一種荔枝核皂苷的提取工藝的制作方法
【專利摘要】本發明提供了一種皂苷的提取方法，特別是涉及一種荔枝核皂苷的提取方法，屬于植物提取【技術領域】。工藝流程包括有：將荔枝核粉碎，分別用石油醚、氯仿和乙醚進行萃取，再采用高速逆流色譜進行提純。本發明提供的荔枝核皂苷提取方法，采用多次萃取分離的方式去荔枝核皂苷粗提物進行分離，有效地從粗提物中獲得活性成分，并去除了雜質，產品收率和純度高于常規方法。
【專利說明】—種荔枝核皂苷的提取工藝
【技術領域】
[0001]本發明提供了一種皂苷的提取方法，特別是涉及一種荔枝核皂苷的提取方法，屬于植物提取【技術領域】。
【背景技術】
[0002]荔枝與香蕉、菠蘿、龍眼一同號稱“南國四大果品”。荔枝原產于中國南部，是亞熱帶果樹，常綠喬木，高約10米。果皮肯多數鱗斑狀突起，鮮紅，紫紅。果肉產鮮時半透明凝脂狀，味香美。荔枝性熱，多食易上火，并可引起“荔枝病”。荔枝果實除食用外，核人藥為收斂止痛劑,治心氣痛和小腸氣痛。木材堅實,深紅褐色,紋理雅致、耐腐,歷來為上等名材。花多，富含蜜腺，是重要的蜜源植物。
[0003]荔枝不僅味甘汁多，而且富有營養。據現代醫學研究分析測定。荔枝含有豐富的蛋白質、脂肪、尼克酸、梓檬酸、果膠、鈣、磷、鐵等，荔枝果肉中含葡萄糖高達66%，還含有果糖、蔗糖及豐富的維生素C、維生素b、維生素a原以及葉酸、蘋果酸和大量的游離氨基酸等。荔枝的功效主要包括有:1.荔枝所包含可觀的糖分具有補充能量，增加營養的功效，研究表明，荔枝對大腦組織有補養作用，能明顯改善失眠、健忘、神疲等癥。2.荔枝肉含可觀的維生素C與蛋白質，有助干增強機體免疫功能，增強抗病能力。3.荔枝有消腫解毒、止血止疼的功效。4.荔枝擁有可觀的維生素，能夠促進微細血管的血液循環，防止雀斑的發生，令皮膚更光滑。5.可止呃逆，止腹瀉，它是頑固性呃逆和五更瀉者的食療佳品，同時有補腦健身，開胃益脾，有增進食欲之作用。
[0004]目前，荔枝核成分分離制備工藝主要采用水提醇沉和溶劑提取法，水提醇沉法耗時、提取率低；溶劑提取法需要大量的溶劑，而且提取物含雜質多。這些提取工藝對皂苷提取效率不高。
【發明內容】
[0005]本發明的目的是提供一種荔枝核皂苷的提取工藝，解決提取物雜質多、收率低的問題，采用的技術方案是:
[0006]一種荔枝核皂苷的提取工藝，包括如下步驟:
[0007]S1:按重量份計，將50~80份荔枝核粉碎，加入8~12份的氯仿和4~5份水，再加入0.2份的纖維素酶，混合均勻，在超聲功率600~800W、40~45°C的條件下，酶解60~lOOmin，將酶解液過濾，濾液再在70~75°C條件下恒溫干燥18~24h，得到荔枝核粗提取物；
[0008]S2:按重量份計，將荔枝核粗提取物加入20~40份水，lmol/L的NaOH溶液5~8份，在超聲功率600~800W、40~45°C下，使荔枝核提取物在水中分散；再加入40~50份石油醚進行萃取，分層后取石油醚萃取相，在60~70°C條件下，減壓干燥10~12h，得到提取物I ;
[0009]S3:在步驟S2所得提取物I中加入10~20份的水，0.5mol/L的磷酸溶液5~8份，在超聲功率600~800W、40~45°C下，使提取物分散；再加入20~30份的氯仿進行萃取，分層后取氯仿萃取相，在60~70°C條件下，減壓干燥10~12h，得到提取物II ；[0010]S4:在步驟S3所得的提取物II中加入10~15份的水，在超聲功率600~800W、40~45°C下，使提取物分散；再加入15~20份的乙醚進行萃取，分層后取乙醚萃取相，在50~60°C條件下，減壓干燥8~10h，得到提取物III ；
[0011]S5:采用高速逆流色譜法，以按體積比為0.2:3:2.5:8的比例將正己烷-乙酸乙酯-丙酮-水配制成二相系統，攪拌后，靜置分層，下相作為固定相，上相作為流動相；再將步驟S4中所得到的提取物III用下相配成100mg/ml的樣品溶液，并以600~800W的超聲輔助溶解，注入高速逆流色譜，轉速為800r/min，流量為4.5mL/min，檢測波長為580nm，對時間為135~ISOmin內的流出液進行收集，再流出液進行減壓濃縮、干燥，即得。
[0012]上述的步驟SI中，荔枝核破碎之后的粒度大小最好控制在50~100目。
[0013]所述的石油醚的沸程最好是選用30~60°C的規格的。可以保證在低溫條件下進行加熱干燥，而不使有效成分被破壞。
[0014]經過大量試驗摸索,最優的工藝參數如下:
[0015]S1:按重量份計,將78重量份蒸枝核粉碎,加入11重量份的氯仿和4.3重量份水，再加入0.2重量份的纖維素酶，混合均勻，在超聲功率750W、44°C的條件下，酶解90min，將酶解液過濾，濾液再在74°C條件下恒溫干燥23h，得到荔枝核粗提取物；
[0016]S2:按重量份計，將荔枝核粗提取物加入35重量份水，lmol/L的NaOH溶液6重量份，在超聲功率650W、41°C下,使蒸枝核提取物在水中分散；再加入42重量份石油醚進行萃取，分層后取石油醚萃取相，在68°C條件下，減壓干燥12h，得到提取物I ;
[0017]S3:在步驟S2所得提取物I中加入12重量份的水，0.5mol/L的磷酸溶液6重量份，在超聲功率700W、4rC下，使提取物分散；再加入23重量份的氯仿進行萃取，分層后取氯仿萃取相，在69°C條件下，減壓干燥llh，得到提取物II ；
[0018]S4:在步驟S3所得的提取物II中加入14重量份的水，在超聲功率720W、43°C下，使提取物分散；再加入16重量份的乙醚進行萃取，分層后取乙醚萃取相，在57°C條件下，減壓干燥8.5h，得到提取物III ;
[0019]S5:采用高速逆流色譜法，以按體積比為0.2:3:2.5:8的比例將正己烷-乙酸乙酯-丙酮-水配制成二相系統，攪拌后，靜置分層，下相作為固定相，上相作為流動相；再將步驟S4中所得到的提取物III用下相配成100mg/ml的樣品溶液，并以600~800W的超聲輔助溶解，注入高速逆流色譜，轉速為800r/min，流量為4.5mL/min,檢測波長為580nm，對時間為135~ISOmin內的流出液進行收集，再流出液進行減壓濃縮、干燥，即得。
[0020]有益效果
[0021]本發明提供的荔枝核皂苷提取方法，采用多次萃取分離的方式去荔枝核皂苷粗提物進行分離，有效地從粗提物中獲得活性成分，并去除了雜質，產品收率和純度高于常規方法。
【具體實施方式】
[0022]實施例1
[0023]S1:將50kg荔枝核粉碎，加入8kg的氯仿和4kg水，再加入0.2kg的纖維素酶，混合均勻，在超聲功率600W、40°C的條件下，酶解60min，將酶解液過濾，濾液再在70°C條件下恒溫干燥18h，得到荔枝核粗提取物；
[0024]S2:將荔枝核粗提取物加入20kg水，lmol/L的NaOH溶液5kg，在超聲功率600W、40°C下，使荔枝核提取物在水中分散；再加入40kg石油醚進行萃取，分層后取石油醚萃取相，在60°C條件下，減壓干燥10h，得到提取物I ;
[0025]S3:在步驟S2所得提取物I中加入IOkg的水，0.5mol/L的磷酸溶液5kg，在超聲功率600W、4(TC下，使提取物分散；再加入20kg的氯仿進行萃取，分層后取氯仿萃取相，在60°C條件下，減壓干燥10h，得到提取物II ；
[0026]S4:在步驟S3所得的提取物II中加入IOkg的水，在超聲功率600W、40°C下，使提取物分散；再加入15kg的乙醚進行萃取，分層后取乙醚萃取相，在50°C條件下，減壓干燥8h，得到提取物III ;
[0027]S5:采用高速逆流色譜法，以按體積比為0.2:3:2.5:8的比例將正己烷-乙酸乙酯-丙酮-水配制成二相系統，攪拌后，靜置分層，下相作為固定相，上相作為流動相；再將步驟S4中所得到的提取物III用下相配成100mg/ml的樣品溶液，并以600W的超聲輔助溶解，注入高速逆流色譜，轉速為800r/min，流量為4.5mL/min，檢測波長為580nm，對時間為135~ISOmin內的流出液進行收集，再流出液進行減壓濃縮、干燥，即得。
[0028]上述的步驟SI中，荔枝核破碎之后的粒度大小控制在50~100目。
[0029]所述的石油醚的沸程是30~60°C的規格的。 [0030]高速逆流色譜分離提取采用Mk5QuilkPr印500高速逆流色譜儀(英國AECS公司)，配有聚四氟乙烯管(PTFE)分離柱(管直徑2.16mm，分離體積120ml)，SeriesII恒流泵(Scientific System公司),SF1D-1OAvp紫外可見檢測器(蘇州島津儀器公司),N2000色譜數據工作站(浙江大學智達信息工程有限公司)。
[0031]實施例2
[0032]S1:按重量份計，將80kg荔枝核粉碎，加入12kg的氯仿和5kg水，再加入0.2kg的纖維素酶，混合均勻，在超聲功率800W、45°C的條件下，酶解lOOmin，將酶解液過濾，濾液再在75°C條件下恒溫干燥24h，得到荔枝核粗提取物；
[0033]S2:按重量份計，將荔枝核粗提取物加入40kg水，lmol/L的NaOH溶液8kg，在超聲功率800W、45°C下,使蒸枝核提取物在水中分散；再加入50kg石油醚進行萃取,分層后取石油醚萃取相，在70°C條件下，減壓干燥12h，得到提取物I ;
[0034]S3:在步驟S2所得提取物I中加入20kg的水，0.5mol/L的磷酸溶液8kg，在超聲功率800W、45°C下，使提取物分散；再加入30kg的氯仿進行萃取，分層后取氯仿萃取相，在70°C條件下，減壓干燥12h，得到提取物II ；
[0035]S4:在步驟S3所得的提取物II中加入15kg的水，在超聲功率800W、45°C下，使提取物分散；再加入20kg的乙醚進行萃取，分層后取乙醚萃取相，在60°C條件下，減壓干燥10h，得到提取物III ；
[0036]S5:采用高速逆流色譜法，以按體積比為0.2:3:2.5:8的比例將正己烷-乙酸乙酯-丙酮-水配制成二相系統，攪拌后，靜置分層，下相作為固定相，上相作為流動相；再將步驟S4中所得到的提取物III用下相配成100mg/ml的樣品溶液，并以600~800W的超聲輔助溶解，注入高速逆流色譜，轉速為800r/min，流量為4.5mL/min，檢測波長為580nm，對時間為135~ISOmin內的流出液進行收集，再流出液進行減壓濃縮、干燥，即得。
[0037]上述的步驟SI中，荔枝核破碎之后的粒度大小控制在50~100目。
[0038]所述的石油醚的沸程是30~60°C的規格的。
[0039]高速逆流色譜分離提取采用Mk5QuilkPr印500高速逆流色譜儀(英國AECS公司)，配有聚四氟乙烯管(PTFE)分離柱(管直徑2.16mm，分離體積120ml)，SeriesII恒流泵(Scientific System公司),SF1D-1OAvp紫外可見檢測器(蘇州島津儀器公司),N2000色譜數據工作站(浙江大學智達信息工程有限公司)。
[0040]實施例3
[0041]S1:按重量份計,將60kg蒸枝核粉碎,加入IOkg的氯仿和4.5kg水,再加入0.2kg的纖維素酶，混合均勻，在超聲功率700W、42°C的條件下，酶解80min，將酶解液過濾，濾液再在72°C條件下恒溫干燥20h，得到荔枝核粗提取物；
[0042]S2:按重量份計，將荔枝核粗提取物加入30kg水，lmol/L的NaOH溶液7kg，在超聲功率700W、42°C下，使荔枝核提取物在水中分散；再加入45kg石油醚進行萃取，分層后取石油醚萃取相，在65°C條件下，減壓干燥llh，得到提取物I ;
[0043]S3:在步驟S2所得提取物I中加入15kg的水，0.5mol/L的磷酸溶液7kg，在超聲功率700W、42°C下，使提取物分散；再加入25kg的氯仿進行萃取，分層后取氯仿萃取相，在65°C條件下，減壓干燥llh，得到提取物II ；
[0044]S4:在步驟S3所 得的提取物II中加入12kg的水，在超聲功率700W、42°C下，使提取物分散；再加入18kg的乙醚進行萃取，分層后取乙醚萃取相，在55°C條件下，減壓干燥9h，得到提取物III ;
[0045]S5:采用高速逆流色譜法，以按體積比為0.2:3:2.5:8的比例將正己烷-乙酸乙酯-丙酮-水配制成二相系統，攪拌后，靜置分層，下相作為固定相，上相作為流動相；再將步驟S4中所得到的提取物III用下相配成100mg/ml的樣品溶液，并以600~800W的超聲輔助溶解，注入高速逆流色譜，轉速為800r/min，流量為4.5mL/min，檢測波長為580nm，對時間為135~ISOmin內的流出液進行收集，再流出液進行減壓濃縮、干燥，即得。
[0046]上述的步驟SI中，荔枝核破碎之后的粒度大小控制在50~100目。
[0047]所述的石油醚的沸程是30~60°C的規格的。
[0048]高速逆流色譜分離提取采用Mk5QuilkPr印500高速逆流色譜儀(英國AECS公司)，配有聚四氟乙烯管(PTFE)分離柱(管直徑2.16mm，分離體積120ml)，SeriesII恒流泵(Scientific System公司),SF1D-1OAvp紫外可見檢測器(蘇州島津儀器公司),N2000色譜數據工作站(浙江大學智達信息工程有限公司)。
[0049]實施例4
[0050]S1:按重量份計,將78kg蒸枝核粉碎,加入Ilkg的氯仿和4.3kg水,再加入0.2kg的纖維素酶，混合均勻，在超聲功率750W、44°C的條件下，酶解90min，將酶解液過濾，濾液再在74°C條件下恒溫干燥23h，得到荔枝核粗提取物；
[0051]S2:按重量份計，將荔枝核粗提取物加入35kg水，lmol/L的NaOH溶液6kg，在超聲功率650W、41°C下,使蒸枝核提取物在水中分散；再加入42kg石油醚進行萃取,分層后取石油醚萃取相，在68°C條件下，減壓干燥12h，得到提取物I ;
[0052]S3:在步驟S2所得提取物I中加入12kg的水，0.5mol/L的磷酸溶液6kg，在超聲功率700W、4rC下，使提取物分散；再加入23kg的氯仿進行萃取，分層后取氯仿萃取相，在69°C條件下，減壓干燥llh，得到提取物II ；
[0053]S4:在步驟S3所得的提取物II中加入14kg的水，在超聲功率720W、43°C下，使提取物分散；再加入16kg的乙醚進行萃取，分層后取乙醚萃取相，在57°C條件下，減壓干燥
8.5h，得到提取物III ；
[0054]S5:采用高速逆流色譜法，以按體積比為0.2:3:2.5:8的比例將正己烷-乙酸乙酯-丙酮-水配制成二相系統，攪拌后，靜置分層，下相作為固定相，上相作為流動相；再將步驟S4中所得到的提取物III用下相配成100mg/ml的樣品溶液，并以600~800W的超聲輔助溶解，注入高速逆流色譜，轉速為800r/min，流量為4.5mL/min，檢測波長為580nm，對時間為135~ISOmin內的流出液進行收集，再流出液進行減壓濃縮、干燥，即得。
[0055]上述的步驟SI中，荔枝核破碎之后的粒度大小控制在50~100目。
[0056]所述的石油醚的沸程是30~60°C的規格的。
[0057]高速逆流色譜分離提取采用Mk5QuilkPr印500高速逆流色譜儀(英國AECS公司)，配有聚四氟乙烯管(PTFE)分離柱(管直徑2.16mm，分離體積120ml)，SeriesII恒流泵(Scientific System公司),SF1D-1OAvp紫外可見檢測器(蘇州島津儀器公司),N2000色譜數據工作站(浙江大學智達信息工程有限公司)。
[0058]對照例1
[0059]對照例1與實施例1的區別在于省略了使用石油醚對提取物進行萃取的這個步驟。具體是指:
[0060]S1:將50kg荔枝核粉碎，加入8kg的氯仿和4kg水，再加入0.2kg的纖維素酶，混合均勻，在超聲功率600W、40°C的條件下，酶解60min，將酶解液過濾，濾液再在70°C條件下恒溫干燥18h，得到荔枝核粗提取物；
[0061]S2:在步驟SI所得荔枝核粗提取物中加入IOkg的水，0.5mol/L的磷酸溶液5kg，在超聲功率600W、4(TC下，使提取物分散；再加入20kg的氯仿進行萃取，分層后取氯仿萃取相，在60°C條件下，減壓干燥10h，得到提取物I ;
[0062]S3:在步驟S2所得的提取物I中加入IOkg的水，在超聲功率600W、40°C下，使提取物分散；再加入15kg的乙醚進行萃取，分層后取乙醚萃取相，在50°C條件下，減壓干燥8h，得到提取物III ;
[0063]S4:采用高速逆流色譜法，以按體積比為0.2:3:2.5:8的比例將正己烷-乙酸乙酯-丙酮-水配制成二相系統，攪拌后，靜置分層，下相作為固定相，上相作為流動相；再將步驟S3中所得到的提取物II用下相配成100mg/ml的樣品溶液，并以600W的超聲輔助溶解，注入高速逆流色譜，轉速為800r/min，流量為4.5mL/min，檢測波長為580nm，對時間為135~ISOmin內的流出液進行收集，再流出液進行減壓濃縮、干燥，即得。
[0064]對照例2
[0065]對照例I與實施例1的區別在于省略了使用石油醚和氯仿對提取物進行萃取的這2個步驟。具體是指:
[0066]S1:將50kg荔枝核粉碎，加入8kg的氯仿和4kg水，再加入0.2kg的纖維素酶，混合均勻，在超聲功率600W、40°C的條件下，酶解60min，將酶解液過濾，濾液再在70°C條件下恒溫干燥18h，得到荔枝核粗提取物；[0067]S2:在步驟SI所得的荔枝核粗提取物中加入IOkg的水，在超聲功率600W、40°C下，使提取物分散；再加入15kg的乙醚進行萃取，分層后取乙醚萃取相，在50°C條件下，減壓干燥8h，得到提取物I ;
[0068]S3:采用高速逆流色譜法，以按體積比為0.2:3:2.5:8的比例將正己烷-乙酸乙酯-丙酮-水配制成二相系統，攪拌后，靜置分層，下相作為固定相，上相作為流動相；再將步驟S2中所得到的提取物I用下相配成100mg/ml的樣品溶液，并以600W的超聲輔助溶解，注入高速逆流色譜，轉速為800r/min，流量為4.5mL/min，檢測波長為580nm，對時間為135~ISOmin內的流出液進行收集，再流出液進行減壓濃縮、干燥，即得。
[0069]對照例3
[0070]對照例I與實施例1的區別在于省略了使用石油醚、氯仿和乙醚對提取物進行萃取的這3個步驟。具體是指:
[0071]S1:將50kg荔枝核粉碎，加入8kg的氯仿和4kg水，再加入0.2kg的纖維素酶，混合均勻，在超聲功率600W、40°C的條件下，酶解60min，將酶解液過濾，濾液再在70°C條件下恒溫干燥18h，得到荔枝核粗提取物；
[0072]S2:采用高速逆流色譜法，以按體積比為0.2:3:2.5:8的比例將正己烷-乙酸乙酯-丙酮-水配制成二相系統，攪拌后，靜置分層，下相作為固定相，上相作為流動相；再將步驟SI中所得到的荔枝核粗提取物用下相配成100mg/ml的樣品溶液，并以600W的超聲輔助溶解，注入高速逆流色譜，轉速為800r/min，流量為4.5mL/min，檢測波長為580nm，對時間為135~ISOmin內的流出液進行收集，再流出液進行減壓濃縮、干燥，即得。
[0073]性能試驗
[0074]產品的純度數據分析方法可以采用以下文獻中公開的方法進行:陳衍斌、武可泗、陳建宗，《荔枝核皂苷含量測定方法》陜西中醫學院學報，2007年5月第30卷第3期。以專利CN102048885B中公開的荔枝核皂苷提取方法作為對照例4，以荔枝核50kg照同法制備。
[0075]試驗結果見表1。
[0076]表1實施例1~實施例4以及對照例的性能測試數據
[0077]
【權利要求】
1.一種荔枝核皂苷的提取工藝，其特征在于，包括如下步驟: 51:按重量份計，將50~80份荔枝核粉碎，加入8~12份的氯仿和4~5份水，再加A0.2份的纖維素酶，混合均勻，在超聲功率600~800W、40~45°C的條件下，酶解60~lOOmin，將酶解液過濾，濾液再在70~75°C條件下恒溫干燥18~24h，得到荔枝核粗提取物； 52:按重量份計，將荔枝核粗提取物加入20~40份水，ImoI/L的NaOH溶液5~8份，在超聲功率600~800W、40~45°C下，使荔枝核提取物在水中分散；再加入40~50份石油醚進行萃取，分層后取石油醚萃取相，在60~70°C條件下，減壓干燥10~12h，得到提取物I ; 53:在步驟S2所得提取物I中加入10~20份的水，0.5 mo I/L的磷酸溶液5~8份，在超聲功率600~800W、40~45°C下，使提取物分散；再加入20~30份的氯仿進行萃取，分層后取氯仿萃取相，在60~70°C條件下，減壓干燥10~12h，得到提取物II ； 54:在步驟S3所得的提取物II中加入10~15份的水，在超聲功率600~800W、40~45°C下，使提取物分散；再加入15~20份的乙醚進行萃取，分層后取乙醚萃取相，在50~60°C條件下，減壓干燥8~IOh，得到提取物III ; 55:采用高速逆流色譜法，以按體積比為0.2:3:2.5:8的比例將正己烷-乙酸乙酯-丙酮-水配制成二相系統，攪拌后，靜置分層，下相作為固定相，上相作為流動相；再將步驟S4中所得到的提取物III用下相配成100 mg/ml的樣品溶液，并以600~800W的超聲輔助溶解，注入高速逆流色譜，轉速為800r/min，流量為4.5mL/min，檢測波長為580 nm,對時間為135~ISOmin內的流出液進行收集，再流出液進行減壓濃縮、干燥，即得。
2.根據權利要求1所述的荔枝核皂苷的提取工藝，其特征在于:所述的步驟SI中，荔枝核破碎之后的粒度大小控制在50~100目。
3.根據權利要求2所述的荔枝核皂苷的提取工藝，其特征在于:所述的石油醚的沸程是選用30~60°C的規格的。
4.根據權利要求3所述的荔枝核皂苷的提取工藝，其特征在于，工藝參數是: `51:按重量份計，將78重量份荔枝核粉碎，加入11重量份的氯仿和4.3重量份水，再加A0.2重量份的纖維素酶，混合均勻，在超聲功率750W、44°C的條件下，酶解90min，將酶解液過濾，濾液再在74°C條件下恒溫干燥23h，得到荔枝核粗提取物； `52:按重量份計，將荔枝核粗提取物加入35重量份水，lmol/L的NaOH溶液6重量份，在超聲功率650W、41°C下,使蒸枝核提取物在水中分散；再加入42重量份石油醚進行萃取，分層后取石油醚萃取相，在68°C條件下，減壓干燥12h，得到提取物I ; ` 53:在步驟S2所得提取物I中加入12重量份的水，0.5 mo I/L的磷酸溶液6重量份，在超聲功率700W、4rC下，使提取物分散；再加入23重量份的氯仿進行萃取，分層后取氯仿萃取相，在69°C條件下，減壓干燥llh，得到提取物II ； ` 54:在步驟S3所得的提取物II中加入14重量份的水，在超聲功率720W、43°C下，使提取物分散；再加入16重量份的乙醚進行萃取，分層后取乙醚萃取相，在57°C條件下，減壓干燥8.5h，得到提取物III ； `55:采用高速逆流色譜法，以按體積比為0.2:3:2.5:8的比例將正己烷-乙酸乙酯-丙酮-水配制成二相系統，攪拌后，靜置分層，下相作為固定相，上相作為流動相；再將步驟S4中所得到的提取物III用下相配成100 mg/ml的樣品溶液，并以600~800W的超聲輔助溶解，注入高速逆流色譜，轉速為800r/min，流量為4.5mL/min，檢測波長為580 nm,對時間為135~ISOmin內的流出液進 行收集，再流出液進行減壓濃縮、干燥，即得。
【文檔編號】A61K131/00GK103638177SQ201310556612
【公開日】2014年3月19日 申請日期:2013年11月11日 優先權日:2013年6月30日
【發明者】胡云福 申請人:金瑪瑙香水（明光）有限公司