復合超分子吳茱萸堿納米粒及其制備方法

復合超分子吳茱萸堿納米粒及其制備方法
【專利摘要】本發明屬于藥物制劑領域。本發明涉及復合超分子吳茱萸堿納米粒的配方及制備方法。本發明通過制備得到的復合超分子吳茱萸堿納米粒提高了吳茱萸堿的生物利用度，用于腫瘤及炎癥治療。
【專利說明】復合超分子吳茱萸堿納米粒及其制備方法
【技術領域】
[0001]本發明屬于醫藥制劑領域，本發明涉及復合超分子吳茱萸堿納米粒的配方及制備方法。
【背景技術】
[0002]吳茱萸始載于《神農本草經》，為蕓香科植物吳茱萸石虎或疏毛吳茱萸的干燥近成熟果實。吳茱萸堿是該植物中的主要生物堿，國內外研究表明吳茱萸堿具有擴張血管抗炎鎮痛減肥，調節體溫，抗腫瘤以及抑制癌細胞轉移等藥理學活性，但吳茱萸堿的水溶性極差，生物利用度低，吳茱萸堿其大鼠口服生物利用度僅為0.1 %。磷脂復合物作為新型給藥系統，可增加中藥活性成分的口服吸收，提高其生物利用度。文獻(柳珊，譚群友，王紅，廖紅，張景勅.吳茱萸堿磷脂復合物的制備表征及體外抗腫瘤活性的研究.中國藥學雜志.2012,47 (4):517-523)通過將吳茱萸堿制備成吳茱萸堿磷脂復合物，可提高藥物溶解度3.4倍，促進了藥物的吸收，有利于藥物生物利用度的提高。羥丙基-β-環糊精是β-環糊精衍生物，包合化合物可望提高被包合物的穩定性、水溶性和生物利用度。
[0003]超分子藥物指兩個或兩個以上的分子通過非共價鍵形成的、用于預防、診斷和治療疾病的復合物。藥物的磷脂復合物及環糊精包合物均屬于超分子藥物。磷脂復合吳茱萸堿可稱為磷脂復合超分子吳茱萸堿。羥丙基-β -環糊精包合吳茱萸堿可稱為羥丙基環糊精包合超分子吳茱萸堿(目前尚未見羥丙基環糊精包合超分子吳茱萸堿的研究報道)。
[0004]經查詢專利及 文獻，目前尚未見同時采用磷脂復合技術和羥丙基環糊精包合技術增加任何藥物的生物利用度的研究報道，更無同時采用磷脂復合技術和羥丙基-環糊精包合技術制備吳茱萸堿磷脂復合羥丙基-環糊精包合納米粒(即復合超分子吳茱萸堿納米粒)的研究報道，更無將此復合超分子吳茱萸堿納米粒用于增加吳茱萸堿的生物利用度，提高抗癌活性的研究報道。

【發明內容】

[0005]本發明所要解決的技術問題是提供一種復合超分子吳茱萸堿納米粒及其制備方法。復合超分子吳茱萸堿納米粒載體改善了藥物的溶解性，促進了藥物的吸收，增加了藥物的生物利用度，提高了抗癌活性。本發明提供的復合超分子吳茱萸堿納米粒制備工藝簡單，成本較低，易于控制，易于工業化生產。
[0006]本發明提供的復合超分子吳茱萸堿納米粒，制劑中各組分重量百分比為:吳茱萸堿1-4.2份，羥丙基- β -環糊4.1-26.8份，磷脂7-83.1份，無水乙醇790份。本發明提供的復合超分子吳茱萸堿納米粒的制備方法如下:取處方量的吳茱萸堿、羥丙基_β -環糊精、磷脂，溶于無水乙醇中，60°C恒溫磁力攪拌5h反應后，旋轉蒸發除去無水乙醇，真空干燥除去殘留的無水乙醇，即得復合超分子吳茱萸堿納米粒。
[0007]用本發明制得的復合超分子吳茱萸堿納米粒平均粒徑約為180.Snm(圖1)。大鼠口服給藥后體內藥動學考察結果表明，相對于吳茱萸堿、吳茱萸堿羥丙基- β -環糊精包合物和吳茱萸堿磷脂復合物，復合超分子吳茱萸堿納米粒的曲線下面積增大，峰濃度增大，在體內的生物利用度明顯增加。復合超分子吳茱萸堿納米粒的曲線下面積AUCchoo (μ g/L*h)為(4085.86± 17.21)，分別約是吳茱萸堿(870.3±8.87)、吳茱萸堿羥丙基-β -環糊精包合物(2166.72±25.06)和吳茱萸堿磷脂復合物(2280.43± 13.69)的4.7、1.9、1.8倍。復合超分子吳茱萸堿納米粒生物利用度分別是吳茱萸堿、吳茱萸堿羥丙基-β -環糊精包合物和吳茱萸堿磷脂復合物的469 %、188 %、180 %。
[0008]大鼠口服灌胃給藥復合超分子吳茱萸堿納米粒、吳茱萸堿、吳茱萸堿羥丙基-β_環糊精包合物和吳茱萸堿磷脂復合物，給藥劑量均為250mg/kg。分別于給藥后不同時間眼眶后靜脈叢取血，置于肝素化試管中，混勻，離心(12000r/min) 5min,分離上層血漿，于-20°C冰箱中保存備用。血漿樣品的制備:吸取血漿樣品150 μ L，加入內標工作液(20 μ g.πι-1) 10 μ L，渦旋30s，加入氨水75 μ L，渦旋30s,加入乙醚750 μ L，渦旋3min (渦旋Imin后靜置30s,再渦旋Imin,如此三次，總計潤旋時間為3min),4000r.mirT1潤旋5min，取上清液600 μ L至離心管中，40°C水浴揮干乙醚后，加入甲醇100 μ L渦旋lmin，12000r ?mirT1離心1min,取上清液40 μ L進樣檢測。結果代入回歸方程計算血藥濃度,得到藥時曲線，見圖2。
[0009]本專利不同于通常研究報道的藥物的納米載體的制備。本發明首次同時采用磷脂復合技術和羥丙基-β -環糊精包合技術制備了復合超分子吳茱萸堿納米粒(即吳茱萸堿磷脂復合羥丙基-環糊精包合納米粒)，明顯促進了吳茱萸堿在體內的吸收，增加了吳茱萸堿的生物利用度。本發明首次通過同時利用藥用輔料磷脂和羥丙基-β_環糊精，同時采用磷脂復合技術和羥丙基_β -環糊精包合技術，制備成吳茱萸堿磷脂復合羥丙基-β -環糊精包合納米粒，即復合超分子吳茱萸堿納米粒。此新型遞藥系統兼具了磷脂復合物和環糊精包合物的優勢，一方面由于羥丙基-環糊精的存在，明顯改善了吳茱萸堿的溶解性能；另一方面磷脂的存在，促進了吳茱萸堿能更好地從親水環境轉移至親脂環境，可有效提高吳茱萸堿的體內吸收。復合超分子吳茱萸堿納米粒，融合了羥丙基環糊精和磷脂提高吳茱萸堿水溶性，促進吸收的優點，極大地提高了吳茱萸堿的生物利用度，延長了藥物作用時間，吳茱萸堿磷脂復合羥丙基_β -環糊精包合納米粒(即復合超分子吳茱萸堿納米粒)的體內生物利用度明顯高于游離吳茱萸堿、單獨采用磷脂復合技術得到的磷脂復合超分子吳茱萸堿、單獨采用羥丙基-環糊精包合技術得到的羥丙基-環糊精包合超分子吳茱萸堿，復合超分子吳茱萸堿納米粒為吳茱萸堿提供了一種生物利用度明顯提高的新型載藥系統，具有重要意義。
[0010]用本發明提供的復合超分子吳茱萸堿納米粒進行的細胞實驗表明復合超分子吳茱萸堿納米粒可明顯提高吳茱萸堿殺死腫瘤細胞的能力(見圖3)，復合超分子吳茱萸堿納米粒和吳茱萸堿抑制50%腫瘤細胞的藥物濃度分別約為1.25 μ M和20 μ Μ,即復合超分子吳茱萸堿納米粒的半數抑制濃度約為吳茱萸堿1/16。用本發明提供的復合超分子吳茱萸堿納米粒進行的動物實驗表明裸鼠靜脈注射后具有明顯的腫瘤靶向性及抑瘤效果。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0011]圖1為本發明制得的復合超分子吳茱萸堿納米粒的粒徑。[0012]復合超分子吳茱萸堿納米粒平均粒徑為180.8nm。
[0013]圖2為本發明制得的復合超分子吳茱萸堿納米粒的大鼠口服灌胃給藥后體內藥時曲線圖。縱坐標為藥物濃度，橫坐標為時間。
[0014]本發明制備得到的復合超分子吳茱萸堿納米粒較吳茱萸堿、吳茱萸堿羥丙基環糊精包合物、吳茱萸堿磷脂復合物有更大的曲線下面積，并且延長了作用了時間，復合超分子吳茱萸堿納米粒生物利用度分別是吳茱萸堿、吳茱萸堿羥丙基_β -環糊精包合物和吳茱萸堿磷脂復合物的469%、188%, 180%。其生物利用度不僅較游離藥物，而且相對于單一技術制備的吳茱萸堿羥丙基_β -環糊精包合物、吳茱萸堿磷脂復合物都有明顯的提聞。
[0015]圖3為分別給予肺癌Η446細胞等量的復合超分子吳茱萸堿納米粒、游離吳茱萸堿、空白納米粒后48小時的存活情況。縱坐標為腫瘤細胞的存活率，橫坐標為給予的制劑中的藥物濃度。復合超分子吳茱萸堿納米粒和吳茱萸堿抑制50%腫瘤細胞的藥物濃度分別約為1.25 μ M和20 μ Μ,即復合超分子吳茱萸堿納米粒的半數抑制濃度約為吳茱萸堿1/16，說明復合超分子吳茱萸堿納米粒可明顯提高吳茱萸堿殺死腫瘤細胞的能力。
【具體實施方式】
[0016]為了進一步說明本發明及其優點，給出了下列特定的實施例，應理解這些實施例僅有于具體說明而不是作為本發明范圍的限制。
[0017]實施例1:
[0018]配方中含有 的各組分的重量組成比為:吳茱萸堿1.1份，羥丙基-環糊精4.6份，磷脂10.3份，無水乙醇410份。
[0019]制備方法包括下列步驟:取處方量的吳茱萸堿、羥丙基-環糊精、磷脂，溶于無水乙醇中，60°C恒溫磁力攪拌5h反應后，旋轉蒸發除去無水乙醇，真空干燥除去殘留的無水乙醇，即得復合超分子吳茱萸堿納米粒。
[0020]實施例2:
[0021]配方中含有的各組分的重量組成比為:吳茱萸堿1.5份，羥丙基-β-環糊精12.1份，磷脂16.8份，無水乙醇600份。
[0022]制備方法基本同實施例1。
[0023]實施例3:
[0024]配方中含有的各組分的重量組成比為:吳茱萸堿1.8份，羥丙基-環糊精16.7份，磷脂12份，無水乙醇790份。
[0025]制備方法基本同實施例1。
[0026]實施例4:
[0027]配方中含有的各組分的重量組成比為:吳茱萸堿2.1份，羥丙基_β -環糊精5.3份，磷脂15.7份，無水乙醇800份。
[0028]制備方法基本同實施例1。
[0029]實施例5:
[0030]配方中含有的各組分的重量組成比為:吳茱萸堿1.9份，羥丙基-環糊精5.1份，磷脂7份，無水乙醇850份。[0031]制備方法基本同實施例1。
[0032]實施例6:
[0033]配方中含有的各組分的重量組成比為:吳茱萸堿2.5份，羥丙基-環糊精13.7份，磷脂10.6份，無水乙醇1200份。
[0034]制備方法基本同實施例1。
[0035]實施例7:
[0036]配方中含有的各組分的重量組成比為:吳茱萸堿3份，羥丙基-環糊精13.9份，磷脂52.1份，無水乙醇1350份。
[0037]制備方法基本同實施例1。
[0038]實施例8:
[0039]配方中含有的各組分的重量組成比為:吳茱萸堿3.1份，羥丙基_β -環糊精4.1份，磷脂9份，無水乙醇1400份。
[0040]制備方法基本同實施例1。
[0041]實施例9:
[0042]配方中含有的各組分的重量組成比為:吳茱萸堿3.5份，羥丙基-環糊精26.8份，磷脂37.5份，無水乙醇1800份。
[0043]制備方法基本同實施例1。
[0044]實施例10:
[0045]配方中含有的各組分的重量組成比為:吳茱萸堿4.1份，羥丙基-環糊精11.5份，磷脂34.8份，無水乙醇2100份。
[0046]制備方法基本同實施例1。
[0047]實施例11:
[0048]配方中含有的各組分的重量組成比為:吳茱萸堿4.0份，羥丙基-β -環糊精26.7份，磷脂83份，無水乙醇2000份。
[0049]制備方法基本同實施例1。
[0050]實施例12:
[0051]配方中含有的各組分的重量組成比為:吳茱萸堿4.2份，羥丙基-β-環糊精11.6份，磷脂15.6份，無水乙醇2400份。
[0052]制備方法基本同實施例1。
【權利要求】
1.一種復合超分子吳茱萸堿納米粒，其特征在于:制劑中各組分重量百分比為:
2.根據權利要求1所述的復合超分子吳茱萸堿納米粒的制備方法:取處方量的吳茱萸堿、羥丙基-β -環糊精、磷脂，溶于無水乙醇中，40-60°C恒溫磁力攪拌3-5小時反應后，旋轉蒸發除去無水乙醇，真空干燥除去殘留的無水乙醇，即得復合超分子吳茱萸堿納米粒。
【文檔編號】A61K9/14GK104027817SQ201410271043
【公開日】2014年9月10日 申請日期:2014年6月6日 優先權日:2014年6月6日
【發明者】張景勍, 羅見春, 劉宏明, 熊華蓉, 胡雪原, 譚群友, 何丹 申請人:重慶醫科大學