一種防治病毒性心肌炎的金絲桃素組合物及其應用的制作方法
【專利摘要】本發明提供了一種防治病毒性心肌炎的金絲桃素組合物及其應用。所述組合物由金絲桃素和黃芪甲甙按質量比1：5～6組成。通過檢測小鼠血清溶血素形成和對小鼠腹腔巨噬細胞吞噬功能的作用實驗，確定金絲桃素、黃芪甲甙按1：5質量配比，療效最佳。本發明提供了一種具有較好療效的防治病毒性心肌炎的金絲桃素組合物，為新藥篩選提供了基礎。
【專利說明】一種防治病毒性心肌炎的金絲桃素組合物及其應用
(-)【技術領域】
[0001]本發明涉及一種防治病毒性心肌炎的金絲桃素組合物及其應用。
(二)【背景技術】
[0002]貫葉連翅(Hypericumperforatum L.HP)為藤黃科金絲桃屬(Hypericum L.)植物貫葉連翹的全草，歐洲和北美稱其為圣約翰草，是近年來繼銀杏之后世界最暢銷草藥。金絲桃素(Hypericin，HY)是從HP中提取的萘駢二蒽酮單體化合物，是HP主要活性成分，具有抗抑郁、抗菌、抗病毒、抗腫瘤作用；在德國，已與蛋白質結合用于臨床抗憂郁，治療愛滋病。我國貫葉金絲桃資源比較豐富，但對其研究與應用很少。近來研究表明，HY對多種病毒(DNA或RNA病毒)包括艾滋病病毒(HIV)、皰疫病毒、炎病毒、副流感病毒、牛痘病毒、肝炎病毒、禽流感病毒等有抗病毒作用，尤其對逆轉錄RNA病毒如HIV、副流感病毒、禽流感病毒等作用顯著，機理可能與抑制逆轉錄酶有關。金絲桃素目前有關治療病毒性心肌炎的研究，已有相關的實驗研究報道(李樂，張益靈，陶厚權，丁寶興，王本蘭.金絲桃素抑制慢性病毒性心肌炎小鼠心肌組織病理學改變。中國醫藥指南，2011，9 (33):283-285)。黃芪是我國傳統中藥之一，參與機體的多種代謝，具有廣泛的藥理作用，對病毒性心肌炎(VMC)有確切療效，臨床已應用多年(唐立明.中藥黃民的現代醫學臨床應用和研究進展.中醫臨床研究2013，5(3):117-120)。具有抑制病毒復制，改善心功能、減輕心肌病理改變等療效。黃芪甲甙為我國有自主知識產權的一種黃芪皂甙類單體成份，為黃芪劑制中的主要有效成份，黃芪制劑的質量控制標準都是以黃芪皂甙的含量為依據。已有研究證實，，黃芪甲甙明顯提高感染CVB3小鼠的生存率，改善心肌組織病理改變，減輕炎癥細胞浸潤及壞死病灶，降低心肌組織中的病毒滴度及病毒RNA的復制水平，對CVB3小鼠病毒性心肌炎有明顯的治療作用(何春枝，李雙杰.黃芪甲甙對急性病毒性心肌炎小鼠IGF-1及相關蛋白表達的作用研究.中國當代兒科雜志，2011，13 (9):751-754)。但將金絲桃素與黃芪甲甙配伍應用，治療病毒性心肌炎未見研究報道。`
(三)
【發明內容】
[0003]本發明目的是提供一種防治病毒性心肌炎的金絲桃素組合物及其應用。
[0004]本發明采用的技術方案是:
[0005]一種防治病毒性心肌炎的金絲桃素組合物，由金絲桃素和黃芪甲甙按質量比1:5~6組成。
[0006]優選的，所述組合物中金絲桃素和黃芪甲甙質量之比為1:5。
[0007]發明人利用柯薩奇B組病毒(Coxsackievirus group B3, CVB3)感染心肌,復制病毒性心肌炎小鼠模型，對金絲桃素組合物，經藥效學整體動物實驗研究，取得了肯定的治療效果，較單獨的金絲桃素或黃芪甲甙療效更好。用正交實驗方法，通過檢測小鼠血清溶血素形成和對小鼠腹腔巨噬細胞吞噬功能的作用實驗，確定金絲桃素、黃芪甲甙按1:5質量配t匕，療效最佳。[0008]本發明還涉及所述的組合物在制備防治病毒性心肌炎的藥物中的應用。本發明組合物可添加常規藥用輔料，制成常規的劑型。
[0009]本發明的有益效果主要體現在:本發明提供了一種具有較好療效的防治病毒性心肌炎的金絲桃素組合物，為新藥篩選提供了基礎。
(四)【專利附圖】
【附圖說明】
[0010]圖1為各組病毒性心肌炎小鼠心肌組織學改變(HE染色IOOx)；
[0011]A:對照組；B:模型組；C:金絲桃素組合物組30mg/kg/d治療組；D:金絲桃素組合物組100mg/kg/d治療組E:金絲桃素組；F:黃芪甲甙組；圖2為各組小鼠心肌Masson染色(X 400，深色條帶反映心肌纖維化);A:對照組；B:模型組；C:金絲桃素組合物30mg/kg/d治療組；D:金絲桃素組合物100mg/kg/d治療組；E:Cap50mg/kg/d治療組。
(五)【具體實施方式】
[0012]下面結合具體實施例對本發明進行進一步描述，但本發明的保護范圍并不僅限于此:
[0013]實施例1:金絲桃素和黃芪甲甙組合物配比藥效學實驗
[0014]I材料與藥物:
[0015]AS3120A超聲波清洗器；AR2140電子分析天平；酶聯免疫測定儀(奧地利安圖公司2010 型)；油鏡(OLYMPUS CH 型)。
[0016]ICR小鼠240只，雌`雄各半，體重16_20g，5~6周齡，由浙江大學試驗動物中心提供，動物合格證號:2009035。
[0017]0.9%生理鹽水(NaCl) ;2%、10%綿羊紅細胞(鄭州百基生物科技有限公司)；1%雞血紅細胞(取自市售SPF公雞，自備);5%可溶性淀粉；豚鼠血清(上海恒遠生物科技有限公司)；
[0018]藥物與試劑:
[0019]金絲桃素，Sigma公司，純度98%，用二甲基亞砜溶解，生理鹽水稀釋，終濃度為0.15%，避光4°〇保存。
[0020]黃芪甲甙，國家生物制品檢定檢測研究院提供。純白色干粉劑，用0.5%助溶劑羧甲基纖維素鈉制成均勻混懸液，濃度8%。
[0021 ] 按照金絲桃素和黃芪甲甙質量之比將上述溶液分別配制成1:1組，1:2組，1:3組，1:4組，1:5組，1:6組1:7組1:8組2:1組,3:1組,4:1組的組合物溶液。
[0022]2方法與結果
[0023]2.1分光光度法檢測血清溶血素
[0024]方法:取小鼠140只(雌雄各半)，隨機分成14組，即空白對照組、金絲桃素和黃芪甲式組合物1:1組，1:2組，1:3組，1:4組，1:5組，1:6組1:7組1:8組2:1組,3:1組,4:1組，單獨金絲桃素或黃芪甲甙組。連續灌胃給藥7天(均為150mg生藥/kg)，給藥第3天所有小鼠腹腔注射2%的綿羊血紅細胞懸液0.2mL,于第7天給藥后2h將各鼠摘眼球取血ImL離心，取IOii L血清置已加入生理鹽水的試管中，用生理鹽水稀釋500倍，將稀釋后血清加A 96孔板中，每孔0.1mL,繼而加入等量的10%綿羊血紅細胞懸液0.05mL和豚鼠血清(1:20稀釋)0.1mL,試驗孔總體積為0.3mL。置37°C溫箱溫育30min,離心(2000r/min) IOmin,取上清液200 u L放入另一 96孔板內，置酶標儀(A415)測定吸收度值。
[0025]結果:實驗結果如表1。
[0026]
【權利要求】
1.一種防治病毒性心肌炎的金絲桃素組合物，由金絲桃素和黃芪甲甙按質量比1:5~6組成。
2.如權利要求1所述的組合物，其特征在于所述組合物中金絲桃素和黃芪甲甙質量之比為1:5。
3.如權利要求1所述的組合物在制備防 治病毒性心肌炎的藥物中的應用。
【文檔編號】A61K31/7048GK103479657SQ201310372867
【公開日】2014年1月1日 申請日期:2013年8月23日 優先權日:2013年8月23日
【發明者】李樂, 廖瑩瑩, 尚好, 陶厚權 申請人:浙江工業大學