一種連翹總苷的制備方法
【專利摘要】一種連翹總苷的制備方法，其步驟是：A、滲濾：將連翹粉碎至20-40目，用40%-70%的低級醇溶液對連翹進行36-48h的滲濾，得滲濾液，再在55-65℃溫度下減壓濃縮得濃縮液，濃縮液的體積為滲濾液的1/5～1/4；B、萃取：將小極性有機試劑和乙酸乙酯按1:0.5～1的體積比配制成萃取液，用萃取液對等體積的濃縮液萃取2-4次，棄去萃取部分得母液；C、加鹽萃取：向母液加入易溶于水的強酸弱堿鹽，使其pH至3-5，然后用母液等體積的乙酸乙酯/甲醇混合液萃取4-6次，合并萃取液，減壓濃縮至干，即得。該法操作簡便、成本低廉、適于工業化生產；制得物的連翹總苷的收率高，含量高，藥效作用好。
【專利說明】一種連翹總苷的制備方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種連翹酯苷的制備方法。
【背景技術】
[0002]連翅(Forsythia suspense)為木犀科植物連翅的干燥果實,主產于我國山西、河南、陜西等地。連翹藥材具有解熱、抗炎，抗菌、抗病毒、解毒，保肝和鎮吐等藥理藥效作用。其主要有效成分為連翹苷和連翹酯苷(forsythiaside)兩類成分，其中連翹酯苷包括連翹酯苷A, B, C，D, E等,尤以連翅酯苷A (forsythiaside A)的含量最高。
[0003]由于連翹酯苷為苯乙醇苷類化合物，而肉蓯蓉藥材中最主要的生物活性物質也為苯乙醇苷類化合物。因此采用一定工藝手段富集連翹酯苷，得到的連翹總苷有可能用來代替處于瀕危境地的名貴珍稀中藥一肉蓯蓉。 [0004]目前連翹總苷的制備方法主要有大孔樹脂柱、硅膠柱、聚酰胺柱。大孔樹脂柱層析需要含水量為30%-60%的低級醇溶液進行洗脫，而連翹酯苷對熱敏感，不耐高溫，含水的洗脫液需要較長時間的減壓蒸餾，在這一過程中連翹酯苷會發生分解，導致制備物的連翹酯苷的含量低。硅膠柱、聚酰胺柱法需要使用大量的一次性填料，其材料消耗量大，成本高，不適于工業化生產。
【發明內容】
[0005]本發明的目的是提供一種連翹總苷的制備方法，該法的操作簡便、成本低廉、適于工業化生產，且其制得物的連翹總苷的收率高，連翹酯苷的含量高，藥效作用好。
[0006]本發明實現其發明目的所采用的技術方案是，一種連翹總苷的制備方法，包括下述步驟:
[0007]A:滲濾
[0008]將連翹藥材粉碎至20-40目，用體積分數為40%_70%的低級醇溶液對連翹藥材進行36-48h的滲濾，得滲濾液，滲濾液在55-65°C溫度下減壓濃縮得濃縮液，濃縮液的體積為滲濾液的1/5~1/4 ；
[0009]B:萃取
[0010]將小極性有機試劑和乙酸乙酯按1:0.5~I的體積比配制成萃取液，再用萃取液對等體積的濃縮液萃取2-4次，棄去萃取部分得母液；
[0011]C:加鹽萃取
[0012]向步驟B中的母液加入易溶于水的強酸弱堿鹽，調整母液pH至3-5，然后用與母液等體積的乙酸乙酯/甲醇混合液萃取4-6次，合并萃取液，減壓濃縮至干，得到連翹總苷。
[0013]與現有技術相比，本發明的有益成果是:
[0014]一、整個操作僅需液態常溫下的滲濾和兩步萃取即可，工藝操作簡便、無需專用設備，也無需使用一次性填料，其材料消耗低，制備成本低、適合工業化。
[0015]二、不含水的乙酸乙酯/甲醇混合液(萃取液)，萃取后的減壓濃縮時間短，連翹酯苷的分解少，制得物的連翹總苷的收率高，連翹酯苷的含量高，藥效作用好。測試表明，本發明制得物的連翹酯苷A的質量含量均大于50%。
[0016]上述步驟A中的連翹藥材為青連翹藥材。
[0017]青連翹中連翹酯苷的含量更高，從而保證制備物的連翹酯苷含量高。
[0018]上述步驟A中的低級醇為甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇中的一種或多種的混合物。
[0019]這些低級醇的40%_70%的溶液，其極性合適，能最大限度的提取出連翹藥材中的連翹酯苷。
[0020]上述步驟A中的連翹藥材與低級醇溶液之間的質量比為1:4_1:7。
[0021]連翹藥材與低級醇溶液采用以上比例，既能很好的提取出連翹藥材中的連翹酯苷，同時又降低了低級醇溶液的用量及其減壓濃縮的時間和能耗。
[0022]上述步驟B中的小極性有機試劑為石油醚、環己烷、己烷、戊烷、氯仿或二氯甲烷。
[0023]這些小極性有機試劑與乙酸乙酯組成的萃取液，能很好的萃取出滲濾濃縮液中的小極性雜質，從而有效提高制備物的連翹酯苷的純度和含量。
[0024]上述步驟C中的乙酸乙酯/甲醇混合液中乙酸乙酯與甲醇的體積比為97:3-93:7。
[0025]采用以上比例的乙酸乙酯/甲醇混合液能更好的從前一步的萃取母液中萃取出連翹酯苷，使連翹酯苷的收率高，含量高。
[0026]上述步驟C中的易溶于水的強酸弱堿鹽為CuS04、FeCl2, (NH4)2SO4, NH4NO3^ NH4Cl,NH4KNH4Br, NH4ClO4中的一種或一種以上的混合物。
[0027]這些強酸弱堿鹽的水溶性好，可以很好的將母液的Ph值調制3-5，從而抑制連翹酯苷的解離，并使母液的極性增大，使連翹酯苷能更好地在萃取時分配至萃取液中，以提高連翹酯苷的收率和含量。
[0028] 下面結合【具體實施方式】對本發明作進一步的詳細說明。
【具體實施方式】
[0029]實施例1
[0030]一種連翹總苷的制備方法，包括下述步驟:
[0031]A、滲濾
[0032]將連翹藥材粉碎至20-40目，用質量為連翹藥材質量4倍、體積分數為40%的甲醇溶液對連翹藥材進行36h的滲濾，得滲濾液，滲濾液在60°C溫度下減壓濃縮得濃縮液，濃縮液的體積為滲濾液的1/5 ；
[0033]本例的連翹藥材為青連翹藥材，即在未完全成熟時采摘得到的連翹藥材。
[0034]B:萃取
[0035]將小極性有機試劑一石油醚和乙酸乙酯按1:1的體積比配制成萃取液，再用萃取液對等體積的濃縮液萃取3次，棄去萃取部分得母液；
[0036]C:加鹽萃取
[0037]向步驟B中的母液加入(NH4)2SO4，調整母液pH至5，然后用與母液等體積的乙酸乙酯/甲醇混合液萃取6次，合并萃取液，減壓濃縮至干，得到連翹總苷。其中，乙酸乙酯/甲醇混合液中乙酸乙酯與甲醇的體積比為97:3。
[0038]經測試，本例制得的連翹總苷，其連翹酯苷A的質量含量為51%。[0039]實施例2
[0040]一種連翹總苷的制備方法，包括下述步驟:
[0041]A、滲濾
[0042]將連翹藥材粉碎至20-40目，用質量為連翹藥材質量7倍、體積分數為50%的乙醇溶液對連翹藥材進行42h的滲濾，得滲濾液，滲濾液在55°C溫度下減壓濃縮得濃縮液，濃縮液的體積為滲濾液的1/4 ；
[0043]本例的連翹藥材為青連翹藥材。
[0044]B:萃取
[0045]將小極性有機試劑一環己烷和乙酸乙酯按1:0.75的體積比配制成萃取液，再用萃取液對等體積的濃縮液萃取2次，棄去萃取部分得母液；
[0046]C:加鹽萃取
[0047]向步驟B中的母液加入NH4Cl,調整母液pH至4，然后用與母液等體積的乙酸乙酯/甲醇混合液萃取5次，合并萃取液，減壓濃縮至干，得到連翹總苷。其中，乙酸乙酯/甲醇混合液中乙酸乙酯與甲醇 的體積比為95:5。
[0048]經測試，本例制得的連翹總苷，其連翹酯苷A的質量含量為52%。
[0049]實施例3
[0050]一種連翹總苷的制備方法，包括下述步驟:
[0051]A、滲濾
[0052]將連翹藥材粉碎至20-40目，用質量為連翹藥材質量6倍、體積分數為70%的乙醇溶液對連翹藥材進行48h的滲濾，得滲濾液，滲濾液在65°C溫度下減壓濃縮得濃縮液，濃縮液的體積為滲濾液的1/4.5 ；
[0053]本例的連翹藥材為青連翹藥材。
[0054]B:萃取
[0055]將小極性有機試劑一己烷和乙酸乙酯按1:0.5的體積比配制成萃取液，再用萃取液對等體積的濃縮液萃取4次，棄去萃取部分得母液；
[0056]C:加鹽萃取
[0057]向步驟B中的母液加入NH4NO3，調整母液pH至3，然后用與母液等體積的乙酸乙酯/甲醇混合液萃取4次，合并萃取液，減壓濃縮至干，得到連翹總苷。其中，乙酸乙酯/甲醇混合液中乙酸乙酯與甲醇的體積比為93:7。
[0058]經測試，本例制得的連翹總苷，其連翹酯苷A的質量含量為50%。
[0059]實施例4
[0060]一種連翹總苷的制備方法，包括下述步驟:
[0061]A、滲濾
[0062]將連翹藥材粉碎至20-40目，用質量為連翹藥材質量7倍、體積分數為50%的丙醇溶液對連翹藥材進行48h的滲濾，得滲濾液，滲濾液在60°C溫度下減壓濃縮得濃縮液，濃縮液的體積為滲濾液的1/4 ；
[0063]本例的連翹藥材為青連翹藥材。
[0064]B:萃取
[0065]將小極性有機試劑一戊烷和乙酸乙酯按1:1的體積比配制成萃取液，再用萃取液對等體積的濃縮液萃取2次，棄去萃取部分得母液；
[0066]C:加鹽萃取
[0067]向步驟B中的母液加入CuSO4，調整母液pH至4，然后用與母液等體積的乙酸乙酯/甲醇混合液萃取5次，合并萃取液，減壓濃縮至干，得到連翹總苷。其中，乙酸乙酯/甲醇混合液中乙酸乙酯與甲醇的體積比為95:5。
[0068]經測試，本例制得的連翹總苷，其連翹酯苷A的質量含量為53%。
[0069]實施例5
[0070]一種連翹總苷的制備方法，包括下述步驟:
[0071]A、滲濾
[0072]將連翹藥材粉碎至20-40目，用質量為連翹藥材質量5倍、體積分數為40%的異丙醇溶液對連翹藥材進行42h的滲濾，得滲濾液，滲濾液在55°C溫度下減壓濃縮得濃縮液，濃縮液的體積為滲濾 液的1/4 ；
[0073]本例的連翹藥材為青連翹藥材。
[0074]B:萃取
[0075]將小極性有機試劑一氯仿和乙酸乙酯按1:0.75的體積比配制成萃取液，再用萃取液對等體積的濃縮液萃取3次，棄去萃取部分得母液；
[0076]C:加鹽萃取
[0077]向步驟B中的母液加入NH4I,調整母液pH至4，然后用與母液等體積的乙酸乙酯/甲醇混合液萃取5次，合并萃取液，減壓濃縮至干，得到連翹總苷。其中，乙酸乙酯/甲醇混合液中乙酸乙酯與甲醇的體積比為95:5。
[0078]經測試，本例制得的連翹總苷，其連翹酯苷A的質量含量為52%。
[0079]實施例6
[0080]一種連翹總苷的制備方法，包括下述步驟:
[0081]A、滲濾
[0082]將連翹藥材粉碎至20-40目，用質量為連翹藥材質量4倍、體積分數為60%的甲、乙醇混合溶液對連翹藥材進行36h的滲濾，得滲濾液，滲濾液在65°C溫度下減壓濃縮得濃縮液，濃縮液的體積為滲濾液的1/5 ；
[0083]本例的連翹藥材為青連翹藥材。
[0084]B:萃取
[0085]將小極性有機試劑一二氯甲烷和乙酸乙酯按1:1的體積比配制成萃取液，再用萃取液對等體積的濃縮液萃取3次，棄去萃取部分得母液；
[0086]C:加鹽萃取
[0087]向步驟B中的母液加入NH4Br,調整母液pH至3，然后用與母液等體積的乙酸乙酯/甲醇混合液萃取5次，合并萃取液，減壓濃縮至干，得到連翹總苷。其中，乙酸乙酯/甲醇混合液中乙酸乙酯與甲醇的體積比為95:5。
[0088]經測試，本例制得的連翹總苷，其連翹酯苷A的質量含量為52%。
[0089]實施例7
[0090]一種連翹總苷的制備方法，包括下述步驟:
[0091]A、滲濾[0092]將連翹藥材粉碎至20-40目，用質量為連翹藥材質量4倍、體積分數為50%的乙醇溶液對連翹藥材進行42h的滲濾，得滲濾液，滲濾液在55°C溫度下減壓濃縮得濃縮液，濃縮液的體積為滲濾液的1/4 ；
[0093]本例的連翹藥材為青連翹藥材。
[0094]B:萃取
[0095]將小極性有機試劑一環己烷和乙酸乙酯按1:0.75的體積比配制成萃取液，再用萃取液對等體積的濃縮液萃取2次，棄去萃取部分得母液；
[0096]C:加鹽萃取
[0097]向步驟B中的母液加入NH4ClO4,調整母液pH至4，然后用與母液等體積的乙酸乙酯/甲醇混合液萃取5次，合并萃取液，減壓濃縮至干，得到連翹總苷。其中，乙酸乙酯/甲醇混合液中乙酸乙酯與甲醇的體積比為95:5。
[0098]經測試，本例制得的連翹總苷，其連翹酯苷A的質量含量為51%。 [0099]實施例8
[0100]一種連翹總苷的制備方法，包括下述步驟:
[0101]A、滲濾
[0102]將連翹藥材粉碎至20-40目，用質量為連翹藥材質量7倍、體積分數為50%的甲醇溶液對連翹藥材進行48h的滲濾，得滲濾液，滲濾液在55°C溫度下減壓濃縮得濃縮液，濃縮液的體積為滲濾液的1/5 ；
[0103]本例的連翹藥材為青連翹藥材。
[0104]B:萃取
[0105]將小極性有機試劑一環己烷和乙酸乙酯按1:0.75的體積比配制成萃取液，再用萃取液對等體積的濃縮液萃取4次，棄去萃取部分得母液；
[0106]C:加鹽萃取
[0107]向步驟B中的母液加入FeCl2，調整母液pH至4，然后用與母液等體積的乙酸乙酯/甲醇混合液萃取5次，合并萃取液，減壓濃縮至干，得到連翹總苷。其中，乙酸乙酯/甲醇混合液中乙酸乙酯與甲醇的體積比為93:7。
[0108]經測試，本例制得的連翹總苷，其連翹酯苷A的質量含量為51%。
[0109]實施例9
[0110]一種連翹總苷的制備方法，包括下述步驟:
[0111]A、滲濾
[0112]將連翹藥材粉碎至20-40目，用質量為連翹藥材質量6倍、體積分數為70%的異丙醇溶液對連翹藥材進行36h的滲濾，得滲濾液，滲濾液在60°C溫度下減壓濃縮得濃縮液，濃縮液的體積為滲濾液的1/5 ；
[0113]本例的連翹藥材為青連翹藥材。
[0114]B:萃取
[0115]將小極性有機試劑一石油醚和乙酸乙酯按1:0.5的體積比配制成萃取液，再用萃取液對等體積的濃縮液萃取2次，棄去萃取部分得母液；
[0116]C:加鹽萃取
[0117]向步驟B中的母液加入NH4Cl和(NH4) 2S04混合物，調整母液pH至3，然后用與母液等體積的乙酸乙酯/甲醇混合液萃取5次，合并萃取液，減壓濃縮至干，得到連翹總苷。其中，乙酸乙酯/甲醇混合液中乙酸乙酯與甲醇的體積比為95:5。
[0118] 經測試，本例制得的連翹總苷，其連翹酯苷A的質量含量為52%。
【權利要求】
1.一種連翹總苷的制備方法，包括下述步驟: A:滲濾 將連翹藥材粉碎至20-40目，用體積分數為40%-70%的低級醇溶液對連翹藥材進行36-48h的滲濾，得滲濾液，滲濾液在55-65°C溫度下減壓濃縮得濃縮液，濃縮液的體積為滲濾液的1/5~1/4 ; B:萃取 將小極性有機試劑和乙酸乙酯按1:0.5~I的體積比配制成萃取液，再用萃取液對等體積的濃縮液萃取2-4次，棄去萃取部分得母液； C:加鹽萃取 向步驟B中的母液加入易溶于水的強酸弱堿鹽，調整母液pH至3-5，然后用與母液等體積的乙酸乙酯/甲醇混合液萃取4-6次，合并萃取液，減壓濃縮至干，得到連翹總苷。
2.根據權利I要求所述的方法，其特征在于，所述步驟A中的連翹藥材為青連翹藥材。
3.根據權利I要求所述的方法，其特征在于，所述步驟A中的低級醇為甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇中的一種或多種的混合物。
4.根據權利I要求所述的方法，其特征在于，所述步驟A中的連翹藥材與低級醇溶液之間的質量比為1:4-1:7。
5.根據權利I要求所述的方法，其特征在于，所述步驟B中的小極性有機試劑為石油醚、環己烷、己烷、戊烷、氯仿或二氯甲烷。
6.根據權利I要求所述的方法，其特征在于，所述步驟C中的乙酸乙酯/甲醇混合液中乙酸乙酯與甲醇的體積比為97:3-93:7。
7.根據權利I要求所述的方法，其特征在于，所述步驟C中的易溶于水的強酸弱堿鹽為CuSO4, FeCl2, (NH4)2SO4, NH4NO3^ NH4C1、NH41、NH4Br、NH4ClO4 中的一種或一種以上的混合物。
【文檔編號】A61K36/634GK103933127SQ201410149410
【公開日】2014年7月23日 申請日期:2014年4月14日 優先權日:2014年4月14日
【發明者】周先禮, 馮銳, 肖鋒, 單連海, 黃帥 申請人:西南交通大學