快速測定蘋果黃蚜對聯苯菊酯敏感性的診斷試劑盒及使用方法
【專利摘要】快速測定蘋果黃蚜對聯苯菊酯敏感性的診斷試劑盒由玻璃管、藥膜及棉塞構成。所述的藥膜是將500μL濃度為聯苯菊酯1.3mg/L的丙酮溶液均勻涂抹于指形管內壁及底部，滾動晾干后形成，將晾干的指形管塞上棉塞制成。本發明的使用方法是將準備好的診斷試劑盒帶到田間，打開棉塞，把20頭大小一致的蘋果黃蚜成蟲輕掃入指形管內，然后再塞上棉塞，60分鐘后檢查死亡率。用蘋果黃蚜死亡率確定對聯苯菊酯的敏感度，從敏感度的高低決定施用農藥的種類和用量。采用本發明的診斷試劑盒，能在2小時內快速、簡便的判斷蘋果黃蚜對聯苯菊酯的敏感性，為科學有效地指導田間防治蘋果黃蚜提供科學依據。
【專利說明】快速測定蘋果黃蚜對聯苯菊酯敏感性的診斷試劑盒及使用方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及害蟲敏感性快速檢測【技術領域】，具體地說涉及一種快速、簡便測定蘋果黃蚜對聯苯菊酯敏感性的診斷試劑盒及使用方法。
【背景技術】
[0002]蘋果黃姆citricola von der (SboO屬半翅目 Hemiptera姆科Aphididae,又名繡線菊蚜，以成蟲、若蟲刺吸葉和枝梢的汁液，葉片被害后向背面橫卷，影響新梢生長及樹體發育，是蘋果樹上的主要害蟲之一。為有效控制蘋果黃蚜的危害，需要明確其對常用藥劑的敏感性，便于科學選藥和用藥。目前常用點滴法或浸蟲法，通過比較田間品系和敏感品系對常用藥劑的致死中量(LD5tl)的區別，來確定其敏感度。一是專業技術性強，二是工作量大，三是耗費時間較長，不能及時為指導用藥提供依據。
[0003]近年來，一種更為簡便的研究病蟲害敏感性的方法逐漸受到研究人員的重視，即診斷劑量法。診斷劑量法亦分兩種，一種為平坡診斷法，另一種為區分劑量法。黃斌、郭瑩、尤民生等人采用平坡診斷法分別研究了小菜蛾、黃曲條跳甲的敏感性，呂要斌等人亦采用平坡診斷法研究了田間小菜蛾種群對茚蟲威的敏感性，結果表明診斷劑量法與浸液法具有相似結論，并發現平坡診斷法比浸液法更簡便，在定性判別是否產生抗藥性時具有較高可信度；高希武、羅萬春、李國清等人分別采用區分劑量法研究了盲蝽、棉蚜、馬鈴薯甲蟲、小菜蛾、棉鈴蟲的抗藥性，確定了部分害蟲的敏感基線和抗性診斷劑量。診斷劑量法相比傳統方法更為簡便，尤其是區分劑量法在確定區分劑量后，研究病蟲害敏感性時較為便捷。但是，在現有相關技術方面未見采用診斷劑量法研究蘋果黃蚜對農藥敏感性的報道；現有對蘋果黃蚜敏感性的檢測常 用點滴法或浸蟲法，其通過比較田間品系和敏感品系對常用藥劑的致死中量(LD50)的區別，來確定其敏感度，現有技術存在如下問題:一是專業技術性強，須專業技術人員操作；二是檢測設施復雜，工作量大；三是耗費時間較長，檢測時間均在10小時以上，不能及時為指導用藥提供依據。為指導田間科學用藥，增強其實用性和便捷性，供基層科技人員或農民使用，發明人研究了快速測定蘋果黃蚜對聯苯菊酯敏感性的方法，并開發出了診斷試劑盒。
【發明內容】
[0004]本發明的目的是提供一種快速、簡便測定蘋果黃蚜對聯苯菊酯敏感性的診斷試劑盒及使用方法，使用該診斷試劑盒，能在2小時內快速測定和判斷蘋果黃蚜對聯苯菊酯的敏感性，為指導田間科學用藥提供簡便快捷的用具和方法。
[0005]為實現上述目的，本發明采用如下技術方案。
[0006]本發明的快速測定蘋果黃蚜對聯苯菊酯敏感性的診斷試劑盒由玻璃管、藥膜及棉塞構成。所述的玻璃管為長7.5-10 cm、直徑1.5-2.5 cm的指形管；所述的藥膜是將500ML濃度為聯苯菊酯1.3 mg/L的丙酮溶液均勻涂抹于指形管內壁及底部，滾動晾干后形成，所述的棉塞是經消毒處理后的脫脂棉制成，將晾干的指形管塞上棉塞即制成診斷試劑盒。
[0007]本發明的快速測定蘋果黃蚜對聯苯菊酯敏感性的診斷試劑盒的使用方法是:將準備好的聯苯菊酯診斷試劑盒帶到田間，打開棉塞，把20頭大小一致的蘋果黃蚜成蟲輕掃入指形管內，然后再塞上棉塞，60分鐘后檢查死亡率。若死亡率大于等于80%，表明被測試的蘋果黃蚜對聯苯菊酯敏感度較高，可以用常規的聯苯菊酯濃度及用量進行防治；若死亡率低于80%，則表明被測試的蘋果黃蚜對聯苯菊酯敏感度較低，應改用其他敏感度較高的農藥。
[0008]采用本發明的快速測定蘋果黃蚜對聯苯菊酯敏感性的診斷試劑盒，能快速、簡便的判斷蘋果黃蚜對聯苯菊酯的敏感性。與現有診斷方法相比，診斷試劑盒操作簡單，使用方便，普通農民經過簡單的培訓即會操作；極大地簡化了診斷設施，診斷工作量也減少到最小；大大縮短了診斷時間，在2小時內便可得出診斷結果。為科學有效地指導田間防治蘋果黃蚜提供科學依據，避免造成常規用量的農藥防治效果差，造成果園的經濟損失，或超常規用藥造成環境污染。
[0009]藥膜中農藥的濃度及用量試驗
1、試驗藥劑:聯苯菊酯原藥。
[0010]2、試驗種群和材料:
蘋果黃蚜敏感品系(S):溫室內自然繼代生長4年，期間未接觸過任何藥劑。
[0011]蘋果黃蚜抗性品系(R):田間采集。
[0012]供試昆蟲:蘋果黃蟲牙citricola。
[0013]敏感品系(S):采集于太原市小店區孫家寨溫室大棚。
[0014]抗性品系(R):采集于太原市小店區孫家寨果園，聯苯菊酯抗性倍數為5.69倍。
[0015](抗性倍數=抗性品系LC5tl/敏感品系LC5tl，其中LC5tl為致死中濃度，即致死50%個體的藥劑濃度。)
供試試劑:丙酮。
[0016]適用的靶標作物為蘋果樹。
[0017]適合的害蟲為蘋果黃蚜。
[0018]3、試驗方法:
通過藥膜法測定聯苯菊酯殺蟲活性物質對蘋果黃蚜的毒力，利用毒力回歸方程計算蘋果黃蚜死亡率在50%、60%、70%、80%、90%時所對應的劑量(LC5(1、LC6C1、LC7tl、LC8tl、LC9tl)，從而確定防治蘋果黃蚜的藥劑及用量，并據此制備診斷試劑盒。
[0019](I)試驗種群敏感度測定:
采用指形管藥膜法。用·微量移液器在長7.5 cm、直徑2.5 cm的指形管中加入500 ML的藥液(用500ML丙酮溶解后的藥液)，緩慢傾斜轉動使藥液在指形管底面及管壁內不同高度范圍內形成均勻藥膜；晾干后每管中接入大小一致的蘋果黃蚜20頭，然后將棉塞推至藥膜邊緣處，放于溫度25±1 °C、光周期L: D = 14:10 h的光照培養箱中。I小時后調查蚜蟲死亡數，計算死亡率，繪制毒力回歸曲線。藥劑濃度設置參照表1。
[0020](2)回歸方程的建立:采用藥膜法，測試聯苯菊酯對蘋果黃蚜敏感品系的毒力。藥劑濃度設置見表1。
[0021]表1診斷試劑盒藥劑設置
【權利要求】
1.一種快速測定蘋果黃蚜對聯苯菊酯敏感性的診斷試劑盒，其特征在于，它由玻璃管、藥膜和棉塞構成，所述的玻璃管為長7.5-10 cm、直徑1.5-2.5 cm的指形管；所述的藥膜是將500ML濃度為聯苯菊酯1.3 mg/L的丙酮溶液均勻涂抹于指形管內壁及底部，滾動晾干后形成；所述的棉塞是經消毒處理后的脫脂棉制成；將晾干的指形管塞上棉塞即可； 快速測定蘋果黃蚜對聯苯菊酯敏感性的診斷試劑盒的使用方法如下: 將準備好的聯苯菊酯診斷試劑盒帶到田間，打開棉塞，把20頭大小一致的蘋果黃蚜成蟲輕掃入指形管內 ，然后再塞上棉塞，60分鐘后檢查死亡率，若死亡率大于等于80%，表明被測試的蘋果黃蚜對聯苯菊酯敏感度較高，可以用常規的聯苯菊酯濃度及用量進行防治；若死亡率低于80%，則表明被測試的蘋果黃蚜對聯苯菊酯敏感度較低，應改用其他敏感度較高的農藥。
【文檔編號】A61K49/00GK103656689SQ201310636516
【公開日】2014年3月26日 申請日期:2013年12月3日 優先權日:2013年12月3日
【發明者】張潤祥, 封云濤, 范仁俊, 庾琴, 王振, 劉中芳, 張鵬九, 李光玉, 張建華 申請人:山西省農業科學院植物保護研究所