土茯苓提取物在制備降脂減肥藥物及保健食品中的應用的制作方法
【專利摘要】本發明屬于中藥領域，涉及土茯苓提取物在制備降脂減肥藥物及保健食品中的應用。該土茯苓提取物包含5-O-咖啡酰基莽草酸、落新婦苷、異落新婦苷、新落新婦苷、新異落新婦苷、花旗松素、黃杞苷、異黃杞苷、白藜蘆醇。動物實驗表明土茯苓提取物可顯著減少小鼠腹腔脂肪重量，減輕小鼠體重，同時降低小鼠血清中甘油三脂和總膽固醇濃度，效果強于落新婦苷單一成分。本發明藥物取自天然中藥，組分間具有協同增效降脂減肥效果，減肥效果好，拓展了土茯苓應用的范圍。
【專利說明】土茯苓提取物在制備降脂減肥藥物及保健食品中的應用
【技術領域】
[0001]本發明屬于藥物領域，尤其涉及一種中藥提取物在降脂減肥藥物及保健食品中的應用。
【背景技術】
[0002]隨著人民生活水平的提高，因能量攝入過多(高脂、高糖膳食)而引起的肥胖、高血脂等問題日益嚴重。肥胖不僅影響體形，更重要的是它與糖尿病，高血壓等疾病的發病正相關。高血脂是造成動脈粥樣硬化的主要因素，進而可能引發血栓及心肌梗塞等多種心腦血管疾病。調查數據表明中國有11%的兒童及30%的成人超重，42%的兒童至少存在一種糖脂代謝指標異常，中國面臨心血管疾病發病率劇增風險。因此，研究開發出安全有效的降脂減肥的藥物或保健食品具有極為重要的社會意義。
[0003]土獲茶是百合科菝葜屬植物光葉菝葜(Smilax glabra Roxb.)的根莖,是中國藥典收錄的常用中藥，也是衛生部允許在保健食品中使用的中草藥之一。化學成分研究表明土茯苓主要含有落新婦苷、黃杞苷等黃酮物質；另外，它也含有白藜蘆醇、莽草酸、5-0-咖啡酰莽草酸等芪類及酚酸類物質。但目前，尚未有土茯苓提取物降脂減肥方面的研究報道。我們研究發現土茯苓提取物可以顯著減少小鼠腹腔脂肪重量，減輕小鼠體重，同時降低小鼠血清中甘油三脂和總膽固醇濃度，具有很好的降脂減肥作用，在降血脂及減肥藥物和保健食品方面具有重要的應用價值。
【發明內容】
[0004]本發明目的在于提供土茯苓提取物在制備降脂減肥藥物及保健食品中的應用。
[0005]具體包括如下技術方案:
土茯苓提取物在制備降脂減肥藥物及保健食品中的應用。
[0006]所述土茯苓提取物中包含5-0-咖啡酰基莽草酸、落新婦苷、異落新婦苷、新落新婦苷、新異落新婦苷、花旗松素、黃杞苷、異黃杞苷、白藜蘆醇；
所述的土茯苓提取物提取步驟包括:土茯苓藥材粉碎，乙醇超聲提取，減壓回收乙醇，離心后獲得上清液；往上清液中加入β -環糊精-淀粉樹脂,震蕩吸附后過濾,樹脂用乙醇洗脫兩次，收集洗脫液，回收乙醇后4(T50°C真空干燥，獲得土茯苓提取物。
[0007]提取步驟優選為:土茯苓藥材粉碎過40目篩，用10倍體積60%乙醇超聲提取，60°c減壓回收提取溶劑中乙醇，離心后獲得上清液；往上清液中加入與土茯苓藥材等重量的40-60目β -環糊精-淀粉樹脂，震蕩吸附30 min后過濾，樹脂用60%乙醇洗脫兩次，收集洗脫液，回收乙醇后4(T50°C真空干燥，獲得土茯苓提取物。
[0008]該降脂減肥藥物還包括藥學上可接受的輔料，如淀粉、環糊精等。可依照劑型需要添加常用輔料。
[0009]該降脂減肥保健品可以依照保健品的制備需要加入常用的輔料，做成各種劑型。這是常規技術，不再贅述。[0010]本發明的有益效果是:(1)原料采用天然中藥原料，更為安全。(2 )本土茯苓提取物制備的藥物減肥效果好，拓展了土茯苓的用途。(3)落新婦苷經動物實驗表明具有降脂減肥作用，同時結果也表明土茯苓提取物降脂減肥作用更強，表明落新婦苷與土茯苓提取物中的其他成分在降脂減肥上具有協同增效作用，具有意想不到的效果。
[0011]為更好的說明本發明的實質，下面用土茯苓提取物降脂減肥的實驗及結果來進一步說明。
[0012]土茯苓提取物:土茯苓粉碎過40目篩，用10倍體積60%乙醇超聲提取，60 °C減壓回收提取溶劑中乙醇，離心后獲得上清液。往上清液中加入與土茯苓藥材等重量的40-60目環糊精-淀粉樹脂，震蕩吸附30 min后過濾，樹脂用60%乙醇洗脫兩次，收集洗脫液，回收乙醇后40-50°C真空干燥，獲得土茯苓提取物。
[0013]圖1為該土茯苓提取物的高效液相色譜圖(HPLC)。所用HPLC系統為Waters 600，配備雙波長檢測器及在線脫氣系統。色譜柱為Agilent Zorbax SB C18柱(250 mmX4.6mm 1.d., 5 μ m)。流動相為乙腈(A)及0.1%醋酸水溶液(B)。線性梯度程序為0 - 15min，16 - 21% A; 15-40 min, 21 -40% A。流速為 1 mL/min。進樣量為 10 μ L，檢測波長為291 nm。圖中峰I為5_0_咖啡酰基莽草酸，峰3為落新婦苷，峰2、5、6為落新婦苷異構體(異落新婦苷、新落新婦苷、新異落新婦苷)，峰4為花旗松素，峰7、8為黃杞苷和異黃杞苷，峰9為白藜蘆醇，各化合物分子結構見圖2。峰2，3，4，5，6，7，8為黃酮化合物，將它們峰面積之和代入落新婦苷標準曲線，計算得到提取物中總黃酮含量(以落新婦苷計)。分析結果表明提取物中落新婦苷所占比例很大，約為50%。
[0014]其降脂減肥效果實驗如下:
落新婦苷:純度>98%，購自上海同田生物技術有限公司。
[0015]取土茯苓提取物1份，加入環糊精兩份，混勻后提高其水溶性。取落新婦苷I份，加入環糊精兩份，混勻。
[0016]70只4周齡雌性ICR小鼠隨機分為7組(I、II、III、IV、V、VI和VII組)，每組
10只。其中，I組為基礎對照組，喂食基礎飼料；II組為高脂對照組，喂食高脂飼料；III、IV和V喂食高脂飼料，并且在飲用水中添加土茯苓提取物，以其中總黃酮計，總黃酮濃度分別為I mg/ml (III組)、2 mg/ml (IV組)和4 mg/ml (V組)；VI和VII組喂食高脂飼料，并且在飲用水中添加落新婦苷，濃度分別為I mg/ml (VI組)、2 mg/ml (VII組)。所述高脂飼料組成為85%基礎飼料+10%豬油+5%蔗糖。所有小鼠自由采食和飲水，飼養8周，每周稱體重。實驗結束后,從心臟采血,分離血清,分析小鼠血清中甘油三酯和膽固醇濃度；解剖動物采集小鼠腹腔內脂肪組織、脾、腎、肝臟等組織并稱重。
[0017]表一為不同處理組小鼠體重與飼養時間關系。由表一知，高脂對照組小鼠體重增加顯著快于基礎飼料對照組，體重差異有統計學意義(P〈0.05)。與高脂對照組相比，在飲用水中添加土茯苓提取物可顯著降低小鼠體重增加，體重差異有統計學意義(p〈0.05)，并且濃度越高，效果越顯著。與高脂對照組相比，添加落新婦苷也可降低小鼠體重，但體重差異無統計學意義(P>0.05)。表二為不同處理組小鼠在第三周和第七周的平均攝食量和飲水量。由表二可知，與高脂對照組相比，在飲用水中添加土茯苓提取物或落新婦苷不會減少小鼠的攝食量和飲水量，說明各組小鼠體重增加不同不是由攝食量引起的。
[0018]小鼠解剖后，取腹腔脂肪、肝臟、腎臟及脾臟稱重，統計結果見表三。實驗結果表明，與基礎飼料組相比，高脂對照組小鼠腹腔脂肪重量顯著增加(P〈0.05)。與高脂對照組相t匕，在飲用水中添加土茯苓提取物可顯著減少小鼠腹腔脂肪重量(P〈0.05)。與高脂對照組相比，添加落新婦苷也可減少小鼠腹腔脂肪重量，但差異無統計學意義(P>0.05)。肝臟、腎臟及脾臟稱重結果表明各組之間無顯著差異，說明土茯苓提取物和落新婦苷均對小鼠器臟無影響，不影響小鼠健康。
[0019]血清中甘油三脂和總膽固醇指標測定結果表明(表四)，與基礎飼料組相比，高脂對照組小鼠血清中甘油三脂和總膽固醇濃度顯著升高(P〈0.05)。與高脂對照組相比，在飲用水中添加土茯苓提取物可顯著降低小鼠血清中甘油三脂和總膽固醇濃度(P〈0.05)。與高脂對照組相比，添加落新婦苷也可降低小鼠血清中甘油三脂和總膽固醇濃度，但差異無統計學意義(P>0.05)。
[0020]以上實驗結果表明，土茯苓提取物可以顯著減少小鼠腹腔脂肪重量，減輕小鼠體重，同時降低小鼠血清中甘油三脂和總膽固醇濃度，差異具有統計學意義(P〈0.05)。而落新婦苷單一組分，雖然也可以減輕小鼠體重，降低小鼠血清中甘油三脂和總膽固醇濃度，但差異不顯著(p>0.05)。
[0021]HPLC分析結果表明土茯苓提取物中，除主要含有落新婦苷外，還含有落新婦苷異構體、花旗松素、黃杞苷和異黃杞苷等黃酮成分，另外也含有5-0-咖啡酰基莽草酸、白藜蘆醇等酚酸和芪類成分。這些成分中落新婦苷經動物實驗表明具有降脂減肥作用，同時結果也表明土茯苓提取物降脂減肥作用更強，表明落新婦苷與土茯苓提取物中的其他成分在降脂減肥上具有協同增效作用，賦予土茯苓提取物更好的降脂減肥作用，效果強于其中主要成分落新婦苷單一組分。土茯苓是國家衛生部允許在保健食品中使用的中草藥之一，因此土茯苓提取物在降脂減肥保健品及藥品方面具有廣闊的應用前景。
[0022]表一不同飼養時間小鼠體重表(平均值土SE，n=10)
【權利要求】
1.土茯苓提取物在制備降脂減肥藥物及保健食品中的應用。
2.如權利要求1所述的應用，其特征在于含有5-0-咖啡酰基莽草酸、落新婦苷、異落新婦苷、新落新婦苷、新異落新婦苷、花旗松素、黃杞苷、異黃杞苷、白藜蘆醇。
3.如權利要求1所述的應用，其特征在于所述的土茯苓提取物提取步驟包括:土茯苓藥材粉碎，乙醇超聲提取，減壓回收乙醇，離心后獲得上清液；往上清液中加入β -環糊精-淀粉樹脂，震蕩吸附后過濾，樹脂用乙醇洗脫兩次，收集洗脫液，回收乙醇后4(T50°C真空干燥，獲得土茯苓提取物。
4.如權利要求3所述的應用，其特征在于所述提取步驟:土茯苓藥材粉碎過40目篩，用10倍體積60%乙醇超聲提取，60 °C減壓回收提取溶劑中乙醇，離心后獲得上清液；往上清液中加入與土茯苓藥材等重量的40-60目β-環糊精-淀粉樹脂，震蕩吸附30 min后過濾，樹脂用60%乙醇洗 脫兩次，收集洗脫液，回收乙醇后4(T50°C真空干燥，獲得土茯苓提取物。
【文檔編號】A61K36/896GK103463531SQ201310445918
【公開日】2013年12月25日 申請日期:2013年9月27日 優先權日:2013年9月27日
【發明者】張清峰, 付瑩娟, 郭玉顯 申請人:張清峰