一種倍半萜類化合物及其制備方法和用途
【專利摘要】本發明屬于醫藥【技術領域】，涉及從一株刺囊殼屬真菌（Ascotrichasp.）中分離得到的兩個具有抗腫瘤活性的石竹烯型倍半萜類化合物及其制備方法，其結構如下。本發明所涉及的化合物結構新穎，具有顯著的體外抗腫瘤活性，并且能夠通過液體發酵和簡便的提取分離方法很容易地大量獲取，可以成為開發新型抗白血病藥物的活性先導化合物。--?其中R為H或CH3。
【專利說明】一種倍半萜類化合物及其制備方法和用途
【技術領域】
[0001]本發明屬于醫藥【技術領域】,涉及從一株刺囊殼屬(Ascotricha sp.ZJ-M-5)真菌發酵產物中分離得到的具有抗腫瘤作用的石竹烯型新倍半萜類化合物及其制備方法。
【背景技術】
[0002]微生物能夠產生結構新穎并具有抗腫瘤、抗感染等多樣生物活性的次級代謝產物，因此從微生物中尋找藥物先導化合物一直是創新藥物研究的熱點。傳統的微生物培養采用提供豐富營養物質促進其生產的方式，然而在此條件下，大多數微生物的合成次級代謝產物的基因處于沉默狀態，導致產生的次級代謝產物數量較少，含量較低，并且往往產生很多諸如脂肪酸、環二肽等非活性物質干擾提取分離。有鑒于此，Axel Zeeck等人提出OSMAC (one strain many compounds,單菌多物)策略(ChemBioChem, 2002, 3:619-627),即通過改變培養基成分、培養條件及添加酶抑制劑等方法，激活在傳統培養條件下微生物次級代謝的“沉默途徑”，從而獲取結構更為新穎、活性更為多樣和產量更為豐富的微生物來源活性天然產物。
[0003]刺囊殼屬真菌(Ascotricha sp.ZJ-M-5)是通過化學和生物活性篩選，從浙江奉化市莼湖鎮桐照村黃灘涂地的海泥樣品中分離得到的一株能夠產生抗腫瘤化合物的微生物。發明人前期工作中，從該菌株含有豐富營養物質的培養基發酵產物中獲得了環橙花二醇類衍生物(Natural Product Research, 2013, 27:847-850)和一個 C3，4 位裂環的羊毛脂烷型三萜類化合物(藥學學 報，2013，48:89-93)。然而，采用OSMAC策略，通過改變培養基組成，發現該菌株在寡營養條件下的次級代謝與在含有豐富營養物質培養基條件下的次級代謝存在顯著的差異。從其中得到了兩個存在五元環狀半縮醛結構的新的石竹烯型倍半萜類化合物。
[0004]含有式I骨架的天然倍半萜類化合物目前僅有從太平洋紅豆杉內生真菌Pestalotiopsis sp.中分離得至Ij 的(+ )-pestalotiopsin A (Journal of OrganicChemistry, 1996,61:2122-2124)和(+ )-pestalotiopsin C (Phytochemistry,1997,46:313-319)兩個，并且僅有( + )-pestalotiopsin A對小鼠淋巴細胞白血病P388細胞株具有細胞毒作用，IC5tl 值為 3.82 μ M (Journal of Organic Chemistry，2009，74，6452-6461 )。但是(+ )-pestalotiopsin A 和(+ )-pestalotiopsin C 在 Pestalotiopsis sp.中產率較低，分別為1.2mg/L和1.0mg/L，且發酵需要在避光條件下，低溫(25°C)培養21~46天，并且其產生也具有很大的偶然性和不穩定性(Phytochemistry，1997，46:313_319)，不適宜工業化生產制備。
【發明內容】
[0005]本發明提供一種從刺囊殼屬真菌Ascotricha sp.ZJ-M-5中分離的C-6位為羥基取代的具有五元環狀半縮醛結構的新石竹烯型倍半萜類化合物。
[0006]本發明所述化合物的結構如式I所示，其與(+ ) -pestalotiopsin A及(+ ) -pestalotiopsin C結構上的差異在于C_6位為羥基而非甲氧基取代:
[0007]
【權利要求】
1.具有如下結構的倍半萜類化合物:
2.一種制備如權利要求1所述倍半萜類化合物的方法，其特征在于，挑取刺囊殼屬真菌的孢子，直接接種到液體培養基中搖床培養4-10天，其中培養基由蒸餾水配制，包含蔗糖 2~4%，NaNO3 0.2~0.4%, KCl 0.03~0.07%, FeSO4.7Η20 0.0005~0.0015%, K2HPO4.0.05、.15%，培養溫度為25~37 ° C，搖床轉速160-200轉/分鐘，發酵液經過濾除去菌絲體后，濾液采用等體積正丁醇萃取3次，將正丁醇萃取物經1- 20倍量200-300目硅膠柱色譜分離，以體積配比為5:1-1:1的石油醚-丙酮混合溶劑梯度洗脫，其中體積配比為3:1的石油醚-丙酮混合溶劑洗脫部分，經重結晶得到R為CH3的式I化合物，體積配比為1:1的石油醚-丙酮混合溶劑洗脫部分，經重結晶得到R為H的式I化合物。
3.一種藥物組合物，包含權利要求1所述的化合物。
4.權利要求1所述的化合物或權利要求3所述的組合物在制備抗白血病藥物中的應用。
【文檔編號】A61P35/02GK103788109SQ201410030059
【公開日】2014年5月14日 申請日期:2014年1月22日 優先權日:2014年1月22日
【發明者】李占林, 華會明, 王文靜, 李丹毅 申請人:沈陽藥科大學