專利名稱：治療奶牛乳房炎的中藥方劑及其提取物和制劑的制作方法
技術領域：
本發明屬于獸用中藥領域，涉及治療奶牛乳房炎的中藥方劑，還涉及中藥方劑的提取物和由提取物制成的制劑。
背景技術：
中醫藥是中華民族在與疾病長期斗爭的過程中積累的寶貴財富。在繼承發揚中醫藥優勢特色的基礎上，充分利用現代科學技術，推動中醫藥現代化和國際化，以滿足時代發展和民眾日益增長的醫療保健需求，是歷史賦予中國科研工作者們的責任。中國國務院16個部門聯合發布《中醫藥創新發展規劃綱要(2006 2020年)》中指出，以中藥為基礎的相關產品如保健品、日用品、化妝品、食品添加劑、農藥、獸藥、飼料添加劑等的開發研究是中醫藥創新發展的優先領域之一。奶牛乳房炎是其乳腺組織受到物理、化學、微生物等致病因子刺激所發生的一種炎性變化，引起乳房局部血液循環障礙、乳腺組織病理損傷，導致奶牛泌乳機能受損，生殖機能失調。奶牛乳房炎在奶牛養殖生產中的發病率高、造成損失大，是奶牛最常見多發的頑疾，被列為奶牛的四大疾病之一。奶牛乳房炎的危害表現在:(I)感染率、發病率高(資料報道，全球約有2.2億頭奶牛，其中1/3的奶牛患有各種類型的乳腺炎；國內的發病率在20 70%之間，國外的發病率約為25 60%) ；(2)乳房炎降低奶產量(可降低奶量10% 15%)，并降低牛奶品質和營養價值；(3)乳房炎嚴重影響奶牛的利用年限，一些牛無法治愈而被淘汰；同時,還會造成奶牛延長產后發情和妊娠時間；(4)對病牛的治療費用，以及增加護理所需額外的勞動力開支等；(5)影響人體健康:乳房炎病牛乳汁含大量病原微生物及其產生的毒素，以及經治療后造成藥物殘留，危害人類健康。但由于奶牛乳房炎病原的復雜性，給此病的預防和治療帶來了很大的困難。長期以來，對奶牛乳房炎的治療主要采用抗生素或化學合成藥物，給藥方式采用肌肉、靜脈注射、局部給藥、乳房灌注或·乳房封閉療法。隨著藥物的長期使用、以及耐藥性增加，一些治療藥物的療效降低愈來愈明現，而且藥物殘留已引發了的食品公共衛生問題。由于中藥的藥理功能不僅對病原和病狀具有干擾、抑制作用，更重要的是中藥還具有調節動物機體的免疫、內分泌和代謝機能等。如中藥具有促進血液循環、刺激泌乳的藥理作用，能提高奶牛的奶產量。而且，大部分中藥系植物源性天然藥物，不會影響乳成分，更不存在因藥物殘留帶來的公共衛生問題。因此，推廣應用中草藥治奶牛乳房炎不但是畜牧業可持續發展的要求，也足發展綠色食品和提高人民生活質量的需要。目前，獸醫臨床上用于治療奶牛乳房炎的藥物，無論是抗生素、化藥，還是中藥，在其使用中都存在不同程度的弊端。乳室注射操作不方便，并對乳頭、乳管也有刺激；靜脈注射對藥物的劑型、操作要求較高；肌肉注射會產生強烈的應激反應；中藥內服受動物依從性的限制，并且藥物的生物利用度低。在我國，雖然一些中藥被用來治療奶牛乳房炎，但傳統的治療奶牛乳房炎的中藥方劑多數是口服煎劑或散劑，或外用制劑，其劑型落后，生產工藝落后，科技含量不高，其治療效果起伏不定、也不甚理想。因此，在獸醫臨床上亟需一種療效確切、安全低毒、無殘留、勿需口服、注射途徑給藥，且使用方便的治療奶牛乳房炎的藥物。經皮給藥是指經皮膚給藥而起全身治療作用的控釋制劑，無肝臟的首過效應和不受胃腸道消化酶的破壞對藥物降解等作用，有維持較長作用時間、降低藥物毒副作用和不良反應、維持穩定而持久的血藥濃度從而提高療效的優點。可見經皮給藥是一種極有前途的劑型，尤其是高效、安全的中藥滲透促進劑，已成為第3代藥物制劑開發研究的中心內容
之一 O因此，把傳統的中醫中藥優勢與現代藥物制劑技術結合，研制新制劑——搽劑，將在奶牛乳房炎防治方面發揮更大的作用。
發明內容
有鑒于此，本發明的目的在于提供一種安全、不影響牛乳品質的治療奶牛乳房炎的中藥方劑；本發明的目的之二在于提供中藥方劑的提取物；本發明的目的之三在于提供提取物的制備方 法；本發明之四在于提供含有提取物的制劑，制成的制劑可用于獸醫臨床的治療奶牛乳房炎。為達到上述目的，本發明提供如下技術方案:1.治療奶牛乳房炎的中藥方劑,按重量份計包括蒲公英100 200份、赤茍100 200份和連翹100 200份。優選的,按重量份計包括蒲公英200份、赤茍200份和連翅100份。本發明使用的中藥具有如下功效:蒲公英為菊科多年生草本植物蒲公英(Taraxacum mongoIicum Hand.Mazz)、堿地蒲公英(Taraxacum sinicum Kitag.)和異荀蒲公英(Taraxacum heterolepis Nakai etH.Koidz.)等多種同屬植物的帶根全草。味甘、微苦，性寒；入肝、胃經；具有清熱解毒，消腫散結的功能。現代藥物學研究表明，蒲公英具有抗菌抗病毒活性成分，對金色葡萄球菌、溶血性鏈球菌、綠膿桿菌、傷寒桿菌、流感病毒等具有抑制作用。赤芍為毛茛科植物芍藥(Paeonia lactiflora Pal1.)或川赤芍(Paeoniaveitchii Lynch)的干燥根。赤茍味苦、性微寒,歸肝經；具清熱涼血、活血祛瘀、止痛功能。主治溫毒發斑，吐血衄血,癥瘕腹痛,跌撲損傷,癰腫瘡瘍等。赤芍的現代藥物學研究表明，赤芍具有提高網狀內皮系統的吞噬功能和增強調理素活性，清除氧自由基，保護線粒體結構和功能正常，抗血小板聚集及抗血栓形成，顯著鎮靜和一定的鎮痛，并且在體外對痢疾桿菌、傷寒桿菌和溶血性鏈球菌有較強抑制等藥理作用。連翅為木犀科植物連翅(Forsythia suspensa (Thunb.) Vahl.)的干燥果實。味苦，性涼；入心、肺、肝、膽經；具有清熱解毒、散結消腫的功能。用于溫熱、斑疹、癰瘍腫毒、瘰疬、風熱感冒、溫熱初起、溫熱入營、高熱煩渴、神昏發斑、熱淋尿閉。現代藥物學研究表明，連翹具有一定的抗菌活性，對葡萄球菌、鏈球菌、大腸桿菌、肺炎球菌、流感病毒等具有抑制作用。2.所述中藥方劑的提取物。所述中藥方劑的提取物可以用現有技術中制備蒲公英、赤芍和連翹水提取物的方法進行提取，最佳使用本發明提供的制備方法。
3.所述提取物的制備方法，具體步驟如下:a.蒲公英水提物的制備:準確稱取配方量的蒲公英，切碎，然后加入水煎煮，過濾，收集濾液，再用體積分數為60 70%的乙醇沉淀，收集濾液，濾液回收乙醇，最后用體積分數為80 85%的乙醇沉淀，過濾，濾液回收乙醇，得蒲公英水提物；b.赤芍水提物的制備:準確稱取配方量的赤芍，加水煎煮，收集煎煮液，得赤芍水提物；c.連翹水提物的制備:準確稱取配方量的連翹，加入水煎煮，收集煎煮液，得連翹水提物；d.合并制 得的蒲公英水提物、赤芍水提物和連翹水提物，得中藥方劑的提取物。4.含有所述提取物的制劑。本發明中可以將中藥方劑或其提取物與藥學上可接受的中藥透皮促進劑制成直接噴霧的中藥透皮制劑，如搽劑。使用透皮給藥的透皮制劑既避免了胃腸道及肝的“首過效應”，提高了藥物在體內的可預見性，又避免了藥物直接注入乳池的弊端，最大限度的降低了藥物在乳汁中的殘留，使用方便，副作用小，而且符合“綠色、環保”的要求。與內服、注射等劑型相比，有投藥安全、給藥次數少，不受胃腸因素的影響、可產生預期的吸收作用與血藥濃度等特點。優選的，所述制劑為搽劑。優選的，每IOOmL所述搽劑由如下組分組成，100 200g蒲公英的水提物、100 200g連翹的水提物、100 200g赤芍的水提物、冰片2 4g、丙二醇2 10mL、薄荷醇O Sg、對羥基苯甲酸乙脂1.0g,乙醇胺0.1 0.3mL，余量為體積分數50%的乙醇。更優選的，每IOOmL所述搽劑由如下組分組成，IOOg蒲公英的水提物、200g赤芍的水提物、200g連翹的水提物、冰片4g、丙二醇6mL、薄荷醇4g、對羥基苯甲酸乙脂1.0g,乙醇胺0.2mL，余量為體積分數50%的乙醇。更優選的，每IOOmL所述搽劑由如下組分組成，150g蒲公英的水提物、IOOg赤芍的水提物、IOOg連翹的水提物、冰片4g、丙二醇9mL、薄荷醇5g、對羥基苯甲酸乙脂1.0g,乙醇胺0.3mL，余量為體積分數50%的乙醇。更優選的，每IOOmL所述搽劑由如下組分組成，IOOg蒲公英的水提物、150g赤芍的水提物、IOOg連翹的水提物、冰片4g、丙二醇6mL、薄荷醇4g、對羥基苯甲酸乙脂1.0g,乙醇胺0.lmL，余量為體積分數50%的乙醇。本發明的有益效果在于:本發明公開了治療奶牛乳房炎的中藥方劑，藥用成分由連翹、赤芍和蒲公英組成，各成分配伍后具有協同效應，配伍遵循中醫對奶牛乳房炎的治貝U，并符合中藥“九畏和十八反”的配伍原則；組合后能夠在體外抑制奶牛乳房炎的主要致病性病原菌一金黃色葡萄球菌、大腸桿菌和無乳鏈球菌；本發明還公開了中藥方劑的提取物，含有中藥組合物中的全部有效成分，并且藥用成分含量高，將提取物利用現代中藥制劑技術制成搽劑，使用冰片和薄荷醇中藥透皮劑為促透劑，其安全性好，單次給藥和多次給藥對實驗動物未見中毒或異常癥狀，也未出現死亡情況、無神經系統毒性和無皮膚毒性；并且所得搽劑質量穩定，在常溫(25°c)、高溫(40°C)、低溫(4°C)下放置3個月后，制劑的外觀性狀、PH值、連翹苷的含量等均無明顯變化，且微生物限度檢查合格；該中藥透皮劑的透皮性好，最大透皮速率達到1.9303 ;搽劑使用方便，通過皮膚給藥，劑量可控；生物利用度高，給藥次數少；吸收迅速，見效快；可以避免諸如胃腸道刺激、肝臟“首過效應”及半衰期短、必須多次給藥等缺點；同時，最大限度的降低了藥物在乳汁中的殘留，副作用小，適用于不宜或不便口服、注射等方法投藥的臨床治療，在防治奶牛乳房炎領域具有良好的應用前景。本發明的公開的搽劑制備方法簡單，成本低廉，而且符合“綠色、環保”的要求，適于工業化大規模化生產。
具體實施例方式下面將結合具體實施例，對本發明的優選方式進行詳細的描述。實施例1治療奶牛乳房炎的中藥方劑，按重量份計由連翹100 200份、蒲公英100 200份和赤芍100 200份組成，方劑中連翹、蒲公英和赤芍均具有防治奶牛乳房炎的效果。為了提高有效藥用成分的濃度及提高藥物的利用效率，將中藥制備成相應的提取物，具體如下:蒲公英水提物的制備方法:準確稱取配方量的蒲公英，切碎，然后加入相當于蒲公英重量10倍的水，文火煎煮I小時，過濾；重復煎煮2次，合并3次濾液，然后加入乙醇至乙醇的體積分數為60 70%，冷藏4 8小時(2 6°C )，過濾，收集濾液，濾液回收乙醇,然后再向濾液中加入乙醇至乙醇的體積分數為80 85%，冷藏過夜(2 6°C)，過濾，濾液回收乙醇，然后制備 成IOg生藥/mL，得蒲公英水提物，4°C保存，備用。赤芍水提物的制備方法:準確稱取配方量的赤芍，加入相當于赤芍重量4倍的蒸餾水煮沸30分鐘，過濾除渣，重復煎煮2次，合并3次煎煮液，然后隔水濃縮至IOg生藥/mL,得赤芍水提物，4°C保存，備用。連翹水提物的制備方法:準確稱取配方量的連翹，加入相當于連翹重量12倍的蒸餾水煎煮1.5分鐘，過濾，重復煎煮3次，合并煎煮液，減壓濃縮至濃度為IOg生藥/mL，得連翹水提物，4°C保存，備用。將制備的蒲公英水提物、赤茍水提物和連翅水提物混合后獲得中藥方劑的提取物。實施例2為了方便給藥，將實施例1中的方劑或中藥方劑的提取物與藥劑學上可接受的中藥透皮促進劑制成透皮劑。本實施例以搽劑為例，制備治療奶牛乳房炎的中藥制劑，其配方和制備方法如下:配方1:制備IOOmL的搽劑，組分如下:連翹IOOg的水提物，蒲公英IOOg的水提物，赤芍IOOg的水提物，冰片2.0g，l，2-丙二醇8.0mL，薄荷醇8.0g，對羥基苯甲酸乙脂1.0g,乙醇胺0.lmL，余量為體積分數為50%的乙醇。搽劑的制備方法:取處方量的連翹水提物、蒲公英水提物和赤芍水提物，加入80mL體積分數為50%乙醇，充分攪拌使其完全溶解(如室溫不能完全溶解，置37°C水浴超聲波助溶)，完全溶解后，4°C冷藏靜置24小時以上，過濾，濾液加入0.03g顆粒活性炭，在溫度為4°C條件下吸附24小時除去中藥提取物中的致熱源，過濾去掉活性炭；然后向除去熱源的中藥提取物中加入處方量的冰片、I，2-丙二醇、薄荷醇、對羥基苯甲酸乙脂，充分攪拌均勻，補加體積分數為50%的乙醇至總體積為95mL，再用乙醇胺調節pH至7.2 7.4，再補加體積分數為50%的乙醇至總體積為IOOmL,混勻，4°C靜置24小時，分裝，最后100°C流通蒸氣滅菌30分鐘，即得防治奶牛隱性乳房炎的搽劑。利用本配方制得的搽劑為棕黑色、有芳香氣味、分散均勻的液狀溶液；微生物限度檢查合格，透皮速率為0.8052。配方I1:制備IOOmL的搽劑，組分如下:連翹150g的水提物，蒲公英150g的水提物，赤芍150g的水提物，冰片3.0g, 1,2-丙二醇5.0mL,薄荷醇7.0g,對羥基苯甲酸乙脂1.0g,乙醇胺0.2mL，余量是體積分數為50%的乙醇。搽劑的制備方法與實施例1相同。利用本配方制得的搽劑為棕黑色、有芳香氣味、分散均勻的液狀溶液；微生物限度檢查合格，透皮速率為0.8873。配方II1:制備IOOmL的搽劑，組分如下:連翹200g的水提物，蒲公英200g的水提物，赤芍200g的水提物，冰片4.0g, 1,2-丙二醇2.0mL,薄荷醇6.0g,對羥基苯甲酸乙脂1.0g,乙醇胺0.3mL，余量為體積分數為50%的乙醇。搽劑的制備方法與實施例1相同。利用本配方制得的搽劑為棕黑色、有芳香氣味、分散均勻的液狀溶液；微生物限度檢查合格，透皮速率為0.9149。配方IV:制備IOOmL的搽劑，組分如下:連翹150g的水提物，蒲公英IOOg的水提物，赤芍IOOg的水提物，冰片4.0g, 1,2-丙二醇9.0mL,薄荷醇5.0g,對羥基苯甲酸乙脂1.0g,乙醇胺0.3mL，余量為體積分數為50%的乙醇。搽劑的制備方法 與實施例1相同。利用本配方制得的搽劑為棕黑色、有芳香氣味、分散均勻的液狀溶液；微生物限度檢查合格，透皮速率為0.9389。配方V:制備IOOmL的搽劑，組分如下:連翹IOOg的水提物，蒲公英150g的水提物，赤芍IOOg的水提物，冰片4.0g，l，2-丙二醇6.0mL，薄荷醇4.0g，對羥基苯甲酸乙脂1.0g,乙醇胺0.lmL，余量為體積分數為50%的乙醇。搽劑的制備方法與實施例1相同。利用本配方制得的搽劑為棕黑色、有芳香氣味、分散均勻的液狀溶液；微生物限度檢查合格，透皮速率為1.6861。配方V1:制備IOOmL的搽劑，組分如下:連翹IOOg的水提物，蒲公英IOOg的水提物，赤芍150g的水提物，冰片4.0g, 1,2-丙二醇3.0mL,薄荷醇3.0g,對羥基苯甲酸乙脂1.0g,乙醇胺0.2mL，余量為體積分數為50%的乙醇。搽劑的制備方法與實施例1相同。利用本配方制得的搽劑為棕黑色、有芳香氣味、分散均勻的液狀溶液；微生物限度檢查合格，透皮速率為1.6599。配方VI1:制備IOOmL的搽劑，組分如下:連翹200g的水提物，蒲公英IOOg的水提物，赤芍IOOg的水提物，冰片4.0g, 1,2-丙二醇10.0mL，薄荷醇2.0g，對羥基苯甲酸乙脂1.0g,乙醇胺0.2mL，余量為體積分數為50%的乙醇。搽劑的制備方法與實施例1相同。利用本配方制得的搽劑為棕黑色、有芳香氣味、分散均勻的液狀溶液；微生物限度檢查合格，透皮速率為0.4954。配方珊:制備IOOmL的搽劑，組分如下:連翹IOOg的水提物、蒲公英200g的水提物、赤芍IOOg的水提物；冰片4.0gU, 2-丙二醇7.0mL、薄荷醇1.0g、對羥基苯甲酸乙脂1.0g、乙醇胺0.lmL、余量為體積分數為50%的乙醇。搽劑的制備方法與實施例1相同。利用本配方制得的搽劑為棕黑色、有芳香氣味、分散均勻的液狀溶液；微生物限度檢查合格，透皮速率為0.6381。配方K:制備IOOmL的搽劑，組分如下:連翹IOOg的水提物，蒲公英IOOg的水提物，赤芍200g的水提物，冰片4.0g, 1,2-丙二醇4.0mL,薄荷醇0g，對羥基苯甲酸乙脂1.0g,乙醇胺0.3mL，余量為體積分數為50%的乙醇。的制備方法與實施例1相同。利用本配方制得的搽劑為棕黑色、有芳香氣味、分散均勻的液狀溶液；微生物限度檢查合格，透皮速率為0.5152。配方X:制備IOOmL的搽劑，組分如下:連翹IOOg的水提物，蒲公英200g的水提物，赤芍200g的水提物，冰片4.0g, 1,2-丙二醇6.0mL,薄荷醇4.0g,對羥基苯甲酸乙脂1.0g,乙醇胺0.2mL，余量為體積分數為50%的乙醇。搽劑的制備方法與實施例1相同。利用本 配方制得的搽劑為棕黑色、有芳香氣味、分散均勻的液狀溶液；微生物限度檢查合格，透皮速率為1.9303。將上述配方I X制成的搽劑對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌和無乳鏈球菌進行體外抑菌活性試驗，結果如表1-4所示。表1.配方I X的中藥制劑對金黃色葡萄球菌的抑菌作用
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^ 1-4^..*!> *4. 注:“ + ”表示有細菌生成，“一”表示無細菌生長。表2.配方I X的中藥制劑對大腸桿菌的抑菌作用
權利要求
1.治療奶牛乳房炎的中藥方劑，其特征在于按重量份計包括蒲公英100 200份、赤芍100 200份和連翹100 200份。
2.根據權利要求I所述治療奶牛房炎的中藥方劑，其特征在于按重量份計包括蒲公英200份、赤芍200份和連翹100份。
3.權利要求I或2所述治療奶牛乳房炎的中藥方劑的提取物。
4.權利要求3所述提取物的制備方法，其特征在于，具體步驟如下 a.蒲公英水提物的制備準確稱取配方量的蒲公英，切碎，然后加入水煎煮，過濾，收集濾液，再用體積分數為60 70%的乙醇沉淀，收集濾液，濾液回收乙醇，最后用體積分數為80 85%的乙醇沉淀，過濾，濾液回收乙醇，得蒲公英水提物； b.赤芍水提物的制備準確稱取配方量的赤芍，加水煎煮，收集煎煮液，得赤芍水提物； c.連翹水提物的制備準確稱取配方量的連翹，加入水煎煮，收集煎煮液，得連翹水提物； d.合并制得的蒲公英水提物、赤芍水提物和連翹水提物，得中藥方劑的提取物。
5.含有權利要求3所述提取物的制劑。
6.根據權利要求5所述的制劑，其特征在于所述制劑為搽劑。
7.根據權利要求6所述的制劑，其特征在于每IOOmL所述搽劑由如下組分組成，100 200g蒲公英的水提物、100 200g連翹的水提物、100 200g赤芍的水提物、冰片2 4g、丙二醇2 10mL、薄荷醇O 8g、對輕基苯甲酸乙脂I. Og,乙醇胺O. I O. 3mL,余量為體積分數50%的乙醇。
8.根據權利要求7所述的制劑，其特征在于每IOOmL所述搽劑由如下組分組成，IOOg蒲公英的水提物、200g赤芍的水提物、200g連翹的水提物、冰片4g、丙二醇6mL、薄荷醇4g、對羥基苯甲酸乙脂I. Og,乙醇胺O. 2mL，余量為體積分數50%的乙醇。
9.根據權利要求7所述的制劑，其特征在于每IOOmL所述搽劑由如下組分組成，150g蒲公英的水提物、IOOg赤芍的水提物、IOOg連翹的水提物、冰片4g、丙二醇9mL、薄荷醇5g、對羥基苯甲酸乙脂I. Og,乙醇胺O. 3mL，余量為體積分數50%的乙醇。
10.根據權利要求7所述的制劑，其特征在于每IOOmL所述搽劑由如下組分組成，IOOg蒲公英的水提物、150g赤芍的水提物、IOOg連翹的水提物、冰片4g、丙二醇6mL、薄荷醇4g、對羥基苯甲酸乙脂I. Og,乙醇胺O. lmL，余量為體積分數50%的乙醇。
全文摘要
本發明公開了一種治療奶牛乳房炎的中藥方劑及其提取物和制劑，中藥方劑按重量份計包括蒲公英100～200份、赤芍100～200份和連翹100～200份，配方合理，遵循了中醫對奶牛乳房炎的治則，并符合中藥“九畏和十八反”的配伍原則，各成份配伍后具有協同效應，能夠在體外抑制奶牛乳房炎的主要致病菌，如金黃色葡萄球菌、大腸桿菌和無乳鏈球菌；將中藥方劑制成提取物，并與中藥透皮促進劑配伍制成搽劑，制成的搽劑透皮性好，透皮速率達到1.6599～1.9303，對臨床型奶牛乳房炎和奶牛隱性乳房炎的治療效果好，對臨床型奶牛乳房炎治愈率達到80%，并且還具有穩定性好、安全性高、無神經系統毒性和無皮膚毒性等特點。
文檔編號A61K36/71GK103251691SQ20131019998
公開日2013年8月21日 申請日期2013年5月24日 優先權日2013年5月24日
發明者聶奎, 王裕文, 周作勇 申請人:西南大學