人源化的嵌合抗因子Bb抗體及其用途

文檔序號：1292654閱讀：431來源：國知局

人源化的嵌合抗因子Bb抗體及其用途
【專利摘要】本發明提供了一種在受試對象中抑制由Bb抑制劑介導的補體激活的方法，該方法向所述的受試對象給藥Bb抑制劑，從而抑制Bb與因子B和備解素的結合，抑制C3的切割，抑制嗜中性粒細胞、單核細胞、血小板和內皮細胞的激活，或者抑制C3a、C5a和Mac的形成中的至少一種。
【專利說明】人源化的嵌合抗因子Bb抗體及其用途
[0001] 相關申請
[0002] 本申請要求2012年4月3日提交的美國臨時申請No. 61/619,858的優先權，該申請的主題內容以引用方式全文并入本文。

【技術領域】
[0003] 本發明涉及效應器功能和免疫源性降低的、人源化嵌合抗體及其抗原結合片段。本申請進一步涉及因子B的抗體用于抑制C3bBb或PC3bBb復合物的活性的用途，這將進一步抑制因子B在C3/C5轉化酶中的蛋白水解活性。本發明的人源化嵌合單克隆抗體選擇性地阻斷因子Bb與PC3bB復合物的結合，而不會抑制經典途徑的激活。這些抗體不會抑制 C3b與因子Bb的相互作用，因此具有獨特的功能。此類抗體為疾病指征（其中補體旁路途徑起致病作用）的有用療法。

【背景技術】
[0004] 補體系統是通過3條不同的途徑激活的：經典途徑、凝集素途徑和補體旁路途徑 (AP)。經典途徑是通過抗原-抗體復合物激活的。凝集素途徑是經典途徑的改變，旁路途徑是通過外來物質、人工表面、死亡組織、細菌、死亡酵母細胞來激活的。
[0005] 經典途徑的激活產生C3a、C4a、C5a和C5b_9分子，它們響應于宿主防御而激活多種細胞。在致病條件下，作為旁路途徑的激活結果，形成過敏毒素 C3a、C5a，它們激活細胞和還被稱為膜攻擊復合物（MAC) C5b-9分子（其破壞組織）。總體而言，這些分子通過細胞激活而介導炎癥并釋放炎癥介質。除了 C5b-9作為細胞溶解性孔隙形成復合物的作用，強有力的證據表明亞溶解MAC的沉積在炎癥中可以起到重要的作用。
[0006] 經典的補體途徑對于宿主防御對抗病原體是重要的。補體旁路途徑在病理學炎癥中被激活。發現C3a、C5a和C5b-9水平的升高與多種急性和慢性疾病狀況有關。因此，抑制疾病誘導的AP激活在疾病中（其中補體激活在疾病病理學中起作用）對于臨床益處而目是重要的。
[0007] 補體系統除了在免疫防御中的基本作用以外，其在許多臨床狀況中會促使組織損傷。補體生物化學級聯中所包括的活性對宿主組織呈現潛在的威脅。實例包括不加選擇地釋放可能導致宿主細胞溶解的破壞性的酶。因此，迫切需要研發防止這些不利作用的治療有效性的補體抑制劑。
[0008] 在其中AP激活有助于疾病病理學的疾病狀況下，在血清、血漿、血液或代表了疾病的其他體液中發現C3a、C5a和C5b-9的水平升高。這些分子的每一種分子通過不同機制的生產和抑制對于疾病都是重要的。用于抑制PC3bBb復合物形成的一種可能的機制是通過使用抗Bb抗體。因此，通過耗盡Bb、中和Bb或使Bb失活來阻斷/抑制或阻止AP激活仍為重要的治療策略。
[0009] 本發明涉及研發得到的人源化的嵌合抗體序列，該抗體序列是新型的，并且提供與因子Bb的靶向結合。此類人源化的/嵌合抗體與因子Bb的結合會阻止轉化酶的激活。此外，此類抗體還通過與PC3bB復合物的因子B上的因子D切割位點結合而阻止PC3bB轉化為PC3bBb。這些抗體不能抑制備解素與C3b的結合。與Bb結合、阻止PC3bBb激活并且阻止新的C3轉化酶形成的抗因子Bb劑包括但不限于單克隆和多克隆的抗體，嵌合的、人源化的、全人類、及納米抗體，全長的及它們的片段，包括IgG、Fab、Fab'、F(ab'）2和IgGs。本發明的抗體可以抑制C3a、C5a和C5b-9的形成，這些因子會驅使發炎，還會放大AP激活過程。
[0010] 此外,適體、小分子和SiRNA還可以中和與PC3bB復合物結合的Bb，并阻止AP誘導生產的C3a、C5a和C5b-9的生產。結果，細胞激活、炎癥和炎癥介質的釋放也都被阻止。由于AP激活與多種急性和慢性人類疾病關聯，所以使用抗Bb劑進行阻斷還將阻斷炎癥的過程，這可以為使用抗Bb單克隆抗體治療的哺乳動物提供臨床益處。
[0011] 補體是與發病機理有關的多種因子之一，并且可以為臨床控制提供有效點的重要的病理機制。越來越多地認識到補體介導的組織損傷在多種疾病狀態中的重要性，意味著需要有效的補體抑制藥品。盡管如此，目前完全缺乏人類用途的、特異性地靶向及抑制補體激活的批準藥品。
[0012] 因子B在旁路途徑的放大環中起到重要作用，這是因為其提供用于C3轉化酶 (PC3bBb)的催化亞基Bb。已經研發出抑制C3b與Ba結合的抗體，但是它們都不具有抑制 Bb的活性。因子B本身為不具有已知的催化活性的酵素原。在因子B與PC3b復合物結合后，其被因子D切割，從而釋放Ba。已經顯示因子B通過在Ba和Bb各個亞基中發現的區域而與C3b結合。因子Bb結合劑的抑制劑會導致選擇性地抑制因子B的功能，由此阻止C3a、 C5a和C5b-9的形成，這會導致許多有害的結果。
[0013] 根據本專利申請中所述的結果，我們研發了人源化的嵌合抗體，該抗體結合因子B 的催化結構域，阻止PC3bBb的活性，結合Bb上因子D的切割位點，并阻止其他的PC3bBb分子的形成。這些抗體不能抑制C3b與因子B的結合，因為這種結合事件顯示為是通過因子B 的Ba結構域介導的。本申請研發出人源化的嵌合抗Bb特異性抑制劑或抑制方法，這種抑制劑或抑制方法將（a)通過阻斷PC3bBb活性而阻斷因子B功能，和/或（b)抑制因子B的切割，這種切割會阻止Bb的生成。這些抑制劑似乎是C3轉化酶的酶活性的滅活劑，而不破壞因子B與C3b的相互作用。針對抗因子Bb抗體在阻斷AP激活中的潛在作用，我們已經評價了抗因子Bb抗體的抑制活性。這些抗體在體外和全血中阻止了因子B的功能。此外，還研發了其他的抗因子Ba的單克隆抗體，并且在疾病的動物模型中進行了測試，但是并未構成本發明的一部分。這些抗Ba抗體阻斷了因子B與C3b的結合，因此阻斷了補體級聯的激活。
[0014] 本發明計劃通過使用抗Bb抗體來抑制Bb在病理學狀況中的功能活性及其的程序性作用。
[0015] 發明概述
[0016] 本發明涉及通過阻斷PC3bBb和C3bBb上的Bb位點并限制因子D介導的因子B的切割來抑制Bb依賴的補體激活的方法。與Bb結合并且僅抑制旁路途徑的激活但不會抑制經典途徑的抗體被涵蓋在本發明的范圍內。因子B依賴的補體激活可以通過因子B抑制劑分子（除了諸如適體和SiRNA以外的抗體）來抑制。因子B抑制劑分子抗體可以包含全部的或片段的抗因子B抗體。片段的抗因子B抗體可以為Fa、F(ab)2、Fv或單鏈Fv。抗因子 B抗體可以為單克隆、多克隆、嵌合或去免疫化的，并且具有與因子B及其片段結合的能力。本發明公開了 Bb抗體但并不是抗Ba抗體用于治療通過補體激活調節的多種炎癥紊亂的用途。
[0017] 在一個方面中，本發明涉及抑制Bb依賴的補體激活在受試對象中的不利作用的方法。該方法包括向受試對象給予有效抑制Bb依賴的補體激活的、一定量的Bb抑制劑。就這一點而言，短語"Bb依賴的補體激活"是指所有3種補體途徑的激活。在本發明的一些方面中，Bb抑制劑為抗因子Bb抗體或其片段，而在其他的方面中，抗因子Bb抗體具有降低的效應器功能。在其他的方面中，Bb抑制劑為Bb抑制肽。本發明所述的方法、組合物和藥劑用于在哺乳動物的受試對象中體內抑制Bb依賴的補體激活的不利作用，期中所述的哺乳動物受試對象包括遭受急性或慢性病理學狀況的人類，其中在疾病的病理學中，涉及不適的補體激活。
[0018] 在另一個方面中，本發明創建了抗因子Bb抗體，該抗體包含互補性決定區1至 3(⑶Rl至3)與構架區（FR1至FR4)的多種組合。⑶R包含輕鏈與重鏈的組合。⑶R-L1、 ⑶R-L2、⑶R-L3、⑶R-Hl、⑶R-H2、⑶R-H3及構架區可用于治療上述提及的疾病狀況，在該疾病狀況中，補體起到一定的作用。包含CDR(其在可變區的氨基酸序列內為任何順序）的抗體被涵蓋在本發明的范圍內。這樣，本發明涵蓋了所討論的序列，以及⑶R或構架區中任何的序列變化，只要保持90%的序列一致性即可。此類抗體僅以化學計量比為1:1與Bb分子結合，這意味著通過使用該抗體，人類可以評價血漿樣品中的百分比活性。
[0019] 附圖簡述
[0020] 圖1示出了 2種補體途徑；經典途徑和補體旁路途徑。該圖示將2種途徑分開，并且2種途徑沒有在C3b處匯合。
[0021] 圖2示出了人源化的抗Bb抗體與B蛋白質的結合親和力。
[0022] 圖3示出了人源化的抗Bb抗體與Bb蛋白質的結合親和力。
[0023] 圖4示出了人源化的抗Bb抗體未抑制因子B與C3b的結合。
[0024] 圖5示出了人源化的抗Bb抑制了新的C3b分子的形成，其中所述的新的C3b分子形成了新的C3/C5轉化酶。
[0025] 圖6示出了人源化的抗Bb抑制了新的PC3b復合物的形成。
[0026] 圖7示出了人源化的抗Bb抑制了新的因子B/Bb分子的形成，其中所述的新的因子B/Bb分子與C3/C5轉化酶有關。
[0027] 圖8示出了人源化的抗Bb抑制了紅細胞溶解和組織損傷所需形成的C5b_9的形成。
[0028] 圖9示出了人源化的抗Bb抗體抑制的旁路途徑依賴的紅細胞溶解。
[0029] 圖10示出了人源化的抗Bb抗體不抑制經典激活途徑。
[0030] 圖11示出了人源化的抗體抑制了兔紅細胞在PNH血清中的溶解。
[0031] 圖12示出了鼠抗Bb抗體的序列（SEQ ID NO: 1和SEQ ID NO: 2)。呈現出人源化的抗體（SEQ ID NO:3 至 SEQ ID NO: 12)的序列。
[0032] 圖13至圖17示出了⑶R和構架區的序列ID N0。
[0033] 圖18示出了在Bb蛋白質中造成鼠與人源化抗Bb結合的肽基元。
[0034] 發明詳述
[0035] 標準的術語（包括本領域的技術人員使用的那些）是普通的且標準的，并且已經無條件地在整個申請中使用。
[0036] 為了描述本發明，提供以下定義以便就在說明書和權利要求書中使用的術語提供清晰度。
[0037] 如本文所用，術語"旁路途徑"是指補體激活，其在傳統上被認為產生于對補體因子C3的蛋白水解產生的C3b，其是通過例如真菌和酵母菌細胞壁的酵母聚糖、革蘭氏陰性外膜的脂多糖（LPS)和兔紅細胞，以及由許多純多糖、兔紅細胞、病毒、細菌、動物腫瘤細胞、寄生蟲和破損細胞刺激的。
[0038] 如本文所用，術語"抗體"涵蓋抗體和抗體片段，其特異性地與Bb或者其多肽或部分結合，其中所述的抗體衍生自任何生產該抗體的哺乳動物（例如小鼠、大鼠、兔或靈長動物，包括人類）。示例性的抗體包括多克隆、單克隆和重組抗體；多特異性抗體（包括雙特異性抗體）、人源化的抗體；鼠抗體、嵌合（即，小鼠-人、小鼠-靈長動物、靈長動物-人）、單克隆抗體，和抗獨特性抗體；以及去免疫化的抗體；并且可以為它們任何完整的分子或片段。
[0039] 如本文所用，術語"抗體片段"是指由全長的抗因子Bb抗體衍生的或者與全長抗因子Bb抗體相關的部分，通常包括其抗原結合區或可變區。抗體片段的示例性實例包括 Fab、Fab'、F(ab) 2、F(ab'）2和Fv片段；scFv片段；雙體；線性抗體；單鏈抗體分子和由抗體片段形成的多特異性抗體。
[0040] 如本文所用，術語"Bb抑制劑"是指與Bb結合或相互作用的、并且有效抑制Bb依賴的補體激活的任何試劑，包括抗Bb抗體及其Bb結合片段，天然和合成的肽。在本發明的方法中使用的Bb抑制劑可以將Bb依賴的補體激活（由此降低其所有的激活）降低超過 20%。在一個實施方案中，Bb抑制劑將補體激活降低90%。
[0041] 如本文所用，"嵌合抗體"是指包含可變結構域和互補性決定區的重組蛋白質，其中所述的可變結構域和互補性決定區衍生自非人類物種（例如嚙齒動物）的抗體，同時抗體分子的剩余部分衍生自人類抗體。
[0042] 如本文所用，術語"經典途徑"是指（1)由與外來粒子結合的抗體所引發的Cl復合物的補體激活，該過程需要結合識別分子Clq;還指（2)通過抗原-抗體復合物的形成所發生的補體激活。
[0043] 如本文所用，"人源化的抗體"為嵌合抗體，其包含符合特異性互補性決定區的最小序列，其中所述的互補性決定區衍生自被移植到人類抗體構架中的非人類免疫球蛋白。人源化的抗體通常為重組蛋白質，其中僅抗體的互補性決定區是非人類起源的。
[0044] 如本文所用，"膜攻擊復合物"（"MAC"）是指5種終末補體成分（C5-C9)的復合物，其中該復合物插入并破壞膜。此外，MAC還可以稱為C5b-9和SC5b-9。
[0045] 如本文所用，"受試對象"包括所有哺乳動物，包括但不限于狗、貓、馬、綿陽、山羊、奶牛、兔、豬、人類、非人類靈長動物、和嚙齒動物。此外，旁路途徑除了在補體激活中作為獨立途徑而被廣泛認可的作用以外，其還為最初通過經典途徑和凝集素途徑所引發的補體激活提供放大環。
[0046] 如本文所用，"單鏈Fv"或"scFv"抗體片段包含抗體的VH和VL結構域，其中這些結構域以單鏈多肽形式呈現。通常，Fv多肽進一步包含在VH和VL結構域之間的多肽連接體，其能夠使scFv形成用于抗原結合所需的結構。
[0047] 本發明的抗體為用于治療人類疾病的人源化的嵌合抗Bb單克隆抗體（mAb)，和抗原結合片段。本發明的抗體可以提供用于滿足這種需要的高親和力抗體。本發明的抗Bb 單克隆抗體中和了 PC3bBb復合物中的Bb的催化活性，并保護了 PC3bB復合物中因子B的因子D切割位點。
[0048] 具有特征性CDR的動物和植物衍生的抗Bb單克隆抗體被涵蓋在本發明的范圍內，其中所述的特征性CDR結合Bb并抑制Bb與PC3bB復合物的結合。與本發明的抗體的CDR 之間同源性超過60%的CDR被涵蓋在本發明的范圍內。用于生成人源化的嵌合抗Bb抗體的小鼠單克隆抗體被涵蓋在本發明的范圍內。
[0049] 本發明的抗體與現有技術的不同之處在于：本發明的抗體a)不抑制因子B與C3b 的結合；b)與因子B上的因子D切割位點結合；c)不影響經典的補體途徑；以及d)以1:1 的摩爾當量與Bb結合。
[0050] 人源化的鼠抗Bb抗體能在得自正常和疾病的血清中，抑制兔紅細胞的溶解。
[0051] 人源化的鼠抗Bb抗體能抑制C3a、C5a、C5b_9和TNFa的生產。這些抗體對抗Bb，并由此不與Ba發生交聯反應，其中所述的Ba為完整Ba分子的片段。
[0052] 本發明的抗體能抑制新的B3b、PC3b、PC3bB和PC3bBb的形成。這些抗體特定地抑制旁路途徑，而不影響經典途徑的放大環。
[0053] 可以根據抗因子Bb抗體中和由旁路途徑的激活而產生的Bb的能力來選擇抗因子 Bb抗體。摩爾當量為1:1表明所有的Bb都被抗Bb抗體中和。
[0054] 本發明的抗體不影響經典途徑的激活。因此，本發明的單克隆抗體不影響經典途徑。旁路途徑（放大環）的抑制應該影響經典途徑，但是所述的這些抗體甚至在2種途徑通常都被激活的情況下，仍未顯示對經典途徑的激活有任何影響。
[0055] 本發明的另一個方面涉及包含mAb的重鏈和輕鏈的⑶R1XDR2和⑶R3,或者它們的組合的抗體。重鏈可變區⑶R1、⑶R2和⑶R3的氨基酸序列分別示于SEQ ID NO: 14, 16 和18中。輕鏈可變區CDR1、CDR2和CDR3的氨基酸序列分別示于SEQ ID N0:21, 23和25 中，其中所述的抗體特異性地結合人類Bb和B。
[0056] 所述的抗體可以為嵌合抗體、人源化的抗體、人類抗體、人源化的抗體或嵌合抗體。可變區內的⑶R可以具有90 %的相似性至99 %的相似性。
[0057] 本發明的抗體、本發明的⑶R和本發明的構架列于圖12-17中。
[0058] 本發明的抗體可以用于在遭受急性或慢性病理學損傷的受試對象（包括人類）中體內抑制通過旁路途徑的補體激活。本發明可以關乎以下疾病、紊亂、損傷和治療來使用，包括但不限于：
[0059] 體外循環疾病和紊亂：心肺轉流術后的炎癥、手術后的肺功能紊亂、心肺轉流術、血液透析、白細胞清除術、血漿置換、血小板去除法、肝素誘導的體外LDL沉淀（HELP)、灌注后綜合征、體外膜式氧合（ECMO)、心肺轉流術（CPB)、灌注后綜合征、全身炎性反應綜合征和多器官衰竭。
[0060] 心血管疾病和紊亂：急性冠脈綜合征、Kawaski病（動脈炎）、多發性大動脈炎、過敏性紫癜性腎炎、血管滲漏綜合征、經皮冠狀動脈介入治療（PCI)、心肌梗死、急性心肌梗死后缺血再灌注損傷、動脈粥樣硬化、脈管炎、免疫復合物脈管炎、與類風濕性關節炎有關的脈管炎（也稱為惡性類風濕性關節炎）、系統性紅斑狼瘡相關性脈管炎、膿毒病、動脈瘤、心肌病、擴張型心肌病、心臟手術、外周血管疾病、腎血管疾病、心血管疾病、糖尿病血管病、靜脈氣栓（VGE)、Wegener肉芽腫、肝素誘導的體外膜肺氧合和Behcet綜合征。
[0061] 骨/肌骨骼疾病和紊亂：關節炎、炎性關節炎、非炎性關節炎、類風濕性關節炎、兒童類風濕性關節炎、全身發病型幼年類風濕性關節炎、骨關節炎、骨質疏松癥、系統性紅斑狼瘡（SLE)、Behcet綜合征和Sjogren綜合征。
[0062] 移植疾病和紊亂：移植排斥反應、異種移植排斥反應、移植物抗宿主病、器官或移植物的異種移植、器官或移植物的同種移植和超急排斥反應。
[0063] 眼/眼科疾病和紊亂：干、濕性年齡相關性黃斑變性（AMD)、脈絡膜神經血管病 (CNV)、視網膜損傷、糖尿病視網膜病、糖尿病視網膜微血管病變、眼的組織胞漿菌病、葡萄膜炎、糖尿病黃斑水腫、糖尿病視網膜病、糖尿病視網膜微血管病變、病理性近視、網膜中央靜脈阻塞（CRVO)、角膜新生血管形成、視網膜新生血管形成、視網膜色素上皮細胞（RPE)、眼的組織胞楽菌病和Purtscher視網膜病。
[0064] 溶血/血液病和紊亂：膿毒病、全身炎癥反應綜合征（SIRS)、失血性休克、急性呼吸窘迫綜合征（ARDS)、災難性抗磷脂抗體綜合征（CAPS)、冷凝集素病（CAD)、自身免疫性血小板減少性紫癜（TTP)、內毒素血癥、溶血性尿毒綜合征（HUS)、非典型溶血尿毒綜合征 (aHUS)、陣發性睡眠性血紅蛋白尿（PNH)、膿毒病、感染性休克、鐮狀細胞血癥、溶血性貧血、高嗜酸性粒細胞綜合征和抗磷脂抗體綜合征（APLS)。
[0065] 呼吸/肺疾病和紊亂：哮喘、Wegener肉芽腫、輸血相關急性肺損傷（TRALI)、抗腎小球基底膜疾病（Goodpasture疾病）、嗜酸性粒細胞性肺炎、過敏性肺炎，過敏性支氣管炎、支氣管擴張瘀血、反應性氣道病綜合征、呼吸道合胞體病毒（RSV)感染、副流感病毒感染、鼻病毒感染，腺病毒感染、變應性支氣管肺曲菌病（ΑΒΡΑ)、肺結核、肺寄生蟲病、成人呼吸窘迫綜合征、慢性阻塞性肺疾患（COPD)、肉狀瘤病、肺氣腫、支氣管炎、囊性纖維化、間質性肺病、急性呼吸窘迫綜合征（ARDS)、輸血相關急性肺損傷、缺血/再灌注急性肺損傷、棉纖維吸入性肺炎、肝素誘導的體外膜肺氧合、過敏性休克和石棉誘導的炎癥。
[0066] 中樞和外周神經系統/神經性疾病和紊亂：多發性硬化（MS)、重癥肌無力（MG)、重癥肌無力、多發性硬化、格林-巴利綜合征、Miller-Fisher綜合征、中風、中風后再灌注、 Alzheimer疾病、多灶性運動神經病（MMN)、脫髓鞘作用、Huntington疾病、肌萎縮（ALS)、 Parkinson疾病、視乳頭變性疾病（DDD)、腦膜炎、腦膜炎顱神經損傷、變異型克雅氏病 (vCJD)、急性特發性犬類多神經病、腦/腦床上（包括但不限于大出血、炎癥和水腫）和神經性疼痛。
[0067] 創傷誘導的損傷和紊亂：失血性休克、血量減少性休克、脊髓損傷、神經元損傷、腦創傷、腦缺血再灌注、擠壓傷、傷口愈合、嚴重的燒傷和凍傷。
[0068] 腎臟疾病和紊亂：腎缺血再灌注損傷、腎絲球腎炎（PSGN)、Goodpasture疾病、膜性腎炎、Berger疾病/IgA腎病、系膜增生性腎小球腎炎、膜性腎小球腎炎、膜增生性腎小球腎炎（腎小球膜毛細血管性腎小球腎炎）、急性感染后腎小球腎炎、腎小球腎炎、狼瘡性腎炎、過敏性紫癜性腎炎和腎皮質壞死（RCN)。
[0069] 器官的再灌注損傷和紊亂：包括但不限于心、腦、腎和肝。
[0070] 繁殖和泌尿生殖器疾病和紊亂：膀胱疼痛的疾病和障礙、感覺膀胱疾病和紊亂、自然流產、男性和女性的不孕不育疾病、妊娠疾病、母胎耐受、先兆子癇、泌尿生殖道炎癥性疾病、胎盤功能不全的疾病和紊亂、流產的疾病和紊亂、慢性膀胱炎和間質性膀胱炎。
[0071] 皮膚/皮膚病學的疾病和紊亂：燒傷、牛皮癬、特應性皮炎（AD)、嗜酸細胞性海綿層水腫、蕁麻疹、熱傷害、類天皰瘡、獲得性大皰性表皮松解癥、自身免疫性大皰性皮膚病、大皰性類天皰瘡、硬皮病、血管性水腫、遺傳性血管水腫（HAE)、多形性紅斑、妊娠皰疹、 Sjogren綜合征、皮肌炎和皰疫樣皮炎。
[0072] 胃腸疾病和紊亂：Crohn疾病、Celiac疾病/乳糜泄、Whipple疾病、腸缺血、炎性腸病和潰瘍性結腸炎。
[0073] 內分泌疾病和紊亂：橋本氏甲狀腺炎；幼淋巴細胞性甲狀腺炎；壓力和焦慮；影響催乳素、生長或胰島素樣生長因子、促腎上腺皮質激素釋放的其他疾病；胰腺炎；Addison 疾病；糖尿病狀況，包括但不限于1型和2型糖尿病；1型糖尿病；肉狀瘤病；糖尿病視網膜微血管病變；非肥胖型糖尿病（IDDM);血管病；IDDM或2型糖尿病的神經病或視網膜病并發癥；和胰島素抵抗。
[0074] 惡性病的治療：由化療和放療引起的疾病和紊亂。
[0075] 本發明的抗體可以是治療性的。鼠、嵌合的、人源化的和靈長源抗體目前被認為是治療性的。但是，在科學的最新進展中，所述的抗體還可以被其他類型的抗體替代，其中如同分子的抗體的相互作用可以在低的pMole至高的pMole，直至低的nMole范圍內。
[0076] 嵌合抗體和人源化的抗體都具有人類構架恒定區。人源化的和人類的構架區是天然人類構架區或改變的人類構架區，以便增加所述的CDR區的親和力和效力。恒定區可以存在或不存在于所述的抗體中。可以利用多種方法在植物、細節和哺乳動物細胞系統中生產具有和不具有恒定區的抗體。
[0077] 抗Bb抗體的功能活性被定義為抗Bb抗體在不影響經典途徑的放大環的條件下僅抑制AP激活的能力。這些抗體能夠（1)抑制PC3bB復合物的催化活性；（2)減少PC3bBb形成和/或C3bBb形成；（3)降低游離C3b的濃度；(4)減少C3b的形成；（5)減少C3a、C5a和 C5b-9的形成；(6)減少單核細胞⑶Ilb的表達；（7)減少嗜中性粒細胞⑶Ilb的表達（8) 減少血小板CD62P的表達；（9)減少白細胞-血小板綴合物的形成；（10)減少腫瘤壞死因子 a (TNF);以及（11)減少嗜中性粒細胞彈性蛋白酶的形成。
[0078] 可以形成雙特異性抗體，該抗體可以包含：⑴2種抗體，一種對Bb具有特異性，另一種綴合在一起的抗體對第二分子具有特異性；（ii)單一抗體，其具有對Bb具有特異性的一條鏈，以及對第二分子具有特異性的第二條鏈；或者（iii)對Bb和其他分子具有特異性的單鏈抗體。此類雙特異性抗體可以使用本領域公知的技術來形成。
[0079] 抗Bb抗體或其片段可以用于治療方法中，該方法用于預防性和治療性治療由補體旁路途徑的成分和/或補體旁路途徑激活后所產生的因子直接或間接介導的疾病。
[0080] 此外，本發明提供了這樣的方法，該方法用于抑制由旁路途徑衍生的Bb依賴的補體激活的不利作用。Bb抑制劑可以作為主要療法單獨使用，或者作為增強其他治療的益處的補體與其他方法結合使用。
[0081] 抑制劑可以為小分子、適體、DNA片段、代表了⑶R結構域的小肽、SiRNA。這些抑制劑抑制了 PC3bBb與C3、C5、C9和C5b-9的結合。
[0082] Bb抑制劑可以通過動脈內、顱內、靜脈內、皮下、肌肉內或其他腸胃外給藥的不同方式給藥。對于非肽能的抑制劑潛在地以口服形式給藥，最合適的是通過動脈內或靜脈內給藥。給藥可以周期性地重復，這可以由醫生根據最佳治療效果來確定。實施例
[0083] 除非另作說明，所有試劑均以高品質使用。所有的補體蛋白質、旁路途徑和經典途徑的緩沖液、檢測抗體和紅細胞均得自Complement Technologies (Tyler, TX)或Quidel Corporation (San Diego, CA)。流式細胞術抗體得自 BD Biosciences, San Jose, CA。TMB 底物得自 Kirkegaard&Perry Limited, Gaithersberg，MD。所有二級抗體均得自 American Qualex，San Clemente, CA, BSA，而其他的試劑均得自 Sigma-Aldrich, St Louise, MO。
[0084] ELISA 平板讀取器（SpectraMaxl90 和 250)得自 Molecular Devices，流式細胞儀為FACS Calibur15VaritySD程序用于數據分析。使用MicroCal Origin程序進行曲線擬合。溶血的動力學測試使用SectraMax, Molecular Devices來運行。ELISA平板得自Corning Costar, Lowell, MA0
[0085] 人源化的嵌合抗體包含親代鼠單克隆抗體的⑶R，序列為SEQ ID No 1和SEQ ID No2,其呈現于本申請中。對小鼠注射人類Bb (Complement Technology, Tyler, TX)，并針對 Bb的結合和AP抑制活性來篩選小鼠血清。使用標準的程序，將由備解素陽性小鼠得到的脾細胞與骨髓瘤細胞融合。使用有限稀釋技術，將融合細胞克隆成單一的細胞群。使96孔板中的細胞生長，并利用備解素的結合和旁路途徑的抑制來測試上清液。識別阻斷AP激活的細胞，并使用抑制C5b-9形成的那些細胞進一步篩選。根據抑制紅細胞溶解的1D3,將這些克隆分類。對細胞系分泌的抗體測序，從而形成SEQ ID NO: 1和SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列。將由重鏈和輕鏈得到的CDR接枝到人類的構架中，從而形成多種人源化的抗體序列SEQ ID NO:3至SEQ ID NO: 12。在哺乳動物CHO細胞中生產、表達、分泌和純化SEQ ID NO:3至SEQ ID NO: 12的抗體，從而生產全部的IgGlk。抗體可按如下所示來表征。
[0086] 實施例1 :人源化的抗Bb抗體以高親和力與閔子B和Bb蛋白質結合
[0087] 抗Bb IgGl及其抗原結合片段與人類因子B和Bb的親和力為低的pM抗體范圍。抗體與Bb結合會中和PC3bBb (C3/C5轉化酶）的催化活性。抗Bb與人類因子B的結合會阻斷因子B上的因子D切割位點。為了進行這些試驗，在4°C下，將聚苯乙烯微量滴定板過夜涂覆處于磷酸鹽緩沖液（PBS)中的人類因子B和Bb (2. 0 μ g/50 μ 1/孔）。在吸入備解素溶液后，將孔用包含1%牛血清白蛋白（BSA) (Sigma-AldriCh，St.L〇uis，M〇.)的PBS在室溫下封閉1小時。不具有肽或備解素涂料的孔作為背景對照。將人源化的抗因子Bb的等分液加入到B和Bb涂覆的孔中，并將其溫育1小時以便發生結合。在室溫下溫育1小時時間后，使用PBS將平板沖洗5次，并與以1:2000稀釋的用于檢測的、過氧化物酶綴合的山羊抗人單克隆抗體溫育。溫育后，沖洗平板，并使用TMB試劑識別結合的過氧化物酶。
[0088] 如圖2和3所示，人源化的抗Bb以皮摩爾的親和力與因子B(圖2)和Bb(圖3) 結合。
[0089] 實施例2 :人源化的抗Bb單克降抗體不能抑制閔子B與C3b的結合
[0090] 以前發明的抗因子B抗體通常會抑制B與C3b的相互作用。本新型的抗體不能抑制因子B與C3b的結合。在典型的試驗中，在4°C下，將聚苯乙烯微量滴定板孔（96孔中結合力平板，Corning Costar, Cambridge, Mass.)過夜涂覆處于磷酸鹽緩沖液pH7. 4 (PBS)中的 C3b (2 μ g/50 μ 1/孔，complement technology, Tyler, Tx)。在吸入 C3b 溶液后，將孔用包含1%牛血清白蛋白（BSA;Sigma Chemical)的PBS在室溫下封閉1小時。不具有C3b涂料的孔作為背景對照。將人源化的抗Bb的等分液加入到包含固定濃度的因子B的溶液中。在室溫下溫育Ih后，使用PBS充分沖洗孔。使用多克隆抗B抗體檢測全部結合的"B"。人源化的抗Bb濃縮物均不能抑制因子B與C3b的結合，如圖4所示。
[0091] 實施例3 :人源化的抗閔子Bb能夠抑制補體旁路涂徑中C3/C5轉化酶（PC3bBb)的形成
[0092] 通過得自傷寒沙門氏菌（Salmonella Typhosa)的脂多糖在正常人類血清中激活補體旁路途徑。我們使用這種范例來證明本發明的抗備解素抗體是否能抑制PC3bBb的形成。在人源化的抗Bb抗體存在和缺乏下，我們測量P、C3b、Bb和C5b-9的沉積情況。使用合適的抗體檢測沉積的P、C3b、Bb和C5b-9。在人源化的抗Bb抗體存在下，注意到C3和C5 轉化酶的形成以劑量依賴的方式受到抑制，這可通過對P、C3b、Bb和C5b-9各分子沉積的抑制來表明。
[0093] 在典型的測試中，將聚苯乙烯微量滴定板孔用處于PBS中的2μ g/δΟμ 1的 LPS(得自傷寒沙門氏菌的脂多糖）過夜涂覆。將孔與處于PBS中的1% BSA溫育，以封閉孔中未占據的位點。在室溫下封閉2小時并使用PBS沖洗后，將處于AP緩沖液中的正常人類血清（10%)與濃度改變的抗體和片段混合。將混合物在LPS涂覆的孔上溫育。將平板在37°C下溫育2小時，從而使補體AP激活發生。溫育后，使用PBS充分沖洗平板，并使用合適的抗體檢測C3轉化酶的成分。我們使用在封閉溶液中1:2000稀釋的C3b和兔抗人C3c，在封閉溶液中1:2000稀釋的山羊抗人P，在封閉溶液中1:500稀釋的山羊抗人因子Bb，以及在封閉溶液中1:2000稀釋的HRPO綴合的抗人C5b-9檢測C3b。在室溫下，將平板與各自的抗體溫育1小時。在溫育后，使用PBS沖洗平板，并使用在封閉溶液中1:2000稀釋的過氧化物酶標記的山羊抗兔抗體（用于檢測C3b)和在封閉溶液中1:2000稀釋的過氧化物酶標記的兔抗山羊抗體（用于檢測P)來檢測結合的抗體。所有的平板在使用PBS充分洗滌后，使用TMB顯色。使用IM正磷酸淬滅藍色。C3b、P、Bb和MAC的共同存在表明C3/C5轉化酶形成。
[0094] 圖5示出了對C3b沉積的劑量依賴性抑制，圖6示出了對P沉積的劑量依賴性抑制，圖7示出了 Bb形成的劑量依賴性沉積，圖8示出了由人源化的抗Bb抗體沉積C5b-9的劑量依賴性沉積。這些數據提供了抗Bb單克隆抗體阻止轉化酶形成并抑制AP激活的直接證據。
[0095] 實施例4 :人源化的抗Bb抗體能夠兔紅細朐（rRBC)的旁路涂徑（AP)依賴的溶解
[0096] 本紅細胞溶解的測試是基于rRBC表面上終末補體復合物的形成。結果，rRBC溶解。在700nm下光散色的程序性降低是紅細胞溶解的直接量度。通常，rRBC在包含5mM MgCl 2的凝膠巴比妥緩沖液中與正常人類血清溫育。在這些條件下，rRBC的表面會引發正常人類血清中旁路途徑的激活。旁路途徑的激活導致C5b-9復合物在rRBC的表面上形成。預計抑制C5b-9復合物形成的試劑會抑制細胞的溶解。為了評價抗備解素抗體及其片段的作用，將各種濃度的IgG、F(ab'） 2和Fab在37°C下，在具有固定濃度的兔紅細胞的AP緩沖液中與正常人類血清（10 % NHS)在溫度受控的ELISA平板讀取器（能夠在700nm下讀數）中溫育。測量700nm下光散色的程序性降低（由于完整細胞的溶解）作為時間的函數。使用SpectraMax 190平板讀取器和SoftMax軟件記錄并分析數據。就計算而言，在各濃度的 IgG、F(ab'）；^P Fab下計算總的抑制情況，并將結果表示為未溶解對照的％。使用MicroCal Origin軟件，在反曲線圖中繪制各濃度下的數據。
[0097] 如圖9所示，在抑制紅細胞溶解的正常人類血清中，人源化的抗Bb IgG能夠在正常的人類血清中以大約79nM的IC5tl抑制AP依賴的rRBC溶血。抗體能夠以大約79nM的 IC5tl抑制溶解。
[0098] 使用由陣發性睡眠性血紅蛋白尿癥（PNH)患者得到的血清實施類似的試驗。不使用10%最終血清濃度，我們使用40%的最終血清濃度。如圖11所示，人源化的抗Bb能夠阻止PNH血清中紅細胞的溶解。
[0099] 實施例5 :人源化的抗Bb不能抑制經典激活涂徑
[0100] 本發明的單克隆抗體不能抑制宿主防御所需的經典途徑。將抗體致敏的綿羊紅細胞與10%正常的人類血清在包含鈣（5mM CaCl2/MgCl2)緩沖液的凝膠巴比妥緩沖液中溫育。抗體致敏的綿羊細胞會激活經典途徑。結果，在被指控溶解的紅細胞的表面上形成C5b-9。我們測試10%正常的人類血清。在這2種條件下，抗Bb不會抑制綿羊紅細胞的溶解。在典型的測試中，將100 μ 1抗體致敏的綿羊紅細胞（Complement Technologies，Tyler，TX)在CP緩沖液中，在10%正常的人類血清中溫育，從而使補體激活發生。CP激活的結果是紅細胞發生溶解。在700nm下測量由于細胞溶解而導致的光散射的程序性降低，作為時間的函數。
[0101] 如圖10所示，人源化的抗Bb IgG在正常人類血清中不會抑制抗體致敏的綿羊細胞的溶解。這些結果表明抗Bb抗體能夠選擇性地抑制補體旁路途徑，而不會影響經典突進的激活。
[0102] 實施例6 :人源化抗Bb抗體的牛產
[0103] 將容納CDR的鼠單克隆抗體測序，并將CDR移植到各人類構架區中。使用本領域研發的方法在CHO細胞中克隆并表達抗體。圖12至17示出了抗體⑶R和構架區。
[0104] 實施例7 :Bb蛋白質的抗原決定簇的圖譜繪制
[0105] 使用clips技術，由Pepscan實施Bb蛋白質的抗原決定簇的圖譜繪制。合成多個重疊肽，并使抗體在1 μ g/ml濃度下與所述的肽結合。產生最強信號的肽被識別為潛在的抗體的抗原決定簇。序列47和48被識別為一個抗體克隆，而序列49、50和51被識別為人源化抗Bb抗體。
【權利要求】
1. 一種包含參照抗體的重鏈的抗因子Bb鼠抗體，其中所述的抗因子Bb抗體包含在SEQ ID NO: 1所含有的⑶R和構架的組合。
2. -種包含參照抗體的輕鏈的抗因子Bb鼠抗體，其中所述的抗因子Bb抗體包含在SEQ ID NO: 2所含有的⑶R和構架的組合。
3. -種包含鼠 CDR和人源化的構架區的抗因子Bb人源化抗體，其中所述的人類構架區選自 SEQ ID NO:3, SEQ ID NO:4, SEQ ID NO:5, SEQ ID NO:6, SEQ ID NO:7, SEQ ID NO:8, SEQ ID N0:9, SEQ ID NO:10,SEQ ID NO:11 和 SEQ ID NO:12。
4. 權利要求3所述的抗體，其中所述的抗體抑制了所述的PC3bBb復合物的形成。
5. 權利要求4所述的抗體，其中所述的抗體通過抑制所述的PC3bBb復合物的形成來抑制C3b的形成。
6. 權利要求4所述的抗體，其中所述的抗體通過抑制所述的PC3bBb復合物的形成來抑制PC3b復合物的形成。
7. 權利要求4所述的抗體，其中所述的抗體通過抑制所述的PC3bBb復合物的形成來抑制PC3bB復合物的形成。
8. 權利要求4所述的抗體，其中所述的抗體通過抑制所述的PC3bBb復合物的形成來抑制C3bBb的形成。
9. 權利要求4所述的抗體，其中所述的抗體通過抑制所述的PC3bBb復合物的形成來抑制C3a、C5a和SC5b-9的形成。
10. 權利要求4所述的抗體，其中所述的抗體通過抑制所述的PC3bBb復合物的形成來抑制紅細胞的溶解。
11. 權利要求4所述的抗體，其中所述的抗體通過抑制所述的PC3bBb復合物的形成來抑制嗜中性粒細胞、單核細胞和血小板的激活。
12. 權利要求4所述的抗體，其中所述的抗體通過抑制所述的PC3bBb復合物的形成來抑制炎癥介質TNF和白細胞介素的激活。
13. -種包含鼠 CDR和人源化構架區的、與位于因子Bb上的肽區結合的抗因子Bb人源化抗體，其中所述的肽區選自 SEQ ID N0:47，SEQ ID N0:48，SEQ ID N0:49，SEQ ID N0:50 和 SEQ ID NO:51。
14. 一種包含參照抗體的重鏈⑶R的抗因子Bb抗體，其中所述的抗因子Bb抗體在所述的構架區內的一個或多個位置處包含取代，并且所述的⑶R選自SEQ ID N0:14, SEQ ID NO:16 和 SEQ ID NO:18。
15. -種包含參照抗體的輕鏈CDR的抗因子Bb抗體，其中所述的抗因子Bb抗體在所述的構架區內的一個或多個位置處包含取代，并且所述的⑶R選自SEQ ID N0:21，SEQ ID NO:23 和 SEQ ID NO:25。
16. -種包含參照抗體的輕鏈⑶R和重鏈⑶R的抗因子Bb抗體，其中所述的抗因子Bb 抗體具有人源化的天然或非天然的構架區，并且所述的構架區選自SEQ ID NO: 13, SEQ ID NO:15,SEQ ID NO:17,SEQ ID NO:19,SEQ ID NO:20,SEQ ID NO:22,SEQ ID NO:24和SEQ ID N0:26。
17. -種包含參照抗體的輕鏈⑶R和重鏈⑶R的抗因子Bb抗體，其中所述的抗因子Bb 抗體具有人源化的天然或非天然的構架區，并且所述的構架區選自SEQ ID NO:27, SEQ ID N0:28，SEQ ID NO:29,SEQ ID NO:19,SEQ ID NO:20,SEQ ID NO:22,SEQ ID NO:30和SEQ ID N0:26。
18. -種包含參照抗體的輕鏈⑶R和重鏈⑶R的抗因子Bb抗體，其中所述的抗因子 Bb抗體具有人源化的天然或非天然構架區，并且所述的構架區包含SEQ ID NO:31，SEQ ID N0:32，SEQ ID NO:33,SEQ ID NO:19,SEQ ID NO:20,SEQ ID NO:34,SEQ ID NO:35和SEQ ID N0:26。
19. 一種包含參照抗體的輕鏈⑶R和重鏈⑶R的抗因子Bb抗體，其中所述的抗因子 Bb抗體具有人源化的天然或非天然構架區，并且所述的構架區包含SEQ ID NO:36, SEQ ID N0:37，SEQ ID NO:38,SEQ ID NO:19,SEQ ID NO:39,SEQ ID NO:40,SEQ ID NO:41和SEQ ID N0:42。
20. -種包含參照抗體的輕鏈⑶R和重鏈⑶R的抗因子Bb抗體，其中所述的抗因子 Bb抗體具有人源化的天然或非天然構架區，并且所述的構架區包含SEQ ID NO:43, SEQ ID N0:44，SEQ ID N0:45，SEQ ID N0:19，SEQ ID N0:46，SEQ ID N0:40，SEQ ID N0:41 和SEQ ID N0:42。
21. -種包含至少一個選自以下的⑶R的抗因子Bb抗體：SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO:16,SEQ ID NO:18,SEQ ID NO:21，SEQ ID NO:23 和 SEQ ID NO:25。
22. 權利要求11所述的抗體，其中所述的抗體包含至少兩個選自以下的⑶R :SEQ ID NO:14,SEQ ID NO:16,SEQ ID NO:18,SEQ ID NO:21，SEQ ID NO:23 和 SEQ ID NO:25。
23. 權利要求11所述的抗體，其中所述的抗體包含至少三個選自以下的⑶R :SEQ ID NO:14,SEQ ID NO:16,SEQ ID NO:18,SEQ ID NO:21，SEQ ID NO:23 和 SEQ ID NO:25。
24. 權利要求11所述的抗體，其中所述的抗體包含至少四個選自以下的CDR :SEQ ID NO:14,SEQ ID NO:16,SEQ ID NO:18,SEQ ID NO:21，SEQ ID NO:23 和 SEQ ID NO:25。
25. 權利要求11所述的抗體，其中所述的抗體包含至少五個選自以下的CDR :SEQ ID NO:14,SEQ ID NO:16,SEQ ID NO:18,SEQ ID NO:21，SEQ ID NO:23 和 SEQ ID NO:25。
26. 權利要求11所述的抗體，其中所述的抗體包含至少六個選自以下的CDR :SEQ ID NO:14,SEQ ID NO:16,SEQ ID NO:18,SEQ ID NO:21，SEQ ID NO:23 和 SEQ ID NO:25。
27. 權利要求11所述的抗體，其中所述的抗Bb抗體在所述的重鏈和輕鏈CDR中的至少一個或多個位置處進一步包含取代，并且保持90 %的序列一致性。
28. 權利要求11所述的抗體，其中在SEQ ID NO: 14中一個或多個氨基酸被取代，并且保持90%的序列一致性。
29. 權利要求11所述的抗體，其中在SEQ ID NO: 16中一個或多個氨基酸被取代，并且保持90%的序列一致性。
30. 權利要求11所述的抗體，其中在SEQ ID NO: 18中一個或多個氨基酸被取代，并且保持90%的序列一致性。
31. 權利要求11所述的抗體，其中在SEQ ID NO:21中一個或多個氨基酸被取代，并且保持90%的序列一致性。
32. 權利要求11所述的抗體，其中在SEQ ID N0:23中一個或多個氨基酸被取代，并且保持90%的序列一致性。
33. 權利要求11所述的抗體，其中在SEQ ID NO:25中一個或多個氨基酸被取代，并且保持90%的序列一致性。
34. 權利要求11所述的抗體，其中所述的抗體為單克隆抗體。
35. 權利要求24所述的抗體，其中所述的抗體選自IgG, (Fab'）2, Fab, Fab'，Fv, scFv, 雙價抗體和單價抗體。
36. 權利要求24所述的抗體，其中所述的抗體為嵌合的、人源化的、全人類的、重組的和/或其他抗體的變體。
37. -種治療炎癥紊亂的方法，其中在所述的疾病中發現異常水平的炎癥介質，包括 C3a，C5a 或 C5b-9。
38. 權利要求27所述的方法，其中所述的炎癥紊亂為自身免疫疾病。
39. 權利要求27所述的方法，其中所述的自身免疫疾病選自類風濕性關節炎、幼年型關節炎、系統性紅斑狼瘡、多發性硬化和其中所述的肌體的免疫系統發生調控的其他自身免疫疾病。
40. -種治療眼科紊亂的方法，其中補體激活在疾病的病理學中起作用。
41. 權利要求30所述的方法，其中所述的眼科疾病選自干、濕性年齡相關性黃斑變性，脈絡膜神經血管病，葡萄膜炎，糖尿病視網膜病，糖尿病黃斑水腫，病理性近視，希佩爾 Lindau病，糖尿病視網膜病，眼組織胞漿菌病，糖尿病視網膜病，脈絡膜新生血管形成 (CNV)，視網膜中央靜脈阻塞（CRVO)，角膜新生血管形成，地圖樣萎縮，玻璃膜疣病和視網膜新生血管形成。
42. -種治療補體相關的紊亂的方法，其中所述的紊亂選自哮喘或哮喘氣道炎癥。
43. -種權利要求32的方法，其中所述的哮喘氣道炎癥選自哮喘，肺慢性阻塞性疾病 ("C0PD"），過敏性支氣管-肺曲菌病，過敏性肺炎，嗜酸性粒細胞性肺炎，肺氣腫，支氣管炎，過敏性支氣管炎，支氣管擴張，囊腫性纖維化，肺結核，過敏性肺炎，職業性哮喘，肉樣瘤，反應性氣道病綜合征，間質性肺病，嗜酸性粒細胞增多癥，鼻炎，鼻竇炎，運動誘發性哮喘，污染誘發的哮喘，咳嗽變異性哮喘，肺寄生蟲病，呼吸道合胞體病毒 ("RSV"）感染，副流感病毒（"PIV"）感染，醫鼻病毒（"RV"）感染和腺病毒感染。
44. 一種在患有或處于發展成狀況或疾病的風險中的哺乳動物中抑制旁路途徑激活的方法，其中所述的旁路途徑有助于疾病病理學或使導致所述的狀況或疾病的至少一種癥狀惡化。
45. -種抗Bb抗體或其抗原結合片段，其選擇性地與Bb結合，并中和PC3bBb復合物的 C3轉化酶活性。
46. 權利要求35所述的抗體或其抗原結合片段，其中所述的抗因子Bb抗體或其抗原結合片段與Bb結合并抑制所述的補體旁路途徑的C3轉化酶的活性，但不抑制所述的補體的經典途徑的C3轉化酶的活性。
47. 權利要求36所述的抗原結合片段，其中所述的抗原為Bb，并且包括哺乳動物的Bb、重組的Bb和人類Bb。
48. 權利要求36所述的抗原，其中所述的抗原為Bb及其片段。
49. 權利要求36所述的抗體或抗原，其中所述的抗體或其抗原結合片段具有低的pM至低的nM的結合親和力。
50. 權利要求36所述的抗體，其中所述的抗體是聚乙二醇化的和/或與合成的化學個體綴合的。
51. -種藥物組合物，該組合物包含有效量的權利要求1所述的嵌合的或人源化的抗 Bb抗體或其抗原結合片段、以及藥物可接受的載體。
52. 權利要求41所述的藥物組合物，其中所述的抗體是使用本領域已知的技術來生產的。
53. -種治療補體相關的炎癥紊亂的方法，其中所述的抗因子Bb與因子Bb結合，其摩爾比為1個抗體與1個Bb結合至1個抗體與2. 5個B分子結合。
【文檔編號】A61K39/395GK104220454SQ201380018990
【公開日】2014年12月17日申請日期:2013年4月2日優先權日:2012年4月3日
【發明者】R·班薩爾申請人:諾沃姆德治療公司

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