用于測定肝細胞癌(hcc)患者的治療的有效響應的生物標記的制作方法

用于測定肝細胞癌(hcc)患者的治療的有效響應的生物標記的制作方法
【專利摘要】本發明涉及一種或多種定義為KRAS或NRAS基因的生物標記用于預測欲給藥到肝細胞癌(HCC)患者的MEK蛋白激酶抑制劑和/或索拉非尼或瑞戈非尼的藥效或臨床響應的用途。本發明還涉及用于鑒定HCC患者中的突變型KRAS或NRAS基因的體外方法及其藥盒。
【專利說明】用于測定肝細胞癌（HCC)患者的治療的有效響應的生物標 記 發明領域
[0001] 本發明涉及一種或多種定義為KRAS或NRAS基因的生物標記用于預測欲給藥到肝 細胞癌（HCC)患者的MEK蛋白激酶抑制劑和/或索拉非尼或瑞戈非尼的藥效或臨床響應的 用途。本發明還涉及用于鑒定HCC患者中的突變型KRAS或NRAS基因的體外方法及其藥盒。
[0002] 發明背景
[0003] 癌基因一導致癌癥產生的基因一通常是某些正常細胞基因（"原癌基因"）的突變 形式。癌基因通常編碼信號通路組分（例如受體酪氨酸激酶、絲氨酸-蘇氨酸激酶或者下 游信號轉導分子）的異常形式。主要的下游信號轉導分子是Ras蛋白，其固定于細胞質膜 的內表面上，并且將結合的鳥苷三磷酸（GTP)水解成鳥苷二磷酸（GDP)。當生長因子受體被 生長因子激活時，其引發導致鳥嘌呤核苷酸對Ras的交換活性的激活的反應鏈。Ras在具 有結合GTP(下文中稱為"Ras.GTP"）的活化的"開"狀態和具有結合GDP的非活化的"關" 狀態之間交替。活化的"開"狀態（Ras.GTP)結合并激活控制細胞生長和分化的蛋白。
[0004] 例如，在"絲裂原活化蛋白激酶（MAP激酶）級聯"中，Ras.GTP引起絲氨酸/蘇氨 酸激酶級聯的激活。已知的需要Ras.GTP來激活它們自身的若干組激酶之一是Raf家族。 Raf?蛋白激活"MEK1"和"MEK2"，即絲裂原活化ERK激活激酶的縮寫（其中ERK是胞外信號 調節蛋白激酶，其為MAPK的另一種命名）。MEK1和MEK2是雙功能的絲氨酸/蘇氨酸和酪 氨酸蛋白激酶，并且也稱為MAP激酶激酶。因此，Ras.GTP激活Raf，Raf激活MEK1和MEK2， MEK1和MEK2激活MAP激酶（MAPK)。由絲裂原激活MAP激酶似乎對增殖是必不可少的，并 且該激酶的組成性激活足以誘導細胞轉化。無論從細胞表面受體還是從致癌的Ras突變體 誘導，阻斷下游Ras信號轉導（如通過使用顯性失活Raf-1蛋白）可以完全地抑制有絲分 裂發生。
[0005] 在細胞增殖的控制中，Raf和Ras的相互作用是關鍵調節步驟。至今，除了MAPK以 夕卜，尚未鑒定MEK的其他底物；但是，近來報道表明MEK也可以被其他上游信號蛋白（例如 MEK激酶或MEKK1和PKC)激活。激活的MAPK轉位并在細胞核內蓄積，在細胞核內它可以使 轉錄因子例如Elk-1和Sapla磷酸化并將其激活，這導致基因（例如c-fos)的表達增強。
[0006] 一旦被激活，Raf及其他激酶在相鄰的兩個絲氨酸殘基（對于MEK1是S218和 S222)上使MEK磷酸化。這些磷酸化對于作為激酶的MEK的激活是必須的。繼而，MEK在被 單個氨基酸分開的兩個殘基：酪氨酸Y185和蘇氨酸T183上使MAP激酶磷酸化。在使MAP 激酶磷酸化之前，MEK似乎與MAP激酶牢固結合，這表明由MEK使MAP激酶磷酸化可能需要 所述兩種蛋白之間預先的強相互作用。兩個因素一MEK獨特的專一性及其在磷酸化前需要 與MAP激酶間的強相互作用一表明MEK的作用機制可能與其他蛋白激酶的機制足夠不同， 以至于允許MEK的選擇性抑制劑。可能這樣的抑制劑會通過變構機制而不通過涉及阻斷 ATP結合位點的更常見的機制來起作用。
[0007] 因此，MEKUMEK2和Raf是經證實并被接受的用于抗增殖的靶點。
[0008]RAS基因與人腫瘤有關。致癌的突變RAS蛋白抵抗由GAP介導的結合GPT的水 解引起的下調。RAS亞家族包括至少21個成員，如HRAS、KRAS、NRAS、RRAS。RAS基因的突 變在致癌中起直接作用（AmyYoung等人，AdvancesinCancerResearch, 2009)。在數種 腫瘤中鑒定出大量RAS蛋白的突變并進行了定量（YuliyaPylayeva-Gupta等人，Nature Review-Cancers，第 11 卷，2011 年 11 月，第 761 頁和AntoineE.Karmoud等人，Nature Review-Cancers，第 9 卷，2008 年 7 月，第 517頁）。
[0009]MEK蛋白激酶抑制劑：
[0010] 已報道了MEK的1-取代-2 (對位取代-苯基氨基）-芳基抑制劑的若干實例。美 國專利第6, 440, 966號和6, 750, 217號及相應的公開W0 00/42003描述了作為MEK抑制劑 起作用的磺酰胺-取代-2 (4-碘苯基氨基）-苯甲酸酯和N-取代苯甲酰胺的羧酸酯和異羥 肟酸酯以及N-取代酰胺衍生物。所述磺酰胺也可以是N-取代的。
[0011] 美國專利第6, 545, 030號及相應的公開W0 00/42029描述了MEK抑制劑1-雜環 基-2 (4-碘苯基氨基）-苯，其中所述雜環是5元含氮環，例如吡唑、三唑、噁唑、異噁唑和異 tl惡唑啉酮（isoxazolinone)。更新近的美國專利公開2005/004186描述了相關的化合物，其 中'030專利的4-碘取代基被包括烷基、烷氧基、酰氧基、烯基、氨基甲酰基、氨基甲酰基烷 基、羧基、羧基烷基、N-酰基亞磺酰氨基等的非常廣泛的一類基團代替。
[0012] 美國專利6, 469, 004及相應的公開W0 00/42022描述了一組雜環并稠合的亞苯基 化合物（即苯并咪唑、苯并噁唑、苯并噻唑、苯并噻二唑、喹唑啉等）的羧酸酯和異羥肟酸 酯。所述雜環是7-F-6-(4-碘-苯基氨基）-5_羧酸酯、羧酸酰胺或異羥肟酸酯。更新近的 公開美國2005/0026970描述了相似的化合物，其中4-碘取代基被非常廣泛的一類結構代 替。相關的化合物描述于專利公開W0 03/077855、W0 03/77914和US2005/0554701中。 在TO2005/028426中，可以發現被報道的用作MEK抑制劑的2-(4-碘苯基氨基）-苯基異 羥肟酸酯的其他實例。
[0013] 專利公開W0 02/06213及相應的美國申請系列10/333, 399號（U.S. 2004/0054172)描述了 1-草氨酸-2 (4-鹵代苯基氨基）-3, 4-二氟苯的羥基取代酸的酯。 美國專利6, 891，066號及相應的公開W0 03/62191描述了相似的化合物，其中4-鹵素取代 基被非常廣泛的一類結構代替。在4-位上的取代基有甲基、乙基、乙炔基和2-羥基乙基。 在美國專利第6, 770, 778號中描述了具體的相關化合物。
[0014] 發表于2004年9月30日的專利公開W0 04/083167(日語）公開了超過2000種一 但提供了僅400種的NMR數據一 1- (N-取代磺酰基脲）-2 (2, 4-二鹵代苯基氨基）-3, 4-二 氟苯，并且斷言它們被用作MEK抑制劑。對于一亞組僅僅12種化合物給出了表明抑制MEK 的數據。除了仲胺或叔胺之外，這12種化合物均包含以下基團之一：N，N-二取代磺酰基脲、 N-哌嗪磺酰胺、N-哌啶磺酰胺或N-吡咯烷磺酰胺。
[0015] 最近，在W0 2007/014011A2中描述N-(2-芳基氨基）芳基磺酰胺為合適的MEK抑 制劑。這些N-(2-芳基氨基）芳基磺酰胺是新的絲裂原活化細胞外信號調節激酶（ERK)激 酶（MEK)抑制劑，已證實其作為單一藥劑的廣泛的抗腫瘤活性和協同活性。
[0016] 索柃非尼:
[0017] 索拉非尼（Nexavar%BayerAG,Leverkusen,Germany)是口 服多激酶抑制 齊U，其能夠抑制參與血管生成和淋巴管生成的數種酪氨酸激酶受體，包括血管內皮生長 因子受體（VEGFR)-l、VEGFR-2、VEGFR-3、血小板源生長因子受體（PDGFR)、Flt-3、c-Kit 和RET(Wilhelm等人，2006 ;Wilhelm等人，2004)。此外，索拉非尼抑制Ras/Raf/絲 裂原活化蛋白（MAP)/細胞外信號調節激酶（ERK)激酶（MEK)[或絲裂原活化蛋白激 酶（MAPK)]通路，這已在多種實體瘤和白血病細胞系的細胞增殖、分化和存活中表明 (Sebolt-Leopold&Herrera，2004 ;Roberts&Der，2007;Wilhelm等人，2004;Yu等人，2005)。 索拉非尼的促細胞死亡效應可在細胞系之間變化，并且它們似乎與細胞增殖抑制和細胞毒 性機制有關，這僅部分得以闡明。在淋巴瘤細胞中，索拉非尼暴露下調抗細胞凋亡蛋白髓樣 細胞白血病-1 (Mcl-1)，其為與細胞存活有關的Bcl-2家族成員。Mcl-1在數種淋巴瘤中 過表達，并且可以賦予對于由大多數細胞毒性藥物所產生的細胞凋亡刺激的抗性（Rahmani 等人，2007 ;Cory等人，2003 ;Ch〇-Vega等人，2004 ;Yu等人，2005)。此外，索拉非尼誘導的 對ERK通路的抑制可能導致Bcl-X^下調，從而模仿利妥昔單抗介導的對CD20陽性NHL細胞 系的作用（Jazirehi等人，2004)。最近，發現索拉非尼在肺癌中有效（EdwardS.Kim等人， AmericanAssociationforCancerResearch,CancerDiscovery, 2011 ;1(1)0F43)〇
[0018] 瑞戈非尼:
[0019] 瑞戈非尼（US20050038080和WO2005009961)是口服多激酶抑制劑，其靶向血管 生成、間質和致癌受體酪氨酸激酶（RTK)。瑞戈非尼由于其雙重靶向VEGFR2-TIE2酪氨酸激 酶抑制而表現出抗血管生成活性。目前正作為多種腫瘤類型的潛在治療選擇進行研究。
[0020] 已證明瑞戈非尼增加患有轉移性結腸直腸癌患者的總體存活率。
[0021] 肝細胞癌（HCC)是第六大常見腫瘤和癌癥相關死亡的第三大原因。75%以上的病 例發生在亞太地區，其在很大程度上與慢性乙型肝炎病毒（HBV)感染有關。僅在中國就發 生50%以上的HCC病例，并且每年估計360000例居住在東亞國家（包括中國、日本、韓國和 臺灣）的患者死于該疾病。
[0022] HCC患者的預后依然慘淡。HCC患者的總體5年存活率僅為9%，僅略好于對于 30年前診斷的患者所記錄的4%。即使對于患有局限于肝臟的HCC患者，5年存活率僅為 19%，并且對于局部擴散的患者，它下降到7%，并且對于患有遠端轉移疾病的患者，它下降 到 3. 4%。
[0023] 盡管有上述提及的癌癥治療的進步，但癌癥治療中的主要挑戰是基于遺傳標記 (即生物標記）為患者選擇特異性治療方案，以優化治療結果。
[0024] 換言之，知道哪些患者能夠對于預期治療積極響應會是有幫助的，所述預期治療 由向肝細胞癌（HCC)患者給藥MEK蛋白激酶抑制劑和/或索拉非尼或瑞戈非尼組成，其中 所述MEK抑制劑是N- (2-芳基氨基）芳基磺酰胺。
[0025] 事實上，令人驚奇地發現，使用特定的生物標記（即RAS基因）適合用于選擇對于 給藥MEK蛋白激酶抑制劑和/或索拉非尼或瑞戈非尼積極響應的肝細胞癌（HCC)患者。
[0026] 因此，對于以下是有需求的：使用RAS基因作為生物標記的適合用于提供關于患 者響應的預測信息的診斷測試、方法和工具。
[0027] 發明概述
[0028] 在第一方面中，本發明涉及一種或多種定義為突變RAS的生物標記用于預測欲給 藥到HCC患者的包含MEK蛋白激酶抑制劑和索拉非尼或瑞戈非尼的組合的藥效或臨床響應 的用途。
[0029] 在第二方面中，本發明涉及一種或多種定義為突變RAS的生物標記用于預測欲給 藥到HCC患者的至少一種MEK蛋白激酶抑制劑的藥效或臨床響應的用途。
[0030] 在第三方面中，本發明涉及一種或多種定義為突變RAS的生物標記用于預測欲給 藥到HCC患者的索拉非尼或瑞戈非尼的藥效或臨床響應的用途。
[0031] 在第四方面中，本發明涉及體外方法，其包括以下步驟：
[0032]-鑒定從HCC患者獲得的測試樣品中的突變型RAS基因和/或蛋白，
[0033] 其特征在于所述方法是用于預測欲給藥到HCC患者的包含MEK蛋白激酶抑制劑和 /或索拉非尼或瑞戈非尼的組合的藥效或臨床響應。
[0034] 在第五方面中，本發明涉及藥盒。
[0035] 在第六方面中，本發明涉及如本文中所定義的式A的化合物的用途，其用于制備 治療具有突變的KRAS、NRAS或HRAS基因的患者的肝細胞癌的藥物。
[0036] 援引加入
[0037] 在本說明書中提及的所有出版物和專利申請都通過援引加入本文，其程度如同具 體地且單獨地表明各單獨的出版物或專利申請通過援引加入。
[0038] 發明詳述
[0039] 令人驚奇地發現，突變RAS生物標記的存在與給藥到HCC患者的MEK蛋白激酶抑 制劑和/或索拉非尼或瑞戈非尼的治療效果相關。
[0040] 在第一方面中，本發明涉及一種或多種定義為突變RAS的生物標記用于預測欲給 藥到HCC患者的包含MEK蛋白激酶抑制劑和索拉非尼或瑞戈非尼的組合的藥效或臨床響應 的用途。
[0041] 在一個實施方案中，所述用途涉及一種或兩種定義為RAS的生物標記。優選地，所 述用途涉及一種定義為RAS的生物標記。
[0042] 在一個實施方案中，所述RAS是指基因或其蛋白，其中所述RAS基因或RAS蛋白選 自KRAS、NRAS或HRAS。優選地，RAS是KRAS或NRAS。更優選地，RAS是KRAS。
[0043] 優選地，所述用途涉及KRAS、NRAS或HRAS基因。更優選地，所述用途涉及KRAS或 NRAS基因。
[0044]RAS蛋白是對應于一種RAS基因的轉導（transduction)的蛋白。
[0045] 在一個實施方案中，所述用途涉及一種定義為突變KRAS或NRAS基因或其蛋白的 生物標記用于預測欲給藥到HCC患者的MEK蛋白激酶抑制劑和索拉非尼或瑞戈非尼的組合 的藥效或臨床響應。
[0046] 在一個實施方案中，所述用途涉及MEK蛋白激酶抑制劑和索拉非尼或瑞戈非尼的 組合。
[0047] 突變KRAS、NRSA和HRAS基因或蛋白在腫瘤的文獻中已知（Yuliya Pylayeva-Gupta等人，NatureReview-Cancers，第 11 卷，2011 年 11 月，第 761 頁和 AntoineE.Karmoud等人，NatureReview-Cancers,第 9 卷，2008 年 7 月，第 517頁）。
[0048] 突變KRAS和NRSA基因優選如表1中所定義。
[0049]
【權利要求】
1. 一種或多種定義為突變RAS的生物標記用于預測欲給藥到HCC患者的包含MEK蛋白 激酶抑制劑和索拉非尼或瑞戈非尼的組合的藥效或臨床響應的用途。
2. 權利要求1的用途，其中一種生物標記定義為RAS基因或RAS蛋白。
3. 權利要求1或2的用途，其中RAS是KRAS、NRAS或HRAS。
4. 權利要求3的用途，其中RAS是KRAS或NRAS。
5. 權利要求1-4的用途，其中所述MEK蛋白激酶抑制劑是式A的化合物或其藥學上可 接受的鹽、溶劑合物、多晶型物、酯、酰胺、互變異構體或前藥： 其中
G 是 Gp G2、Rla、Rlb、Rlc、Rld、R le、Arp Ar2 或 Ar3 ; Ra(1、RdPR2獨立地選自H、鹵素、氰基、氰基甲基、硝基、二氟甲氧基、二氟甲氧基、三氟甲 基、疊氣基、氛基、燒基氛基、二燒基氛基、CO2R5、OR5、-〇- (CO) -R5、-〇_C (O) -N(R5) 2、-NR5C (O) NR6R7、-SR5、NHC (O)R5、-NHS02R5、SO2N(R 5) 2、C1-C6 烷基、C1-C4 烷氧基、C3-C6 環烷基、C2-C6 烯 基、C2-C6炔基、芳基、烷基芳基、芳基烷基和雜環基； 各R5選自H、低級烷基、取代的低級烷基、芳基或取代的芳基以及NR7R6 ; 其中各R6和R7獨立地選自氫或低級烷基；其中 所述烷基、環烷基、烯基、芳基、烷基芳基、芳基烷基、雜環基和炔基任選地被1-3個獨 立地選自鹵素、〇H、CN、氰基甲基、硝基、苯基、二氟甲氧基、二氟甲氧基和三氟甲基的取代基 取代； 所述C1-C6烷基和C1-C4烷氧基任選地被OCH 3或OCH2CH3取代； Ral是H、C1-C6燒基、C3-C6環燒基、C 2-C6烯基、C5-C6環烯基或C2-C 6塊基； 其中各烷基、環烷基、烯基、環烯基或炔基任選地被1-3個獨立地選自齒素、羥基、C1-C4 烷基、C1-C4烷氧基、氰基、氰基甲基、硝基、疊氮基、三氟甲基、二氟甲氧基和苯基的取代基取 代，并且 所述C3-C6環烷基的一個或兩個環碳原子任選地獨立地被0、N或S代替；或者 Ral是5或6原子雜環基，所述基團可為飽和的、不飽和的或芳族的，其含有1-5個獨立 地選自0、N和S的雜原子，所述雜環基任選地被1-3個獨立地選自鹵素、羥基、C1-C4烷基、 C1-C4烷氧基、氰基、氰基甲基、硝基、疊氮基、三氟甲基、二氟甲氧基和苯基的取代基取代； Ra2是H、鹵素、F或氧代；或者 Ral 和 Ra2 一起為-Q (R2) -U (R1) = D-; Ra3是H、鹵素、羥基、疊氮基、氰基、氰基甲基、C1-C6烷基、C 3-C6環烷基X2-C6烯基、C5-C 6 環稀基或C2-C6塊基，其中各燒基、環燒基、稀基、環稀基或塊基任選地被1_3個獨立地選自 鹵素、羥基、C 1-C4烷氧基、氰基、氰基甲基、硝基、疊氮基、三氟甲基和苯基的取代基取代； =:是單鍵或雙鍵； X和Y獨立地選自F、I、Br、Cl、CF3、C1-C3烷基、C 2-C3烯基、C2-C3炔基、環丙基、苯基、批 啶基、吡唑基、0Me、0Et或SMe或Het，其中Het是5-10元單環或雙環雜環基，所述基團是飽 和的、烯族的或芳族的，其含有1-5個獨立地選自N、0和S的環雜原子；其中 所有所述苯基或Het基團都任選地被以下基團取代：F、Cl、Br、I、乙酰基、甲基、CN、 N02、C02H、C1-C3 燒基、C1-C3 燒氧基、C1-C3 燒基-C ( = 0)-、C1-C3 燒基-C ( = S)-、C1-C3 燒 氧基-C ( = S) -、C1-C3 燒基-C ( = 0) 〇-、C1-C3 燒基-〇- (C = 0) -、C1-C3 燒基-C ( = 0) NH-、 CfC3 燒基 _C ( = NH) NH_、CfC3 燒基 _NH_ (C = 0)_、_. -C1-C3 燒基 _N_ (C = 0)_、C1-C3 燒 基-c( = 0)N(CrC3烷基）-、CrC3烷基-s( = 0)2ΝΗ-或三氟甲基； X和Y的所有所述甲基、乙基、C1-C3烷基和環丙基都任選地被OH取代； Y的所有所述苯基、吡啶基、吡唑基都任選地被鹵素、乙酰基、甲基和三氟甲基取代；并 且 X和Y的所有所述甲基都任選地被1個、2個或3個F原子取代； A、 D、J、L、Q、U 獨立地選自 C、CH、-NH、N、0 和-N(CH3)-; G1是任選地被一個氨基取代的C1-C6烷基、C1-C 3烷基氨基或二烷基氨基，所述二烷基氨 基包含兩個可相同或不同的C1-C4烷基；或者 G1是C3-C8二氨基燒基； G2是5或6元環，其為飽和的、不飽和的或芳族的，含有1-3個獨立地選自N、0和S的 環雜原子，任選地被1-3個獨立地選自下列基團的取代基取代：F、Cl、OH、（KC1-C3烷基）、 0CH 3、0CH2CH3、CH3C ( = 0) NH、CH3C ( = 0) 0、CN、CF3 以及含有 1-4 個獨立地選自 N、0 和 S 的 環雜原子的5元芳族雜環基； Rla是甲基、環丙氧基或C1-C4燒氧基；其中 所述甲基任選地被0H、1-3個氟原子或1-3個氯原子取代； 所述C1-C4烷氧基的C1-C4烷基部分任選地被一個羥基或甲氧基取代；并且 所述C1-C4烷氧基內的所有C2-C4烷基都任選地進一步被另一個OH基取代； Rlb是CH (CH3) -Cp3烷基或C3-C6環烷基，所述CH3、烷基和環烷基任選地被1-3個獨立地 選自F、Cl、Br、I、OH、C1-C4烷氧基和CN的取代基取代； Rlc 是（CH2)nOmIT，其中 m是0或1 ; η 是 0、1、2 或 3 ; R'是C1-C6烷基，其任選地被1-3個獨立地選自F、Cl、OH、0CH3、OCH 2CH3和C3-C6環烷 基的取代基取代； Rld 是 C(A'）（A" )(B)-，其中 B、 A'和A"獨立地為Η、取代的或未取代的CV6烷基、取代的或未取代的C2_6烯基，或者 A'和A"連同它們所連接的碳原子一起形成取代的或未取代的3-6元飽和環； Rle是芐基或2-苯基乙基，其中所述苯基任選地被取代， 其中 v
， q是1或2 ; R8 和 R9 獨立地為 H、F、Cl、Br、CH3、CH2F、CHF2、CF3、OCH 3、OCH2F、OCHF2、OCF3、乙基、正丙 基、異丙基、環丙基、異丁基、仲丁基、叔丁基和甲基橫醜基； R10 是 H、F、Cl、Br、CH3、CH2F、CHF2、CF3、OCH 3、OCH2F、OCHF2、OCF3、乙基、正丙基、異丙基、 環丙基、異丁基、仲丁基、叔丁基和甲基磺酰基、硝基、乙酰胺基、脒基、氰基、氨基甲酰基、 甲基氨基甲酰基、二甲基氨基甲酰基、1，3, 4-噁二唑-2-基、5-甲基-1，3, 4-5噁二唑基、 1，3, 4-噻二唑基、5-甲基-1，3, 4-噻二唑-IH-四唑基、N-嗎啉基羰基氨基、N-嗎啉基磺酰 基或N-吡咯烷基羰基氨基； R11和R12獨立地為H、F、Cl或甲基； Ar1是
其中 W和V獨立地為N、CR8或CR9 ; R8、R9 和 Rltl 獨立地為!1、卩、(：1、81'、013、01丨、(：冊2、〇卩3、001 3、001丨、0(：冊2、0〇卩3、乙基、正丙 基、異丙基、環丙基、異丁基、仲丁基、叔丁基和甲基磺酰基、硝基、乙酰胺基、脒基、氰基、氨 基甲酰基、甲基氨基甲酰基、二甲基氨基甲酰基、1，3, 4-噁二唑-2-基、5-甲基-1，3, 4-噁 二唑、1，3, 4-噻二唑、5-甲基-1，3, 4-噻二唑、IH-四唑基、N-嗎啉基羰基氨基、N-嗎啉基 磺酰基和N-吡咯烷基羰基氨基； R11和R12獨立地為H、F、Cl或甲基； Ar2是
其中 ? 虛線表示雙鍵，其形式上可位于V與W和V之間的碳之間，或W與W和V之間的碳之 間； W是-S-、-0-或-N =，其中 當W是-0-或-S-時，V是-CH=、-CCl =或-N=;并且 當 W 是-N =時，V 是 CH、CC1、N 或-NCH3-; R13和R14獨立地為H、甲氧基羰基、甲基氨基甲酰基、乙酰胺基、乙酰基、甲基、乙基、三氟 甲基或鹵素； Ar3是
其中 W 是-NH-、-NCH3-或-0-;并且 R13和R14獨立地為H、F、Cl或甲基。
6.權利要求1-5的用途，其中所述組合包含具有以下結構并且其中2-0H碳呈S構型的 所述MEK蛋白激酶抑制劑：
與索拉非尼。
7. 權利要求1-5的用途，其中所述組合包含具有以下結構并且其中2-0H碳呈S構型的 所述MEK蛋白激酶抑制劑： 與瑞戈非尼。
廠
8. -種或多種定義為突變RAS的生物標記用于預測欲給藥到HCC患者的至少一種MEK 蛋白激酶抑制劑的藥效或臨床響應的用途。
9. 一種或多種定義為突變RAS的生物標記用于預測欲給藥到HCC患者的索拉非尼或瑞 戈非尼的藥效或臨床響應的用途。
10. 體外方法，其包括以下步驟： -鑒定從HCC患者獲得的測試樣品中的突變型RAS基因和/或蛋白， 其特征在于所述方法是用于預測欲給藥到HCC患者的包含MEK蛋白激酶抑制劑和/或 索拉非尼或瑞戈非尼的組合的藥效或臨床響應。
11. 藥盒，其包含用于檢測突變型RAS基因或蛋白、用于鑒定定義為突變型RAS的生物 標記的合適的構件， 其特征在于所述藥盒是用于預測欲給藥到HCC患者的包含MEK蛋白激酶抑制劑和索拉 非尼或瑞戈非尼的組合的藥效或臨床響應。
12. 權利要求5、6或7中任一項的式A的化合物的用途，其用于制備治療具有突變的 KRAS、NRAS或HRAS基因的患者的肝細胞癌的藥物。
【文檔編號】A61K31/18GK104394855SQ201380035020
【公開日】2015年3月4日 申請日期:2013年5月27日 優先權日:2012年5月31日
【發明者】H·克里塞爾, F·普勒, M·杰弗斯 申請人:拜耳醫藥股份有限公司