含有重組人生長激素的鼻腔給藥制劑及其制備方法
【專利摘要】本發明公開了一種含有重組人生長激素的鼻腔給藥制劑及其制備方法，所述含有重組人生長激素的鼻腔給藥制劑，以重量百分比計，含有：黏膜吸收促進劑0.1～30%，生物粘附材料0.1～50%，重組人生長激素1～30%。本發明的優點在于：簡便易行，適合工業化生產。制備過程不使用有機溶劑，對重組人生長激素的活性破壞較小，本發明的載藥微粒可顯著增加鼻腔滯留時間，增加人生長激素的經鼻吸收，提高生物利用度。
【專利說明】含有重組人生長激素的鼻腔給藥制劑及其制備方法
【技術領域】
[0001] 本發明涉及醫藥領域，具體為一種用于治療內源性生長激素缺乏癥、慢性腎衰、特 納氏綜合癥所致兒童生長緩慢及重度燒傷等疾病，含有重組人生長激素的鼻腔給藥制劑及 其制備方法。
【背景技術】
[0002] 重組人生長激素（rhGH)自1985年問世以來，徹底解決了尸源性人GH來源稀少和 潛在脘病毒感染而致Creutzfeldt - Jakob病的問題，為生長激素缺乏癥（GHD)患者提供 了治療途徑。它具有與人體內源生長激素同等的作用，能使摘除垂體大鼠的體重增加，促進 脛骨和軟骨生長。同時還有促進全身蛋白質合成，糾正手術等創傷后的負氨平衡狀態，刺激 免疫球蛋白合成，刺激淋巴樣組織，巨噬細胞和淋巴細胞的增殖，增強抗感染能力；刺激燒 傷創面及切口膠原細胞、巨噬細胞分裂增殖，加速傷口愈合的作用。
[0003] 迄今為止rhGH在人體的應用已經通過20多年的臨床驗證，其有效性和安全性 得到了醫生及患者的普遍認可。同時rhGH的應用人群也在逐漸擴大，FDA已經批準了兒 童GHD、慢性腎功能不全、HIV感染相關衰竭綜合癥、成人GHD、Turner綜合征、小于胎齡兒 (SGA)、特發性矮身材（ISS)、短腸綜合征、Prader - Willi綜合征等10余個rhGH適應癥。
[0004] 長期、規則使用rhGH是rhGH治療達到最佳療效的基礎。目前全球范圍內正式上市 使用的rhGH需要每天注射給藥，兒童GHD療程長達3個月至3年，使患者不但要承受因注 射帶來的痛苦，還得承擔由此帶來的諸多生活不便和額外的經濟負擔，降低了患者依從性， 影響了 rhGH治療的長期療效。某兒童醫院內分泌門診部資料顯示，因咨詢rhGH需要每日 注射后而放棄治療的約5?10%。國外已經發表的研究顯示，接受rhGH注射治療的兒童患 者，23%每月會漏打至少3次，在2年的治療期里，13%的患兒會因漏打而導致實際使用劑 量減少50 %以上。另一項統計顯示，注射劑依從性僅36?49%，70%患者感到不快，30%考 慮停止治療（Frost & Sullivan)。
[0005] 國內外一些制藥企業和研發機構致力于rhGH長效制劑的開發，通過緩控釋技術 或化學修飾方法改善rhGH的藥代動力學特征，增加患者依從性。但是rhGH長效制劑的應 用面臨一些潛在的問題，如注射后的血GH濃度變化與生理分泌模式不同是否會影響GH長 效制劑的療效？持續高水平的GH濃度是否會導致安全性問題？緩釋制劑注射部位局部反 應如何解決？第一個經FDA批準的PLGA緩釋微球Nutropin Depot?因為療效不佳和局部 副反應等原因停止銷售。
[0006] 開發非注射的短效GH給藥系統是符合治療要求和相對更安全的給藥方式，具有 長效注射給藥系統無法比擬的優勢。如經鼻、肺、眼、口腔、直腸等粘膜給藥，其中鼻腔給藥 研究較多。
[0007] 迄今為止，關于重組人生長激素的鼻腔給藥研究表明，盡管鼻腔具有較大的吸收 面積和豐富的血液供應，但蛋白質類大分子藥物仍難透過鼻腔黏膜。（1)蛋白穿透黏膜能 力差，蛋白由于分子量太大，因此穿透鼻腔黏膜的能力較低；（2)鼻粘膜纖毛具有快速清 除機制，縮短了藥物在鼻腔吸收部位的滯留時間，影響藥物的生物利用度；（3)鼻腔中可 能存在酶的降解作用。
[0008] 為解決重組人生長激素的經鼻吸收問題，有很多通過在制劑中加入各種吸收促進 劑來提高人生長激素生物利用度的研究，但是大多數不能超過皮下注射的30%，也就意味著 藥效達不到注射給藥的效果。如Pharm Res，1990, 7(7) :772報道生長激素經大鼠鼻腔給予， 采用溶血卵磷脂為促進劑時相對生物利用度為25. 8%，用鹽酸氨肽酶抑制劑為促進劑時的 相對生物利用度為28. 9%。Eur. J. Pharm. Sci. 26(2005)9-15的研究表明，羊鼻腔給予生長 激素和殼聚糖的干粉混合物，與皮下注射比，生物利用度大約15%.
[0009] 綜上所述，盡管已進行了多種嘗試來提高人生長激素經鼻給藥的吸收，但目前仍 未能達到與皮下注射相當的效果，仍然需要進一步提高人生長激素經鼻給藥的生物利用 度。
【發明內容】
[0010] 本發明的目的在于提供一種含有重組人生長激素的鼻腔給藥制劑及其制備方法， 以克服現有技術存在的缺陷，滿足臨床應用的需要。
[0011] 所述的含有重組人生長激素的鼻腔給藥制劑，以重量百分比計，含有：
[0012] 黏膜吸收促進劑 0.1?30%
[0013] 生物粘附材料 0· 1?50%
[0014] 重組人生長激素 1?30%
[0015] 優選的，以重量百分比計，含有：
[0016] 黏膜吸收促進劑 2?23%
[0017] 生物粘附材料 1?7%
[0018] 重組人生長激素 6?12%
[0019] 所述黏膜吸收促進劑選自環糊精或其衍生物、烷基糖苷類表面活性劑、膽酸鹽類、 氨肽酶抑制劑、磷脂或其衍生物中的一種以上；
[0020] 優選的黏膜吸收促進劑為烷基糖苷類表面活性劑，更優選的為八/十/十二/ 十四烷基麥芽糖苷、蔗糖苷或葡萄糖苷；
[0021] 生物粘附材料選自殼聚糖、結冷膠、氨基化明膠、纖維素或其衍生物、卡波姆或透 明質酸等中的一種以上；
[0022] 優選的生物粘附材料為殼聚糖，分子量50, 000?1，000, 000,脫乙酰度>85%。
[0023] 所述重組人生長激素的分子量為?22, OOODa，可以是有191個氨基酸殘基的、與 天然人生長激素結構和氨基酸序列完全一致的蛋白，也可以是N-端增加一個甲硫氨酸的 192個氨基酸殘基組成的蛋白。所述重組人生長激素也可以是分子量為20KD，176個氨基酸 殘基，缺失天然人生長激素32?46位15個氨基酸殘基的重組人生長激素。
[0024] 優選的，所述的含有重組人生長激素的鼻腔給藥制劑，還包括保護劑，所述保護劑 選自乳糖、蔗糖、海藻糖、甘露醇或葡聚糖等中的一種以上，用于干燥過程中生長激素的活 性保護；
[0025] 進一步優選的，所述的含有重組人生長激素的鼻腔給藥制劑，還包括穩定劑，所述 穩定劑選自甘氨酸、賴氨酸、醋酸鋅或波洛沙姆等中的一種以上，用于提高生長激素的穩定 性；
[0026] 優選的，所述的含有重組人生長激素的鼻腔給藥制劑，還包括pH=5?8的緩沖鹽， 所述pH=5?8的緩沖液選自醋酸-醋酸鈉、檸檬酸-檸檬酸鈉或磷酸二氫鈉-磷酸氫二鈉 等；
[0027] 特別優選的，所述的含有重組人生長激素的鼻腔給藥制劑，包括如下重量百分比 的組分：
【權利要求】
1?含有重組人生長激素的鼻腔給藥制劑，其特征在于，以重量百分比計，含有： 黏膜吸收促進劑 〇? 1?30% 生物粘附材料 〇. 1?50% 重組人生長激素 1?30%。 2?根據權利要求1所述的含有重組人生長激素的鼻腔給藥制劑，其特征在于，以重量 百分比計，含有： 黏膜吸收促進劑 2?23% 生物粘附材料 1?7% 重組人生長激素 6?12%。
3. 根據權利要求1所述的含有重組人生長激素的鼻腔給藥制劑，其特征在于，還包括 保護劑、穩定劑或PH=5?8的緩沖鹽中的一種以上，所述保護劑選自乳糖、蔗糖、海藻糖、甘 露醇或葡聚糖中的一種以上； 所述穩定劑選自甘氨酸、賴氨酸、醋酸鋅或波洛沙姆等中的一種以上； 所述pH=5?8的緩沖液選自醋酸-醋酸鈉、檸檬酸-檸檬酸鈉或磷酸二氫鈉-磷酸氫 二鈉。
4. 一種含有重組人生長激素的鼻腔給藥制劑,其特在于，包括如下重量百分比的組 分：
5. 根據權利要求4所述的含有重組人生長激素的鼻腔給藥制劑，其特征在于，包括如 下重量百分比的組分：
6. 根據權利要求1?5任一項所述的含有重組人生長激素的鼻腔給藥制劑，其特征在 于，所述黏膜吸收促進劑選自環糊精或其衍生物、烷基糖苷類表面活性劑、膽酸鹽類'氨肽 酶抑制劑、磷脂或其衍生物中的一種以上； ' 生物粘附材料選自殼聚糖、結冷膠、氨基化明膠、纖維素或其衍生物、卡波姆或透明質 酸等中的一種以上； ' 所述重組人生長激素的分子量為?22, OOODa。
7. 根據權利要求6所述的含有重組人生長激素的鼻腔給藥制劑，其特征在于，所述黏 膜吸收促進劑為烷基糖苷類表面活性劑。
8. 根據權利要求6所述的含有重組人生長激素的鼻腔給藥制劑，其特征在于，所述生 物粘附材料為殼聚糖，分子量50, 000?1，000, 000,脫乙酰度>85%。 9?根據權利要求6所述的含有重組人生長激素的鼻腔給藥制劑，其特征在于，所述重 組人生長激素是有191個氨基酸殘基的、與天然人生長激素結構和氨基酸序列完全一致的 蛋白；或天然人生長激素N-端增加一個甲硫氨酸的、192個氨基酸殘基組成的蛋白；或分 子量為20KD，176個氨基酸殘基，缺失天然人生長激素 32?46位15個氨基酸殘基的重組 人生長激素。
10.根據權利要求1?9任一項所述的含有重組人生長激素的鼻腔給藥制劑的制備方 法，其特征在于，包括如下步驟： (1) 將生物粘附材料溶解于pH緩沖液，然后加入重組人生長激素； 、、 (2) 在上述的溶液中，加入黏膜吸收促進劑、保護劑和穩定劑，采用本領域常規的方法， 干燥，獲得所述的含有重組人生長激素的鼻腔給藥制劑； 、 (3) 將干燥后的固體過1〇〇目篩，得30 - 150 Um粉末，按劑量分裝于鼻用粉霧劑裝置 中。
【文檔編號】A61K38/27GK104225579SQ201310240170
【公開日】2014年12月24日 申請日期:2013年6月17日 優先權日:2013年6月17日
【發明者】吳聞哲, 侯惠民, 姚孝林 申請人:上海現代藥物制劑工程研究中心有限公司