藁本內(nèi)酯在制備預防皮膚光老化護膚品的用途及使用方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了藁本內(nèi)酯在制備預防皮膚光老化護膚品的用途及使用方法，在制備護膚品時，是以藁本內(nèi)酯為活性成分，將其制備成粒徑小于200nm的藁本內(nèi)酯納米脂質(zhì)體或納米乳液，其質(zhì)量百分比濃度為0.01%-10%。通過UVB誘導皮膚角質(zhì)細胞模型試驗，考察了藁本內(nèi)酯對UVB誘導皮膚角質(zhì)細胞光老化關鍵基因的表達影響，試驗結(jié)果表明，本發(fā)明可有效抑制膠原蛋白的降解及細胞炎癥反應，達到預防皮膚光老化的效果；藁本內(nèi)酯廣泛存在于當歸根揮發(fā)油或川芎根揮發(fā)油中，可以通過直接添加藁本內(nèi)酯或間接含有藁本內(nèi)酯的當歸油或川芎油于預防皮膚光老化護膚品中。
【專利說明】藁本內(nèi)酯在制備預防皮膚光老化護膚品的用途及使用方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明屬于生物【技術領域】，具體涉及藁本內(nèi)酯在制備預防皮膚光老化護膚品的用途及使用方法。
【背景技術】
[0002]皮膚光老化是指皮膚反復暴露于太陽紫外線中而引起的皮膚過早老化。急性暴露在太陽光紫外線可導致曬傷(紅斑)，免疫系統(tǒng)的抑制，DNA損傷和結(jié)締組織的降解，長期慢性的紫外線照射會造成皮膚光老化，進而引發(fā)皮膚癌。隨著環(huán)境的惡化、臭氧層的減少，太陽光中照射地面的紫外線輻射量逐漸增強，人類皮膚光老化現(xiàn)象日益嚴重，皮膚癌發(fā)生率逐年增加，嚴重威脅人類皮膚健康。
[0003]受體蛋白質(zhì)酪氨酸憐酸酶-kappa(receptor protein tyrosinephosphatase-kappa, RPTP- κ )可以特定、直接去磷酸化表皮生長因子受體(EpidermalGrowth Factor Receptor, EGFR),使EGFR和RPTP-κ之間的形成平衡。當皮膚受到紫外線的照射后，產(chǎn)生了高濃度的活性氧自由基(Reactive Oxygen Species, R0S),使RPTP-κ氧化而失去活性，改變EGFR和RPTP- κ之間的平衡，導致EGFR磷酸化，引起系列下游信號通路的激活。EGFR參與調(diào)節(jié)細胞增殖、抗細胞凋亡、遷移和血管生成等多個生物過程，在維持皮膚正常功能發(fā)揮非常常重要的作用，但其調(diào)控異常會導致腫瘤發(fā)生，眾多癌癥研究結(jié)果證明了抑制EGFR可以治療癌癥。EGFR是否磷酸化決定了其是否處于活化功能狀態(tài)，而EGFR既可以在配體結(jié)合的情況下被激活，也能夠自我激活。EGFR的活化引起一系列的信號通路的激活(稱為哺乳動物的紫外線反應)，包括下游絲裂原活化蛋白激酶(MAP激酶)，磷脂酰肌醇3-kinase/Akt (P1-3激酶/Akt)及磷脂酶C/蛋白激酶C (PLC/PKC)通路的激活。因此，這些信號轉(zhuǎn)導途徑的轉(zhuǎn)錄因子和它們的靶基因，包括誘導皮膚組織中轉(zhuǎn)錄因子激活蛋白含量(AP-1)和基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)表達增高，特異性降解真皮中的主要由膠原蛋白和彈性纖維組成的細胞外基質(zhì)`，引發(fā)皮膚彈性喪失，色素沉著和皺紋的產(chǎn)生。RPTP-K負調(diào)控EGFR信號傳導，抑制EGFR失控而產(chǎn)生的癌變，具有抑制癌癥的功能。因此，RPTP- κ在紫外線引起的皮膚光老化及皮膚癌的預防及治療中發(fā)揮重要的作用。另外ROS還可以活化腫瘤壞死因子受體(Tumor Necrosis Factor Receptor, TNFR)和白細胞介素-1受體(Interleukin Receptor, IL-1R)，激活核因子 kB(Nuclear factor kB, NF_kB)信號通路,刺激前炎癥細胞因子(IL-l，TNF-a，IL-6)等基因的轉(zhuǎn)錄，引起皮膚組織炎癥反應。然而IL-1以及TNF- a等細胞因子的受體活化后，p38MAPK和JNK信號通路被激活，進而上調(diào)c-Jun表達，促進c-Jun與c-fos結(jié)合成轉(zhuǎn)錄因子AP-1調(diào)節(jié)MMPs表達。
[0004]通過轉(zhuǎn)錄因子AP-1的作用來調(diào)控MMPs的表達，MMPs金屬基質(zhì)蛋白酶直接作用于膠原蛋白為主的細胞外蛋白基質(zhì)成分，細胞外基質(zhì)成分被降解，直接造成皮膚松弛、皺紋形成等光老化改變。MMPs家族包括金屬基質(zhì)蛋白酶MMP-1 (膠原蛋白酶)，MMP-3 (基質(zhì)降解酶)和MMP-9 (白明膠酶)。MMP-1降解1、11和III型膠原蛋白，MMP-9降解IV、V膠原蛋白，而MMP-3則有更廣泛的底物特異性，它可以降解多種類型的膠原蛋白及基質(zhì)分子，如蛋白多糖、層粘連蛋白和纖維連接蛋白。
[0005]因此，通過活性物干預，調(diào)控EGFR、IL-1R及TNFR活性，抑制AP-1信號通路(MMP1、MMP3及MMP9)及NF_kB (TNF-α、IL-6及IL-1)信號通路的表達，抑制膠原蛋白的降解及細胞炎癥反應，進而達到預防皮膚光老化的效果。
[0006]藁本內(nèi)酯是當歸、川芎等傳統(tǒng)中藥的主要有效成分之一，具有較強的藥理作用，是一個極具開發(fā)價值的化合物，也是目前評價當歸、川芎等藥材及制劑質(zhì)量的重要依據(jù)之一。根據(jù)文獻報道，藁本內(nèi)酯具有以下藥理作用:1)、對心腦血管、循環(huán)系統(tǒng)及免疫功能等均有較強的藥理作用；2)、對動脈粥樣硬化、脈管炎和腦血栓等心腦血管疾病有防治作用，并有很強的解痙、平喘、鎮(zhèn)定作用；3)、具有良好的改善微循環(huán)作用，可用于防治與微循環(huán)障礙有關的疾病；4)、抑制平滑肌增殖，并對平滑肌有明顯松弛作用，可用于治療眼睛疲勞等。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0007]本發(fā)明的目的是提供一種藁本內(nèi)酯的新用途及其使用方法，特別是提供其在制備預防皮膚光老化的護膚品中的新用途及其使用方法。
[0008]本發(fā)明提供的藁本內(nèi)酯的新用途是在制備預防皮膚光老化護膚品中的應用。
[0009]本發(fā)明所述的藁本內(nèi)酯用于制備預防皮膚光老化護膚品的使用方法，其特征在于:以藁本內(nèi)酯為活性成分，將其制備成粒徑小于200nm的藁本內(nèi)酯納米脂質(zhì)體或納米乳液；所述的藁本內(nèi)酯在預防皮膚光老化護膚品中的質(zhì)量百分比濃度為0.01%-10%。
[0010]優(yōu)選地，本發(fā)明所述的藁本內(nèi)酯在預防皮膚光老化護膚品中的質(zhì)量百分比濃度為0.1%-5%。
[0011]本發(fā)明所述的藁本內(nèi)酯為中藥當歸根或川芎根提取物單體成分，在制備預防皮膚光老化的護膚品的應用中，`可以直接添加藁本內(nèi)酯，也可以添加含有藁本內(nèi)酯的當歸根提取物當歸油或川芎根提取物川芎油。
[0012]本發(fā)明所述的制備預防皮膚光老化的護膚品所用的藁本內(nèi)酯，通過調(diào)控UVB誘導皮膚角質(zhì)細胞的EGFR、IL-1R及TNFR活性，抑制細胞中AP-1信號通路中MMP1、MMP3及MMP9和NF-kB信號通路中TNF-a、IL_6及IL-1mRNA的表達，抑制膠原蛋白的降解及細胞炎癥反應，達到預防皮膚光老化的作用。
[0013]本發(fā)明提供的預防皮膚光老化的藁本內(nèi)酯，來源于中藥揮發(fā)油，，試驗結(jié)果表明，藁本內(nèi)酯可有效抑制膠原蛋白的降解及細胞炎癥反應，達到預防皮膚光老化的效果，其優(yōu)點是:①來源于天然，安全無刺激，且水溶性高；②具有有效的抑制UVB誘導皮膚角質(zhì)細胞的光老化效應，可廣泛用于抗光老化的皮膚護理產(chǎn)品；③藁本內(nèi)酯脂質(zhì)體或納米乳液可以提高藁本內(nèi)酯的皮膚滲透性，增強皮膚生物利用率。
【具體實施方式】
[0014]本發(fā)明提供了一種藁本內(nèi)酯在制備預防皮膚光老化的護膚品中的應用，在制備預防皮膚光老化的護膚品中，本發(fā)明是以藁本內(nèi)酯為活性成分，將其制備為粒徑小于200nm的藁本內(nèi)酯納米脂質(zhì)體或納米乳液；所述的藁本內(nèi)酯在預防皮膚光老化護膚品中的質(zhì)量百分比濃度為0.01%-10% ;藁本內(nèi)酯在預防皮膚光老化護膚品中的優(yōu)選質(zhì)量百分比濃度為0.1%-5%。[0015]下面將通過實施例對本發(fā)明進行詳細描述，但是，下列實施例僅用于說明本發(fā)明而不應視為限定本發(fā)明的范圍。實施例中未注明具體條件者，按照常規(guī)條件或制造商建議的條件進行。
[0016]實施例1:藁本內(nèi)酯抗光老化試驗
[0017]將一支購買的人角化細胞復蘇后，擴增培養(yǎng)，生長3代，取直徑6cm的培養(yǎng)皿中一半的細胞傳至24孔培養(yǎng)板，剩下的細胞保種凍存。待24孔培養(yǎng)板中細胞貼壁生長密度達到60%后，分組為陰性對照組、陽性對照組(全反式維甲酸)及實驗組(0.5%藁本內(nèi)酯溶液)，分別在陽性對照組及實驗組加入藥物，共同培養(yǎng)24hr，24hr后，部分對照組及實驗組吸去培養(yǎng)基加入Trizol500ul用于提取總RNA分析，吹打轉(zhuǎn)移到離心管凍至_20°C，另一部分對照組及試驗組，移去培養(yǎng)基，再加入PBS，UVB紫外處理，劑量為30mj/cm2，最后再還原為陰性對照組、陽性對照組及實驗組的條件繼續(xù)培養(yǎng)，8hr后各加Trizol500ul用于提取總RNA分析。通過 Real-time PCR 技術定量 AP-1、NF-κ B 信號通路中 c-fos、c_jun、IL-β 1、IL-6,IL-8、
[0018]TNF- α、MMPl、MMP3, MMP9 等 mRNA 的表達量的變化，如表 I。
[0019]表1藁本內(nèi)酯抑制UVB誘導細胞因子mRNA基因表達的影響
[0020]
【權利要求】
1.藁本內(nèi)酯在制備預防皮膚光老化的護膚品中的應用。
2.一種如權利要求1所述的藁本內(nèi)酯用于制備預防皮膚光老化護膚品的使用方法，其特征在于:以藁本內(nèi)酯為活性成分，將其制備成粒徑小于200nm的藁本內(nèi)酯納米脂質(zhì)體或納米乳液；所述的藁本內(nèi)酯在預防皮膚光老化護膚品中的質(zhì)量百分比濃度為0.01%-10%。
3.如權利要求2所述的藁本內(nèi)酯用于制備預防皮膚光老化護膚品的使用方法，其特征在于:所述的藁本內(nèi)酯在預防皮膚光老化護膚品中的質(zhì)量百分比濃度為0.1%-5%。
【文檔編號】A61K8/49GK103830116SQ201410117051
【公開日】2014年6月4日 申請日期:2014年3月26日 優(yōu)先權日:2014年3月26日
【發(fā)明者】周華鋒, 段明星, 姜梅, 高楊, 嚴澤民, 徐之偉 申請人:清華大學, 江蘇隆力奇生物科技股份有限公司