預防并減少細菌粘附于口腔表面的口腔用組合物的制作方法
【專利摘要】本發明涉及預防并減少細菌粘附于口腔表面的口腔用組合物。特別是，本發明涉及一種含有抗粘著劑，優選半胱氨酸蛋白酶且最優選無花果蛋白酶的口腔用組合物。另一方面，半胱氨酸蛋白酶與一種或多種成分例如抗菌劑和表面活性劑聯用。抗粘著劑減緩受試者口腔和牙菌斑形成物質之間的相互作用。
【專利說明】預防并減少細菌粘附于口腔表面的口腔用組合物
本申請是申請日為2005年11月28日，申請號為200580048166.X，國際申請號為PCT/US2005/043062,發明名稱為“預防并減少細菌粘附于口腔表面的口腔用組合物”的發明專利申請的分案申請。
相關申請的交叉引用
[0001]本申請要求保護2004年12月16日申請的美國臨時專利申請系列號60/636，788和60/636，787的優先權，其全部內容通過引用結合到本文中。
發明背景
[0002]牙菌斑或牙菌斑生物膜是一種在口腔例如組織及牙齒表面形成的柔軟沉積物，由細菌、唾液和食物副產物組成。牙菌斑牢固的粘附于不規則或不連續的地點(例如附于牙垢、位于齦線、舌表面及牙縫隙內等)。除了不美觀外，牙菌斑還與齦炎和其它形式牙周病的發生有關。
[0003]口腔細菌中大部分是保護性生物膜的一部份，本質上使其耐受大多數治療。即使顯示舌上的細菌多達口腔中細菌的50%，但很少有人刷牙后清洗舌頭。另外對于許多人來說，由于咽反射，刷或擦舌頭是困難的。因此，非機械性的清洗舌頭對于不能用機械裝置清洗的人是非常需要的。
[0004]本領域中已經建議許多種類的藥物以阻止蝕斑形成且防止與蝕斑形成有關的口腔感染和牙病的產生。
[0005]雖然許多先有技術涉及抗菌潔牙劑和口腔用組合物，但本領域仍需要制備一種能夠提高阻止牙菌斑積聚效應的產品。
發明簡述
[0006]本發明包括一種含有抗粘著劑(ant1-adhes1n agent),優選半胱氨酸蛋白酶且最優選無花果蛋白酶的口腔用組合物。另一方面，半胱氨酸蛋白酶與一種或多種成分例如抗菌劑和表面活性劑聯用。抗粘著劑減緩口腔表面和牙菌斑形成物質例如細菌之間的相互作用。
發明詳述
[0007]本發明提供一種特定類型的酶，用于預防、阻止或至少抑制牙菌斑形成物質包括生物物質、化學物質、微生物及細菌結合、粘附或附著到口腔表面。本發明使用的酶抑制形成牙菌斑的細菌層的生成。確信這種酶通過附著到口腔表面包括柔軟組織從而抑制牙菌斑的生長或其進一步生長。文中術語“抗粘著”與“抗附著”可互換使用。本發明中所用適當的酶包括抗粘著蛋白酶，優選半胱氨酸蛋白酶且最優選選自無花果蛋白酶、番木瓜蛋白酶和南極磷蟲下蛋白酶(krillase)的蛋白酶。優選的，抗粘著劑包含無花果蛋白酶和一種或多種其它酶，例如其它抗粘著酶或另一類型的酶例如菠蘿蛋白酶、糜蛋白酶、alcalase、淀粉酶(amalysecs)、葡萄糖氧化酶、纖維素酶(cellusases)、脂肪酶(Iipsases),和/或除抗粘著半胱氨酸蛋白酶外的其它蛋白酶。
[0008]本發明所用的無花果蛋白酶可通過本領域已知的任何方法制備(Ficin for usein the invent1n may be obtained by any means from the.)。優選通過將無花果屬(Ficus)植物包括Ficus glabrata的乳汁干燥并過濾得到。
[0009]組合物中存在的抗粘著劑的量依賴于各種應用。在組合物中或適當的載體中其存在的量按重量計小于100份。所需抗粘著劑的量按重量計每100份組合物中至少占0.01份。一般而言，以總組合物重量按100份計為基礎，每100份中存在的抗粘著酶制劑的量按重量計為約0.01-約10份。更加合乎需要的是其至少為0.05份，且優選適于糊劑組合物的 0.03-0.3 份。
[0010]一種或多種其它抗牙菌斑藥劑可以抗牙菌斑有效總量存在。適當的藥劑包括但不限于二價錫鹽、銅鹽、鎂鹽和銀鹽，聚二甲基娃氧燒共聚多元醇(dimethicone copolyol)例如十六烷基聚二甲基硅氧烷共聚多元醇、葡萄糖淀粉酶、葡萄糖氧化酶、脲、乳酸鈣、甘油磷酸鈣、聚丙烯酸鍶及螯合劑例如檸檬酸、酒石酸及其堿金屬鹽。
[0011]組合物可含有其它添加劑和物質，包括任何需要的活性劑或美容劑和/或常規的口腔護理添加劑或賦形劑。例如可存在的抗菌劑包括氯化芐乙銨、二異丁基苯氧乙氧乙基二甲基芐基氯化銨及氯化十六烷基吡啶爲令以及在授予Gaffar等的美國專利第5，776，435號列出的藥劑，其通過弓I用結合到本文中。
[0012]本發明的組合物也可包括研磨劑例如二氧化硅或珍珠巖，潤濕劑例如甘油、山梨醇、木糖醇和/或丙二醇，增稠劑、表面活性劑、氟離子源、合成的陰離子聚羧酸鹽、芳香劑、抗結石劑(antitartar agents)、著色劑、脫敏劑(例如硝酸鉀)、增白劑、防腐劑、娃酮和葉綠素化合物。如果存在這些添加劑，加入到口腔用組合物中的量要基本不損害所需的性質和特征。
[0013]本發明的口腔護理組合物可以任何常規方式制成。制備技術需根據所需最終遞送形式進行變動，這些形式可包括任何已知的口腔護理制劑，例如糊劑、凝膠劑、混懸劑、糖果劑(口香糖、糖果、錠劑、糖錠)、條狀物(tapes)、薄膜物、清洗與洗滌劑、片劑。
[0014]例如可如下制備糊劑:攪拌下在常規混合器中將潤濕劑(例如甘油、山梨醇、丙二醇和聚乙二醇)分散在水中。向分散體中加入酶或酶有機增稠劑(例如黃原膠)、任何陰離子聚羧酸鹽、任何鹽(例如氟化鈉防齲藥劑)、焦磷酸鈉、三聚磷酸鈉防牙垢鹽及任何增甜齊U，攪拌所得混合物直至形成均勻凝膠相。向凝膠相中加入色素(例如T12)及任何所需酸或堿以調節pH。混合這些成分直到得到均勻相。然后將該混合物轉移至高速/真空混合器中，其中向此混合物中加入無機二氧化硅增稠劑和表面活性劑。在這時加入低油吸收的二氧化硅研磨劑與組合物中使用的其它研磨劑。然后在約20-50毫米汞柱真空，優選約30毫米汞柱下高速混合該混合物5-30分鐘。所得產物為均勻的、半固體、可擠出的糊劑或凝膠產物。
[0015]本發明提供了維持并穩定蛋白酶活性或至少使活性損失最小化的有用的制劑。有利的，抗菌劑與蛋白酶在制劑中聯用而提供基于抗粘著及抗菌功能性的協同結果。本發明組合物功能包括抗粘著與牙菌斑分解功能。在一個方面中，優選無花果蛋白酶用于前者而優選番木瓜蛋白酶用于后者。在另Iv方面中，在人臨床研究中無花果蛋白酶和番木瓜蛋白酶均顯示出傳遞抗牙菌斑效力的抗粘著作用模式，且無花果蛋白酶比番木瓜蛋白酶效力更高。本發明提供了具有對于口腔牙菌斑細菌抗粘著活性的蛋白酶及適于口腔治療的組合物，其包括具有其它同樣穩定蛋白酶功能的治療載體。總之，優選的得自無花果樹的蛋白酶(無花果蛋白酶)在單純溶液中、在液體潔牙劑中以及在完全糊劑中證實具有抗粘著活性。該化合物顯示出優于陰性對照的預防單一細菌物種及混合的培養物種粘著在聚苯乙烯表面、羥磷灰石表面及真牙表面的作用。此化合物進一步顯示出通過降低這種表面的表面能而改良牙齒樣表面即鍺棱柱的活性。這種化合物可單獨使用或作為混合物與其它酶或抗菌劑合用。本發明的口腔用組合物能用于治療任何有口腔的受試者，包括生物、人和動物，且口腔包括嘴、舌、組織、牙、腭和釉質等。這種口腔用組合物可通過任何方法且不限于任何特定的方法接觸口腔而應用到口腔中。實例包括液體載體例如口腔清洗劑、糊劑載體例如牙膏、潔牙劑、口含珠(mouth beads)及清新劑、口香糖、玩具、咀嚼片、可涂覆(paint-on)組合物和凝膠、消費品、可食用品及糖果劑。
實施例1-含有抗粘著酶的潔牙劑制劑
[0016]將酶配制在二氧化硅基質制劑中。表I提供了示例性潔牙劑制劑。除非另有說明，所有值為重量百分比。制劑中關鍵的處方成分為按重量占0.226%的無花果蛋白酶、番木瓜蛋白酶和南極磷蝦蛋白酶的酶，按重量占25 %的用于高質量清洗的混合二氧化硅研磨劑系統，還有按重量各自占0.5%的SLS/1.5%的多聚醇(pluronic)和1%的甜菜堿的混合表面活性劑系統。也包括在酶存在下穩定的薄荷-留蘭香香料。分別選定各種組分用于賦予特性(例如泡沫、香味、口感和美學要求)而不損害酶的活性。對于酶濃度，在選擇臨床制劑前進行用來選擇酶有效水平的劑量反應研究。基于體外研究，在GMP條件下在OPTC( 口腔治療技術中心(Oral ProcessTechnology Center))中制造臨床用制品。
表1:含有酶的潔牙劑制劑
【權利要求】
1.一種包含由無花果蛋白酶和番木瓜蛋白酶組成的抗粘著劑的口腔用組合物，所述抗粘著劑以有效減緩受試者口腔與牙菌斑形成物質之間相互作用的量存在。
2.權利要求1的組合物，其中，口腔用組合物按100重量份計，則抗粘著劑的量最高至10份。
3.權利要求1的口腔用組合物，其中所述抗粘著劑的存在量為按重量計每100份組合物中至少占0.01份。
4.權利要求3的組合物，其中，口腔用組合物按100重量份計，則抗粘著劑的量為0.01-10 份。
5.權利要求3的組合物，其中，口腔用組合物按100重量份計，則抗粘著劑的量為至少0.05 份。
6.權利要求3的組合物，其中，口腔用組合物按100重量份計，則抗粘著劑的量為0.03-0.3 份。
7.一種包含含有無花果蛋白酶的抗粘著劑的口腔用組合物，所述抗粘著劑以有效減緩受試者口腔與牙菌斑形成物質之間相互作用的量存在。
8.權利要求7的組合物，其中，口腔用組合物按100重量份計，則抗粘著劑的量最高至約10份。
9.一種包含按重量計每100份組合物中至少占0.01份的抗粘著劑的口腔用組合物，其中所述抗粘著劑包含凝乳活性高于番木瓜蛋白酶的半胱氨酸蛋白酶。
10.權利要求9的組合物，其中，口腔用組合物按100重量份計，則抗粘著劑的量為約0.01-約 10 份。
11.權利要求9的組合物，其中，口腔用組合物按100重量份計，則抗粘著劑的量為至少約0.05份。
12.權利要求9的組合物，其中，口腔用組合物按100重量份計，則抗粘著劑的量為約0.03-約 0.3 份。
13.權利要求9的組合物，其中抗粘著劑包含多于一種半胱氨酸蛋白酶。
14.權利要求13的組合物，其中半胱氨酸蛋白酶包含與番木瓜蛋白酶和南極磷蝦蛋白酶中至少一種聯用的無花果蛋白酶。
15.權利要求13的組合物，其進一步包括至少一種不同于半胱氨酸蛋白酶的酶。
16.權利要求15的組合物，其中所述不同的酶是至少一種選自淀粉酶、脂肪酶、核酸酶和其它蛋白酶的酶。
17.一種減少受試者口腔中牙菌斑生長的方法，所述方法包括使口腔與有效量的抗粘著蛋白酶接觸，從而減緩受試者口腔與牙菌斑形成物質之間的相互作用。
18.—種包含抗粘著劑的口腔用組合物，所述抗粘著劑包含無花果蛋白酶和抗菌劑。
19.權利要求7的組合物，其中抗粘著劑進一步包含至少一種番木瓜蛋白酶和南極磷蝦蛋白酶。
20.權利要求7的組合物，其中抗菌劑包含陽離子抗菌劑。
21.權利要求7的組合物，其中抗菌劑包含季銨化合物。
22.權利要求7的組合物，其中抗菌劑包含鹵化烷基吡啶5。
23.一種口腔用組合物，所述組合物具有至少一種包括十六烷基吡啶鎌的抗菌劑及至少一種凝乳活性高于番木瓜蛋白酶的抗粘著蛋白酶。
【文檔編號】A61K8/49GK104127328SQ201410298607
【公開日】2014年11月5日 申請日期:2005年11月28日 優先權日:2004年12月16日
【發明者】H.M.特里維迪, 徐韜, K.帕納利干 申請人:高露潔-棕欖公司