一種核桃蛋白肽及其制備方法和其應用的制作方法
【專利摘要】本發明公開了一種核桃蛋白肽及其制備方法與應用。該核桃蛋白肽是按照包括下述步驟的方法制備得到的：采用芳香水果植物復合蛋白酶對核桃分離蛋白進行酶解反應，得到所述核桃蛋白肽。其相對分子質量主要在0～1000Da之間，均由2～9個氨基酸組成。本發明所提供的核桃蛋白肽風味獨特、含肽率高、分子量小、肽鏈短、無需脫苦、具有極強的活性和多樣性，可作為醫藥原料以及食品添加劑用于制備降血壓、抗氧化、增強記憶力、提高腦神經靈敏度的產品，如藥品、保健品、食品等。本發明制備核桃蛋白肽的方法工藝簡易、投資少、見效快、回報率高、無環境污染、是一種低碳高效，適宜于工業化生產的項目。
【專利說明】一種核桃蛋白肽及其制備方法和其應用
【技術領域】
[0001]本發明屬于生物【技術領域】，具體涉及一種核桃蛋白肽及其制備方法和其應用。
【背景技術】
[0002]核桃為胡桃科胡桃屬植物，是世界四大干果之一。核桃油中飽和脂肪酸總量一般小于10%，不飽和脂肪酸含量豐富，主要有油酸、亞油酸和亞麻酸，總量約90%。
[0003]核桃仁中蛋白的含量約為15%，其中含8種人體必需氨基酸，且含量合理，接近聯合國糧農組織（FAO)和世界衛生組織（WHO)規定的標準，是一種很好的木本植物蛋白。核桃制油剩余的核桃柏多被用作動物飼料原料，造成資源浪費。因此對核桃進行深加工，通過提取核桃蛋白對其進行再利用，既可提高核桃加工的附加值，又可以充分利用核桃蛋白資源。
【發明內容】
[0004]本發明的一個目的是提供一種核桃蛋白肽及其制備方法和其應用。
[0005]本發明提供的一種制備核桃蛋白肽的方法，包括下述步驟：采用芳香水果植物復合蛋白酶對核桃分離蛋白進行酶解反應，得到所述核桃蛋白肽；所述芳香水果植物復合蛋白酶是由無花果蛋白酶、菠蘿蛋白酶、木瓜蛋白酶按照酶活單位iu ：1U ：4U的比例混合而成。
[0006]所述方法中，所述核桃分離蛋白的制備過程包括：將核桃仁經液壓搾油機壓搾后得到核桃柏加入水中，每30ml水中加入Ig核桃柏，用氫氧化鈉調節pH8. 5，50°C的條件下，對核桃柏利用超聲波提取60min，然后用冰醋酸調節pH值，在pH4. 5條件進行酸沉淀，過濾后所得固體物質即為核桃分離蛋白。`
[0007]所述方法中，所述核桃柏的制備過程包括：利用去殼工具去掉核桃外殼后，得到核桃仁；然后將核桃仁倒入烘干池，用熱風爐將核桃仁升溫到40°C并使其受熱均勻，烘干3h ；最后將經過預處理的核桃仁放入網狀過濾袋，然后將過濾袋裝入液壓搾油機開始壓搾去油后，所得固體物質為核桃柏。
[0008]所述方法中，所述酶解反應的反應溫度為60°C，反應時間為90分鐘，pH值為
7.5—8. O ο
[0009]所述方法中，所述酶解反應的反應體系中，核桃分離蛋白與水的質量份數比為I :15 ;酶解每克核桃分離蛋白所需芳香水果植物復合蛋白酶8000U。
[0010]所述方法還包括下述步驟：在酶解反應結束后，對酶解液進行冷藏沉降處理，過濾，收集濾液；所述冷藏沉降的溫度為-4°C，時間為24小時。
[0011]所述方法還包括將所述濾液進行酶滅活處理的步驟；所述酶滅活的條件為：溫度100。。，時間20分鐘。
[0012]所述方法制備得到的核桃蛋白肽也屬于本發明保護的范圍。
[0013]所述方法制備得到的核桃蛋白肽在下述至少一種中的用途：
[0014]( I)制備降血壓的廣品中的應用；[0015](2)制備抗氧化的產品中的應用；
[0016](3)制備增強記憶力和/或提高腦神經靈敏度產品中的應用。
[0017]所述應用中，所述產品可為藥品、保健品或食品。
[0018]本發明的再一個目的是提供一種具有下述任一用途的產品，其活性成分為所述方法制備得到的核桃蛋白肽：
[0019](I)降血壓；
[0020](2)抗氧化；
[0021](3)增強記憶力和/或提高腦神經靈敏度。
[0022]以核桃蛋白肽為活性成分制備的降血壓、抗氧化、增強記憶力、提高腦神經靈敏度的藥物或保健品，需要的時候，在上述藥物或保健品中還可以加入一種或多種藥學上可接受的載體。所述載體包括藥學領域常規的稀釋劑、賦形劑、填充劑、粘合劑、濕潤劑、崩解劑、吸收促進劑、表面活性劑、吸附載體、潤滑劑等。
[0023]所述降血壓、抗氧化、增強記憶力、提高腦神經靈敏度的藥物可以制成口服液、片劑、沖劑、膠囊(包括軟、硬膠囊)、噴劑以及包衣丸劑等多種形式。上述各種劑型的藥物均可以按照藥學領域的常規方法制備。
[0024]本發明所提供的核桃蛋白肽風味獨特、含肽率高、分子量小、肽鏈短、無需脫苦、具有極強的活性和多樣性，可作 為醫藥原料以及食品添加劑用于制備降血壓、抗氧化、增強記憶力、提高腦神經靈敏度的產品，如 藥品、保健品、食品等。
[0025]本發明制備核桃蛋 白肽的方法工藝簡易、投資少、見效快、回報率高、無環境污染、是一種低碳高效，適宜于工業化生產的項目。
【具體實施方式】
[0026]下述實施例中所使用的實驗方法如無特殊說明，均為常規方法。
[0027]下述實施例中所用的材料、試劑等，如無特殊說明，均可從商業途徑得到。
[0028]實施例I、核桃蛋白肽的制備
[0029](一）核桃分離蛋白的制備
[0030]I、核桃制油剩余的核桃柏的獲得：利用去殼工具去掉核桃外殼后，得到核桃仁；然后將核桃仁倒入烘干池，用熱風爐將核桃仁升溫到40°C并使其受熱均勻，烘干3h ;最后將經過預處理的核桃仁放入網狀過濾袋，然后將過濾袋裝入液壓搾油機開始壓搾去油后，所得固體物質為核桃柏。
[0031]2、從核桃制油剩余的核桃柏中提取蛋白：將榨油后的核桃柏加入水中，每30ml水中加入Ig核桃柏，用氫氧化鈉調節pH8. 5，50°C的條件下，對核桃柏利用超聲波提取60min，然后用冰醋酸調節pH值，在pH4. 5條件進行酸沉淀，過濾后所得固體物質即為核桃分離蛋白。
[0032](二）芳香水果植物復合蛋白酶的配制
[0033]將無花果蛋白酶、菠蘿蛋白酶、木瓜蛋白酶按照IU ：1U ：4U的比例混合即得芳香水果植物復合蛋白酶。
[0034](三）核桃蛋白肽的制備
[0035]將上述制備的核桃分離蛋白投入酶解罐中，向酶解罐內加入相當于所述核桃分離蛋白質量的15倍的水，按酶解每克核桃分離蛋白需要芳香水果植物復合蛋白酶8000U的量加入復合蛋白酶；攪拌混勻后加熱至60°C對核桃分離蛋白酶解90min，酶解過程保持pH值在7. 5-8. O，用冰醋酸調節反應液的pH值；酶解結束后，還需對酶解液進行酶滅活處理，所述酶滅活的條件為溫度100°C，時間為20分鐘。之后在-4°C條件下冷藏沉降處理24小時，待其雜質基本沉淀，取上清液，再用板框過濾后即得核桃蛋白
[0036]實施例2、核桃蛋白肽的分子量分布檢測
[0037]核桃蛋白肽的分子量分布的測定方法采用高效凝膠過濾色譜法，測試結果表明本發明提供的核桃蛋白肽的相對分子質量主要集中在O-1000Da的小分子肽與氨基酸混合物，小肽含量為65%以上。
[0038]對比例1-3、核桃蛋白肽的制備
[0039]按照表1所述的酶反應條件，按實施例I所述方法，進行核桃蛋白肽的制備。
[0040]表1
[0041]
【權利要求】
1.一種制備核桃蛋白肽的方法，包括下述步驟：采用芳香水果植物復合蛋白酶對核桃分離蛋白進行酶解反應，得到所述核桃蛋白肽；所述芳香水果植物復合蛋白酶是由無花果蛋白酶、菠蘿蛋白酶、木瓜蛋白酶按照酶活單位iu ：1U ：4U的比例混合而成。
2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：所述核桃分離蛋白的制備過程包括，將核桃仁經液壓搾油機壓搾后得到核桃柏加入水中，每30ml水中加入Ig核桃柏，用氫氧化鈉調節pH8. 5，50°C的條件下，對核桃柏利用超聲波提取60min，然后用冰醋酸調節pH值，在PH4. 5條件進行酸沉淀，過濾后所得固體物質即為核桃分離蛋白。
3.根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述酶解反應的反應溫度為60°C，反應時間為90分鐘，pH值為7. 5-8. O。
4.根據權利要求1-3中任意一項所述的方法，其特征在于：所述酶解反應的反應體系中，核桃分離蛋白與水的質量份數比為I :15 ;酶解每克核桃分離蛋白所需芳香水果植物復合蛋白酶8000U。
5.根據權利要求1-4中任意一項所述的方法，其特征在于：所述方法還包括下述步驟：在酶解反應結束后，對酶解液進行冷藏沉降處理，過濾，收集濾液；所述冷藏沉降的溫度為_4°C，時間為24小時。
6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于：所述方法還包括將所述濾液進行酶滅活處理的步驟；所述酶滅活的條件為：溫度100°c，時間20分鐘。
7.權利要求1-6中任意一項所述方法制備得到的核桃蛋白肽。
8.權利要求7所述的核桃蛋白肽在下述至少一種中的用途： (1)制備降血壓的產品中的應用； (2)制備抗氧化的產品中的應用； (3)制備增強記憶力和/或提高腦神經靈敏度產品中的應用。
9.根據權利要求8所述的應用，其特征在于：所述產品可為藥品、保健品或食品。
10.一種具有下述任一用途的產品，其活性成分為權利要求7所述的核桃蛋白肽： (1)降血壓； (2)抗氧化； (3)增強記憶力和/或提高腦神經靈敏度。
【文檔編號】A61P25/00GK103484518SQ201310412884
【公開日】2014年1月1日 申請日期:2013年9月11日 優先權日:2013年9月11日
【發明者】鄒遠東 申請人:鄒遠東