一種制備載多西紫杉醇脂質超聲微泡的方法
【專利摘要】本發明涉及一種多西紫杉醇脂質超聲微泡的制備方法，該方法中主要使用的化學試劑有DPPC、DPPE、DSPA、膽固醇和PBS溶液，最終為肝癌的治療提供一種新型、高效的給藥途徑。
【專利說明】一種制備載多西紫杉醇脂質超聲微泡的方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種制備載多西紫杉醇脂質超聲微泡的方法，屬于醫藥制劑【技術領域】。
【背景技術】
[0002]原發性肝癌是世界第六大常見的惡性腫瘤，在全世界范圍內每年大約新增肝癌病人100萬人，患者的5年生存率不到10%，失去手術機會的患者其中位生存時間僅為4-6個月，預后極差，居癌癥引起的死亡原因的第三位。我國人群由于耶乂、此乂感染率高，肝癌發病率和死亡率居全球之首，因此，對于肝癌治療的研究顯得尤其重要和必要。目前肝癌首選的治療方案仍是手術切除，然而，僅10% -15%的患者在確診時尚有手術機會，且手術切除率低，術后復發率高；化療常常是可供選擇的主要治療方法和手段，然而，化療藥物大多為細胞毒性藥物，對腫瘤組織和正常組織缺乏靶向性，具有較大的毒副作用；選擇性肝動脈化療栓塞術(從⑶)因其全身毒副作用相對較小應用較廣泛，但療效仍欠佳，且術后可引起嚴重栓塞后綜合征、上消化道出血、膽囊栓塞、嚴重血管痙攣，甚至急性肝衰竭等嚴重副反應，使患者耐受性和依從性差，而不能堅持治療，且從⑶對患者和醫務人員均有放射性危害，不宜進行重復治療。因此，尋求一種有效、安全、靶向性高、毒副作用小的治療手段迫在眉睫。
[0003]紫杉烷類藥物是一類新的抗腫瘤藥物，具有獨特的抗腫瘤活性，近年來被認為是最具有潛力的抗惡性腫瘤藥物之一，目前在臨床上有多西紫杉醇和紫杉醇兩種，兩者抗腫瘤的機制相同，都是作用于微管/微管蛋白系統，通過加強微管蛋白聚合和擬制微管解聚作用，使微管穩定，破壞腫瘤細胞的有絲分裂，促使腫瘤細胞凋亡。而多西紫杉醇(簡稱000的抗腫瘤活性優于紫杉醇，多西紫杉醇可單獨或聯合其他化療藥物用于乳腺癌、非小細胞肺癌、卵巢癌、肝癌、前列腺癌等的治療。但由于多西紫杉醇的水溶性差，脂溶性較好，在臨床使用中受限。
[0004]脂質體有由磷脂和膽固醇組成，具有類似生物膜雙分子層的結構，交替間隔著水相和脂質雙分子層，此種結構即可將親水性藥物包封于水相，又可將親脂性的藥物包封于脂質雙分子層，因此，脂質體可用作脂溶性較好藥物的載體，克服臨床使用受限的技術問題。
[0005]自1968年成首次報道了超聲造影劑的應用以來，其聲學特性不斷地為人們所認識并應用于實踐。人們在利用微泡造影劑增強超聲顯像的同時，還發現微泡具有靶向運載作用，利用微泡在超聲介導下的空化效應，可以靶向傳輸基因或藥物，達到治療疾病的目的。這無疑極大地拓展了超聲造影劑的應用領域，并可能建立一種安全、有效、無創的超聲介導祀向傳輸系。
[0006]近年來，有關超聲造影劑靶向運載藥物的研究日益增多。通過調整微泡本身的特性，可將藥物或治療性基因整合于微泡中，同時將高度特異的抗體或其他配體連接于微泡表面。經靜脈注入攜藥的微泡后，用超聲照射特定的部位，即可實現藥物或治療性基因的定向釋放。超聲微泡藥物運載系統在溶栓治療和抗腫瘤治療方面起到了重要作用。超聲靶向微泡爆破是一種新興的靶向給藥及基因轉運方法，以超聲微泡造影劑作為藥物或基因轉送的載體，主要作用機制是聲孔作用，即胞膜上形成的瞬時孔。超聲輻照于靶組織或靶器官，靶部位載基因或載藥微泡后靶向釋放出基因和藥物，提高藥物和基因轉染率。
[0007]超聲微泡的生物學特性使其成為一種理想的基因或藥物遞送載體。將少量攜帶基因或藥物的微泡經外周靜脈或局部注射后，微泡流經靶向部位時進行超聲檢查，即得到超聲影像。當超聲影像圖證明超聲準確定位于靶向部位時，增加聲壓使之達到一定強度，即可使微泡破裂產生空化效應，空化效應是指存在于液態物質中的微小空泡在高強度超聲的作用下被激發，空化核急劇膨脹和收縮直至爆裂，此過程中空化核吸收了大量的聲能，并將能量集中釋放在極小的區域，核內局部溫度和壓力急劇升高，隨之產生強大沖擊波、內切力、高速微束射流及自由基等二次效應，不僅使微血管破裂，血管內皮細胞收縮，細胞間隙增寬，微血管壁的通透性增大，還可使細胞膜的完整性遭到破壞，產生暫時性、可逆性的小孔，增加了細胞膜的通透性，均能夠增強載藥微泡對基因或藥物的轉移。
[0008]介于此，本發明旨在通過制備載多西紫杉醇脂質超聲微泡，通過對其性能進行考察、評價，為肝癌的化療提供一種新型、高效的給藥途徑。
【發明內容】
[0009]本發明的目的在于，提供一種制備載多西紫杉醇脂質超聲微泡的方法，該方法具有科學、聞效的特點。
[0010]本發明的又一目的在于，最終所制備的載多西紫杉醇脂質超聲微泡在用于治療肝癌藥物中的應用。
[0011]本發明的技術方案，制備載多西紫杉醇脂質超聲微泡的方法是:
[0012]取多西紫杉醇1-5呢、0？？0試劑0.5-2呢、0？？2試劑1-4呢、03？八試劑3-10呢和膽固醇適量，加入有機溶劑充分溶解，冷卻至室溫，加值彡7.0的？83溶液200-800^ 1、甘油40-609 1，膽固醇適量，充分混合后密封，置于40-601的恒溫設備中孵育成薄膜，充入全氟丙烷替代密閉容器中的空氣，密閉置于銀汞調和器振蕩458，即得。
[0013]其中，優選的制備方法是:
[0014]取多西紫杉醇2呢、0？？0試劑1呢、0？？2試劑2呢、08？^試劑5呢和膽固醇適量，加入有機溶劑充分溶解，冷卻至室溫，加值等于7.0的？83溶液450 ^ 1，甘油50 ^ 1、膽固醇適量，充分混合后密封，置于501的恒溫設備中孵育成薄膜，充入全氟丙烷替代密閉容器中的空氣，密閉置于銀汞調和器振蕩458，即得。
[0015]上述所制備的載多西紫杉醇脂質超聲微泡，可用于在制備治療肝癌藥物中的應用。
[0016]有益效果
[0017]對于本發明所述的技術方案，我們對該技術所帶來的創新性進行了全面的研究比對，其在超聲應用的過程中能顯著提高超聲的消融作用，總結起來有益效果有以下兩點:
[0018]1.造影功能:此種方法制備得到的微泡平均粒徑為350鹽-75011111，外形整齊圓整，分布均勻。在超聲造影模式給予動物一定劑量的該微泡，可以看到明顯的造影功能，較清晰的顯示出肝腫瘤的輪廓。
[0019]2.靶向釋放藥物出1冊與之聯合使用，可達到定向爆破的功能，更能使得藥物利用達到最大化，是超聲診斷提高到治療水平上重要的一步。
具體實施例
[0020]以下是本
【發明內容】
的具體實施例，用于闡述本申請文件中所要解決技術問題的技術方案，有助于本領域技術人員理解本
【發明內容】
，但本發明技術方案的實現并不限于這些實施例。實施例1
[0021]取多西紫杉醇2呢、0？？0試劑1呢、0？？2試劑2呢、08？^試劑5呢和膽固醇適量，加入有機溶劑充分溶解，冷卻至室溫，加四值為5.0的？83溶液450^ 1，甘油50^ 1、膽固醇適量，充分混合后密封，置于501的恒溫設備中孵育成薄膜，充入全氟丙烷替代密閉容器中的空氣，密閉置于銀汞調和器振蕩308，即得。
[0022]實施例2
[0023]取多西紫杉醇1呢、試劑0.5呢、0？？2試劑1呢、03？八試劑3呢和膽固醇適量，加入有機溶劑充分溶解，冷卻至室溫，加值小于4.0的？83溶液200 4 1，甘油40^ 1、膽固醇適量，充分混合后密封，置于601的恒溫設備中孵育成薄膜，充入全氟丙烷替代密閉容器中的空氣，密閉置于銀汞調和器振蕩358，即得。
[0024]實施例3
[0025]取多西紫杉醇5呢、0？？0試劑2呢、0？？2試劑4呢、08？^試劑10呢和膽固醇適量，加入有機溶劑充分溶解，冷卻至室溫，加值小于3.0的？83溶液800 4 1，甘油60^ 1、膽固醇適量，充分混合后密封，置于401的恒溫設備中孵育成薄膜，充入全氟丙烷替代密閉容器中的空氣，密閉置于銀汞調和器振蕩408，即得。
[0026]實施例4
[0027]取多西紫杉醇2呢、0？？0試劑1呢、0？？2試劑2呢、08？^試劑5呢和膽固醇適量，加入有機溶劑充分溶解，冷卻至室溫，加四值為2.5的？83溶液450^ 1，甘油50^ 1、膽固醇適量，充分混合后密封，置于551的恒溫設備中孵育成薄膜，充入全氟丙烷替代密閉容器中的空氣，密閉置于銀汞調和器振蕩458，即得。
[0028]實施例5
[0029]取多西紫杉醇2呢、0？？0試劑1呢、0？？2試劑2呢、08？^試劑5呢和膽固醇適量，加入有機溶劑充分溶解，冷卻至室溫，加值為6.5的？83溶液450 ^ 1，甘油55 ^ 1、膽固醇適量，充分混合后密封，置于501的恒溫設備中孵育成薄膜，充入全氟丙烷替代密閉容器中的空氣，密閉置于銀汞調和器振蕩508，即得。
[0030]以上在本發明的所有技術方案中，所述的是:二棕櫚酰磷脂酰膽堿，0？？2:二棕櫚酰磷酯酰乙醇胺，08？^:二硬脂酰基磷脂酸，？88溶液:磷酸鹽緩沖溶液，:高強度聚焦超聲。
【權利要求】
1.一種制備載多西紫杉醇脂質超聲微泡的方法，其特征在于: 取多西紫杉醇l-5mg、DPPC試劑0.5_2mg、DPPE試劑l_4mg、DSPA試劑3_10mg和膽固醇適量，加入有機溶劑充分溶解，冷卻至室溫，加PH值彡7.0的PBS溶液200-800 μ 1、甘油40-60 μ 1，膽固醇適量，充分混合后密封，置于40-60°C的恒溫設備中孵育成薄膜，充入全氟丙烷替代密閉容器中的空氣，密閉置于銀汞調和器振蕩45s，即得。
2.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于: 取多西紫杉醇2mg、DPPC試劑lmg、DPPE試劑2mg、DSPA試劑5mg和膽固醇適量，加入有機溶劑充分溶解，冷卻至室溫，加PH值為7.0的PBS溶液450 μ 1，甘油50 μ 1、膽固醇適量，充分混合后密封，置于50°C的恒溫設備中孵育成薄膜，充入全氟丙烷替代密閉容器中的空氣，密閉置于銀汞調和器振蕩45s，即得。
3.如權利要求1或2所述的制備方法，其特征在于:最終所制成的載多西紫杉醇脂質超聲微泡在制備治療肝癌藥物中的應用。
【文檔編號】A61K9/00GK104368016SQ201310688779
【公開日】2015年2月25日 申請日期:2013年12月12日 優先權日:2013年12月12日
【發明者】張悅 申請人:張悅