萊菔子提取物及其制備方法
【專利摘要】本發明提供了一種萊菔子提取物及其制備方法。本發明中提供的萊菔子提取物的制備包括萊菔子的凈制、炒制、脫脂、提取與精制工藝和質量控制方法。其制備工藝簡單、合理，有效的保存和富集了藥效成分，并同時獲得了可作為精細化工原料的高芥酸脂肪油。本發明方法制備的萊菔子提取物可使其藥效成分得到有效富集，即可保證傳統炒萊菔子飲片的藥效，并顯著減少了服用劑量，使其質量更加穩定可控。
【專利說明】萊菔子提取物及其制備方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種萊菔子提取物，同時涉及其提取制備方法，屬中醫藥【技術領域】。
【背景技術】
[0002]飲片炮制后入藥是中醫臨床用藥的特色，炮制在中藥的減毒、增效、緩性、便用等方面發揮了獨特的作用，但受歷史及學科發展等方面的制約，傳統炮制一直處于對中藥材整體的簡單的加工狀態，由于受藥材的產地、自然環境等諸多因素的影響，難以保證中藥飲片治療質量科學意義上的穩定和統一。目前，在認識傳統炮制機理的基礎上，利用現代提取分離技術，對中藥有效成分研究已成為創新藥物研制的途徑之一，在此理論基礎上，研究中藥飲片如何使有效成分富集，又保證藥效的技術問題，是對豐富和完善中藥炮制理論實踐的有益探索。
萊菔子是中醫常用藥，具有“生升熟降”、“生熟異治”的藥性特點。申報者在完成國家自然科學基金項目(30672665)中證明，萊菔子炒制的一個重要機理是防止蘿卜苷在煎煮過程中被酶解，有利于在煎出液中保存蘿卜苷。萊菔子中含有30%-40%的脂肪油，按中藥傳統入煎劑使用只有不足5%被煎出，其余則隨藥渣廢棄。萊菔子脂肪油中含30%以上的芥酸。芥酸長期食用對人體不利，是食用油的限制性標準之一，但它是重要的化工原料，具有很高的工業利用價值。可用于制造芥酸酰胺、芥醇、山崳酸、芥酸的各種金屬鹽類及酯類等各種表面活性劑和塑料助劑。
[0003]目前市場上流通 的炒萊菔子配方顆粒，是炒萊菔子經水提、濃縮，干燥獲得的簡單提取物。其炒制工藝限于經驗控制水平，提取制備中沒有精制過程，飲片中95%以上的脂肪油隨藥渣廢棄。炒制質量得不到有效控制，藥效成分得不到有效富集，資源得不到綜合利用。
【發明內容】
[0004]為了解決上述技術問題，本發明提供了一種萊菔子提取物及其制備方法，是在規范萊菔子炒制工藝的基礎上，通過物理脫脂獲得75%左右的萊菔子脂肪油部分。并對脫脂后的提取精制工藝進行了優化，使其藥效成分得到了有效富集，且保證了炒萊菔子飲片的藥效，顯著減少了服用劑量，使其質量更加穩定可控。
[0005]本發明的技術方案如下:
一種萊菔子提取物，由以下步驟制備而成:
1.萊菔子的炒制與脫脂
取萊菔子，凈制后炒制；炒制時，預熱至鍋底溫度達200-250 °C時投藥，快速均勻翻炒I一 1.5 min，至質地鼓起，易脫皮，有爆裂聲和特有香氣時，取出，晾涼；粉碎成10目粉，90°C烘l_2h，使粉末溫度均勻達到90°C，壓油機物料室控溫95°C ±3°C，投料入壓油室，壓油機采用漸進式加壓使脂肪油溢出后，暫停加壓，待油溢出速度顯著減慢時，再繼續加壓至油溢出，如此反復至出油率達到原料中脂肪油含量的75%±3%時，停止壓油；脂肪油另器保存，藥餅粉碎后供進一步提取；
2.脫脂炒萊菔子的提取與精制
經物理脫脂后的炒萊菔子藥餅破碎成粗粉，加水浸泡0.5 h，加熱回流提取三次，加水量依次為藥料的8倍，6倍，6倍，提取時間分別為1.0 h，0.5 h，0.5 h，過濾，合并濾液，減壓濃縮至I g/ml，加入95%乙醇，邊加邊快速攪拌，使得乙醇濃度為80%，靜置24 h，過濾，濾液減壓濃縮回收乙醇至無醇味，繼續濃縮至近干，真空干燥至含水量為4.0%-5.0%，得到萊菔子提取物。
[0006]由以上制備方法制備成的萊菔子提取物中的主要的有效成分及含量范圍如下: 總硫苷含量為:42.39%~45.50% ；
蘿卜苷含量為:2(λ 12°~23.14% ；
總生物堿含量為:4.19%~4.80% ；
芥子堿的含量為:3.79%~4.35% ；
總黃酮含量為:6.99%~8.83%。
[0007]萊菔子中含有30%_40%的脂肪油，按中藥傳統入煎劑使用只有不足5%被煎出，其余則隨藥渣廢棄。且萊菔子脂肪油中含30%以上的芥酸，芥酸長期食用對人體不利，是食用油的限制性標準之一，但它是重要的化工原料，具有很高的工業利用價值。所以，本發明采用物理脫脂方法獲取其脂肪油，既避免了生產過程中使用有機溶媒，難以實際應用，又可使樣品中較化學脫脂法留用部分脂肪油，這部分脂肪油在提取物中完全可以達到原有飲片的藥效，同時，還具有消泡的作用，使提取過程更安全。壓榨出的脂肪油可以作為化工原料使用，從而減少高芥酸脂肪油的浪費，提高萊菔子的利用價值，使資源達到綜合利用。同時利于藥效成分的富集和減少脂肪油對提取過程的影響。
[0008]炒萊菔子提取物可在使用劑量顯著減少，質量更加可控的條件下，發揮炒萊菔子傳統飲片的療效。藥效實驗表明，炒萊菔子提取物使用傳統飲片1/5的劑量，可取得與其相同的抑制實驗動物胃排空，促進腸推進的功效。減少實驗動物的咳嗽潛伏期和咳嗽次數的作用，祛痰作用也呈現相同的規律性變化。實驗還表明，炒萊菔子脂肪油也具有一定的抑制胃排空，促進腸推進，減少實驗動物的咳嗽潛伏期和咳嗽次數及祛痰作用，說明采用物理脫月旨，使炒萊菔子提取物中含有符合中醫臨床使用飲片中的少量脂肪油，更能體現炒萊菔子的中醫臨床效果。具體藥效實驗如下:
I促進胃腸運動實驗
1.1.供試樣品的制備
水煎劑:稱取5.0Og炒萊菔子藥材，搗碎，加入20倍量水加熱回流提取，Ih,抽濾，合并水煎液，濃縮定容至25mL，即得含藥濃度為0.2g/ mL的水煎液。 [0009]脂肪油部位:參照5.0Og炒萊菔子飲片在水煎劑中的溶出量，稱取脂肪油
0.1200g,加入IOmL蒸懼水,超聲30min,制成濃度為0.012g/mL混懸液。
[0010]提取物:參照5.0Og炒萊菔子飲片制備成提取物的量，稱取亳州提取物1.00g，用蒸餾水定容至25 mL,即得濃度為0.04g/ mL溶液。
[0011]1.1.3實驗動物
昆明種小鼠，體重18~22 g，雌雄各半，山東魯抗醫藥股份有限公司質監中心實驗動物室提供。許可證號:SCXK (魯)20080002。[0012]實驗方法與結果 1.2.1實驗方法
昆明種小鼠60只，18~22g，雌雄各半，隨機分為5組，分別為空白組、阿托品組、阿托品+水煎劑、阿托品+提取物組、阿托品+脂肪油組。
[0013]實驗前禁食10 h，清除墊料，飲水不限。實驗時，空白組和阿托品組灌胃0.2 mL蒸餾水，阿托品+水煎劑、阿托品+提取物組和阿托品+脂肪油組灌胃等量的相應藥物。
[0014]給藥Ih后，除空白組外，其余各組均腹腔注射阿托品(1.5mg.kg—1)。
[0015]給藥后2 h,各組均給予半固體營養糊,0.4 mL/只，10 min后脫頸椎處死。解剖，結扎胃賁門和幽門，取胃稱重，然后沿胃大彎剪開胃體，洗去胃內容物后拭干稱重。同時迅速取出小腸，輕輕剝離后直鋪于白紙上，測量幽門至回盲腸部全長及幽門至黑色半固體糊前沿的距離。
[0016]胃內殘留率=(胃總重一胃凈重)/所灌營養糊重X 100%。
[0017]小腸推進率=推進長度/小腸總長X 100%。
[0018]表1供試品小鼠胃排空實驗數據
【權利要求】
1.一種萊菔子提取物，其特征在于，其主要有效成分及含量范圍如下: 總硫苷及含量范圍:42.39%~45.50% ； 總生物堿及含量范圍:4.19%~4.80% ； 總黃酮及含量范圍:6.99%~8.83%。
2.根據權利要求1所述的萊菔子提取物，其特征在于，總硫苷中蘿卜苷在萊菔子提取物中的含量范圍為:20.12%~23.14%。
3.根據權利要求1所述的萊菔子提取物，其特征在于，生物堿中芥子堿在萊菔子提取物中的含量范圍為:3.79%~4.35%。
4.根據權利要求1、2或3所述的萊菔子提取物，其特征在于，由以下制備方法制備而成: 1)萊菔子的炒制與脫脂 取萊菔子，凈制，炒制:炒制時，預熱至鍋底溫度達200-250 °C時投藥，快速均勻翻炒1-1.5 min，至質地鼓起，易脫皮，有爆裂聲和特有香氣時，取出，晾涼；粉碎成10目粉，90°C烘l_2h，使粉末溫度均勻達到90°C，壓油機物料室控溫95°C ±3°C，投料入壓油室，壓油機采用漸進式加壓使脂肪油溢出后，暫停加壓，待油溢出速度顯著減慢時，再繼續加壓至油溢出，如此反復至出油率達到原料中脂肪油含量的75%±3%時，停止壓油；脂肪油另器保存，藥餅粉碎后供進一步提取； 2)脫脂炒萊菔子的提取與精制 經物理脫脂后的炒萊菔子藥餅破碎成粗粉，加水浸泡0.5 h，加熱回流提取三次，加水量依次為藥料的8倍，6倍，6倍，提取時間分別為1.0 h，0.5 h，0.5 h，過濾，合并濾液，減壓濃縮至I g/ml，加入95%乙醇，邊加邊快速攪拌，使得乙醇濃度為80%，靜置24 h，過濾，濾液減壓濃縮回收乙醇至無醇味，繼續濃縮至近干，真空干燥至含水量為4.0%-5.0%，得到萊菔子提取物。
5.一種權利要求1-4中任一項所述的萊菔子提取物的制備方法，其特征在于，步驟如下: 1)萊菔子的炒制與脫脂 取萊菔子，凈制，炒制:炒制時，預熱至鍋底溫度達200-250 °C時投藥，快速均勻翻炒1-1.5 min，至質地鼓起，易脫皮，有爆裂聲和特有香氣時，取出，晾涼；粉碎成10目粉，90°C烘l_2h，使粉末溫度均勻達到90°C，壓油機物料室控溫95°C ±3°C，投料入壓油室，壓油機采用漸進式加壓使脂肪油溢出后，暫停加壓，待油溢出速度顯著減慢時，再繼續加壓至油溢出，如此反復至出油率達到原料中脂肪油含量的75%±3%時，停止壓油；脂肪油另器保存，藥餅粉碎后供進一步提取； 2)脫脂炒萊菔子的提取與精制 經物理脫脂后的炒萊菔子藥餅破碎成粗粉，加水浸泡0.5 h，加熱回流提取三次，加水量依次為藥料的8倍，6倍，6倍，提取時間分別為1.0 h，0.5 h，0.5 h，過濾，合并濾液，減壓濃縮至I g/ml，加入95%乙醇，邊加邊快速攪拌，使得乙醇濃度為80%，靜置24 h，過濾，濾液減壓濃縮回收乙醇至無醇味，繼續濃縮至近干，真空干燥至含水量為4.0%-5.0%，得到萊菔子提取物。
【文檔編號】A61P1/00GK103830305SQ201410033131
【公開日】2014年6月4日 申請日期:2014年1月24日 優先權日:2014年1月24日
【發明者】呂文海, 任濤, 蘇永汶, 孫忠迪 申請人:山東中醫藥大學