專利名稱：一種具有α-1,3-葡聚糖主鏈的毛蚶多糖及其制備方法和用途的制作方法
技術領域：
本發(fā)明具體涉及一種具有α -1，3-葡聚糖主鏈的毛蚶多糖及其制備方法和用途；屬于天然高分子領域。
背景技術：
毛酣(Areasubcrenata Lischke)為軟體動物門(Mollusca)雙殼綱(Bivalvia)列齒目(Taxodonta)紺科(Arcidae),屬海產(chǎn)經(jīng)濟貝類。毛紺常棲息在稍有淡水注入的淺海泥沙中，由于特殊的生長環(huán)境，所以肉質肥嫩、味道鮮美，營養(yǎng)價值也很高，可以提高機體的免疫能力，因此引起了國內外學者的關注，目前國內學者已從毛蚶中提取得到一些活性成分。海洋中存在著大量具有各種獨特性質和生理活性的天然產(chǎn)物，其特異的化學結構是陸生天然活性物質無法比擬的，許多新化學結構是陸生生物所沒有的，具有顯著的藥理作用。多糖是其中一大類海洋生物活性物質，由各種海洋生物中分離的多糖，從來源可分為海洋動物多糖、海藻多糖、海洋微生物多糖，已證明具有各種各樣的生物活性和藥用功能，如抗腫瘤、抗病毒、抗心血管疾病、抗氧化、免疫調節(jié)等。動物多糖具有抗腫瘤、提高免疫力作用。研究表明，玉足海參多糖對實驗小鼠乳腺癌、肺癌、黑色素瘤均具有顯著的生長抑制率。多糖抗癌的原因大多是激活了體內免疫系統(tǒng)，改善了機體免疫力。從皺紋盤鮑中提取的鮑魚多糖能夠明顯增加巨噬細胞吞噬能力，增強遲發(fā)超敏反應。這種免疫增強作用可能是其抗腫瘤作用的機理。此外還發(fā)現(xiàn)三角帆蛘多糖、文蛤多糖、鹿茸多糖、蠶蛹多糖、泥鰍多糖、烏賊墨、鯊魚軟骨素、海參等具有抗腫瘤和增強免疫力的活性。多糖應用于腫瘤治療將是一個新的迷人的領域。多糖的結構與其生物學功能密切相關，因此近些年具有生物學活性多糖結構的解析是糖化學領域的熱點，同時也是一個難點。
發(fā)明內容
本發(fā)明的目的是從毛蚶中提取出一種多糖，鑒定其化學結構并確定其具體的活性用途。毛蚶多糖重復單元結構如下:
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權利要求
1.一種具有α-1，3-葡聚糖主鏈的毛蚶多糖，其特征在于所述多糖的重復結構單元中含有I — 3、1 — 4及I — 6三種糖苷鍵，其中主鏈為I — 3糖苷鍵，側鏈由I — 4及I — 6兩種糖苷鍵組成，糖殘基為α構型，其相對分子量為8.5X105Da，比旋度 +135° (c 0.1, H2O); 2、根據(jù)權利要求1所述的一種具有α _1，3-葡聚糖主鏈的毛蚶多糖，其特征在于: 所述的重復結構單元結構如下:
2.根據(jù)權利要求1所述的由毛蚶提取的多糖的制備方法，其特征在于按如下步驟實現(xiàn): a、將新鮮毛蚶20kg去殼，收集肉體部分5kg，并用水漂洗干凈，紗布過濾以盡可能把水份除去，收集到的肉體部分用組織勻漿搗碎機進行勻漿，勻漿液中加入等體積的丙酮脫色；處理后的樣品用熱水提取，用正交實驗法確定提取最佳條件，離心收集上清液，旋轉蒸發(fā)濃縮至原溶液1/3體積后,加入1/4體積Sevag試劑,劇烈振蕩15min, 4000rpm離心15min,取上清，重復上述操作8次直到氯仿層無乳白色沉淀，減壓濃縮揮去有機溶劑；將去蛋白后的多糖提取液減壓濃縮至原體積的1/5，緩緩加入4倍體積的無水乙醇，4°C放置過夜，離心收集沉淀，將沉淀用丙酮洗滌3次，最后經(jīng)冷凍干燥得毛蚶粗多糖105g ； b、將毛紺粗多糖500mg配成100mg/mL的水溶液,過濾后經(jīng)過DEAE-52纖維素離子交換柱分離，用蒸餾水洗脫，流速1.0mL/min,每管5mL分部收集，苯酚-硫酸法逐管檢測糖含量，繪制洗脫曲線，收集10 26管，合并相同組分并冷凍干燥得到120mg多糖P-1 ； C、上述收集得到的組分P_130mg經(jīng)Sephacryl S-400柱層析(1.6cmX80cm)進一步純化，0.15mol/L的NaCl溶液洗脫，流速0.5mL/min，每管1.5mL分部收集，檢測方法同上，合并10 15管，透析脫鹽后冷凍干燥即得毛蚶多糖10mg。
3.由權利要求1所述的一種具有α-1，3-葡聚糖主鏈的毛蚶多糖在制備免疫調節(jié)劑、抗腫瘤藥物或抗氧化藥物中的應用。
全文摘要
本發(fā)明具體涉及一種具有α-1，3-葡聚糖主鏈的毛蚶多糖及其制備方法和用途；屬于天然高分子領域。本發(fā)明提供一種從毛蚶中提取得到的多糖，提取多糖的方法、該多糖的化學結構及其用途。利用化學分析及波譜技術對其結構進行分析，發(fā)現(xiàn)本發(fā)明中的毛蚶多糖的重復結構單元中含有1→3、1→4及1→6三種糖苷鍵，其中主鏈由1→3糖苷鍵組成，側鏈由1→4及1→6兩種糖苷鍵組成，糖殘基為α構型，其相對分子量為8.5×105Da，比旋度此多糖為首次從毛蚶中分離得到的一種結構新穎的葡聚糖。同時，本發(fā)明中的毛蚶多糖可以刺激小鼠脾淋巴細胞及巨噬細胞的增殖，表明本發(fā)明中的毛蚶多糖具有免疫增強作用。
文檔編號A61K31/715GK103193895SQ20131015878
公開日2013年7月10日 申請日期2013年5月3日 優(yōu)先權日2013年5月3日
發(fā)明者奚濤, 邢瑩瑩, 張?zhí)鹛? 陸園園 申請人:中國藥科大學