一種板藍根注射用原位凝膠及其制備方法【專利摘要】本發明屬動物用藥物制劑領域，涉及一種板藍根注射用原位凝膠制劑及其制備方法，其包含以下組分：板藍根提取液30.0-75.0重量份、泊洛沙姆40714.5-31.5重量份、泊洛沙姆1880.7-9.5重量份、高分子阻滯劑0.02-10.0重量份、增溶穩定劑0.01-10.0重量份、pH調節劑適量、防腐劑0.01-3.0重量份，所得制劑每毫升相當于原生藥干燥品1.5-5.0克。本發明制劑室溫為自由流動的液體，肌肉或皮下注射后形成半固體凝膠，緩慢釋藥，實現一個療程僅給藥一次，且制備簡單、給藥方便、療效確切。本發明制劑有抗病毒、抗菌、抗內毒素及免疫調節等作用，適用于防治豬、牛、羊、犬、貓等動物疾病。【專利說明】一種板藍根注射用原位凝膠及其制備方法【
技術領域：
】[0001]本發明屬動物用藥物制劑領域，涉及一種具有適宜相變溫度的板藍根注射用原位凝膠及其制備方法。技術背景[0002]注射型原位凝膠(injectableinsitugel)是將藥物和聚合物分散于適宜的溶劑中，局部肌肉或皮下注射，在給藥部位生理條件下，聚合物凝固形成半固體或固體藥物η凝膠貯庫，并通過聚合物的不斷降解，持續釋放藥物，達到緩釋長效作用。[0003]注射用溫敏型原位凝膠使用前(環境溫度下)為低黏度液體，在注射部位生理溫度下發生膠凝，形成柔軟、潤滑、透明的固體或半固體凝膠，多以泊洛沙姆為基質材料。泊洛沙姆為非離子型表面活性劑，是聚氧乙烯(PEO)與聚氧丙烯(PPO)組成的ABA型嵌段共聚物，具有毒性低，刺激性小，生物相容性好，流變學特征良好的優點。其中泊洛沙姆407(Ρ407)水溶液具有良好的反向熱膠凝性質，即低溫時為液體，升高一定溫度時成為凝膠，且膠凝溫度隨體系中Ρ407濃度增加而降低，體系中加入泊洛沙姆188(Ρ188)，可提高溶液的膠凝溫度，調整Ρ407和Ρ188的比例和濃度，能獲得理想的膠凝溫度。研究顯示，該體系配合使用適當的高分子阻滯劑，可以調整體系溶液的黏度、機械強度和溶蝕速度，較有效地解決藥物突釋問題。[0004]注射用溫敏型原位凝膠既克服了普通乳劑、脂質體、微球等制備復雜、批次間差異較大、工業化較困難等不足，也避免了傳統植入劑開刀植入的痛苦。注射用溫敏型原位凝膠制備過程簡單，給藥量易于控制，生理相容性好，可延長釋藥周期、減少給藥次數，提高了動物應用的順應性，提高了經濟效益。[0005]板藍根系常用傳統中藥，藥材多以菘藍干燥根入藥，清熱解毒、涼血利咽。現代藥理學研究表明，其具有較強的抗病毒、抗菌、抗內毒素和免疫調節作用。[0006]板藍根對流感病毒、柯薩奇病毒、疹病毒、乙型腦炎病毒等有顯著抑制作用，是公認抗病毒中藥。其抗病毒作用體現在，能有效阻礙流感病毒核蛋白基因表達，抑制乙肝病毒核心抗原，滅活單純皰疹病毒-1(HSV-1)等，保護細胞免受病毒吸附，而抑制病毒感染。板藍根抗菌作用體現在，對金黃色葡萄球菌、肺炎雙球菌、溶血性鏈球菌、腦膜炎球菌、大腸埃希菌、痢疾桿菌等數十種細菌有顯著抗菌活性，能封閉宿主細胞上的細菌受體而阻止細菌侵襲。板藍根免疫調節作用體現在，能顯著增加動物免疫器官指數、白細胞和淋巴細胞總數，促進抗體產生、調節細胞因子釋放，增強非特異性免疫和細胞免疫功能，這也提高了動物抗病毒、細菌感染能力。板藍根既能直接破壞內毒素結構，也能阻斷內毒素引起的信號傳導通路，抑制機體炎性因子的過度釋放，抑制膜結構伸展刺突蛋白和絲裂原活化蛋白激酶的表達而削弱內毒素毒性。[0007]板藍根在畜禽疾病防治中廣泛應用。在豬病臨床，板藍根注射液常用藥于防治豬流感、豬水泡性口炎，豬病毒性水瀉等疾病，有報道其對豬黃痢治愈率達95%以上。板藍根注射液用于防治犢牛腹瀉、牛腮腺炎、牛流行熱及羔羊痢疾、羊痘等，效果明顯。寵物臨床，板藍根注射液常配合西藥治療犬瘟熱、犬貓流行性感冒等。此外也用于治療水貂阿留申病等。家禽疾病防治中，板藍根相關制劑應用較多，如復方板藍根治療雞傳染性喉氣管炎、傳染性法氏囊病，防治小鵝瘟，與病毒靈聯用于鴨病毒性肝炎、花肝病等，治療禽敗血霉形體感染、巴氏桿菌等細菌感染也有良效。[0008]目前，板藍根已批準的獸用產品劑型及規格有:①板藍根注射液，規格:10mL相當于原生藥5g；10mL相當于原生藥IOg；20mL相當于原生藥20g。②板藍根片，規格:0.2g；0.25g；0.3g；0.5g。此外還有板藍根末、板藍根當歸散、七味板藍根散、銀翹板藍根散及板藍根大黃散等。[0009]板藍根已報道的劑型有:板藍根沖劑、含片、顆粒劑、糖漿劑、咀嚼片、軟膠囊劑、滴丸、凍干粉針劑及泡騰片等，未見板藍根注射用原位凝膠劑型報道。[0010]板藍根已公開的相關專利有板藍根VC片、無糖型板藍根顆粒、發酵板藍根飼料添加劑、復方板藍根噴霧劑、板藍根滴丸、板藍根注射液、水溶性板藍根膨化劑、復方板藍根膨化劑、畜禽用板青顆粒、治療仔豬副傷寒的復方板藍根補液、板藍根提取物口腔速崩片、板藍根口服液等，未見板藍根注射用原位凝膠的報道及公開專利。[0011]在豬、羊、牛、犬、貓等疾病防治的一個療程中，板藍根注射液需重復多次注射給藥，易造成血藥濃度出現明顯的“波峰波谷”，不利于抗病毒、抗菌及免疫調節等作用發揮，且頻繁注射捉抓動物費時費力又易造成動物應激反而加重病情。當板藍根制成注射用原位凝膠，一次注射給藥，即可較長時間維持有效且相對穩定的血藥濃度，增強疾病的防治效果。單次用藥，降低動物應激等不利因素，減少動物保定次數，節約防治成本，提高了經濟效.【
發明內容】[0012]本發明的目的是針對板藍根已有獸用劑型給藥的不足，提供一種板藍根注射用原位凝膠。[0013]本發明的另一目的是提供該板藍根注射用原位凝膠的制備方法。[0014]本發明的目的可通過如下技術方案實現:[0015]板藍根注射用原位凝膠包含如下組分:板藍根提取液30.0-75.0重量份、泊洛沙姆40714.5-31.5重量份、泊洛沙姆1880.7-9.5重量份、高分子阻滯劑0.02-10.0重量份、增溶穩定劑0.01-10.0重量份、pH調節劑適量、防腐劑0.01-3.0重量份，所得制劑每毫升相當于原生藥干燥品1.5-5.0克。[0016]所述的凝膠基質選自泊洛沙姆108、124、188、237、338、407的任意一種或多種；優選泊洛沙姆40714.5-31.5重量份，泊洛沙姆1880.7-9.5重量份。[0017]所述的高分子阻滯劑選自聚乙烯醇、聚維酮、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、羥乙基纖維素、羥丙基纖維素、羧甲基纖維素鈉、卡波姆、透明質酸、黃原膠、殼聚糖、羧甲基殼聚糖、海藻酸鈉、磷脂等的任意一種或多種；優選聚維酮1.0-7.5重量份、或羧甲基纖維素鈉0.07-1.0重量份。[0018]所述的增溶穩定劑選自吐溫-20、吐溫-60、吐溫-80、丙二醇、正丁醇、異丙醇、異丁醇、聚乙二醇、甘油等的任意一種或多種；優選吐溫-800.1-2.0重量份，丙二醇2.0-10.0重量份。[0019]所述的pH調節劑選自枸櫞酸及其鈉鹽、酒石酸及其鈉鹽、碳酸鈉、碳酸氫鈉、磷酸氫二鉀及磷酸二氫鉀、磷酸氫二鈉及磷酸二氫鈉、氫氧化鈉、單乙醇胺等的任意一種或多種；優選氫氧化鈉適量。[0020]所述的防腐劑選自羥苯酯類、三氯叔丁醇、苯甲醇、醋酸洗必泰、苯扎溴銨、山梨酸鉀、硫柳汞等的任意一種或多種；優選苯甲醇0.5-2.0重量份。[0021]所述的板藍根注射用原位凝膠的制備方法包含如下步驟:(a)常規水提醇沉法制備板藍根提取液；(b)將選用的增溶穩定劑及防腐劑加入上述板藍根提取液中，用注射用水稀釋至適當濃度；(c)將處方量的凝膠基質和選用的高分子阻滯劑撒在上述溶液上，4°C左右冷藏24h，得到澄清、無團塊、分散均勻的溶液，氫氧化鈉調節pH為6.0-6.5,0.22μπι微孔濾膜濾過；(d)將(C)所得溶液用注射用水定容，攪拌均勻，[0022]即得。[0023]本發明的優點在于:[0024]本發明利用泊洛沙姆水溶液的溫度敏感性質及不同型號泊洛沙姆組合，制備了具有適宜相變溫度的板藍根注射用原位凝膠，使其在室溫條件下以液體狀態存在，肌注或皮下注射給藥時，在注射部位形成凝膠。所制的板藍根注射用原位凝膠與常規板藍根注射液相比釋藥緩慢，血藥濃度平穩，持效時間大大延長；所用高分子材料生理相容性好，刺激性低。本發明板藍根注射用原位凝膠制備工藝簡單，給藥方便，減少給藥次數，能更好發揮板藍根的功效。【專利附圖】【附圖說明】[0025]板藍根注射用原位凝膠體外釋放度曲線【具體實施方式】[0026]實施實例1:[0027]板藍根注射用原位凝膠(每ImL相當于原生藥干燥品1.5g)[0028]處方[0029]板藍根(以原生藥干燥品計)1500.0gP407210.0gPl8829.0g羧甲基纖維素鈉1.0g氫氧化鈉適量苯甲醇l0.0g吐溫-805.0g丙二醇60.0g注射用水加至1000mL[0030]制備方法:(a)取處方量板藍根原生藥(以干燥品計)，常規水提醇沉法制備板藍根提取液；(b)將吐溫-80、丙二醇和苯甲醇加入到板藍根提取液中，之后加注射用水稀釋至適當濃度；(c)再將處方量的凝膠基質和羧甲基纖維素鈉撒在上述溶液上，4°C左右冷藏過夜，得到澄清、無團塊、分散均勻的溶液，氫氧化鈉調節PH為6.0-6.5,0.22μm微孔濾膜濾過；(d)將(C)用注射用水定容，攪拌均勻，即得。[0031]將所制備的原位凝膠進行體外性能評價，包括膠凝溫度、膠凝時間、熱可逆性、釋放度、黏度、PH值的測定等。各項目測定方法如下，其測定結果見表1，體外釋放結果見附圖。[0032]凝膠溫度測定(采用試管倒轉法)取儲存于冰箱中的凝膠溶液3~4mL至試管，將溫度計插入凝膠溶液中。將試管置于水浴中(水浴液面高出試管內容凝膠溶液3cm)，緩慢升溫，升溫速率約為每Imin~2min升高I°C。將試管傾斜90°，觀察內容物不流動時的溫度即定義為膠凝溫度。每個樣品測定3次，結果取其平均值。[0033]膠凝時間測定原位凝膠溶液25°C放置0.5h，置于已預熱至37°C的試管中并保溫，記錄相變時間。[0034]熱可逆性測定將凝膠加熱至特定溫度(30，35，40，45，50，55，60，70°C)，然后緩慢冷卻至室溫，即算作一次加熱循環，檢驗直至凝膠不再具備溫敏性或者成分發生改變，若重復10次仍具有溫敏性，記做循環次數>10。[0035]釋放度測定精密吸取IOmL原位凝膠制劑，置于預先已稱重的平底具塞刻度試管中，再行稱重。將該試管置于37.3±0.2°C的恒溫水浴振蕩器中平衡lOmin，使聚合物溶液完全形成凝膠。小心加入經預熱的37°C5mL緩沖液(pH7.4，含SDS0.5%,作為釋放介質)中，恒溫水浴振蕩(95次/min)，分別在15、40、60min，1.33、2、3、5、8、12、24、48、60、72、84、96、104、120h立即傾出全部釋放介質，將容器內外表面用濾紙吸干，迅速稱量并紀錄，然后重新放入恒溫水浴振蕩器中平衡lOmin，再補充釋放介質5mL。如此反復操作，直至試驗結束。[0036]黏度測定使用旋轉式黏度計測定室溫(25°C)下凝膠的黏度。[0037]pH值測定用酸度計測定原位凝膠溶液室溫下的pH值。[0038]實施實例2:[0039]板藍根注射用原位凝膠(每ImL相當于原生藥干燥品2.5g)[0040]處方[0041]【權利要求】1.制備一種具有適宜相變溫度的板藍根注射用原位凝膠，其特征在于包含如下組分:板藍根提取液30.0-75.0重量份、泊洛沙姆40714.5-31.5重量份、泊洛沙姆1880.7-9.5重量份、高分子阻滯劑0.02-10.0重量份、增溶穩定劑0.01-10.0重量份、pH調節劑適量、防腐劑0.01-3.0重量份，所得制劑每毫升相當于原生藥干燥品1.5-5.0克。該凝膠具有適宜的相轉化溫度，能夠在室溫條件下以液體狀態存在，給藥后在機體內形成固體或半固體凝膠。2.根據權利要求1所述的一種具有適宜相變溫度的板藍根注射用原位凝膠，其特征在于所述的制劑中溫敏凝膠基質選自泊洛沙姆108、124、188、237、338、407的任意一種或多種；優選泊洛沙姆40714.5-31.5重量份，泊洛沙姆1880.7-9.5重量份，調節二者用量可控制該制劑的相變溫度介于32°C-37°C之間。3.根據權利要求1所述的一種具有適宜相變溫度的板藍根注射用原位凝膠，其特征在于所述的制劑中高分子阻滯劑選自聚乙烯醇、聚維酮、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、羥乙基纖維素、羥丙基纖維素、羧甲基纖維素鈉、卡波姆、透明質酸、黃原膠、殼聚糖、羧甲基殼聚糖、海藻酸鈉、磷脂等的任意一種或多種；優選聚維酮1.0-7.5重量份、或羧甲基纖維素鈉0.07-1.0重量份。4.根據權利要求1所述的一種具有適宜相變溫度的板藍根注射用原位凝膠，其特征在于所述的制劑中增溶穩定劑選自甘油、吐溫-20、吐溫-60、吐溫-80、丙二醇、正丁醇、異丙醇、異丁醇、聚乙二醇等的任意一種或多種；優選吐溫-800.1-2.0重量份，丙二醇2.0-10.0重量份。5.根據權利要求1所述的一種具有適宜相變溫度的板藍根注射用原位凝膠，其特征在于所述的制劑中PH調節劑選自枸櫞酸及其鈉鹽、酒石酸及其鈉鹽、碳酸鈉、碳酸氫鈉、磷酸氫二鉀及磷酸二氫鉀、磷酸氫二鈉及磷酸二氫鈉、氫氧化鈉、單乙醇胺等的任意一種或多種；優選氫氧化鈉適量。`6.根據權利要求1所述的一種具有適宜相變溫度的板藍根注射用原位凝膠，其特征在于所述的制劑中防腐劑選自羥苯酯類、三氯叔丁醇、苯甲醇、醋酸洗必泰、苯扎溴銨、山梨酸鉀、硫柳汞等的任意一種或多種；優選苯甲醇0.5-2.0重量份。7.根據權利要求1所述的一種具有適宜相變溫度的板藍根注射用原位凝膠的制備方法，其特征在于包含如下步驟:(a)常規水提醇沉法制備板藍根提取液；(b)將選用的增溶穩定劑及防腐劑加入上述板藍根提取液中，之后加注射用水稀釋至適當濃度；(C)再將處方量的凝膠基質和選用的高分子阻滯劑撒在上述板藍根溶液上，4°C左右冷藏24h，得到澄清、無團塊、分散均勻的溶液，氫氧化鈉調節PH為6.0-6.5，0.22μm微孔濾膜濾過；(d)將(c)所得溶液用注射用水定容，攪拌均勻，即得。【文檔編號】A61K36/315GK103520227SQ201310463955【公開日】2014年1月22日申請日期:2013年10月9日優先權日:2013年10月9日【發明者】余祖功,郭凡溪,耿智霞,田靜申請人:南京農業大學