用于治療炎癥的組合物和方法

用于治療炎癥的組合物和方法
【專利摘要】本發明提供電動產生的流體(例如，富含氣體的電動流體或溶液)、用于治療炎癥或至少一種炎癥癥狀的治療組合物和方法。電動產生的流體或治療組合物和方法包括任選地與其他治療劑組合的電動產生的含水流體。具體方面提供通過調節細胞膜、膜電位、膜蛋白(例如膜受體，包括但不限于G蛋白偶聯受體(GPCR))和細胞間連接(例如緊密連接、間隙連接、黏著帶和橋粒)中的至少一種來調控或調節與炎癥反應相關的細胞內信號轉導。其他實施方式包括電動產生的流體(例如，電動產生的富含氣體的流體和溶液)和治療組合物的具體施用途徑或制劑。
【專利說明】用于治療炎癥的組合物和方法
[0001]本申請是申請日為2008年10月24日的中國專利申請200880122817.9的分案申請。
發明領域
[0002]具體方面一般涉及炎癥和調控或調節細胞內信號轉導，并且更具體地涉及通過施用包含本發明的至少一種電動產生的流體(例如，電動產生的富含氧的流體)的治療組合物來治療或預防受治療者的炎癥或至少一種炎癥癥狀的組合物和方法。具體方面涉及通過施用包含如本文公開的至少一種電動產生的流體(包括富含氣體的(例如富含氧的)電動產生的流體)的治療組合物來調節細胞膜、膜電位、膜蛋白(例如膜受體，包括但不限于G蛋白偶聯受體)和細胞間連接(例如緊密連接、間隙連接、黏著帶和橋粒(desmasome))中的至少一個來調節與炎癥反應相關的細胞內信號轉導。其他方面涉及組合治療。
[0003]相關申請的交叉引用
[0004]本申請要求2007年10月25日提交的美國臨時專利申請系列第60 / 982，719號、2007年10月25日提交的第60 / 982，720號、2008年4月28日提交的第61 / 048, 332號、2008年4月28日提交 的第61 / 048, 340號、2008年4月28日提交的第61 / 048, 347號和2008年4月28日提交的第61 / 048，404號的優先權，通過引用將這些臨時專利申請整體并入本文。
[0005]發明背景
[0006]炎癥可以是對創傷或諸如細菌或病毒的微生物感染的急性或慢性的、局部或系統性的免疫反應和/或血管反應。炎癥反應通常破壞、稀釋或限制受治療者中的有害試劑和損傷組織。炎癥尤其是急性形式的炎癥的特征在于疼痛、發熱、發紅、腫脹和可能的功能損失的經典體征。在組織學水平，炎癥涉及復雜的一系列事件，包括小動脈、毛細管、和小靜脈膨脹和滲透性和血流增加、包含血漿蛋白的液體滲出和白細胞向炎癥區域的遷移，尤其是對于局部的反應。
[0007]炎癥的治療性治療依據具體的炎癥病癥和追求結果而包括靜脈內、皮下、局部或口服施用的多種藥物。然而，當今大部分可用的抗炎治療具有相當大的缺點，包括注射部位的重度反應、對感染的敏感性增加、皮疹、或其他副作用。因此，存在對較好的抗炎治療劑和治療方法的需要。
[0008]胸腺基質淋巴細胞生成素(TSLP)。胸腺基質淋巴細胞生成素(TSLP)是觸發樹突細胞介導的Th2型炎癥反應的IL-7樣細胞因子并且它被認為是過敏性炎癥的主要開關。TSLP是B細胞和T細胞二者的發育和成熟的必需生長因子(integral growth factor)。具體地，鼠TSLP支持B淋巴細胞生成并且是B細胞增殖所需的。鼠TSLP在控制T細胞受體Y (TCR.Y.)基因座的重排中起關鍵作用并且對胸腺細胞和成熟T細胞具有明顯的刺激作用 ο 參見，例如，Friend 等人，Exp.Hematol.，22:321-328,1994 ；Ray 等人，Eur.J.1mmunol.，26: 10-16,1996 ;Candeias 等人，Immunology Letters, 57:9-14,1997。
[0009]TSLP具有類似于IL-7的細胞因子活性。例如，在刺激B細胞增殖反應中TSLP可以代替IL-7 (Friend等人，如上)。盡管TSLP和IL-7介導對靶細胞類似的作用，但是它們似乎具有不同的信號傳導途徑并且它們的生物學反應可能不同。例如，盡管TSLP調節STAT5的活性，但是它不能激活任何Janus家族酪氨酸激酶成員(Levin等人，J.1mmunol., 162:677-683，1999)。
[0010]TSLP對樹突細胞和TNF生成的作用。在2001年克隆了人TSLP和人TSLP受體之后，發現人TSLP有效地激活不成熟的⑶Ilc+髓樣樹突細胞(mDC)(參見，例如，Reche等人，J.1mmunol.，167:336-343, 2001 和 Soumelis 等人，Nat.1mmunol.，3:673-680, 2002)。Th2細胞在免疫學課本和文獻中一般被定義為產生IL-4、IL-5、IL-13和IL-10的⑶4+T細胞。并且諸如⑶4+T細胞的Thl細胞產生IFN- Y并且有時產生TNF。當TSLP-DC用于體外刺激首次實驗的同種異型CD4+T細胞時，誘導了獨特類型的Th2細胞，該獨特類型的Th2細胞產生經典的Th2細胞因子IL-4、IL-5和IL-13以及大量的TNF，但是極少或沒有IL-10或干擾素-Y (Reche 等人,如上)(還參見，例如，Soumelis 等人，Nat.1mmunol.，3:673-680,2002)。TNF通常不被認為是Th2細胞因子。然而，TNF在哮喘性氣道(asthmatic airway)中是突出的并且與TNF分泌增加相關的基因型伴隨有哮喘風險的增加。參見Shah等人，Clin.Exp.Allergy.,25:1038-1044，1995 ；和 Moffatt, M.F.和 Cookson, W.0.，Hum.Mol.Genet.，6:551-554,1997。
[0011]TSLP誘導人mDC在mRNA和蛋白兩種水平表達TNF超家族蛋白0X40L(Ito等人，J.Exp.Med.,202:1213-1223)。TSLP-DC的0X40L表達對于炎性Th2細胞的形成很重要。因此，TSLP激活的DC通過上調0X40L而不誘導Thl-極化細胞因子(Thl-polarizingcytokine)產生而產生Th2許可性(Th2_permissive)微環境。出處同上。
[0012]TSLP表達、過敏原特異性反應和哮喘。早期研究已顯示人原代皮膚角質形成細胞、支氣管上皮細胞、平滑肌細胞和肺成纖維細胞高度表達TSLPmRNA(Soumelis等人，Nat.1mmunol.，3:673_680，2002)。由于TSLP主要在表皮的頂層的角質形成細胞中表達，所以這表明TSLP產生是完全分化的角質形成細胞的特征。在具有特應性皮炎的患者中TSLP的表達與朗格漢斯細胞遷移和原位激活有關，這表明TSLP可以直接促進這些細胞的激活，這些激活的細胞隨后可以遷移到引流淋巴結并引發過敏原特異性反應。出處同上。在最近的研究中，通過原位雜交顯示TSLP表達在哮喘性氣道中增加并且其與Th2吸引性趨化因子表達和疾病嚴重程度兩者都相關，這提供了 TSLP和哮喘之間的聯系(Ying等人，J.1mmunol.，174:8183-8190,2005)。
[0013]TSLP受體(TSLPR)和過敏反應、哮喘。TSLP受體(TSLPR)是大約50kDa的蛋白并且與共同Y-鏈具有顯著的類似性。TSLPR是新的I型細胞因子受體，它與IL-7Ra (⑶127)結合構成TSLP受體復合體，如在例如Pandey等人,Nat.1mmunol., 1:59-64, 2000中所描述的。TSLPR在其羧基末端附近具有可以與磷酸化的STAT5締合并且在與TSLP結合時介導多種生物學功能的酪氨酸殘基(Isaksen等人，J.1mmunol.，168 =3288-3294,2002)。
[0014]人TSLPR是由單核細胞和⑶Ilc+樹突細胞表達的，并且TSLP結合誘導TH2細胞吸引性趨化因子CCL17和CCL22的表達。此外，如上文所述的，TSLPR誘導的樹突細胞的激活間接導致了 TH2細胞因子IL-4、IL-5和IL-13的分泌增加，TH2細胞因子IL-4、IL-5和IL-13的分泌增加可能是調節⑶4+T細胞內環境穩定所必需的。在小鼠中，TSLPR的缺乏對淋巴細胞數目沒有影響。然而，TSLPR和共同Y-鏈的缺乏導致了與只缺乏共同Y-鏈的小鼠相比較少的淋巴細胞。參見，Reche等人,J.1mmunol.，167:336-343, 2001和Soumelis等人，Nat.1mmunol.,3:673-680, 2002。
[0015]研究已發現TSLP和TSLPR在小鼠中過敏性疾病的引發中起關鍵作用。在一個研究中，顯示被改造為在皮膚中過表達TSLP的小鼠發展了特應性皮炎，該特應性皮炎的特征為含有炎性滲液的濕疹性皮膚損傷、循環的Th2細胞顯著增加和血清IgE增加(Yoo等人，J.Exp.Med.,202:541-549, 2005)。該研究表明在小鼠中TSLP可直接激活DC。在Li等人進行的另一研究中，研究組證實了在皮膚中過表達TSLP的轉基因小鼠發展了特應性皮炎，這加固了 TSLP與特應性皮炎發展之間的聯系。
[0016]另一組研究顯示TSLP是在小鼠中體內引發過敏性氣道炎癥所需要的。在一個研究中，Zhou等人顯示TSLP轉基因的午餐特異性(lunch specific)表達誘導過敏性氣道炎癥(哮喘)，該過敏性氣道炎癥的特征為白細胞(包括Th2細胞)的大量浸潤、杯形細胞超常增生和表皮下纖維化以及血清IgE水平增加(Zhou等人，Nat.1mmunol.，6:1047-1053，2005)。然而，相反的是，缺乏TSLPR的小鼠沒有對吸入的抗原反應而發展哮喘(Zhou等人，如上和Al-Shami等人，J.Exp.Med.，202 =829-839, 2005)。因此，這些研究一起表明TSLP是在小鼠中引發過敏性氣道炎癥所需要的。
[0017]此外，在Yong-Jun等人進行的研究中，顯示表皮細胞來源的TSLP在人中觸發DC介導的炎性Th2反應，這表明TSLP代表了表皮細胞-DC界面處過敏性炎癥的主要開關(Yong-Jun 等人，J.Exp.Med.，203 =269-273, 2006)。
[0018]在最近的研究中， 顯示通過抑制TSLPR調節DC功能降低了小鼠中的嚴重程度(Liyun Shi 等人，Clin.1mmunol.，129:202-210, 2008)。在另一組研究中，顯示 TSLPR 不僅在DC中表達，還在巨噬細胞、肥大細胞和⑶4+T細胞中表達(Rochman等人，J.1mmunol.,178:6720-6724,2007 ;和 OmoriM.和 Ziegler S.，J.1mmunol.，178:1396-1404，2007)。為了查明TSLPR中和對CD4+T細胞或過敏性炎癥中的其他效應細胞的直接作用，Liyun Shi等人進行了其中在過繼地轉移到首次實驗的小鼠的氣道之前用抗TSLPR體外處理加入OVA的DC的實驗。先前已發現OVA-DC觸發強的嗜酸性氣道炎癥并伴隨著諸如IL-4和IL-5的Th2細胞因子的大量產生(Sung 等人,J.1mmunol.，166:1261-1271 和 Lambrecht 等人,J.Clin.1nvest.，106:551-559，2000)。然而，用抗TSLPR預處理0VA-DC導致嗜酸性粒細胞和淋巴細胞浸潤以及IL-4和IL-5水平顯著降低，這進一步說明了 TSLPR在DC引發的過敏性疾病中所起的作用。這種結果還支持阻斷DC上的TSLPR將有助于控制氣道的炎癥(Liyun Shi等人，如上)。
[0019]有不斷增加的大量實驗表明了 TSLP / TSLPR在各種生理過程和病理過程中的作用。TSLP的生理作用包括調節免疫系統，尤其是刺激B細胞和T細胞增殖、發育和成熟。TSLP在過敏性哮喘的病理生物學中起關鍵作用，并且局部抗體介導的TSLP受體阻斷發揮了減輕過敏性疾病的功能。因此據信TSLP和TSLP受體之間的相互作用在如下的許多生理疾病過程中是重要的:過敏性炎癥、具有特應性皮炎或特應性濕疹的患者的皮膚損害以及哮喘。
[0020]發明概述
[0021]具體方面提供了用于治療炎癥的方法，所述方法包括給需要其的受治療者施用治療有效量的電動改變的含水流體，所述電動改變的含水流體適合于將細胞膜的結構或功能改變至足以提供對受治療者的細胞中的細胞內信號轉導的調節，其中炎癥或至少一種炎癥癥狀被治療或減輕。在某些方面，電動改變的含水流體的改變包括將該流體暴露于流體動力誘導的、局部化的電動效應。在某些實施方式中，暴露于局部化的電動效應包括暴露于電壓脈沖和電流脈沖的至少一個。在具體的方面，將流體暴露于流體動力誘導的、局部化的電動效應包括將該流體暴露于用來產生該流體的裝置的誘導電動效應的結構部件。
[0022]在該方法的某些方面，所述至少一種炎癥癥狀涉及選自由以下組成的組的至少一種病癥:過敏、哮喘、濕疹、類風濕性關節炎、發熱、燒傷或其他創傷、微生物感染、接觸刺激性皮炎(contact irritant dermatitis)、脂溢性皮炎、昆蟲咬傷、昆蟲螫傷、曬傷、蕈樣肉芽腫病(mycosis fungoides)、壞疽性膿皮癥、毒常春藤(poison ivy)、有毒漆樹(poisonsumac)、紅斑痤瘡、眼睛炎癥、青光眼、干眼、紅眼、眼紅斑痤瘡、瞼緣炎、瞼板腺炎、角膜炎、結膜充血(conjunctival hyperemia)、眼瞼充血(eyelid hyperemia)等、移植物抗宿主病(graft-versus-host disease)、慢性支氣管炎、特應性皮炎、蕁麻疫、過敏性鼻炎、過敏性結膜炎、多發性硬化病、腱炎、腦中的慢性炎癥、氣道炎性疾病、慢性炎性腸病、春季結膜炎(vernal conjunctivitis)、嗜酸性粒細胞肉芽腫(eosinophilic granuloma)、銀屑病、胺毒性休克、潰瘍性結腸炎、心肌再灌注損傷和腦再灌注損傷、慢性腎小球腎炎、動脈粥樣硬化(athlesclerosis)、內毒素性休克和成人型呼吸窘迫綜合征。在具體方面，所述至少一種炎癥癥狀選自由以下組成的組:癢(itching)、水腫、疼痛、瘙癢(pruritus)、溫度增加、功能損失、發紅、鱗屑(scaling)、起皰(blistering)、色素沉著過度和色素沉著不足。
[0023]在該方法的某些方面，電動改變的含水流體包含電動產生的富含氧的水。
[0024]在該方法的某些方面，電動改變的含水流體調節施用部位的一氧化氮的局部水平或細胞水平。在【具體實施方式】中，電動改變的含水流體促進選自由以下組成的組的至少一種細胞因子在施用部位局部降低=IL-1 β、IL-8、TNF-a和TNF-β。
[0025]該方法的某些方面還包括通過用另一種抗炎劑同時或輔助治療受治療者來協同或非協同性地抑制或減少炎癥。在具體方面，所述其他抗炎劑包括類固醇(例如，包括糖皮質激素類固醇)。在某些方面，類固醇為糖皮質激素類固醇(例如，布地奈德或其活性衍生物)。
[0026 ]本發明的某些方面還包括組合治療，其中將至少一種另外的治療劑施用給患者。在具體方面，所述至少一種另外的治療劑選自由以下組成的組:短效β2_激動劑、長效β2_激動劑、抗膽堿能藥、皮質類固醇、系統性的皮質類固醇、肥大細胞穩定劑、白三烯改性劑、甲基黃嘌呤、β2_激動劑、沙丁胺醇、左旋沙丁胺醇(levalbuterol)、吡布特羅、阿福特羅(artformoterol)、福莫特羅、沙美特羅；抗膽堿能藥，包括異丙托銨和噻托銨(tiotropium);皮質類固醇，包括倍氯米松、布地奈德、氟尼縮松、氟替卡松、莫米松、曲安西龍、甲基潑尼松龍(methyprednisolone)、潑尼松龍、潑尼松；白三烯改性劑，包括孟魯司特、扎魯司特和齊留通(zileuton);肥大細胞穩定劑,包括色甘酸鈉(cromolyn)和奈多羅米；甲基黃嘌呤，包括茶堿；組合藥物，包括異丙托銨和沙丁胺醇、氟替卡松和沙美特羅、布地奈德和福莫特羅；抗組胺劑，包括羥嗪、苯海拉明、氯雷他定、西替利嗪、和氫化可的松；免疫系統調節藥物，包括他克莫司和吡美莫司；環孢菌素；硫唑嘌呤；麥考酚酸酯；以及它們的組合。在某些實施方式中，所述至少一種另外的治療劑為TSLP和/或TSLPR拮抗劑。在具體方面，TSLP和/或TSLPR拮抗劑選自由以下組成的組:對TSLP和TSLP受體特異性的中和抗體、可溶性TSLP受體分子和TSLP受體融合蛋白，包括TSLPR免疫球蛋白Fe分子或編碼多于一種受體鏈的組分的多肽。
[0027]在該方法的某些方面，改變細胞膜的結構或功能包括改變膜相關蛋白的構象、配體結合活性或催化活性。在具體方面，膜相關蛋白包括選自由以下組成的組的至少一種:受體、跨膜受體、離子通道蛋白、細胞內附著蛋白、細胞黏著蛋白、整聯蛋白等。在某些實施方式中，跨膜受體包括G蛋白偶聯受體(GPCR)，并且在某些實施方式中，包括與G蛋白的α亞基(例如，選自由以下組成的組的至少一種=GasWapGat^PGa12)相互作用的G蛋白偶聯受體(GPCR)。在【具體實施方式】中，所述至少一種G蛋白的a亞基是Ga,。
[0028]在該方法的某些方面，改變細胞膜的結構或功能包括改變膜的電導率或膜電位。在具體的實施方式中，調節細胞膜電導率包括調節全細胞電導(例如，包括調節全細胞電導的至少一種電壓依賴性貢獻(voltage-depedent contribution))。
[0029]該方法的某些方面包括細胞內信號轉導的調節，細胞內信號轉導的調節包括鈣依賴性細胞通信途徑或系統的調節(例如包括磷脂酶C活性的調節或包括腺苷酸環化酶(AC)活性的調節)。
[0030]在該方法的某些方面，細胞內信號轉導的調節包括與選自由以下組成的組的至少一種病癥或癥狀有關的細胞內信號轉導的調節:過敏、哮喘、濕疹、類風濕性關節炎、發熱、燒傷或其他創傷、微生物感染、接觸刺激性皮炎、脂溢性皮炎、昆蟲咬傷、昆蟲螫傷、曬傷、蕈樣肉芽腫病、壞疽性膿皮癥、毒常春藤、有毒漆樹、紅斑痤瘡、眼睛炎癥、青光眼、干眼、紅眼、眼紅斑痤瘡、瞼緣炎、瞼板腺炎、角膜炎、結膜充血、眼瞼充血等、移植物抗宿主病、慢性支氣管炎、特應性皮炎、蕁 麻疹、過敏性鼻炎、過敏性結膜炎、多發性硬化病、腱炎、腦中的慢性炎癥、氣道炎性疾病、慢性炎性腸病、春季結膜炎、嗜酸性粒細胞肉芽腫、銀屑病、膿毒性休克、潰瘍性結腸炎、心肌再灌注損傷和腦再灌注損傷、慢性腎小球腎炎、動脈粥樣硬化、內毒素性休克和成人型呼吸窘迫綜合征。
[0031]該方法的某些方面包括將電動產生的流體施用給細胞網絡或細胞層，并且還包括其中細胞間連接(例如包括選自由以下組成的組中的至少一種:緊密連接、間隙連接、黏著帶和橋粒)的調節。在某些方面中，細胞網絡或細胞層包括選自由肺上皮細胞、支氣管上皮細胞和腸上皮細胞所組成的組中的至少一種。
[0032]在該方法的某些方面，電動改變的含水流體是充氧的，并且其中在該流體中的氧的存在量為大氣壓下至少8ppm、至少15, ppm、至少25ppm、至少30ppm、至少40ppm、至少50ppm或至少60ppm的氧。
[0033]在某些實施方式中，電動改變的含水流體包含溶劑化電子和電動改性或帶電的氧類的至少一種。在具體方面，其中所述溶劑化電子或電動改性或帶電的氧類的存在量為至少0.01ppm、至少0.lppm、至少0.5ppm、至少lppm、至少3ppm、至少5ppm、至少7ppm、至少lOppm、至少15ppm或至少20ppm。在某些方面，電動改變的充氧的含水流體包含通過分子氧穩定的溶劑化電子。
[0034]在該方法的某些方面，將細胞膜的結構或功能改變至足以提供對細胞內信號轉導的調節的能力在封閉的氣密容器中持續了至少兩個月、至少三個月、至少四個月、至少五個月、至少6個月、至少12個月或更長的時間。
[0035]另外的方面提供治療組合物，所述治療組合物包含電動改變的充氧的含水流體或溶液(并且任選與至少一種其他治療劑組合)，其中所述流體或溶液中的氧的存在量為至少8ppm、至少15ppm、至少25ppm、至少30ppm、至少40ppm、至少50ppm或至少60ppm的氧。在某些實施方式中，電動改變的充氧的含水流體或溶液包含電動改性的或帶電的氧類。在具體方面，電動改性的或帶電的氧類的存在量為至少0.5ppm、至少lppm、至少3ppm、至少5ppm、至少7ppm、至少lOppm、至少15ppm或至少20ppm。在某些實施方式中，電動改變的充氧的含水流體或溶液包含通過分子氧穩定的溶劑化電子。在具體方面，溶劑化電子的存在量為至少0.01ppm、至少0.lppm、至少0.5ppm、至少lppm、至少3ppm、至少5ppm、至少7ppm、至少lOppm、至少15ppm或至少20ppm。
[0036]其他實施方式涉及包含電動產生的富含氣體的流體的治療組合物，其中所述流體含有在大氣壓下水平為大于約百萬分之三十的擴散的或溶解的氣體，并且其中所述富含氣體的流體含有溶劑化電子。在這些實施方式的某些中，所述富含氣體的流體包括電動產生的富含氧的水。
[0037]具體方面提供包含電動改變的充氧的含水流體或溶液的組合物，其中所述流體或溶液中的氧的存在量為至少25ppm、至少30ppm、至少40ppm、至少50ppm或至少60ppm的氧。在【具體實施方式】中，電動改變的充氧的含水流體或溶液包含電動改性的或帶電的氧類。在某些方面，電動改性的或帶電的氧類的存在量為至少0.5ppm、至少lppm、至少3ppm、至少5ppm、至少7ppm、至少lOppm、至少15ppm或至少20ppm。在【具體實施方式】中，電動改變的充氧的含水流體或溶液包含通過分子氧穩定的溶劑化電子。在某些方面，溶劑化電子的存在量為至少0.01ppm、至少0.lppm、至少0.5ppm、至少lppm、至少3ppm、至少5ppm、至少7ppm、至少lOppm、至少15ppm或至少20ppm。 [0038]在某些方面中，充氧的含水流體或溶液包含通過分子氧穩定的溶劑化電子。在【具體實施方式】中，溶劑化電子的存在量為至少0.01ppm、至少0.lppm、至少0.5ppm、至少lppm、至少3ppm、至少5ppm、至少7ppm、至少lOppm、至少15ppm或至少20ppm。
[0039]附圖簡述
[0040]圖1是現有技術混合裝置的局部橫截面、局部框圖。
[0041]圖2是混合裝置的示例性實施方式的框圖。
[0042]圖3是將第一材料遞送到圖2的混合裝置的示例性系統的圖解。
[0043]圖4是圖2的混合裝置頂端部分的不完全局部橫截面視圖。
[0044]圖5是圖2的混合裝置第一側面部分的不完全橫截面視圖。
[0045]圖6是圖2的混合裝置第二側面部分的不完全局部橫截面視圖。
[0046]圖7是位于圖5的第一側面部分與圖6的第二側面部分之間的圖2的混合裝置的側面部分的不完全橫截面視圖。
[0047]圖8是圖2的混合裝置的轉子和定子的透視圖。
[0048]圖9是圖2的混合裝置的第一室內部的透視圖。
[0049]圖10是包括泵410的替代實施方式的圖2的混合裝置的第一室內部的不完全橫截面視圖。
[0050]圖11是圖2的混合裝置的第二室內部的透視圖。
[0051]圖12是混合裝置的替代實施方式的側面部分的不完全橫截面視圖。
[0052]圖13是供混合裝置的替代實施方式使用的殼體的中部替代實施方式的透視圖。[0053]圖14是供混合裝置的替代實施方式使用的軸承殼體的替代實施方式的不完全橫截面視圖。
[0054]圖15是通過垂直于旋轉軸的平面而取得的圖2的混合裝置的混合室的橫截面視圖，描繪了當轉子的穿孔接近(但不對齊)定子的孔隙時由穴泡引起的旋轉流類型。
[0055]圖16是通過垂直于旋轉軸的平面而取得的圖2的混合裝置的混合室的橫截面視圖，描繪了當轉子的穿孔對齊定子的孔隙時由穴泡引起的旋轉流類型。
[0056]圖17是通過垂直于旋轉軸的平面而取得的圖2的混合裝置的混合室的橫截面視圖，描繪了當之前對齊定子的孔隙的轉子的穿孔不再與其對齊時由穴泡引起的旋轉流類型。
[0057]圖18是轉子的替代實施方式的側視圖。
[0058]圖19是通過垂直于轉子的旋轉軸的平面而取得的放大的不完全橫截面視圖，描繪了在轉子中形成的穿孔和在定 子中形成的穿孔的交替構型。
[0059]圖20是通過經過并沿轉子的旋轉軸延伸的平面而取得的放大的不完全橫截面視圖，描繪了在轉子中形成的穿孔和在定子中形成的穿孔的構型。
[0060]圖21是通過經過并沿轉子的旋轉軸延伸的平面而取得的放大的不完全橫截面視圖，描繪了在轉子中形成的穿孔和在定子中形成的穿孔的替代偏移構型。
[0061]圖22是可用來構建轉子的穿孔和/或定子的孔隙的形狀的圖解。
[0062]圖23是可用來構建轉子的穿孔和/或定子的孔隙的形狀的圖解。
[0063]圖24是可用來構建轉子的穿孔和/或定子的孔隙的形狀的圖解。
[0064]圖25是可用來構建轉子的穿孔和/或定子的孔隙的形狀的圖解。
[0065]圖26是在表面附近形成的雙電層(“EDL”)的圖解。
[0066]圖27是混合室的內部的模型的透視圖。
[0067]圖28是圖27的模型的橫截面視圖。
[0068]圖29是實驗裝置的圖解。
[0069]圖30圖解了用圖2的混合裝置中的氧處理并儲存于各自在65度華氏溫度封蓋的500ml薄壁塑料瓶和1000ml玻璃瓶中的水中的溶解氧水平。
[0070]圖31圖解了用圖2的混合裝置中的氧處理并儲存于均在39度華氏溫度制冷的500ml薄壁塑料瓶和1000ml玻璃瓶中的水中的溶解氧水平。
[0071]圖32圖解了用圖2的混合裝置中的氧處理的500ml飲料流體的溶解氧保留。
[0072]圖33圖解了用圖2的混合裝置中的氧處理的500ml布勞恩(braun)平衡鹽溶液的溶解氧保留。
[0073]圖34圖解了另外一個實驗，其中通過用圖2的混合裝置中的氮氣處理水，圖2的混合裝置被用來排除水中氧。
[0074]圖35圖解了在標準的溫度和壓力下通過圖2的混合裝置排除水中氧。
[0075]圖36是示例性納米籠(nanocage)的圖解。
[0076]圖37A和37B圖解了富含氧的流體的瑞利散射效應；
[0077]圖38圖解了在富含氣體的流體和去離子對照流體的存在下促有絲分裂測定的細胞因子概況。
[0078]圖39圖解了在各種溶解氧飽和率的假單胞菌屬(Pseudomonas)細菌的生長速率的差異。
[0079]圖40A和40B圖解了使用富含氧的細胞培養基和非富含氣體的培養基的創傷體外愈合。
[0080]圖41A到41F示出真皮和表皮體內創傷愈合的組織學橫切片。
[0081]圖42圖解了用來檢測酸性粘多糖例如透明質酸的處理和對照的愈合創傷中Hale染色的表達；
[0082]圖43圖解了用來檢測處理和對照的愈合創傷中血管發生的血管假性血友病因子(Willebrand's Factor)染色的表達；
[0083]圖44圖解了用來檢測處理和對照的愈合創傷中彈性蛋白的Luna染色的檢測；
[0084]圖45圖解了對于處理和對照的愈合創傷的每個視野的肥大細胞的數目。
[0085]圖46圖解了在使用本發明的富含氣體的培養基和對照培養基的角膜成纖維細胞測定中在分開的時間點的死細胞的百分比。
[0086]圖47圖解了在聚合物袋中本發明的富含氣體的流體的儲存期限。
[0087]圖48圖解了在加壓罐充氧的流體⑴、本發明的富含氣體的流體⑵或對照去離子的流體(3)的存在下使脾細胞與MOG接觸的結果。
[0088]圖49-58示出細胞因子的全血樣品評估結果。
[0089]圖59-68示出支氣管肺泡灌洗流體(BAL)樣品評估的對應的細胞因子結果。
[0090]圖69-75示出緩激肽B2膜受體被固定到氨丙基硅烷(aminopropylsilane) (APS)生物傳感器上的研究。在圖69中指明了樣品板設置，并且根據如圖71中所指明的樣品設置對緩激肽與固定化受體的結合進行了評定。緩激肽結合的結果示于圖72中。根據在圖73中所指明的設置進一步滴定與受體結合的緩激肽。如圖74所表明的，與B2受體結合的緩激肽是濃度依賴性的，并且在本發明公開的專利的富含氣體的鹽水流體中與生理鹽水相比提高了結合親和力。與B2受體結合的緩激肽的穩定示于圖75中。
[0091]圖76-83示出顯示本文公開的【具體實施方式】影響調節性T細胞的能力的數據。該研究涉及輻射抗原呈遞細胞并引入抗原和T細胞。
[0092]圖84示出本發明的電動產生的流體減少了鮭魚降鈣素和動物模型的血清攝入。結果與緊密連接的增強是一致的。
[0093]圖85-89示出在肺組織中的緊密連接相關蛋白的表達水平，所述肺組織是來自用于產生圖84的數據的動物模型。
[0094]圖90-94示出從暴露于RDC1676-01 (通過具有添加的額外的氧的本專利裝置處理的無菌鹽水；本發明公開的富含氣體的電動產生的流體(Rev))的人包皮角質形成細胞獲得的數據，顯示出NOSl和N0S3、以及Nostrin、N0S3的上調。
[0095]圖95和96示出支持局部化電動效應(電壓/電流)的數據，所述電動效應發生在包括絕緣的轉子和定子部件的混合裝置中以允許在電動流體產生的過程中檢測電壓/電流效應。
[0096]圖97A-C示出為進一步表征本發明的電動產生的流體的基本性質而進行的核磁共振(NMR)研究的結果。電動產生的流體增加了報道分子海藻糖溶質的13C-NMR線寬。
[0097]圖98和99示出為進一步表征本發明的電動產生的流體的基本性質而進行的伏安研究(即方波伏安(圖98)和溶出極譜(圖99))的結果。在-0.14V、-0.47V、-1.02V和-1.36V觀察到對電動產生的流體唯一的方波伏安峰差異(相比于對照)。對于電動產生的Revera和Solas流體在-0.9伏特看到明顯的極譜峰(polaragraphic peak),并且非電動產生的空白和鹽水對照流體的波譜在-0.19和-0.3伏特示出特征峰，所述特征峰在電動產生的流體的波譜中是不存在的。
[0098]圖100-106示出評定電動產生的流體的測試對上皮細胞膜極性和離子通道活性的影響的膜片鉗技術的結果。結果表明本發明的電動產生的流體影響全細胞電導的電壓依賴性貢獻。
[0099]圖107A-D和108A-D示出數據，所述數據表明本發明的電動產生的流體(例如RDC1676-00、RDC1676-01、RDC1676-02和RDC1676-03)當單獨或作為硫酸沙丁胺醇的稀釋劑在雄性豚鼠中施用時保護免受醋甲膽堿誘導的支氣管收縮。
[0100]圖109-114示出為評定本發明的電動產生的流體在Brown Norway大鼠卵白蛋白敏化模型中的氣道抗炎特性而進行的布地奈德實驗的結果。本發明的電動產生的流體降低了嗜酸性粒細胞計數，示出在降低嗜酸性粒細胞計數上與布地奈德的強協同效應，降低Penh值，提高潮氣量，降低Eotaxin (嗜酸性粒細胞趨化因子)的血液水平，在用本發明的電動產生的流體(例如Rev60)單獨或連同布地奈德一起處理所產生的激發后6小時顯著增強兩種主要的關鍵抗炎細胞因子ILlO和干擾素Y的血液水平，并且降低了 Rantes的系統水平。數據示出存在布地奈德750ug / kg與本發明的電動產生的流體(例如Rev60)的實質的協同效應。
[0101]圖115示出本發明的電動產生的流體(例如Revera60和Solas)分別減少支氣管上皮細胞(BEC)中的DEP誘導 的TSLP受體表達大約90%和50%，而生理鹽水(NS)僅有邊際效應。
[0102]圖116示出本發明的電動產生的流體(例如Revera60和Solas)分別抑制支氣管上皮細胞中的DEP誘導的細胞表面結合的MMP9水平大約80%和70%，而生理鹽水(NS)僅有邊際效應。
[0103]發明詳述
[0104]本文所公開的某些實施方式涉及提供通過以下來治療至少一種炎癥癥狀的組合物和方法:使部位與包含新的電動產生的流體的治療組合物接觸或向受治療者施用包含新的電動產生的流體的治療組合物。在某些【具體實施方式】中，電動產生的流體包括富含氣體的電動產生的流體，該流體包括富含氧的水。
[0105]電動產牛的流體:
[0106]如本文所用的“電動產生的流體”是指出于本文工作實施例的目的通過本文詳細描述的示例性混合裝置(還參見US200802190088和W02008 / 052143，通過引用將二者整體并入本文)而產生的 申請人:發明的電動產生的流體。如本文公開和呈現的資料所證明，電動流體表示相對于現有技術非電動流體，包括相對于現有技術充氧的非電動流體(例如壓力罐充氧的流體及類似物)的新穎的且從根本上不同的流體。如在本文各方面中所公開的那樣，電動產生的流體具有獨特且新穎的物理和生物特性，包括但不限于以下:
[0107]在具體的方面，電動產生的流體是指在流體動力誘導的、局部化(例如就全部流體體積而言是非均一的)的電動效應(例如電壓/電流的脈沖)例如本文所述的裝置部件-局部化效應的存在下產生的流體。在具體的方面，所述流體動力誘導的、局部化的電動效應與本文公開并討論的表面相關的雙層和/或流動電流效應聯合。
[0108]在具體的方面，電動改變的含水流體適合于調節其中溶解的報告溶質(例如海藻糖(Trehelose))的13C-NMR線寬。NMR線寬效應是在測量例如在具體工作實施例中如本文所述的測試流體中的溶質“翻滾”的間接方法中。
[0109]在具體的方面，電動改變的含水流體的特征為以下至少一種:在-0.14V、-0.47￥、-1.02￥和-1.36￥的任何一個的與眾不同的方波伏安峰差異；在_0.9伏特的極譜峰；以及在-0.19和-0.3伏特不存在極譜峰，在-0.19和-0.3伏特的極譜峰是具體工作實施例中本文所公開的電動產生的流體所獨有的。
[0110]在具體的方面，電動改變的含水流體適合于改變細胞膜電導率(例如在本文公開的膜片鉗研究中測量的全細胞電導的電壓依賴性貢獻)。
[0111]在具體的方面，電動改變的含水流體是充氧的，其中在該流體中的氧的存在量為大氣壓下至少15, ppm、至少25ppm、至少30ppm、至少40ppm、至少50ppm或至少60ppm的溶解氧。在具體的方面，電動改變的含水流體具有小于15ppm、小于IOppm的大氣壓下的溶解氧或大致環境氧水平。
[0112]在具體的方面，電動改變的含水流體是充氧的，其中在該流體中的氧的存在量在大約8ppm與大約15ppm之間，并且在這種情況中有時在本文稱作“Solas”。
[0113]在具體的方面，電動改變的含水流體包括溶劑化電子(例如，通過分子氧穩定)和電動改性和/或帶電的氧類的至少一種，并且其中在某些實施方式中所述溶劑化電子和/或電動改性或帶電的氧類的存在量為至少0.01ppm、至少0.lppm、至少0.5ppm、至少lppm、至少3ppm、至少5ppm、至少7ppm、至少lOppm、至少15ppm或至少20ppm。
[0114]在具體的方面，電動改變的含水流體適合于改變細胞膜的結構或功能(例如改變膜相關蛋白的構象、配體結合活性或催化活性)至足以提供對細胞內信號轉導的調節，其中在具體的方面，所述膜相關蛋白包括選自由以下組成的組的至少一種:受體、跨膜受體(例如G蛋白偶聯受體(GPCR) ,TSLP受體、β 2腎上腺素能受體、緩激肽受體等)、離子通道蛋白、細胞內附著蛋白、細胞黏著蛋白和整聯蛋白。在某些方面，發揮效應的G蛋白偶聯受體(GPCR)與G蛋白的α亞基(例如G a s、G a 1、G a (j和G α 12)相互作用。
[0115]在具體的方面，電動改變的含水流體適合于調節細胞內信號轉導，包括鈣依賴性細胞通信途徑或系統的調節(例如磷脂酶C活性的調節或腺苷酸環化酶(AC)活性的調節)O
[0116]在具體的方面，電動改變的含水流體的特征為在本文工作實施例和其他地方中描述的各種生物活性(例如細胞因子、受體、酶和其他蛋白質和細胞內信號傳導途徑的調控)。
[0117]在具體的方面，電動改變的含水流體顯示出與沙丁胺醇和布地奈德的協同效應，如在本文工作實施例中所示。
[0118]在具體的方面，電動改變的含水流體減少在支氣管上皮細胞(BEC)中DEP誘導的TSLP受體的表達,如本文工作實施例中所示。 [0119]在具體的方面，電動改變的含水流體抑制在支氣管上皮細胞(BEC)中DEP誘導的細胞表面結合的ΜΜΡ9水平，如本文工作實施例中所示。
[0120]在具體的方面，電動改變的含水流體的生物效應被白喉毒素抑制，表明β阻斷、GPCR阻斷和鈣離子阻斷影響電動改變的含水流體的活性(例如關于調節性T細胞的功能)，如在本文工作實施例中所示。
[0121]在具體的方面，電動改變的含水流體的物理和生物效應(例如改變細胞膜的結構或功能至足以提供對細胞內信號轉導的調節的能力)在一個封閉的容器(例如，封閉的氣密容器)中持續了至少兩個月、至少三個月、至少四個月、至少五個月、至少六個月或更長時間。
[0122]因此，其他方面提供所述電動產生的溶液和制備電動改變的充氧的含水流體或溶液的方法，所述方法包括:在相對運動的兩個間隔的表面間提供流體材料流，并且在所述兩個間隔的表面間界定混合體積，其中流動的流體材料在混合體積內和穿過混合體積的單次通過的滯留時間為大于0.06秒或大于0.1秒；和在適于將至少20ppm、至少25ppm、至少30、至少40、至少50或至少60ppm的氧(O2)溶解在材料中并電動改變流體或溶液的條件下將氧引入混合體積內的流動的流體材料。在某些方面，在小于100毫秒、小于200毫秒、小于300毫秒或小于400毫秒內將氧注入材料中。在【具體實施方式】中，表面積與體積比為至少
12、至少20、至少30、至少40或至少50。
[0123]其他方面提供制備電動改變的充氧的含水流體或溶液的方法，所述方法包括:在兩個間隔的表面間提供流體材料流，所述兩個間隔的表面在其間界定了混合體積；在適于在小于100毫秒、小于200毫秒、小于300毫秒或小于400毫秒內將至少20ppm、至少25ppm、至少30、至少40、至少50或至少60ppm的氧擴散到材料中的條件下將氧引入在混合體積中的流動的材料中。在某些方面，在混合體積內的所述流動的材料的滯留時間為大于0.06秒或大于0.1秒。在【具體實施方式】中，表面積與體積比為至少12、至少20、至少30、至少40或至少50。
[0124]另外的實施方式提供制備電動改變的充氧的含水流體或溶液的方法，所述方法包括使用用于通過混合第一材料和第二材料來產生輸出混合物的混合裝置，所述裝置包括:第一室，其被構造為接納來自第一材料來源的第一材料；定子；具有旋轉軸的轉子，所述轉子被設置在定子內并且被構造為環繞其中的旋轉軸旋轉，所述轉子和定子的至少一個具有多個穿孔；在轉子和定子之間界定的混合室，所述混合室與第一室流體聯通并且被構造為接納來自第一室的第一材料，并且所述第二材料經由轉子和定子中的一個中所形成的多個穿孔供給混合室；第二室，其與混合室流體聯通并且被構造為接納來自混合室的輸出材料；以及安裝在第一室內的第一內部泵，所述第一內部泵被構造為將第一材料從第一室抽吸到混合室中。在某些方面，第一內部泵被構造為在第一材料進入混合室之前賦予第一材料圓周速度。
[0125]其他實施方式提供制備電動改變的充氧的含水流體或溶液的方法，所述方法包括使用用于通過混合第一材料和第二材料來產生輸出混合物的混合裝置，所述裝置包括:定子；具有旋轉軸的轉子，所述轉子被設置在定子內并且被構造為環繞其中的旋轉軸旋轉；在轉子和定子之間界定的混合室，所述混合室具有:開放的第一末端，第一材料通過該開放的第一末端進入混合室；和開放的第二末端，輸出材料通過該開放的第二末端離開混合室，第二材料通過轉子和定子的至少一個進入混合室；第一室，其與所述混合室的開放的第一末端的至少大部分聯通；以及第二室，其與所述混合室的開放的第二末端聯通。
[0126] 其他方面提供根據上述方法的任何一種制備的電動改變的充氧的含水流體或溶液。
[0127]
[0128]炎癥可以作為對外來材料尤其是微生物來源入侵受治療者的防御性反應產生。此外，機械創傷、毒素和瘤形成可以誘導炎性反應。白細胞的積聚和隨后的激活是大部分形式的炎癥發病的中心事件。炎癥的缺乏可能危害宿主，使其對惡化的感染或創傷敏感。諸如延長的炎性反應的過量炎癥可能導致炎性疾病，所述炎性疾病包括但不限于:糖尿病、動脈硬化、白內障、慢性皮膚病、再灌注損傷和癌癥；感染后綜合征，例如感染性腦膜炎、風濕熱；以及風濕性疾病，如系統性紅斑狼瘡和類風濕性關節炎。這些疾病每年影響著世界范圍內數百萬的人們，并且引起死亡率和發病率增加。這些不同疾病過程中炎性反應的共性使得其能調節預防或治療人類疾病的主要元件。
[0129]促炎性細胞因子的過量產生參與了大量炎性疾病和自身免疫疾病的發病。TNFa分泌是炎性級聯引發的主要事件(Brennan F.Μ.,等人.Lancet, 1989, 2:244-7 ；HaworthC，等人Eur.J.1mmunol.1991,21:2575-2579)并且其直接促進這些疾病的引發和維持。其他細胞因子也發揮作用，包括白細胞介素I β (IL-Ιβ)、IL-6、IL-8、IL-12、一氧化氮(NO)、IFN-Y、粒細胞集落刺激因子(G-CSF)、粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)以及IL-10。這些細胞因子的某些(例如，IL-8)可以增加或加重炎性反應，而其他(例如，IL-10)可以降低或減輕炎性反應。[0130]免疫系統的細胞尤其是巨噬細胞會對激活性刺激物反應而分泌這些細胞因子中的一些。細胞因子的靶細胞可以在任何身體隔室局部化并且可經由長距離機制作用或可以作用于鄰近的細胞。因此，細胞因子可以以局部的或全身的方式調控炎癥。
[0131]炎癥相關的病癥或疾病
[0132]本文的某些實施方式涉及通過預防或減輕與某些病癥或疾病相關的至少一種炎癥癥狀治療受治療者的治療組合物和方法。例如，本文公開的治療組合物和/或方法可能對于治療或預防選自由以下組成的組的一種或多種病癥或疾病是有用的:過敏、哮喘、濕疹、類風濕性關節炎、發熱、燒傷或其他創傷、感染(病毒、細菌、其他微生物)、接觸刺激性皮炎、脂溢性皮炎、昆蟲咬傷、昆蟲螫傷、曬傷、蕈樣肉芽腫病、壞疽性膿皮癥、毒常春藤、有毒漆樹、紅斑痤瘡、眼睛炎癥、青光眼、干眼、紅眼、眼紅斑痤瘡、瞼緣炎、瞼板腺炎、角膜炎、結膜充血、眼瞼充血等、移植物抗宿主病、慢性支氣管炎、特應性皮炎、蕁麻疹、過敏性鼻炎、過敏性結膜炎、多發性硬化病、腱炎、腦中的慢性炎癥、氣道炎性疾病、慢性炎性腸病(克羅恩病(Crohn’s disease))、春季結膜炎、嗜酸粒細胞肉芽腫、銀屑病、膿毒性休克、潰瘍性結腸炎、心肌再灌注損傷和腦再灌注損傷、冠狀動脈粥樣硬化(coronary arteryathesclerosis)、心臟病、慢性腎小球腎炎、內毒素性休克和成人型呼吸窘迫綜合征。
[0133]炎性皮膚病癥是其中炎性細胞(例如，多形核中性粒細胞和淋巴細胞)在沒有明顯的或已知的感染病因的條件下浸潤皮膚的那些皮膚病癥。炎性皮膚病癥的癥狀一般包括:紅斑(發紅)、水腫(腫脹)、疼痛、瘙癢、表面溫度增加和功能損失。如本文所用的炎性皮膚病癥包括但不限于:濕疹和相關病癥、昆蟲咬傷、紅皮病、蕈樣肉芽腫病和相關病癥、壞疽性膿皮癥、銀屑病、多形性紅斑、紅斑痤瘡、甲癬、毒常春藤、有毒漆樹以及痤瘡和相關病癥。這些癥狀或疾病的某些可能導致癢、腫脹、疼痛、瘙癢、表面溫度增加、功能損失、發紅、鱗屑、起皰、色素沉著過度或色素沉著不足以及其他炎癥癥狀。[0134]已經用類固醇；氨甲喋呤；免疫抑制藥物，包括環磷酰胺、環孢菌素，硫唑嘌呤和來氟米特；非類固醇類抗炎劑，如阿司匹林、對乙酰氨基酚；和C0X-2抑制劑；金劑和抗瘧疾治療來治療與炎癥相關的一些病癥或疾病。這些藥物具有多種缺點和不利反應，包括注射部位反應、皮疹、上呼吸道感染、自身免疫病患和對感染的敏感性增加。此外，許多抗炎性藥物需要靜脈內(IV)或皮下(SC)施用，這與較方便和依從性較好的口服或局部皮膚途徑相反。因此，仍然需要開發用于炎癥相關病癥和疾病的新藥物和治療方法。
[0135]組合治療:
[0136]其他方面提供的本文所公開的本發明方法還包括組合治療，其中將至少一種另外的治療劑施用給患者。在某些方面，所述至少一種另外的治療劑選自由下列組成的組:短效β2_激動劑、長效β2_激動劑、抗膽堿能藥、皮質類固醇、系統性的皮質類固醇、肥大細胞穩定劑、白三烯改性劑、甲基黃嘌呤以及它們的組合。在【具體實施方式】中，所述至少一種另外的治療劑選自由下列組成的組:由β 2_激動劑組成的支氣管擴張劑，β 2-激動劑包括沙丁胺醇、左旋沙丁胺醇、吡布特羅、阿福特羅、福莫特羅、沙美特羅；和抗膽堿能藥，例如異丙托銨和噻托銨；皮質類固醇，包括倍氯米松、布地奈德、氟尼縮松、氟替卡松、莫米松、曲安西龍、甲基潑尼松龍、潑尼松龍、潑尼松；白三烯改性劑，包括孟魯司特、扎魯司特和齊留通；肥大細胞穩定劑，包括色甘酸鈉和奈多羅米；甲基黃嘌呤，包括茶堿；組合藥物，包括異丙托銨和沙丁胺醇、氟替卡松和沙美特羅、布地奈德和福莫特羅；抗組胺劑，包括羥嗪、苯海拉明、氯雷他定、西替利嗪、和氫化可的松；免疫系統調節藥物，包括他克莫司和吡美莫司；環孢菌素；硫唑嘌呤；麥考酚酸酯；以及它們的組合。
[0137]其他方面提供的本文所公開的本發明方法還包括與下列的組合治療:TSLP和/或TSLPR拮抗劑(例如，對TSLP和TSLP受體特異性的中和抗體、可溶性TSLP受體分子和TSLP受體融合蛋白，如TSLPR免疫球蛋白Fe分子或編碼多于一種受體鏈的組分從而模擬生理受體異源二聚體 或更高級的寡聚物的多肽。如果受體包含多于一種的多肽鏈，則可以采用單鏈融合體)。
[0138]電動產生的富含氣體的流體和溶液的抗炎活性
[0139]根據本發明的某些方面，本文所公開的富含氣體的流體和/或溶液具有抗炎特性和作用，并且可用作治療受炎癥相關疾病或病患折磨的受治療者的抗炎劑。圖38顯示來自健康血液供體的經過刺激的淋巴細胞的細胞因子特征的實驗結果。如圖38中可以看到的，本發明的富含氧的流體(水)引起特定細胞因子的下調，尤其是IL-6、IL-8和IL-1 β。
[0140]促炎性細胞因子的產生增加參與了大量炎性疾病和自身免疫疾病的發病。TNFa分泌是炎性級聯引發的主要事件(Brennan F.Μ.,等人.Lancet, 1989, 2:244-7 ；HaworthC，等人Eur.J.1mmunol.1991,21:2575-2579)并且其直接促進炎性疾病和自身免疫疾病的引發和維持。其他促炎性細胞因子也發揮有作用，包括白細胞介素I β (IL-Ιβ)、IL-6、IL-8、IL-12、一氧化氮、IFN-y和GM-CSF，而諸如IL-10的抗炎性細胞因子則可以降低疾病。免疫系統的細胞尤其是巨噬細胞會對激活性刺激物反應而分泌這些細胞因子中的許多。
[0141]炎性過程中涉及了多種細胞類型。單核細胞、巨噬細胞和其他免疫細胞的TNFa過量產生是大量疾病發病的關鍵因素。巨噬細胞和T細胞在免疫反應的引發和維持中尤其發揮重要的作用。一旦被病理的或免疫原性刺激物激活，巨噬細胞便通過釋放包括下列的大量細胞因子而反應:TNF- a、IL-1 β、IL-8, IL-12、一氧化氮(NO)、IL-6, GM-CSF, G-CSF,M-CSF以及其他。T細胞釋放IL-2、IL-4、INF- Y和其他炎性細胞因子。這些細胞因子激活其他的免疫細胞，并且一些也可以作為獨立的細胞毒性劑起作用。巨噬細胞和T細胞來源的炎性介質的過量釋放可特定地導致正常細胞和周圍組織損傷。
[0142]促炎性細胞因子參與了 HIV-AIDS和其他病毒感染，包括巨細胞病毒感染、流感病毒感染和孢疹病毒家族感染。TNFa增強人巨細胞病毒的主要即時早期增強子/啟動子的基本活性，并且在前期單核細胞(premonocytic cell)中的潛伏性HCMV感染再激活中起作用(Prosch S.，等人 Virologyl995，208:197-206)。
[0143]此外，大量炎性細胞因子促進患膿毒癥或內毒素性休克的患者的發病率。例如，TNFa和IL-Ιβ在膿毒癥、膿毒性休克和內毒素性休克中具有已經充分確定的重要作用。這些細胞因子的水平增加伴隨有發熱、低血壓和休克(Smith J.W.等人J.Clin.0ncol.1992,10:1141-1152 ；Chapman P.B.，等人 J.Clin.0ncol.1987,5:1942-1951)以及磷脂酶 A2(Gronich J.，等人 J.Clin.1nvest.1994,93:1224-1233)和 NO 合酶的基因表達的誘導。
[0144]NO從平滑肌細胞的誘導在膿毒性休克期間介導了平均動脈壓和全身血管阻力的降低，這表明了 NO的基本作用。因此，對IL-8、IL-li3和NO的靶下調作用可以有益于治療炎性疾病或病患，包括膿毒癥、膿毒性休克和內毒素性休克。
[0145]TNFa的過度產生促進諸如糖尿病和類風濕性關節炎的大量自身免疫疾病的臨床特征。系統性紅斑 狼瘡(SLE)也會被IL-1 β和TNF a水平增加促進。在狼瘡患者中，血清C反應性蛋白、IL-1 β和TNFa水平高于對照，這表明炎性反應的增加在該疾病中起作用(Liou L.B.Clin.Exp.Rheumatol.2001，19:515-523)。具有一種形式的 SLE 即神經精神性紅斑狼瘡(NPLE)的患者的研究表明表達TNFa的mRNA的外周血單核細胞的數目以及NO代謝物的腦脊液水平與NPLE疾病的嚴重程度相關(Svenungsson E.,等人.Ann.Rheum.Dis.2001,60:372-9)。
[0146]在動物模型中，IL-1和TNF a在多種急性和慢性反應中起重要作用。此外，IL-11、IFNa和IFNP還可以上調炎性反應。相反地，幾種細胞因子可以參與下調炎性反應(即，IL-4、IL-10、IL-13以及其他)。如在實施例1中所示，與具有T3抗原的本發明的富含氣體的流體接觸的細胞顯示出比在具有T3抗原的對照培養基中增加的IFN- Y水平，而具有T3抗原的本發明的富含氣體的培養基中IL-8低于具有T3抗原的對照培養基。此外，在具有PHA的本發明的富含氣體的培養基中IL-6、IL-8和TNF-a水平低于具有PHA的對照培養基，而具有PHA的本發明的富含氣體的流體中的IL-1 β水平與具有PHA的對照培養基相比則較低。在單獨的本發明的富含氣體的培養基中，IFN-Y水平高于對照培養基。這些結果與抗炎性微環境一致。
[0147]NO被認為是炎性反應的介質和調節劑。它對病原具有細胞毒性特性，但是也可能對受治療者自身的組織具有有害作用。(Korhonen等人，Curr Drug Targets InflammAllergy4 (4):471_9，2005)。NO與可溶性的鳥苷酸環化酶反應形成環尿苷一磷酸(cGMP)，該環尿苷一磷酸介導許多NO的作用。NO也可以與分子氧和過氧化物陰離子相互作用產生可以改變各種細胞功能的活性氧類。NO的這些間接作用對炎癥具有顯著的作用，其中大量NO由誘導型NO合酶(iNOS)產生并且活性氧類由激活的炎性細胞合成。[0148]NO可以由角質形成細胞、成纖維細胞、內皮細胞和可能的其他細胞產生。NO的一些血管作用包括血管舒張、抑制血小板對血管內皮的黏著、抑制白細胞對血管內皮的黏著以及清除超氧化物酶。(Shah 等人，Env.Health Persp.V.106 (5):1139-1143)。
[0149]此外，已經顯示NO合成的抑制延緩創傷收縮、改變膠原組織并改變新生表皮(neoepidermis)厚度。(Amadeu 和 Costa, J.Cutan.Pathol.33:465-473, 2006)。創傷中肥大細胞遷移和血管發生也受NO抑制的影響。(出處同上)不受任何具體的機制理論束縛，在某些實施方式中，本發明的富含氣體的流體可以調節局部的NO和/或細胞NO的產生或降解，這與本文所公開的實施例部分所說明的創傷愈合作用譜一致。由于調控途徑不同，在某些實施方式中，本發明的富含氣體的流體可以增加NO產生和/或延遲NO降解，而在其他的某些實施方式中，本發明的富含氣體的流體可以降低NO產生和/或促進NO降解。
[0150]特定地，用富含氧的鹽水溶液處理創傷顯示在第4天至第11天和第3天與第11天之間創傷愈合增加，用富含氧的鹽水溶液處理的創傷中新表皮遷移速度為用生理鹽水溶液處理的創傷的表皮遷移的2至4倍，如本文的實施例9所示。該研究還顯示在第15天和第22天之間，如通過較早地形成了較多成熟的表皮層所證明的，用富含氧的鹽水溶液處理的創傷以較快的速率分化。在所有階段，在用富含氧的鹽水溶液處理的創傷內沒有出現與正常愈合相伴隨的表皮中所出現的增厚。
[0151]因此，根據創傷愈合作用譜，但不受任何具體理論限制，據信富含氧的鹽水溶液可以在創傷內調節NO的局部水平和/或細胞水平。NO在創傷愈合中調節生長因子、膠原沉積、炎癥、肥大細胞遷移、表皮增厚和新血管形成。此外，一氧化氮是由受氧調節的誘導型酶產生的。
[0152]在肥大細胞遷 移的情況下，對于富含氧的溶液還出現了遷移早晚的差異。這與關于NO合成抑制領域中已知的情況一致(Amadeu和Costa, J.Cutan Pathol33:465-473,2006)。
[0153]現在參考圖41A至41F，各圖解比較了存在或不存在富含氧的鹽水溶液的豬表皮組織的創傷愈合結果。如可以看到的，在第1、4和16天進行了對照創傷和使用富含氧的鹽水溶液的創傷的愈合觀察。
[0154]圖41A圖解第I天對照創傷的創傷愈合。如可以看到的，創傷顯示出表皮/真皮增厚和輪廓損失。圖41B圖解第I天使用富含氧的鹽水溶液處理的創傷的創傷愈合。創傷顯示出通常在新創傷上正常的表皮/真皮厚度和正常的輪廓。
[0155]現在參考圖41C和41D，圖解了第4天對照創傷的創傷愈合和第4天用富含氧的鹽水溶液處理的創傷的創傷愈合。對于圖41C中所圖解的對照創傷，創傷顯示出600微米的表皮突出物。在圖41D中的用富含氧的鹽水溶液處理的創傷中，圖示了 1200微米的表皮突出物。因此，在實驗的前4天，使用富含氧的鹽水溶液處理的創傷中產生的表皮突出物顯示出為未用富含氧的鹽水溶液處理的創傷兩倍的表皮生長速率。
[0156]現在參考圖41E，圖解了第16天的對照創傷。該創傷與圖41F中所圖解的用富含氧的鹽水溶液處理的創傷所示出的相比，顯示出具有表皮/真皮輪廓損失的較低分化的表皮。圖41F在創傷中顯示出更加分化的表皮和更正常的表皮/真皮輪廓。
[0157]在炎癥過程的前兩個階段，外來體被破壞，例如，如果外來體為生物體；或外來體周圍的組織被松散，例如，如果外來體為碎片。在愈合階段，炎癥開始消退；各血管和血管模式變得再次正常；并且創傷修復開始。修復過程的三個主要事件為(I)通過成纖維細胞增殖形成新的結締組織；(2)上皮再生；和(3)長出新的毛細血管。
[0158]甚至在炎癥消退之前，成纖維細胞就開始由周圍的正常組織向損傷區域移動，在所述正常組織中，成纖維細胞通常以休眠狀態存在。它們通過沿纖維蛋白鏈的變形運動遷移并將它們本身分布在整個愈合區域。一旦固定在損傷組織的位置內，它們便開始合成膠原并分泌這種蛋白，這種蛋白將其自身安排在纖維中。纖維以其縱軸在最大應力方向將其自身定向。隨著膠原束硬度增加，成纖維細胞逐漸退化并緊密地連接至該束，并且損傷區域轉化為疤痕組織。
[0159]疤痕組織形成的同時，在創傷邊緣的完整的表皮細胞開始以一個片層增殖并向損傷區域中心移動。隨著炎癥消退，增加了對直接血液來源的需要，并且在創傷部位出現了血管發生。
[0160]炎癥是涉及多種細胞類型的復雜過程。例如，肥大細胞釋放觸發早期血管舒張的介質，伴隨著內皮細胞的分離和在內皮下層的膠原纖維的暴露。血管內形成的細胞間隙內的纖維捕獲血小板并觸發介質從這些細胞釋放。
[0161]除血小板之外，暴露的膠原纖維還與濾過加寬的血管壁的孔的血漿蛋白相互作用，包括血液凝固級聯、增加血管舒張、增加血管透性和趨化性的觸發因子。
[0162]此外，補體級聯可以被以下幾種刺激物激活:損傷的血管、損害的細胞釋放的蛋白水解酶、任何參與的細菌的膜組分和抗原-抗體復合體。激活的補體組分的一些充當趨化因子，負責白細胞向發炎區 域的流動，而其他則促進吞噬作用并參與細胞裂解。
[0163]此外，據信本發明的富含氣體的流體或溶液還可以調控炎癥的至少一方面所涉及的至少一種細胞因子，所述細胞因子包括但不限于MAF(巨噬細胞活化因子)、MMIF(巨噬細胞遷移抑制因子)、MCF(巨噬細胞趨化因子)、LMIF(白細胞遷移抑制因子)、HRF(組胺釋放因子)、TF (轉移因子)、白細胞介素(IL-1、IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-7、IL-8、IL-9、IL-10、IL-11、IL-12、IL-13、IL-14、IL-15 等)、TNF-a、TNF-β、干擾素(IFN- α、IFN- β、IFN- y、IFN- ζ、IFN- δ等)、G-CSF (粒細胞集落刺激因子)、GM-CSF (粒細胞巨噬細胞CSF) ,M-CSF (巨噬細胞CSF)、多潛能-CSF (IL-3)、成纖維細胞生長因子(aFGF、bFGF)、EGF(表皮生長因子)、NGF(神經生長因子)、H)GF(血小板源生長因子)、VEGF(血管內皮生長因子)、轉化生長因子(TGF-a、TGF-13等)、NAP_2 (嗜中性白細胞活化蛋白2)、PF_4 (血小板因子4)、血小板球蛋白、MCP-1 (單核細胞趨化蛋白l)、MCP-3、MIP-la、ΜΙΡ_1β_+(巨噬細胞炎性蛋白)、RANTES(激活后調節的正常T細胞表達和分泌的細胞因子(regulatedupon activation normal T expressed and presumably secreted chemokine))、HSP (熱休克蛋白)、GRP (葡萄糖調節蛋白)、泛素以及其他細胞因子。
[0164]因此，在某些實施方式中，富含氣體的流體和/或治療組合物可以增加抗炎性分子或細胞因子的產生和/或分泌或降低抗炎性分子或細胞因子的降解，從而減輕或預防至少一種炎癥癥狀。在其他實施方式中，本發明的富含氣體的流體和/或治療組合物可以降低促炎性分子或細胞因子的產生和/或分泌或增加促炎性分子或細胞因子的降解，從而減輕或預防至少一種炎癥癥狀。
[0165]先前的研究已顯示了抗MOG抗體在脫髓鞘作用的增大和EAE (實驗性自身免疫腦脊髓炎)惡化中的關鍵作用，EAE是用于類風濕性關節炎的人自身免疫疾患的動物模型系統。(Linington,等人 1992.J.Neuroimmunol.40:219-224)。此外，抗MOG 的抗體參與了多發性硬化病的發病。(Berger 等人 N.Engl.J.Med.2003Jull0 ；349(2):139-45)。
[0166]如在圖48和實施例12中所示的，本發明所發明的富含氣體的流體放大了淋巴細胞對之前引發動物的抗原的反應。如圖48中所示，當在用本發明的包含溶劑化電子的富含氣體的流體重構的流體中培養時，與加壓的、充氧的流體(壓力罐)或對照去離子化流體相t匕，淋巴細胞增殖對MOG激發的反應更高。
_7] 本發明的電動產生的富含氣體的流體和溶液
[0168]一種流體用另一種流體擴散或富集可產生這兩種流體的溶液或懸浮液。具體而言，用氣體(例如氧)富集液體可能對包括治療性處理的某些應用是有益的。如本文所用“流體” 一般地可指對于任何具體公開的實施方式的液體、氣體、蒸汽、液體和/或氣體的混合物或者它們的任何組合。此外，在某些實施方式中“液體” 一般地可指純的液體或者可指凝膠、溶膠、乳液、流體、膠體、分散體或混合物以及它們的任何組合；以上任何一種粘度可不同。
[0169]在本文所公開的【具體實施方式】中，溶解的氣體包括環境空氣。在一個優選的實施方式中，溶解的氣體包括氧。在另一個實施方式中，溶解的氣體包括氮氧化物。
[0170]存在幾種領域認可的氣體富集液體(例如氧富集水)的方法。例如，渦輪機充氣系統可在葉輪的一組旋轉葉片附近釋放空氣，葉輪將空氣或氧與水混合，或者水可被噴灑到空氣中以提高其氧含量。另外，市場上的其他系統將空氣或氧注入到水中并且使水/氣體經歷大規模渦旋。水中氧的自然存在水平通常是不超過10ppm(百萬分率)，這被認為是100%的溶解氧的水平。在某些裝置上的測試已示出在理想條件下，所述裝置能夠向上達到大約20ppm或水的自然氧水平的兩倍。在某些實施方式中，氧水平可能甚至更高。
[0171]在本文所公開的某些實施方式中，本發明的富含氣體的流體提供了抗炎益處。本文所公開的某些實施方式涉及包含以下物質的治療組合物:本發明的富含氣體的流體以及任選的至少一種另外的治療劑，如藥物、金屬、肽、多肽、蛋白、核苷酸、碳水化合物或糖基化蛋白、脂肪(包括油或蠟)或預防或減輕與炎癥相關的病癥或疾病的至少一個癥狀的其他藥劑。
[0172]此外，本文所公開的某些實施方式包括涉及創傷的炎癥的治療組合物和方法。創傷護理期望的是改善皮下組織的健康和外觀。諸如刀傷、擦傷或水皰的損傷誘導的創傷或諸如外科切口或造口(ostomiess)的手術誘導的創傷需要局部的治療來補救受影響的區域并防止進一步的皮膚損害。如果創傷沒有正確處理，則可能會導致進一步的皮膚刺激，如炎癥，并且可能導致二次感染和受治療者的進一步的不舒適。
[0173]本文提供的【具體實施方式】涉及如本文所定義的擴散器處理的治療性流體，所述流體包括:流體主材料；擴散到該主材料中的輸注材料；和任選地在該主材料中分散的至少一種治療劑，其中該輸注材料包括在該主流體中的氧微泡，其中大多數的微泡在尺寸上小于0.2微米或者優選地小于0.1微米。在某些實施方式中，在輸注的流體主材料中的溶解氧水平可保持在大氣壓下大于約30ppm持續至少13小時。在其他具體的實施方式中，在輸注的流體主材料中的溶解氧水平可保持在大氣壓下大于40ppm持續至少3小時。
[0174] 在另外的實施方式中，輸注的流體主材料還包括鹽水溶液。在其他的實施方式中，輸注的流體主材料在大氣壓下于密封容器內保持至少約20ppm到約40ppm的溶解氧水平持續至少100天、優選至少365天的時間。在某些實施方式中，輸注的流體主材料可具有大氣壓下至少50ppm的溶解氧水平。
[0175]在某些實施方式中，輸注的流體主材料在氧已擴散到其中之后對通過它的激光束發光表現出瑞利散射持續選擇的時間段。
[0176]表A說明了在用富含氧的鹽水溶液處理的愈合創傷和在本發明的富含氣體的富含氧的鹽水溶液的樣品中進行的各種分壓測量。
[0177]表A
【權利要求】
1.一種用于治療炎癥的方法，其包括給需要其的受治療者施用治療有效量的電動改變的含水流體，所述電動改變的含水流體適合于改變細胞膜的結構或功能至足以提供對受治療者的細胞中的細胞內信號轉導的調節，其中炎癥或至少一種炎癥癥狀被治療或減輕。
2.如權利要求1所述的方法，其中所述電動改變的含水流體的改變包括將所述流體暴露于流體動力誘導的、局部化的電動效應。
3.如權利要求2所述的方法，其中暴露于所述局部化的電動效應包括暴露于電壓脈沖和電流脈沖的至少一種。
4.如權利要求2所述的方法，其中將所述流體暴露于流體動力誘導的、局部化的電動效應包括將所述流體暴露于用來產生所述流體的裝置的誘導電動效應的結構部件。
5.如權利要求1所述的方法，其中所述至少一種炎癥癥狀涉及選自由以下組成的組中的至少一種病癥:過敏、哮喘、濕疹、類風濕性關節炎、發熱、燒傷或其他創傷、微生物感染、接觸刺激性皮炎、脂溢性皮炎、昆蟲咬傷、昆蟲螫傷、曬傷、蕈樣肉芽腫病、壞疽性膿皮癥、毒常春藤、有毒漆樹、紅斑痤瘡、眼睛炎癥、青光眼、干眼、紅眼、眼紅斑痤瘡、瞼緣炎、瞼板腺炎、角膜炎、結膜充血、眼瞼充血等、移植物抗宿主病、慢性支氣管炎、特應性皮炎、蕁麻疹、過敏性鼻炎、過敏性結膜炎、多發性硬化病、腱炎、腦中的慢性炎癥、氣道炎性疾病、慢性炎性腸病、春季結膜炎、嗜酸性粒細胞肉芽腫、銀屑病、膿毒性休克、潰瘍性結腸炎、心肌再灌注損傷和腦再灌注損傷、慢性腎小球腎炎、動脈粥樣硬化、內毒素性休克和成人型呼吸窘迫綜合征。
6.如權利要求1所述的方法，其中所述至少一種炎癥癥狀選自由以下組成的組:癢、水腫、疼痛、瘙癢、溫度 增加、功能損失、發紅、鱗屑、起皰、色素沉著過度和色素沉著不足。
7.如權利要求1所述的方法，其中所述電動改變的含水流體包括富含氧的水。
8.如權利要求1所述的方法，其中所述電動改變的含水流體調節施用部位的一氧化氮的局部水平或細胞水平。
9.如權利要求1所述的方法，其中所述電動改變的含水流體促進選自由以下組成的組的至少一種細胞因子在施用部位局部降低:IL-1 β、IL-8、TNF-a和TNF-β。
10.如權利要求1所述的方法，還包括通過用其他抗炎劑同時或輔助治療受治療者來協同或非協同性地抑制或減少炎癥。
11.如權利要求10所述的方法，其中所述其他抗炎劑包括類固醇。
12.如權利要求11所述的方法，其中所述類固醇包括糖皮質激素類固醇。
13.如權利要求12所述的方法，其中所述糖皮質激素類固醇包含布地奈德或其活性衍生物。
14.如權利要求1所述的方法，還包括組合治療，其中將至少一種另外的治療劑施用給患者。
15.如權利要求14所述的方法，其中所述至少一種另外的治療劑選自由以下組成的組:短效β2_激動劑、長效β2_激動劑、抗膽堿能藥、皮質類固醇、全身性皮質類固醇、肥大細胞穩定劑、白三烯改性劑、甲基黃嘌呤、β 2-激動劑、沙丁胺醇、左旋沙丁胺醇、吡布特羅、阿福特羅、福莫特羅、沙美特羅；抗膽堿能藥，包括異丙托銨和噻托銨；皮質類固醇，包括倍氯米松、布地奈德、氟尼縮松、氟替卡松、莫米松、曲安西龍、甲基潑尼松龍、潑尼松龍、潑尼松；白三烯改性劑，包括孟魯司特、扎魯司特和齊留通；肥大細胞穩定劑，包括色甘酸鈉和奈多羅米；甲基黃嘌呤，包括茶堿；組合藥物，包括異丙托銨和沙丁胺醇、氟替卡松和沙美特羅、布地奈德和福莫特羅；抗組胺劑，包括羥嗪、苯海拉明、氯雷他定、西替利嗪和氫化可的松；免疫系統調節藥物，包括他克莫司和吡美莫司；環孢菌素；硫唑嘌呤；麥考酚酸酯；以及它們的組合。
16.如權利要求14所述的方法，其中所述至少一種另外的治療劑為TSLP和/或TSLPR拮抗劑。
17.如權利要求16所述的方法，其中所述TSLP和/或TSLPR拮抗劑選自由下列組成的組:對TSLP和TSLP受體特異性的中和抗體、可溶性TSLP受體分子和TSLP受體融合蛋白，包括TSLPR免疫球蛋白Fe分子或編碼多于一種受體鏈的組分的多肽。
18.如權利要求1所述的方法，其中改變細胞膜的結構或功能包括改變膜相關蛋白的構象、配體結合活性或催化活性。
19.如權利要求18所述的方法，其中所述膜相關蛋白包括選自由以下組成的組中的至少一種:受體、跨膜受體、離子通道蛋白、細胞內附著蛋白、細胞黏著蛋白、整聯蛋白等。
20.如權利要求19所述的方法，其中所述跨膜受體包括G蛋白偶聯受體(GPCR)。
21.如權利要求20所述的方法，其中所述G蛋白偶聯受體(GPCR)與G蛋白α亞基相互作用。
22.如權利要求21所述的方法，其中所述G蛋白α亞基包括選自由Ga s、G a a q和Ga 12所組成的組中的至少一種。
23.如權利要求22所述的方法，其中所述至少一種G蛋白a亞基是Gaq。
24.如權利要求1所述的方法，其中改變細胞膜的結構或功能包括改變膜電導率或膜電位。
25.如權利要求24所述的方法，其中調節細胞膜電導率包括調節全細胞電導。
26.如權利要求25所述的方法，其中調節全細胞電導包括調節全細胞電導的至少一種電壓依賴性貢獻。
27.如權利要求1所述的方法，其中細胞內信號轉導的調節包括鈣依賴性細胞通信途徑或系統的調節。
28.如權利要求1所述的方法，其中細胞內信號轉導的調節包括磷脂酶C活性的調節。
29.如權利要求1所述的方法，其中細胞內信號轉導的調節包括腺苷酸環化酶(AC)活性的調節。
30.如權利要求1所述的方法，其中細胞內信號轉導的調節包括與選自由以下組成的組中的至少一種病癥或癥狀有關的細胞內信號轉導的調節:過敏、哮喘、濕疹、類風濕性關節炎、發熱、燒傷或其他創傷、微生物感染、接觸刺激性皮炎、脂溢性皮炎、昆蟲咬傷、昆蟲螫傷、曬傷、蕈樣肉芽腫病、壞疽性膿皮癥、毒常春藤、有毒漆樹、紅斑痤瘡、眼睛炎癥、青光眼、干眼、紅眼、眼紅斑痤瘡、瞼緣炎、瞼板腺炎、角膜炎、結膜充血、眼瞼充血等、移植物抗宿主病、慢性支氣管炎、特應性皮炎、蕁麻疹、過敏性鼻炎、過敏性結膜炎、多發性硬化病、腱炎、腦中的慢性炎癥、氣道炎性疾病、慢性炎性腸病、春季結膜炎、嗜酸粒細胞肉芽腫、銀屑病、膿毒性休克、潰瘍性結腸炎、心肌再灌注損傷和腦再灌注損傷、慢性腎小球腎炎、動脈粥樣硬化、內毒素性休克和成人型呼吸窘迫綜合征。
31.如權利要求1所述的方法，所述方法包括施用給細胞網絡或細胞層，并且還包括調節其中的細胞間連接。
32.如權利要求31所述的方法，其中所述細胞間連接包括選自由緊密連接、間隙連接、黏著帶和橋粒所組成的組中的至少一種。
33.如權利要求1所述的方法，其中所述細胞網絡或細胞層包括選自由肺上皮、支氣管上皮和腸上皮所組成的組中的至少一種。
34.如權利要求1所述的方法，其中所述電動改變的含水流體是充氧的，并且其中在所述流體中氧的存在量為大氣壓下至少8ppm、至少15ppm、至少25ppm、至少30ppm、至少40ppm、至少50ppm或至少60ppm的氧。
35.如權利要求1到34中任一項所述的方法，其中所述電動改變的含水流體包括溶劑化電子和電動改性或帶電的氧類中的至少一種。
36.如權利要求35所述的方法，其中所述溶劑化電子或者電動改性或帶電的氧類以至少0.01ppm、至少0.lppm、至少0.5ppm、至少lppm、至少3ppm、至少5ppm、至少7ppm、至少lOppm、至少15ppm或至少20ppm的量存在。
37.如權利要求35所述的方法，其中所述電動改變的充氧的含水流體包括通過分子氧穩定的溶劑化電子。
38.如權利要求1所述的方法，其中改變細胞膜的結構或功能至足以提供對細胞內信號轉導的調節的能力在封閉的氣密容器中持續至少兩個月、至少三個月、至少四個月、至少五個月、至少六個月、至少十二個月或更長的時間。
【文檔編號】A61P27/02GK103933567SQ201410108422
【公開日】2014年7月23日 申請日期:2008年10月24日 優先權日:2007年10月25日
【發明者】理查德·L·華森, 安東尼·B·伍德, 格雷戈里·J·阿咸賓 申請人:利發利希奧公司