一種次血紅素三肽及其制備方法和用途
【專利摘要】本發明屬于一種化學藥物及藥物制劑的【技術領域】，特別是一種次血紅素三肽(Deuterohemin-β-Ala-His-Lys，DhHP-3)和衍生物及其新的醫藥用途，進一步講是在抗2型糖尿病藥物制備中的應用。本發明經過優選的次血紅素三肽及其衍生物具有降低血糖、膽固醇及甘油三酯活性，作為治療或預防抗2型糖尿病的藥物，具有細胞膜通透性好、血漿穩定性好、降糖效果好、副作用小等優點，具有較好的應用前景。
【專利說明】一種次血紅素三肽及其制備方法和用途
【技術領域】
[0001]本發明屬于一種化學藥物及藥物制劑的【技術領域】，特別涉及一種應用在抗2型糖尿病藥物制備中的次血紅素三肽及其制備方法。
【背景技術】
[0002]2型糖尿病(Type2Diabetes Mellitus, T2DM)是一種代謝綜合癥，主要表現為高血糖、胰島素抵抗和胰島β細胞功能障礙等，與I型糖尿病相比，其發病率高，也較為常見，約占糖尿病患者中90%。隨著2型糖尿病的發展，患者常會產生多種形式的并發癥，而這些并發癥常是導致死亡的直接因素，嚴重危害人類的生命和健康。
[0003]近年來 ，三價鐵卟啉-短肽化合物因具有較好的生物學活性而較受關注，該類三價鐵卟啉短肽化合物均是血紅素或次血紅素上的羧基與肽鏈上的氨基以酰胺鍵相連。中國專利CN02144902.3公開了三價鐵卟啉及衍生物-短肽化合物及其合成方法；中國專利CN200610131682.5報道了三價鐵卟啉短肽化合物在抗冠心病藥物制備中的用途。
[0004]進一步研究結果表明，這種血紅素或次血紅素與短肽相連構成的血紅素-短肽化合物或次血紅素-短肽化合物，由于短肽的氨基酸殘基組成和順序的差異，其空間構型、水溶性、過氧化物酶活性、細胞膜通透性及生物學活性也有所不同，甚至差異很大。
[0005]中國專利CN200910066991.2報道了一種次血紅素六肽(DhHP_6)化合物在抗腦缺血藥物制備中的用途，該化合物的缺點水溶性低、細胞膜通透性弱，導致其生物利用度低，并且在血漿中的穩定性差；中國專利CN201210448286.0報道了三價鐵卟啉-短肽化合物在抗2型糖尿病藥物制備中的應用，這些短肽化合物雖然表現出一定的降糖活性，然而，由于短肽的氨基酸殘基組成和順序的差異，仍然沒有克服上述的水溶性低、細胞膜通透性弱的缺點，并且降糖活性弱。
[0006]為了克服現有三價鐵卟啉-短肽化合物的不足，本發明提供了一種優選的以次血紅素和三肽相連構成的次血紅素三肽化合物及其衍生物，以及其在治療2型糖尿病方面的應用。
【發明內容】
[0007]本發明要解決的技術問題，是克服現有技術的不足，提供一種特定的次血紅素三肽Deuterohemin-β -Ala-His-Lys (DhHP-3)及其衍生物，以及在制備預防及治療2型糖尿病藥物中的應用。
[0008]本發明的次血紅素三肽的技術方案如下:
[0009]一種次血紅素三肽，是次血紅素(用Dh表示)的羧基與三肽分子中丙氨酸殘基上的氨基以酰胺鍵相連，其特征在于，所述的三肽，鏈接方式依次為β-Ala殘基、His殘基、Lys殘基；具體結構式(記為結構式I )是:
【權利要求】
1.一種次血紅素三肽，是次血紅素的羧基與三肽分子中丙氨酸殘基上的氨基以酰胺鍵相連，其特征在于，所述的三肽，鏈接方式依次為β -Ala殘基、His殘基、Lys殘基；具體結構式是:
2.根據權利要求1所述的次血紅素三肽，其特征在于，以次血紅素三肽結構為基礎，將單甲氧基聚乙二醇琥珀酰亞胺酯的衍生物與次血紅素三肽分子中賴氨酸殘基上的ε-氨基通過親核取代反應以酰胺鍵相連，得到一種單甲氧基聚乙二醇修飾的次血紅素三肽；具體結構式是:.?
3.根據權利要求1或2所述的次血紅素三肽，其特征在于，所述的血紅素三肽，制成載藥聚酯微球；所述的載藥聚酯微球，是用聚乳酸-羥基乙酸共聚物或聚乙二醇-聚乳酸-羥基乙酸共聚物對次血紅素三肽或血紅素三肽衍生物進行包埋得到。
4.一種權利要求1的次血紅素三肽的制備方法，是Fmoc固相合成方法，具體過程是: ①樹脂溶脹:稱取2mmolRink-NH2樹脂，加入50ml 二氯甲烷溶脹2h，抽濾，用二甲基甲酰胺洗滌樹脂6次； ②脫保護:加入100ml20%哌啶/二甲基甲酰胺溶液，于室溫震蕩30min，抽濾，用二甲基甲酰胺洗滌樹脂6次，用顯色劑檢測氨基脫保護情況，當樹脂顆粒全部變為藍色為脫保護完全； ③連接氨基酸:將Fmoc-β-Ala-OH、PyBOP, HOBT, NMM和Rink-NH2樹脂按摩爾比為.3:3:3:3:1依次加入反應器中，加入50ml 二甲基甲酰胺室溫震蕩lh，抽濾，用二甲基甲酰胺洗滌樹脂6次，用顯色劑檢測氨基酸連接情況，樹脂顆粒全部變為透明的黃色為反應完全；重復步驟②③，連接后續的Fmoc-His (Trt) -OH和Fmoc-Lys (Trt) -OH ； ④連接血紅素:重復步驟②，加入4倍過量的亞鐵血紅素反應3小時；抽濾，用二甲基甲酰胺洗滌樹脂6次； ⑤切割:加入100mL切割試劑；切割試劑組成為95%三氟乙酸、2.5%三異丙基硅烷和.2.5%水，室溫反應3h，抽濾，將濾液旋轉蒸； ⑥沉淀:將所得殘留液加入300ml乙醚中沉淀，離心，收集，得次血紅素三肽粗品1.7克； ⑦ 純化:得到的粗肽用反相制備液相色譜純化，流動相:0.1%三氟乙酸/10~90%乙腈/水梯度洗脫，接收主峰，蒸出溶劑旋轉蒸發，所得水溶液凍干，得產物次血紅素三肽純品1.5克。
5.一種權利要求1的次血紅素三肽在制備預防及治療2型糖尿病藥物中的應用。
6.根據權利要求5所述的次血紅素三肽的應用，其特征在于，在次血紅素三肽中，加入粘合劑、崩解劑、填充劑、潤滑劑、調味劑、增溶劑、溶劑、防腐劑、賦形劑中的一種或幾種，制備成片劑、丸劑、膠囊劑、沖劑、噴霧劑、口服液、混懸液、透皮吸收劑或注射劑。
7.根據權利要求5或6所述的次血紅素三肽的應用，其特征在于，次血紅素三肽與二甲雙胍、艾塞那肽、胰島素聯合用藥。
8.—種權利要求2的次血紅素三肽衍生物的應用，用于制備預防及治療2型糖尿病藥物。
9.根據權利要求8所述的次血紅素三肽衍生物的應用，其特征在于，在次血紅素三肽衍生物中，加入粘合劑、崩解劑、填充劑、潤滑劑、調味劑、增溶劑、溶劑、防腐劑、賦形劑中任意一種或幾種，制備成片齊?、丸齊?、膠囊齊?、沖齊?、噴霧劑、口服液、混懸液、透皮吸收劑或注射劑。
10.根據權利要求8或9所述的次血紅素三肽衍生物的應用，其特征在于，次血紅素三肽衍生物與二甲雙胍、艾塞那肽、胰島素聯合用藥。
【文檔編號】A61K47/48GK103965287SQ201410191151
【公開日】2014年8月6日 申請日期:2014年5月7日 優先權日:2014年5月7日
【發明者】王麗萍, 修志明, 雷莉妍, 李惟 申請人:吉林大學