一種紫貽貝脂溶性提取物的制備方法
【專利摘要】一種紫貽貝脂溶性提取物的制備方法，包括以下步驟：1）紫貽貝預(yù)處理：將紫貽貝捕撈上來后進(jìn)行清洗、脫殼、采肉、去足絲；然后將貽貝肉進(jìn)行絞碎處理，得紫貽貝碎肉；2）復(fù)合酶酶解：將貽貝碎肉加入水中，然后加入復(fù)合酶進(jìn)行攪拌、調(diào)pH值、保溫、酶解，酶解前加入Vc，酶解后舍棄液體，得到不溶于水的粗脂肪；3）將所述粗脂肪用有機溶劑溶解，溶解時添加VE，然后經(jīng)冷凍、-5～-10℃條件下過濾得到紫貽貝提取物粗品，然后經(jīng)過水浴回流蒸發(fā)掉有機溶劑后即得到紫貽貝脂溶性提取物。通過本發(fā)明所述方法提取得到的紫貽貝脂溶性提取物具有純度較高、成本低、氧化率低的特點，具有較強的流動性，經(jīng)氣相色譜分析含有26種不飽和脂肪酸，純度達(dá)到95.21%。
【專利說明】一種紫貽貝脂溶性提取物的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種具有抗炎活性的紫貽貝脂溶性提取物的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]嵊泗縣是我國貽貝最大的生產(chǎn)基地，有“中國貽貝之鄉(xiāng)”之美譽。嵊泗貽貝主要以養(yǎng)殖紫貽貝和厚殼貽貝為主，但由于厚殼貽貝生長周期長，目前還主要以紫貽貝為主，2013年產(chǎn)量約11.2萬噸。嵊泗貽貝目前主要消費方式是鮮銷和加工成凍貽貝或干貽貝銷售，但由于貽貝經(jīng)濟(jì)價值較低，鮮品在終端銷售價格僅為2元/斤左右。發(fā)掘貽貝賣點，提高貽貝經(jīng)濟(jì)價值迫在眉睫。炎癥是困擾人類的一大類病癥的總稱，關(guān)節(jié)炎、哮喘等均屬于此類病癥。而貽貝中含有具有Lyprinol活性的抗炎物質(zhì)。因此，以嵊泗貽貝為原料，開發(fā)抗炎類藥物具有重大的經(jīng)濟(jì)意義和社會意義。
[0003]關(guān)于貽貝中抗炎活性物的提取已有前人研究，袁高峰等發(fā)表的“厚殼貽貝脂溶性提取物抗炎生物活性研究”(浙江大學(xué)報(農(nóng)業(yè)與生命科學(xué)版)33 (2):169~173，2007)指出:以厚殼貽貝為原料，經(jīng)過冷凍干燥和氯仿:甲醇(2: 1,V: V)提取了厚殼貽貝脂溶性提取物，并驗證了其抗炎活性；中國專利申請?zhí)枮?00910101136.0，
【公開日】為2009年12月23日的“厚殼貽貝脂溶性提取物及其制備方法和用途”發(fā)明專利申請書中也公開了通過冷凍干燥和超臨界二氧化碳萃取等方法制備的厚殼貽貝脂溶性提取物，但由于脂溶性抗炎物質(zhì)主要為不飽和脂肪酸，而這些方法或存在提取方法過于簡單，導(dǎo)致脂肪酸發(fā)生氧化，或存在提取方法過于復(fù)雜，提取成本聞的弊端。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0004]本發(fā)明針對上述缺點，在保證脂溶性抗炎物質(zhì)活性的基礎(chǔ)上，提供一種低成本的具有抗炎活性的紫貽貝脂溶性提取物的制備方法。
`[0005]一種紫貽貝脂溶性提取物的制備方法，其特征在于包括以下步驟:
1)紫貽貝預(yù)處理:將紫貽貝捕撈上來后進(jìn)行清洗、脫殼、采肉、去足絲；然后將貽貝肉進(jìn)行絞碎處理，得紫貽貝碎肉；
2)復(fù)合酶酶解:將貽貝碎肉加入水中，然后加入復(fù)合酶進(jìn)行攪拌、調(diào)PH值、保溫、酶解，酶解前加入Vc，酶解后舍棄液體，得到不溶于水的粗脂肪；
3)將所述粗脂肪用有機溶劑溶解，溶解時添加VE，然后經(jīng)冷凍、-5~-10°C條件下過濾得到紫貽貝提取物粗品，然后經(jīng)過水浴回流蒸發(fā)掉有機溶劑后即得到紫貽貝脂溶性提取物。
[0006]作為優(yōu)選,步驟I)中所述的絞碎處理是采用攪拌機以10000r/min速率攪拌30s,停機，再開機30s，停機，如此往復(fù)3次。
[0007]作為優(yōu)選，步驟2)中所述的復(fù)合酶是由風(fēng)味酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、堿性蛋白酶、動物復(fù)合蛋白酶的兩種或兩種以上進(jìn)行復(fù)配而成。
[0008]作為優(yōu)選，步驟2)中，所述復(fù)合酶添加比例為0.5%~1%，pH為5.0~6.5，溫度保持40°C~45°C，酶解時間為0.5~1.5小時。
[0009]作為優(yōu)選，步驟3)中所述的有機溶劑為乙酸乙酯或丙酮或乙醚。
[0010]作為優(yōu)選，步驟3)中所述的冷凍溫度為-20°C~_30°C，冷凍時間為5~8小時，水浴回流時間2~3小時。
[0011]作為優(yōu)選，所述步驟2)中酶解前加入1%的Vc，所述步驟3)中溶解時添加1%的VE0
[0012]通過本發(fā)明所述方法提取得到的紫貽貝脂溶性提取物具有純度較高、成本低、氧化率低的特點，具有較強的流動性，經(jīng)氣相色譜分析含有26種不飽和脂肪酸，純度達(dá)到95.21%。
【具體實施方式】
[0013]以下結(jié)合實施例對本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)描述。
[0014]實施例1:
第一步:紫貽貝預(yù)處理:將紫貽貝捕撈上來后進(jìn)行清洗、脫殼、采肉、去足絲；然后將貽貝肉進(jìn)行絞碎處理，得到紫貽貝碎肉。
[0015]第二步:復(fù)合酶酶解:首先將紫貽貝碎肉采用攪拌機以10000r/min速率攪拌30s，停機，再開機30s，停機，如此往復(fù)3次；然后將1份貽貝碎肉加入9份水后加入復(fù)合酶，復(fù)合酶選擇風(fēng)味酶10000IU/g、堿性蛋白酶5000IU/g和動物復(fù)合蛋白酶100000IU/g作為復(fù)合酶,復(fù)配比例為1:1:0.1，復(fù)合酶添加比例0.5%,同時加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%的Vc ;攪拌后調(diào)PH值為5.0，溫度保持在`40°C，酶解時間0.5小時；酶解結(jié)束后過濾，舍棄液體，取固體粗脂肪備用。
[0016]第三步:粗脂肪用5倍質(zhì)量的乙酸乙酯溶解，同時加入粗脂肪質(zhì)量1%的VE，置于_20°C溫度下冷凍5小時后，在_5°C溫度下過濾后得到紫貽貝提取物粗品，再經(jīng)水浴回流后2小時候得到紫貽貝提取物。
[0017]實施例2:
第一步:紫貽貝預(yù)處理:將紫貽貝捕撈上來后進(jìn)行清洗、脫殼、采肉、去足絲；然后將貽貝肉進(jìn)行絞碎處理，得到紫貽貝碎肉。
[0018]第二步:復(fù)合酶酶解:首先將紫貽貝碎肉采用攪拌機以10000r/min速率攪拌30s，停機，再開機30s，停機，如此往復(fù)3次；然后將1份貽貝碎肉加入9份水后加入復(fù)合酶，復(fù)合酶選擇風(fēng)味酶10000IU/g、堿性蛋白酶5000IU/g和動物復(fù)合蛋白酶100000IU/g作為復(fù)合酶,復(fù)配比例為1:1:0.1，復(fù)合酶添加比例0.75%,同時加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%的Vc ;攪拌后調(diào)PH值為5.5，溫度45°C，酶解時間I小時；酶解結(jié)束后過濾，舍棄液體，取固體粗脂肪備用。
[0019]第三步:將粗脂肪用5倍質(zhì)量的乙醚溶解，同時加入粗脂肪質(zhì)量1%的VE，置于_25°C溫度下冷凍6小時后，在_8°C溫度下過濾后得到紫貽貝提取物粗品，再經(jīng)水浴回流后2.5小時候得到紫貽貝提取物。
[0020]實施例3:
第一步:紫貽貝預(yù)處理:將紫貽貝捕撈上來后進(jìn)行清洗、脫殼、采肉、去足絲；然后將貽貝肉進(jìn)行絞碎處理，得到紫貽貝碎肉。[0021]第二步:復(fù)合酶酶解:首先將紫貽貝碎肉采用攪拌機以10000r/min速率攪拌30s，停機，再開機30s，停機，如此往復(fù)3次；然后將1份貽貝碎肉加入9份水后加入復(fù)合酶，復(fù)合酶選擇風(fēng)味酶10000IU/g、堿性蛋白酶5000IU/g和動物復(fù)合蛋白酶100000IU/g作為復(fù)合酶，復(fù)配比例為1:1:0.1，復(fù)合酶添加比例1%，同時加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)1%的Vc ;攪拌后調(diào)pH值為6.0，溫度45°C，酶解時間1.5小時；酶解結(jié)束后過濾，舍棄液體，取固體粗脂肪備用。
[0022]第三步:將粗脂肪用5倍質(zhì)量的丙酮溶解，同時加入粗脂肪質(zhì)量1%的VE，置于_30°C溫度下冷凍8小時后，在-10°C溫度下過濾后得到紫貽貝提取物粗品，再經(jīng)水浴回流后3小時候得到紫貽貝提取物。
[0023]通過本發(fā)明所述方法提取得到的紫貽貝脂肪提取物具有純度較高、成本低、氧化率低的特點，提取物呈現(xiàn)透明的淺黃褐色油狀，具有較強的流動性，經(jīng)氣相色譜分析含有26種不飽和脂肪酸， 純度達(dá)到95.21%。
【權(quán)利要求】
1.一種紫貽貝脂溶性提取物的制備方法，其特征在于包括以下步驟: 1)紫貽貝預(yù)處理:將紫貽貝捕撈上來后進(jìn)行清洗、脫殼、采肉、去足絲；然后將貽貝肉進(jìn)行絞碎處理，得紫貽貝碎肉； 2)復(fù)合酶酶解:將貽貝碎肉加入水中，然后加入復(fù)合酶進(jìn)行攪拌、調(diào)PH值、保溫、酶解，酶解前加入Vc，酶解后舍棄液體，得到不溶于水的粗脂肪； 3)將所述粗脂肪用有機溶劑溶解，溶解時添加VE，然后經(jīng)冷凍、-5~-10°C條件下過濾得到紫貽貝提取物粗品，然后經(jīng)過水浴回流蒸發(fā)掉有機溶劑后即得到紫貽貝脂溶性提取物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種紫貽貝脂溶性提取物的制備方法，其特征在于:步驟I)中所述的絞碎處理是采用攪拌機以10000r/min速率攪拌30s，停機，再開機30s，停機，如此往復(fù)3次。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種紫貽貝脂溶性提取物的制備方法，其特征在于:步驟2)中所述的復(fù)合酶是由風(fēng)味酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、堿性蛋白酶、動物復(fù)合蛋白酶的兩種或兩種以上進(jìn)行復(fù)配而成。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種紫貽貝脂溶性提取物的制備方法，其特征在于:步驟2)中，所述復(fù)合酶添加比例為0.5%~1%，ρΗ為5.0~6.5，溫度保持40°C~45°C，酶解時間為0.5~1.5小時。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種紫貽貝脂溶性提取物的制備方法，其特征在于:步驟3)中所述的有機溶劑為乙酸乙酯或丙酮或乙醚?！?br>
6.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種紫貽貝脂溶性提取物的制備方法，其特征在于:步驟3)中所述的冷凍溫度為-20°C~_30°C，冷凍時間為5~8小時，水浴回流時間2~3小時。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種紫貽貝脂溶性提取物的制備方法，其特征在于:所述步驟2)中酶解前加入1%的Vc，所述步驟3)中溶解時添加1%的VE。
【文檔編號】A61K35/56GK103816187SQ201410049970
【公開日】2014年5月28日 申請日期:2014年2月13日 優(yōu)先權(quán)日:2014年2月13日
【發(fā)明者】鄧尚貴, 霍健聰 申請人:浙江海洋學(xué)院