8-甲氧基補骨脂素柔性納米脂質體凝膠及其制備方法
【專利摘要】本發明涉及8-甲氧基補骨脂素柔性納米脂質體凝膠及其制備方法，配方按重量比為大豆磷脂:膽固醇:MOP:膽酸鈉=20:10:3:10，制備方法為:按處方量將不同藥物溶于60ml氯仿-甲醇(2:1)液，用旋轉蒸發器減壓旋轉去除有機溶劑，形成均勻薄膜(A)；取5mlPBS(10mmol/L)加熱至55℃，傾入(A)中，并浸入55℃水浴中攪拌30min，即得透明的均勻乳白色液體。發明利用柔性納米脂質體作為補骨脂素的藥物載體，可以使補骨脂素具有更好的穿透性，滯留表皮和真皮的時間更長，進入血液循環的藥物更少，從而可以減少藥物使用量和使用次數，降低藥物不良反應的發生率，增加患者對治療的依從性。
【專利說明】8-甲氧基補骨脂素柔性納米脂質體凝膠及其制備方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種醫藥領域，尤其涉及8-甲氧基補骨脂素(MOP)柔性納米脂質體凝膠及其制備方法。
【背景技術】
[0002]白癜風是一種獲得性的皮膚色素異常性疾病，表現為局限性或泛發性色素脫失斑。白癜風的病因和發病機制尚不是十分明確，所以易診難治，有效率低、復發率高。局部或全身使用補骨脂素治療白癜風有著數百年的歷史，是目前白癜風治療最常用且療效肯定的治療方法。補骨脂素酊劑可導致局部皮膚出現紅斑、水皰、大皰，患者瘙癢疼痛明顯，且需多次給藥。
[0003]8-甲氧基補骨脂素(MOP)為一光敏劑，內服或外用治療白癜風，療效確切，為國家基本藥物。臨床上應用的片劑、膠囊、酊劑、軟膏等傳統劑型在長期應用時，易產生較為嚴重的不良反應，如惡心、嘔吐、皮炎、白細胞減少、中毒性肝炎等。
【發明內容】
[0004]為解決上述問題，本發明的目的是提供8-甲氧基補骨脂素柔性納米脂質體凝膠。
[0005]本發明的另一個目的是通過上述8-甲氧基補骨脂素柔性納米脂質體凝膠的制備方法。
[0006]本發明的目的是這樣實現的:一種8-甲氧基補骨脂素柔性納米脂質體凝膠，其特征是將柔性材料與納米材料結合，成為一種新型的凝膠。
[0007]所述的8-甲氧基補骨脂素柔性納米脂質體凝膠，其特征在于將柔性材料與納米材料結合，制備出一種新的8-甲氧基補骨脂素凝膠制劑。
[0008]所述的8-甲氧基補骨脂素柔性納米脂質體凝膠，其特征在于:按重量比其配方為:大豆磷脂:膽固醇:Μ0Ρ:膽酸鈉=20:10:3:10。
[0009]所述的8-甲氧基補骨脂素柔性納米脂質體凝膠的制備方法為:按大豆磷脂20g、膽固醇10g、M0P3g、膽酸鈉10g，溶于60ml氯仿-甲醇(2:1)液，用旋轉蒸發器減壓旋轉去除有機溶劑，形成均勻薄膜(A);取51111 PBS(IOmmoI/L)加熱至55°C，傾入(A)中，并浸入55°C水浴中攪拌30min，即得透明的均勻乳白色液體。
[0010]本發明利用柔性納米脂質體技術研制了補骨脂素(MOP)柔性納米脂質體凝膠，可以使補骨脂素具有更好的穿透性，滯留表皮和真皮的時間更長。柔性納米脂質體又稱傳遞體或變形脂質體，是將表面活性劑(如膽酸鈉、去氧膽酸鈉等)加入到制備脂質體的類脂材料中制成的具有高度自身形變、可高效地穿過比其自身小數倍的皮膚孔道的類脂質體，具有高效滲透性、高度柔韌性和高親水性。柔性納米脂質體的結構類似生物膜，是一種多功能的定向藥物載體，能使更多的藥物保留在皮膚中，減少藥物進入血循環，在表皮和真皮內形成藥物貯庫，形成一個緩釋模型，使藥物持久地對病變局部起治療作用。該技術在抗菌藥物]、抗腫瘤藥物、非留體類消炎藥均得到成功應用，為近年來藥劑學研究的重點。本發明利用柔性納米脂質體作為補骨脂素的藥物載體，可以使補骨脂素具有更好的穿透性，滯留表皮和真皮的時間更長，進入血液循環的藥物更少，從而可以減少藥物使用量和使用次數，降低藥物不良反應的發生率，增加患者對治療的依從性。
[0011]柔性納米脂質體粒徑小，高度自身形變、可高效地穿過比其自身小數倍的皮膚孔道，使一些難以透皮的大分子藥物成功地進入皮膚組織，對藥物的皮膚滲透有顯著的促進作用。同時柔性納米脂質體能改變原型藥物的理化性質，增強藥物的藥理作用及療效，減少刺激性，降低藥物不良反應，提高生物利用度，是一種新型的經皮給藥載體。本本發明通過對MOP柔性納米脂質體凝膠制備工藝，旨在制備具有良好皮膚靶向性的MOP柔性納米脂質體凝膠，提高MOP局部外用治療白癜風的效果，減少毒副作用，為開發高效、低毒、方便的白癜風治療藥物打下基礎。
[0012]具體實施例方式
[0013]下面結合數據和實施例對本發明進一步說明。
[0014]本發明根據正交實驗設計及預試驗，確定按重量比基本配方為:大豆磷脂:膽固醇:Μ0Ρ:膽酸鈉=20:10:3:10。分別采用逆相蒸發法、乙醚注入法、薄膜法、薄膜-超聲法等方法制備MOP柔性納米脂質體，比較脂質體包封率、平均粒徑和Zeta電位。
[0015]1.逆相蒸發法、乙醚注入法、薄膜法、薄膜-超聲法制備MOP柔性納米脂質體。
[0016]基本配方:大豆磷脂:膽固醇:Μ0Ρ:膽酸鈉=20g: 10g:3g:1Og,分別采用逆相蒸發法、乙醚注入法、薄膜法、薄膜-超聲法等方法制備MOP柔性納米脂質體。普通脂質體的制備配方中不含膽酸鈉 。
[0017]I)逆相蒸發法制備大單層脂質體:按處方量將不同藥物溶于60ml氯仿-甲醇(2:1)液，然后加入PBS15mL，再用水浴式超聲儀超聲30min，倒入500ml燒瓶中，置于40°C水浴，減壓除去有機溶劑，達膠態后滴加PBS (IOmmoI/L) 5ml，旋轉使壁上的凝膠脫落，繼續減壓蒸發即可制得透明的均勻乳白色液體。
[0018]2)乙醚注入法:水相:磷酸鹽緩沖液((0.05mol/L，pH7.3)4mL放入試管中，置于55°C至60°C水浴中；有機相:乙醚2ml溶解總脂及MOP ;用帶5號針頭的注射器以0.25mL/min速度將有機相注入水相中，不斷攪拌至有機溶劑除盡，即可得到透明的均勻乳白色液體。
[0019]3)薄膜法制備多室脂質體:按處方量將不同藥物溶于60ml氯仿-甲醇(2:1)液，置于500ml圓底燒瓶中，用旋轉蒸發器減壓旋轉去除有機溶劑，形成均勻薄膜(A)。取5mlPBS(10mmol/L)加熱至55°C，傾入(A)中，并浸入55°C水浴中攪拌30min，即得透明的均勻乳白色液體。
[0020]4)薄膜-超聲法制備小單層脂質體:將3)制得的脂質體再經超聲即得。用水浴式超聲處理機處理30min，再在探頭式超聲儀上超聲粉碎5次，每次3min，直至形成均勻的上清液。4000\8離心101^11，收集上清液。
[0021]2.納米脂質體質量評價:高效液相色譜(HPLC)測定MOP柔性納米脂質體含量；凝膠柱法測定包封率；負染-電鏡法測定粒徑。
[0022]I)高效液相色譜(HPLC)測定MOP柔性納米脂質體含量:取ImL脂質體以PBS稀釋至100ml,取5ml置于25ml量瓶中，加甲醇定容,超聲5min,0.45um微孔濾膜過濾后,精密進樣2ul。另取MOP對照品溶液(10ug/mL)20ul進樣，外標法計算含量。[0023]2)凝膠柱法測定包封率:取MOP柔性納米脂質體lg，用PBS20mL混懸均勻，上葡Sephadex G-25柱，用PBS洗脫，接取流分IOOmL,流速3mL/min，取含藥脂質體流分5mL置于25mL量瓶中，加甲醇定容,超聲處理5min, 0.45mm微孔濾膜過濾,取20 μ L進樣,計算包封于脂質體中的藥物Wl。同時，取柔性納米脂質體lg，用PBSlOOmL混懸均勻，然后取5mL用甲醇稀釋至25mL,超聲處理5min,0.45um微孔濾膜過濾,進樣20ul。計算得總藥物量W2,按下式計算包封率EE:EE = W1/W2X 100%。
[0024]3)負染-電鏡法測定粒徑:取柔性納米脂質體樣品適量，用PBS稀釋200倍，滴于銅網上，2%磷鎢酸負染，自然晾干，5000-20000倍電鏡下觀察并拍照。隨機測定5個視區，每個視區測定50個柔性納米脂質體的粒徑，以照片粒徑除以放大倍數即得柔性納米脂質體的粒徑大小與分布。
[0025]4) Zeta電位測定:取MOP柔性納米脂質體Iml,PBSlml稀釋，檢測。測定條件:電流 0.43mv、電場 16.24V/cm、波長 660nm。
[0026]表1制備MOP脂質體含量、包封率、平均粒徑、Zeta電位的測定
[0027]
【權利要求】
1.一種8-甲氧基補骨脂素柔性納米脂質體凝膠，其特征是將柔性材料與納米材料結合，成為一種新型的凝膠。
2.根據權利要求1中所述的8-甲氧基補骨脂素柔性納米脂質體凝膠，其特征在于將柔性材料與納米材料結合，制備出一種新的8-甲氧基補骨脂素凝膠制劑。
3.根據權利要求1和2中所述的8-甲氧基補骨脂素柔性納米脂質體凝膠，其特征在于:按重量比其配方為:大豆磷脂:膽固醇:Μ0Ρ:膽酸鈉=20:10:3:10。
4.權利要求3所述的8-甲氧基補骨脂素柔性納米脂質體凝膠的制備方法，其特征在于:按大豆磷脂20g、膽固醇10g、M0P3g、膽酸鈉IOg,溶于60ml氯仿-甲醇(2:1)液,用旋轉蒸發器減壓旋轉去除有機溶劑，形成均勻薄膜(A);取51111?83(101111]101/1)加熱至55°C,傾入(A)中，并浸入55°C水浴`中攪拌30min，即得透明的均勻乳白色液體。
【文檔編號】A61K9/127GK103599065SQ201310636916
【公開日】2014年2月26日 申請日期:2013年12月2日 優先權日:2013年12月2日
【發明者】溫炬 申請人:溫炬