申請日期:2014年7月2日 優先權日:2014年7月2日
【發明者】帥放文, 王向峰, 章家偉, 曾三平 申請人:湖南爾康制藥股份有限公司