Satb1在治療皮膚t細胞淋巴瘤中的應用的制作方法
【專利摘要】本發明公開了一種SATB1在治療皮膚T細胞淋巴瘤中的應用。本發明公開了將如下任一物質作為靶點的產品在制備預防和/或治療皮膚T細胞淋巴瘤的藥物中的應用：（1）SEQ?ID?No.1所示的蛋白；（2）SEQ?ID?No.2所示的DNA分子；（3）SEQ?ID?No.2中自5’末端起第1736位至第4024位核苷酸所示的DNA分子。SATB1蛋白特異性的表達于皮膚T細胞淋巴瘤皮損中CD30+的腫瘤性T細胞中，并發現SATB1蛋白的表達增高可以通過促進細胞周期進展而在皮膚T細胞淋巴瘤的發病和進展中起到重要的作用，SATB1作為靶點在治療皮膚T細胞淋巴瘤中具有廣泛的應用前景。
【專利說明】SATB1在治療皮膚T細胞淋巴瘤中的應用
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種蛋白及其基因作為靶點在治療皮膚T細胞淋巴瘤中的應用；特別是涉及SATBl在治療皮膚T細胞淋巴瘤中的應用，屬于生物【技術領域】。
【背景技術】[0002]皮膚T細胞淋巴瘤(Cutaneous T-cell lymphoma, CTCL)是結外非何杰金淋巴瘤(Extra-nodal Non-HodgkinJ s lymphoma, NHL)的一種，是原發于皮膚的由皮膚歸巢的T淋巴細胞克隆性增生造成的疾病，由一組臨床表現、病程預后、治療方法各異的疾病組成。其中蕈樣肉芽腫(Mycosis Fungoides，MF)和原發皮膚CD30+T淋巴細胞增殖性疾病(CD30+cutaneous lymphoproliferative disease, CD30+CLPD)是最常見的類型，兩者發病率占到CTCL的80%以上。⑶30+CLPD是表達⑶30的T淋巴細胞在皮膚中克隆性增生導致的疾病，包括臨床表現惰性的淋巴瘤樣丘疫病(Lymphomatoid papulosis, LyP),惡性的原發性皮膚間變性大細胞淋巴瘤(cutaneous anaplastic large cell lymphoma, PCALCL),以及兩者的中間類型。隨著人們對這一類疾病認識的不斷提高，皮膚T細胞淋巴瘤的發病率近年來快速增長。LyP的皮疹表現為伴壞死的的丘疹、結節，皮疹反復發作，可以自行消退，一般不需系統治療；但約10-20%的LyP患者反復遷延多年后會出現持續增長的斑塊和腫瘤，而進展到c-ALCL等侵襲性皮膚T細胞淋巴瘤。侵襲性的c-ALCL對常規化療抵抗，其中20%的患者會出現系統侵犯并導致死亡。雖然MF不屬于⑶30+CLPD，但是MF中仍然會出現⑶30+的異型T細胞,尤其在MF大細胞轉化(Mycosis fungoides large celltransformation, MF-LCT)中，MF-LCT組織病理表現為細胞明顯異型并有CD30+T淋巴瘤細胞出現，病情進展迅速，預后差。
[0003]LyP, PCALCL和MF起源于單個T淋巴細胞的優勢克隆，LyP能夠進展到PCALCL或MF已經得到證實。然而皮膚T細胞淋巴瘤中⑶30+的惡性腫瘤細胞的發生發展機制仍然不清楚。既往關于這方面的研究主要集中于TGF-β受體的突變及⑶30信號通路的改變。研究發現，與LyP相比，部分PCALCL細胞表面的TGF-β受體發生突變，從而擺脫了由⑶30+Τ細胞自身分泌的TGF-β對細胞生長的負性調節及凋亡誘導，使細胞出現凋亡抵抗，進而出現不受控制的腫瘤性增生。但后來人們發現，只有一少部分PCALCL患者的TGF- β受體出現突變，故而其并不是導致凋亡抵抗的主要原因。又有研究顯示:在對PCALCL細胞系的體外研究中觀察到，PCALCL細胞的CD30受體激活以后，細胞出現增殖增加及凋亡抵抗。故而提出LyP及PCALCL細胞中CD30下游不同通路的激活可能導致疾病的不同臨床表現及進展。但尚無研究表明LyP的皮損中有相應的細胞通路激活的證據。
[0004]SATBl (special AT-rich binding proteinl,特異性 AT 富集區結合蛋白 I)是一種組織特異性的核基質結合蛋白，主要表達于T細胞的前體——胸腺細胞上。SATBl以特殊的籠狀結構分布于細胞核骨架，通過與DNA的特殊區域相結合而調控染色質的高級結構，同時參與染色體重塑、組蛋白乙酰化、甲基化等過程，從而調控多種組織特異性基因的表達。SATBl在T細胞的正常發育中起到至關重要的作用。SATBl基因敲除小鼠的胸腺細胞發育停滯在⑶4+⑶8+雙陽性細胞階段，而不產生⑶4+或⑶8+單陽性的成熟T細胞。SATBl在成熟的外周T細胞分化中的作用近年來成為研究熱點。研究發現SATBl高表達于活化的⑶4+T細胞，而在無反應⑶4+T細胞及調節性T細胞中不表達。
[0005]SATBl在外周成熟T細胞及T細胞腫瘤中的作用尚不清楚。
【發明內容】
[0006]本發明的目的是提供一種SATBl在治療皮膚T細胞淋巴瘤中的應用，本發明提供的SATBl蛋白特異性的高表達于皮膚T細胞淋巴瘤中⑶30+的腫瘤性T淋巴細胞上，且其表達隨著疾病進展而增加。此外，SATBl蛋白的高表達對于維持腫瘤細胞的惡性生物學表型及疾病進展起到重要作用，抑制該基因的表達可以降低⑶30+CLPD細胞系(如Mac — I)的生存率以及體外克隆形成能力、阻滯細胞周期、促進細胞凋亡。
[0007]將如下任一物質作為靶點的產品在制備預防和/或治療皮膚T細胞淋巴瘤的藥物中的應用:
[0008](I) SEQ ID N0.1 所示的蛋白；
[0009](2) SEQ ID N0.2 所示的 DNA 分子；
[0010](3) SEQ ID N0.2中自5’末端起第1736位至第4024位核苷酸所示的DNA分子。
[0011]所述皮膚T細 胞淋巴瘤中具有⑶30+的腫瘤性T細胞。
[0012]將如下任一物質作為靶點的產品在制備抑制皮膚T細胞淋巴瘤中CD30+的腫瘤性T細胞生長和/或增殖的藥物中的應用也屬于本發明的保護范圍:
[0013](I)SEQ ID N0.1 所示的蛋白；
[0014](2) SEQ ID N0.2 所示的 DNA 分子；
[0015](3) SEQ ID N0.2中自5’末端起第1736位至第4024位核苷酸所示的DNA分子。
[0016]將如下任一物質作為靶點的產品在制備降低皮膚T細胞淋巴瘤中CD30+的腫瘤性T細胞腫瘤形成能力的藥物中的應用也屬于本發明的保護范圍:
[0017](I)SEQ ID N0.1 所示的蛋白；
[0018](2) SEQ ID N0.2 所示的 DNA 分子；
[0019](3) SEQ ID N0.2中自5’末端起第1736位至第4024位核苷酸所示的DNA分子。
[0020]將如下任一物質作為靶點的產品在制備促進皮膚T細胞淋巴瘤中CD30+的腫瘤性T細胞凋亡的藥物中的應用也屬于本發明的保護范圍:
[0021](I)SEQ ID N0.1 所示的蛋白；
[0022](2) SEQ ID N0.2 所示的 DNA 分子；
[0023](3) SEQ ID N0.2中自5’末端起第1736位至第4024位核苷酸所示的DNA分子。
[0024]如下任一物質作為診斷標記在制備檢測皮膚T細胞淋巴瘤和/或其中⑶30+的腫瘤性T細胞的藥物或試劑盒中的應用也屬于本發明的保護范圍:
[0025](I)SEQ ID N0.1 所示的蛋白；
[0026](2) SEQ ID N0.2 所示的 DNA 分子；
[0027](3) SEQ ID N0.2中自5’末端起第1736位至第4024位核苷酸所示的DNA分子。
[0028]上述任一所述的應用中，所述皮膚T細胞淋巴瘤為蕈樣肉芽腫或原發皮膚CD30+T淋巴細胞增殖性疾病。[0029]所述蕈樣肉芽腫為MF大細胞轉化；
[0030]所述原發皮膚CD30+T淋巴細胞增殖性疾病為淋巴瘤樣丘疹病或原發性皮膚間變性大細胞淋巴瘤或兩者的中間類型。
[0031]上述任一所述的應用中，所述皮膚T細胞淋巴瘤中⑶30+的腫瘤性T細胞為淋巴瘤樣丘疹病細胞外周血中的異型淋巴細胞或從淋巴瘤樣丘疹病發展到原發性皮膚間變性大細胞淋巴瘤中的細胞；
[0032]具體為Mac-1、Mac_2A 和 Mac_2B 細胞。
[0033]上述任一所述的應用中，所述產品為具有抑制SEQ ID N0.1所示的蛋白活性的物質，具體為SEQ ID N0.1所示的蛋白的抗體。
[0034]上述任一所述的應用中，所述產品為具有抑制SEQ ID N0.2所示的DNA分子和/或SEQ ID N0.2中自5’末端起第1736位至第4024位核苷酸所示的DNA分子活性的物質；
[0035]所述物質具體為如下(1)-(4)任一所述的DNA分子:
[0036](I) SEQ ID N0.8 所示的 DNA 分子；
[0037](2) SEQ ID N0.9 所示的 DNA 分子；
[0038](3) SEQ ID N0.10 所示的 DNA 分子；
[0039](4) SEQ ID N0.11 所示的 DNA 分子。
[0040]如下(I) - (4)任一所述的DNA分子也屬于本發明的保護范圍:
[0041 ] (I)SEQ ID N0.8 所示的 DNA 分子；
[0042](2) SEQ ID N0.9 所示的 DNA 分子；
[0043](3) SEQ ID N0.10 所示的 DNA 分子；
[0044](4) SEQ ID N0.11 所示的 DNA 分子。
[0045]SATBl作為靶點在治療皮膚T細胞淋巴瘤中具有廣泛的應用前景。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0046]圖1為免疫組織化學染色(A)和組織免疫熒光雙染(B)結果。
[0047]圖2為流式細胞儀檢測⑶30和SATBl的表達。
[0048]圖3為組織免疫熒光雙染檢測⑶30和SATBl。
[0049]圖 4 為 Macl、Mac2A、Ma2B、Hut78 及 Jurkat 中 SATBlmRNA (A)和 SATBl 蛋白(B)的表達。
[0050]圖5為CD30+CLPD進展不同的標本中SATBlmRNA的表達。
[0051]圖6為GVl 18慢病毒載體。
[0052]圖 7 為 Macl、Macl-shO、Macl-shl、Macl-sh2、Macl_sh3 和 Macl_sh4 中 SATBlmRNA(A)和SATBl蛋白(B)的表達。
[0053]圖8 為 Macl、Macl-shO、Macl-shl 和 Macl_sh2 細胞系在 96 小時內的增殖。
[0054]圖9為Macl、Macl-shO、Macl_shl和Macl_sh2細胞培養7天后形成的細胞群落數以及形態。
[0055]圖10 為 Macl、Macl-shO、Macl-shl 和 Macl_sh2 細胞的細胞周期檢測。
[0056]圖11 為 Macl、Macl-shO、Macl-shl 和 Macl_sh2 細胞的凋亡檢測。【具體實施方式】
[0057]下述實施例中所使用的實驗方法如無特殊說明，均為常規方法。
[0058]下述實施例中所用的材料、試劑等，如無特殊說明，均可從商業途徑得到。
[0059]下述實施例中的統計學分析:
[0060]用SPASS11.0軟件，計量資料采用均數土標準差表示。細胞mRNA的表達，細胞的生存率分析以及細胞凋亡采用計量資料，多個樣本的均數比較采用單向方差分析(AN0VA)，P < 0.05為差異有統計學意義。
[0061 ] 下述實施例中患者標本及對照標本:
[0062]下述實驗遵循《赫爾辛基宣言》得到了北京大學第一醫院倫理委員會批準，所有患者及正常對照均簽署了知情同意書。實驗從2002年到2014年在北京大學第一醫院皮膚科收集50例CTCL包括6例MF-LCT (MF大細胞轉化)、25例LyP (淋巴瘤樣丘疹病)和19例PCALCL (原發性皮膚間變性大細胞淋巴瘤)石蠟標本(其中4例LyP和9例PCALCL石蠟組織切片由美國波士頓醫學院羅格威廉姆斯醫學中心的皮膚科Marshall E.Kadin教授提供；6例LyP石蠟組織切片由四川大學華西醫學中心皮膚科教授王琳提供)，以及25例皮膚良性炎性疾病標本和10例非大細胞轉化的MF標本(此處指斑塊期MF (plaque stage MF)、腫瘤期MF (tumor stage MF)標本，其中 不含有表達⑶30+的腫瘤性T細胞)作為對照，25例皮膚良性炎性疾病標本包括5例扁平苔蘚、3例濕疹、4銀屑病、5例特應性皮炎、5傳染性軟疣和3例嗜酸細胞增多性皮病；4例正常人外周血單個核細胞(Peripheral blood mononuclearcell，PBMC)及初始T細胞(Naive T細胞)作為細胞實驗對照。所有炎癥性皮膚病對照標本、LyP-A, LyP-C, PCALCL+, PCALCL-臨床標本得到3位皮膚病理學專家最終診斷；CTCL病例的臨床和病理診斷，根據最新的國際皮膚淋巴瘤協會(ISCL)、歐洲癌癥研究和治療組織(EORTC)以及美國皮膚淋巴瘤聯盟(USCLC)推薦的最新修訂標準。
[0063]鼠抗人SATBl單克隆抗體購自BD Bioscience公司，貨號為611182。
[0064]羊抗鼠生物素二抗購自北京中杉金橋生物技術有限公司，貨號為SP2000。
[0065]辣根過氧化物酶標記的鏈霉卵白素購自北京中杉金橋生物技術有限公司。
[0066]羊抗鼠/兔突光二抗購自Invitrogen。
[0067]細胞系Hut-78和Jurkat購自美國ATCC。
[0068]細胞系Mac-l、Mac-2A 和 Mac_2B 在文獻“Davis, T.H.，et al.(1992).〃Hodgkin’ sdisease, lymphomatoid papulosis,and cutaneous T-cell lymphoma derived from acommon T-cell clone.〃N Engl J Med，326 (17): 1115-1122.”中公開過，公眾可從北京大學
第一醫院獲得。
[0069]Power SYBR^ Green PCR Master Mix 試劑盒購自 Life Technology 公司，產品目錄號為4368577。
[0070]pGC-LV 載體、pHelperl.0 載體、pHelper2.0 載體在文獻“You，W.，et al.(2013).Construction of lentiviral vector containing Homo sapiens forkhead box C2geneand its expression in bone marrow mesenchymal stem cells of rabbits.ZhongguoXiu Fu Chong Jian Wai Ke Za Zhi27 (5): 535-540.”中公開過，公眾可從北京大學第一醫
院獲得。
[0071]MethoCult CFC 培養基購自 StemCell Technologies，貨號為 H4230。[0072]SATBl的氨基酸序列如SEQ ID N0.1所示。
[0073]SATBl的基因序列如SEQ ID N0.2所示，編碼區為SEQ ID N0.2中自5’末端起第1736位至第4024位所示。
[0074]實施例1、SATBl在皮膚T細胞淋巴瘤⑶30+的腫瘤性T細胞中特異性高表達
[0075]一、免疫組織化學染色
[0076]將MF大細胞轉化(MF — LCT)、淋巴瘤樣丘疹病(LyP)、原發性皮膚間變性大細胞淋巴瘤(PCALCL)石蠟標本進行免疫組織化學染色，步驟如下:
[0077](一)標本石蠟包埋，制成5μπι的切片，常規脫蠟入水，順次放入二甲苯1、11各10分鐘，無水乙醇1、II，體積百分含量95%的乙醇水溶液1、II，體積百分含量80%的乙醇水溶液各5分鐘，蒸餾水充分水化3-5分鐘，用PBS (ρΗ7.4)沖洗3次，每次5分鐘。
[0078](二)抗原修復:將組織切片放入0.01mol的枸櫞酸鈉緩沖液中在微波爐中高火加熱至沸騰后，換至中火加熱lOmin，拿出靜置冷卻至室溫。 [0079](三)每張切片滴加I滴3%過氧化氫阻斷溶液，室溫下孵育10-15分鐘，以阻斷內源性過氧化酶的活性。用PBS (pH7.4)沖洗3次，每次5分鐘。
[0080](四)除去PBS液，每張切片滴加正常山羊血清遮蓋組織，室溫下孵育15-20分鐘，以封閉非特異性抗原。
[0081](五)除去血清，每張切片滴加一抗(鼠抗人SATBl單克隆抗體)，4°C過夜。陰性對照(皮膚良性炎性疾病標本和非大細胞轉化的MF標本(斑塊期MF (plaque stage MF)、腫瘤期MF (tumor stage MF)標本，其中不含有⑶30+的腫瘤性T細胞))使用PBS代替一抗。
[0082](六)用PBS(pH7.4)沖洗2次，每次5分鐘。除去血清，每張切片滴加I滴羊抗鼠生物素二抗，室溫下孵育20分鐘。用PBS沖洗3次，每次3-5分鐘。
[0083](七)除去PBS液，每張切片滴加I滴辣根過氧化物酶標記的鏈霉卵白素，室溫下孵育20分鐘。用PBS (ρΗ7.4)沖洗2次，每次3-5分鐘。
[0084](A)除去PBS液，每張切片滴加2滴新鮮配制的DAB溶液，顯微鏡觀察顯色5_10分鐘。
[0085](九)自來水沖洗，蘇木素復染3-5分鐘，1%鹽酸酒精分化I分鐘。
[0086](十)切片經過梯度酒精脫水干燥，二甲苯透明，中性樹膠封固。
[0087]MF大細胞轉化(MF — LCT)、淋巴瘤樣丘疹病(LyP)、原發性皮膚間變性大細胞淋巴瘤(PCALCL)中的細胞以具有⑶30+的腫瘤性T細胞為特點。
[0088]MF大細胞轉化(MF — LCT)、淋巴瘤樣丘疹病(LyP)、原發性皮膚間變性大細胞淋巴瘤(PCALCL)石蠟標本經過上述免疫組織化學染色的結果如圖1中A所示，染色結果見表1。
[0089]二、組織免疫熒光雙染
[0090](一)將標本制備成3.5 μ m的石蠟組織切片，并在70度烤片2小時。
[0091](二)兩個二甲苯各脫蠟15分鐘。
[0092](三)在體積百分含量分別為100%、95%、85%、70%乙醇的水溶液中各放置5分鐘。
[0093](四)PBS沖洗2次，每次3分鐘。
[0094](五)檸檬酸鹽緩沖液95度修復25分鐘，PBS沖洗3次，每次3分鐘。
[0095](六)3%過氧化氫在室溫下孵育15分鐘，孵育時避光。PBS沖洗3次，每次3分鐘。
[0096](七)一抗(鼠抗人SATBl單克隆抗體)在4度下孵育過夜，PBS沖洗3次，每次3分鐘。
[0097](八)羊抗鼠/兔突光二抗(購自Invitrogen,Alexaflour488/595)在室溫下孵育I小時，孵育時避光，PBS沖洗3次，每次3分鐘。
[0098](九)用含有DAPI的封片膠封片并蓋上蓋玻片，避光放置10分鐘。
[0099](十)使用Leica激光共聚焦顯微鏡，選取405/488/543激光觀察相應指標在目的細胞著色情況。
[0100]LyP石蠟標本的組織免疫熒光雙染實驗結果如圖1中B所示。
[0101]圖1表明，SATBl高表達于⑶30+的腫瘤性T細胞中。
[0102]SATBl 蛋白在6 例斑塊期MF (plaque stage MF)、4例腫瘤期MF (tumor stage MF)、5例MF大細胞轉化(MF - LCT),23例淋巴瘤樣丘疹病(LyP)、12例原發皮膚間變大細胞淋巴瘤(PCALCL)中的表達情況如表1所示。
[0103]其中23例LyP中有19例SATBl出現陽性表達，而且3例SATBl表達陰性的病例，⑶30蛋白的表達也為陰性。12例PCALCL患者SATBl和⑶30蛋白均為陽性表達。5例MF - LCT患者SATBl和⑶30蛋白均為陽性表達。10例非大細胞轉化的MF (6例斑塊期MF(plaque stage MF)、4例腫瘤期MF(tumor stage MF))其SATBl蛋白的表達均為陰性。
[0104]從以上結果可以看出SATBl蛋白的表達與⑶30的表達高度相關。
[0105]同時，組織免疫熒光雙染激光共聚焦顯示SATBl和⑶30蛋白共同表達于核大深染，胞漿豐富，明顯異型的CD30+T淋巴瘤細胞包膜和細胞核上，兩者高度一致的共定位，⑶30+T淋巴瘤細胞旁邊的組織細胞和反應性增生的炎細胞不表達SATBl。
[0106]綜上所述，SATBl特異性的高表達于⑶30+的腫瘤性T細胞中。
[0107]表1 SATBl和CD30在CTCL中的表達統計
[0108]
【權利要求】
1.將如下任一物質作為靶點的產品在制備預防和/或治療皮膚T細胞淋巴瘤的藥物中的應用: (1)SEQ ID N0.1所示的蛋白； (2)SEQ ID N0.2 所示的 DNA 分子； (3)SEQ ID N0.2中自5’末端起第1736位至第4024位核苷酸所示的DNA分子。
2.將如下任一物質作為靶點的產品在制備抑制皮膚T細胞淋巴瘤中CD30+的腫瘤性T細胞生長和/或增殖的藥物中的應用: (1)SEQID N0.1所示的蛋白； (2)SEQ ID N0.2 所示的 DNA 分子； (3)SEQ ID N0.2中自5’末端起第1736位至第4024位核苷酸所示的DNA分子。
3.將如下任一物質作為靶點的產品在制備降低皮膚T細胞淋巴瘤中CD30+的腫瘤性T細胞腫瘤形成能力的藥物中的應用: (1)SEQID N0.1所示的蛋白； (2)SEQ ID N0.2 所示的 DNA 分子； (3)SEQ ID N0.2中自5’末端起第1736位至第4024位核苷酸所示的DNA分子。
4.將如下任一物質作為靶點的產品在制備促進皮膚T細胞淋巴瘤中CD30+的腫瘤性T細胞凋亡的藥物中的應用: Cl) SEQ ID N0.1所示的蛋白； (2)SEQ ID N0.2 所示的 DNA 分子； (3)SEQ ID N0.2中自5’末端起第1736位至第4024位核苷酸所示的DNA分子。
5.如下任一物質作為診斷標記在制備檢測皮膚T細胞淋巴瘤和/或其中CD30+的腫瘤性T細胞的藥物或試劑盒中的應用: Cl) SEQ ID N0.1所示的蛋白； (2)SEQ ID N0.2 所示的 DNA 分子； (3)SEQ ID N0.2中自5’末端起第1736位至第4024位核苷酸所示的DNA分子。
6.根據權利要求1-5任一所述的應用，其特征在于:所述皮膚T細胞淋巴瘤為蕈樣肉芽腫或原發皮膚CD30+T淋巴細胞增殖性疾病。
7.根據權利要求2-6任一所述的應用，其特征在于:所述皮膚T細胞淋巴瘤中CD30+的腫瘤性T細胞為淋巴瘤樣丘疹病細胞外周血中的異型淋巴細胞或從淋巴瘤樣丘疹病發展到原發性皮膚間變性大細胞淋巴瘤中的細胞； 具體為 Mac-1、Mac_2A 和 Mac_2B 細胞。
8.根據權利要求1-4任一所述的應用，其特征在于:所述產品為具有抑制SEQID N0.1所示的蛋白活性的物質，具體為SEQ ID N0.1所示蛋白的抗體。
9.根據權利要求1-4任一所述的應用，其特征在于:所述產品為具有抑制SEQID N0.2所示的DNA分子和/或SEQ ID N0.2中自5’末端起第1736位至第4024位核苷酸所示的DNA分子活性的物質； 所述物質具體為如下(1)- (4)任一所述的DNA分子: (1)SEQ ID N0.8 所示的 DNA 分子； (2)SEQ ID N0.9 所示的 DNA 分子；(3)SEQ ID N0.10 所示的 DNA 分子；(4)SEQ ID N0.11 所示的 DNA 分子。
10.如下(I) - (4)任一所述的DNA分子:(1)SEQ ID N0.8 所示的 DNA 分子；(2)SEQ ID N0.9 所示的 DNA 分子；(3)SEQ ID N0.10 所示的 DNA 分子；(4) SEQ ID N0.11 所示的 DNA 分子。
【文檔編號】A61P35/00GK103920150SQ201410156173
【公開日】2014年7月16日 申請日期:2014年4月17日 優先權日:2014年4月17日
【發明者】汪旸, 涂平, 張高磊 申請人:北京大學第一醫院