專利名稱：一種帕金森病治療效果的分析方法
技術領域：
: 本發明屬于檢測分析技術領域，涉及一種KCNQ鉀通道阻斷劑XE991對帕金森病治療效果的判定方法，尤其是XE991對多巴胺能神經元的調制作用及其對帕金森病治療效果的分析方法。
背景技術：
:隨著全社會人口老齡化進程的加劇，神經退行性疾病已成為嚴重危害人類健康的疾病之一。帕金森病( Parkinson’s disease，PD)是僅次于阿爾茨海默病的第二大神經系統退行性疾病，主要病理變化為黑質多巴胺能神經元丟失，多巴胺遞質含量減少，導致病人出現靜止性震顫、肌僵直、運動不能及姿勢反射障礙等多種臨床癥狀。迄今為止，雖然遺傳、環境和年齡等因素對H)發病均起到一定的作用，但其確切病因尚不完全清楚，更為嚴重的是，至今尚無成熟有效的藥物或方法能阻止或逆轉ro病情的發展。目前，在治療方面仍以左旋多巴替代療法為主，長期使用所帶來的癥狀波動和運動障礙等副作用不容忽視。由此對病人、看護者及社會帶來的情感、身體和經濟的負擔，越來越成為政府部門、醫療機構和生物制藥行業關注的重大問題。因此人們一直致力于從分子、細胞和整體水平上，多層次、多角度研究ro的發病機理，以尋求有效的預防和治療的藥物與方法。開發新型的能夠防治ro及具有神經保護作用的藥物并將檢測分析其治療效果將對保護人類健康具有重要的現實意義和應用經濟價值。XE991是一種水溶性的蒽酮，其化學名稱為10，10 二(4-吡啶甲基)-9 (IOH)-蒽酮，為第二代KCNQ鉀通道阻斷劑，KCNQ鉀通道作為電壓依賴鉀通道家族的重要成員，在維持神經元的興奮性和神經遞質的釋放等方面發揮重要的作用，XE991分子量為449Da，極易通過血腦屏障。目前，在阿爾茨海默病的治療中已被證實有助于增加乙酰膽堿的釋放，促進學習記憶，增強認知功能，但其在H)中是否具有防治作用和效果的分析如何尚未見報道。XE991的化學結構分子式為C26H2tlN2O15長期研究和大量實驗結果表明，XE991對黑質多巴胺能神經元電活動有明顯的調制作用，并由此影響H)的運動行為，故有望成為治療ro等神經退行性疾病的候選新藥，但目前尚未有文獻報道其在ro防治中的作用及其治療效果的檢驗檢測方法，所以探討一種XE991對帕金森病治療效果的檢測和分析方法很有社會價值和科學意義
發明內容
:本發明的目的在于克服現有技術存在的缺點，尋求涉及一種KCNQ鉀通道阻斷劑XE991對ro治療效果檢測分析技術方法，其機制與直接調制神經元電活動有關。為了實現上述目的，本發明涉及KCNQ鉀通道阻斷劑XE991對帕金森病的治療效果的分析，具體分析過程是:( I)條件準備:選用成年大鼠，體重200g 250g，放置于室溫20 24° C，50 60%相對濕度，12:12h晝夜循環光照條件下生活，自由飲水、取食，備用；選擇藥品為氟哌啶醇(haloperidol);選擇實驗儀器為動物腦立體定位儀；(2)治療實驗:①偏轉行為檢測:采用完全隨機分組方法將大鼠分成2組，對照組和XE991組；每組大鼠有6 7只，預先在黑質區埋置不銹鋼金屬套管；實驗當天將大鼠置于實驗室至少30min,以令其適應實驗環境，在大鼠清醒、自由活動的狀態下，按5mg/kg的劑量腹腔注射氟哌唳醇，注射完畢30 60min后,通過預先埋置的金屬套管向黑質內按1 μ mol/L, 5 μ L的劑量注射生理鹽水或ΧΕ991 ;觀察大鼠頭部是否出現偏轉以及偏轉的方向和角度，根據大鼠頭-背部直線與背-尾部直線所呈的夾角度數進行評分，夾角為0°或無固定的偏轉，O分；小于30°，1分；30 59°，2分；60 89°，3分；大于等于90°，4分，若大鼠頭部向注射對側偏轉記為正值，向同側偏轉記為負值，觀察時間為60min ；②趴桿行為檢測:利用趴桿實驗對大鼠僵直程度進行評價，按0.5mg/kg的劑量腹腔注射氟哌唳醇后30 60min,通過預先埋置的金屬套管向黑質內按1 μ mol/L, 5 μ L的劑量注射生理鹽水或ΧΕ991 ;用一根距離實驗臺高9cm、水平放置的圓柱狀金屬桿，將大鼠雙前肢輕置于金屬桿上，記錄大鼠雙前肢在金屬桿上保持靜止不動的時間，即為僵直潛伏期，當大鼠的前肢在金屬桿上移動或爬下時即停止計時，最長的僵直潛伏期定為300s，每IOmin記錄一次,共記錄60min ；(3)、效果分析:①檢測的KCNQ鉀通道阻斷劑XE991改善氟哌啶醇誘導的H)僵直大鼠的姿勢行為見表2 ;表2:XE991對氟哌啶醇誘導的H)僵直大鼠頭部偏轉角度中位數評分影響
權利要求
1.一種帕金森病治療效果的分析方法，其特征在于涉及KCNQ鉀通道阻斷劑XE991對帕金森病的治療效果的分析，具體分析過程是: (1)條件準備: 選用成年大鼠，體重200g 250g，放置于室溫20 24° C，50 60%相對濕度，12:12h晝夜循環光照條件下生活，自由飲水、取食，備用；選擇藥品為氟哌啶醇；選擇實驗儀器為動物腦立體定位儀； (2)治療實驗: ①偏轉行為檢測:采用完全隨機分組方法將大鼠分成2組，對照組和XE991組；每組大鼠有6 7只，預先在黑·質區埋置不銹鋼金屬套管；實驗當天將大鼠置于實驗室至少30min,以令其適應實驗環境，在大鼠清醒、自由活動的狀態下，按5mg/kg的劑量腹腔注射氟哌唳醇，注射完畢30 60min后,通過預先埋置的金屬套管向黑質內按I μ mol/L, 5 μ L的劑量注射生理鹽水或ΧΕ991 ;觀察大鼠頭部是否出現偏轉以及偏轉的方向和角度，根據大鼠頭-背部直線與背-尾部直線所呈的夾角度數進行評分，夾角為0°或無固定的偏轉，O分；小于30°，1分；30 59°，2分；60 89°，3分；大于等于90°，4分，若大鼠頭部向注射對側偏轉記為正值，向同側偏轉記為負值，觀察時間為60min ； ②趴桿行為檢測:利用趴桿實驗對大鼠僵直程度進行評價，按0.5mg/kg的劑量腹腔注射氟哌啶醇后30 60min，通過預先埋置的金屬套管向黑質內按lymol/LAyL的劑量注射生理鹽水或XE991 ;用一根距離實驗臺高9cm、水平放置的圓柱狀金屬桿，將大鼠雙前肢輕置于金屬桿上，記錄大鼠雙前肢在金屬桿上保持靜止不動的時間，即為僵直潛伏期，當大鼠的前肢在金屬桿上移動或爬下時即停止計時，最長的僵直潛伏期定為300s，每IOmin記錄一次，共記錄60min ； (3)、效果分析: ①檢測的KCNQ鉀通道阻斷劑XE991改善氟哌啶醇誘導的H)僵直大鼠的姿勢行為見表·2 ； 表2:XE991對氟哌啶醇誘導的H)僵直大鼠頭部偏轉角度中位數評分影響
全文摘要
本發明屬于檢測分析技術領域，涉及一種帕金森病治療效果的分析方法，選用成年大鼠放置于室溫條件下生活，選擇藥品為氟哌啶醇；選擇實驗儀器為動物腦立體定位儀；將大鼠分成2組，對照組和XE991組；在大鼠清醒、自由活動的狀態下，腹腔注射氟哌啶醇后，通過金屬套管向黑質內注射生理鹽水或XE991；觀察大鼠頭部是否出現偏轉以及偏轉的方向和角度，根據大鼠頭-背部直線與背-尾部直線所呈的夾角度數進行評分；將大鼠雙前肢輕置于金屬桿上，記錄大鼠雙前肢在金屬桿上的僵直潛伏期，實驗結果說明XE991對氟哌啶醇誘導的PD僵直大鼠有治療效果，實現帕金森病治療效果的分析；其檢測分析工藝簡單，原理可靠，使用的設備儀器技術成熟，檢測數據準確，檢測環境友好。
文檔編號A61K49/00GK103143036SQ201310066449
公開日2013年6月12日 申請日期2013年3月4日 優先權日2013年3月4日
發明者謝俊霞, 姜宏, 石麗敏, 宋寧 申請人:青島大學