專利名稱：水飛薊賓二偏琥珀酸酯的活性異構體的制作方法
技術領域：
本發明屬醫藥技術領域，涉及水飛薊賓二偏琥珀酸酯的活性異構體及其制備方法，還涉及一種包含該活性異構體的藥物組合物。本發明的藥物組合物具有期望的良好性質。
背景技術：
近年來，隨著人們生活水平的提高和飲食結構的變化，我國脂肪肝發病率己接近乙肝病毒攜帶率，并呈明顯上升趨勢。其中，30 40歲的男性是脂肪肝患者大軍中的“主力”，基本占到全部脂肪肝患者的1/4。據估計，現在脂肪肝發病率較20世紀80年代以前增加了 30倍左右。據報道15%脂肪肝患者會發展成肝硬化，3%的脂肪肝患者會死于肝衰竭。因此脂肪肝及早預防和治療具有非常重要的意義。肝炎是指由于不同病因的肝臟炎癥，日常生活中病毒性肝炎最常見，它具有發病率高，病程長，病勢反復性強，危害性大的特點，若不進行及時治療，有轉變為肝硬化及肝癌的可能。我國又是肝炎高發的國家，據統計，我國有超過1.2億人感染乙肝病毒，慢性乙肝病人約3000萬，3800萬人攜帶丙肝病毒，僅從乙肝病毒攜帶者的數字來說，差不多占國民十分之一。目前，雖然肝病藥物種類很多，但尚無一種藥物能真正殺滅乙肝病毒。目前多采用抑制病毒復制、或改善癥狀、控制病情發展兩種治療思路。前者雖然能快速抑制病毒復制，但存在長期用藥風險。如肝病一線藥物拉米夫定雖可以將乙肝病毒抑制在較低水平(DNA〈103拷貝/ml)，但需要長期用藥(通常2_3年)，并不能隨意停用，不僅費用高昂，而且長期用藥直接導致部分患者乙肝病毒出現耐藥變異株，病情更趨復雜。因此，研制一種能有效改善肝病癥狀、適合長期用藥、且價格合理的藥物，用于肝臟疾病的預防和治療，符合當前的國情，滿足臨床需要。水飛薊，菊科，是優良的護肝植物，其主要成分為水飛薊賓(silybin)。藥理實驗證明，水飛薊賓有保護肝細胞膜，改善肝功能的作用，預防多種肝臟毒物所致的肝損傷，促進肝細胞再生，主要用于治療各種急慢性肝炎、初期肝硬化和肝中毒等癥。水飛薊賓非常難溶于水，限制了其口服吸收，成鹽后水溶性明顯增加。目前，主要研究集中在水飛薊賓葡甲胺鹽和水飛薊賓磷脂復合物。西利賓安片的主要成分即是水飛薊賓葡甲胺，但仍存生物利用度不高的缺點。水林佳的主要成分是水飛薊賓卵磷脂復合物，雖然通過改善脂溶性在一定程度上提高了生物利用度，但是其水溶性仍較差。影響體內生物利用度的因素包括劑型因素和生理因素兩個方面:劑型因素如藥物的脂溶性、水溶性和PKa值，藥物的劑型特性(如崩解時限、溶出速率)及一些工藝條件的差別；生理因素包括胃腸道內液體的作用，藥物在胃腸道內的轉運情況，吸收部位的表面積與局部血流，藥物代謝的影響，腸道菌株及某些影響藥物吸收的疾病等。由此，一個藥物在體內的吸收情況不僅與藥物本身的脂溶性有關，而且水溶性也是一關鍵參數。
水飛薊賓二偏琥珀酸酯鈉鹽是一種水飛薊賓的衍生物，其在水溶性方面顯著優于水飛薊賓，據信其具有降低血清中游離脂肪酸和甘油三酯的含量、調節磷脂代謝的紊亂、清除氧自由基、抑制脂質過氧化、穩定肝細胞膜、減輕脂肪變性、對抗肝細胞壞死的功能，可用于鬼筆鵝膏引起的急性肝中毒的治療，還可用于急性、慢性肝損傷的治療，以及用于脂肪肝和酒精肝所造成的肝功能異常的恢復。CN101302212A公開了水飛薊賓二偏琥珀酸酯及其鹽類的制備方法和用途，這種據說有效的制備方法是使水飛薊賓在適合的有機溶劑中與丁二酸酐反應合成得到水飛薊賓丁二酯單甲酯，然后在特定的介質中與氫氧化鈉反應生成氟苯尼考丁二酸酯鈉鹽而實現的。CN101244041A公開了一種用于預防及治療急性肝損傷的藥物及其制備方法。該發明專利文獻具體涉及一種成分為水飛薊賓丁二酸鈉凍干粉針的制備方法，包括以下步驟:(1)將水飛薊賓丁二酸鈉溶解于注射用水中，充分攪拌成溶液；(2)于上述溶液加入甘露醇或乳糖使溶解；(3)將上述溶解用活性炭加熱脫色并用鹽酸溶液或氫氧化鈉溶液調節PH7 9，過濾；(4)濾液無菌分裝，冷凍干燥，即得。盡管人們在使用水飛薊賓產品例如水飛薊賓或其衍生物如水飛薊賓二偏琥珀酸酯或其鹽等方面，然而人們仍然期待有一種改進的方法來治療或預防肝臟等與水飛薊賓或其衍生物所治療的相關疾病，特別是期待有一種改進的方法使用水飛薊賓二偏琥珀酸酯或其鹽來治療與肝臟相關的疾病。
發明內容
本發明的目的在于提供一種改進的方法來治療或預防肝臟等與水飛薊賓或其衍生物所治療的相關疾病，特別是期待有一種改進的方法使用水飛薊賓二偏琥珀酸酯(亦可稱為水飛薊賓二琥珀酸半酯)或其鹽來治療與肝臟相關的疾病。本發明人出人意料的發現，使用水飛薊賓二偏琥珀酸酯的活性異構體顯示出積極的生物和/或物理和/或化學方面的效果。本發明基于此發 現而得以完成。因此，本發明第一方面提供了一種化合物，其為兩種或兩種以上的以下式I化合物異構體的組合:.
權利要求
1.一種化合物，其為兩種或兩種以上的以下式I化合物異構體的組合:
2.根據權利要求1的化合物，其中所述金屬離子是堿金屬離子或者堿土金屬離子；或者，其中X各自獨立地表示H、鈉離子、鉀離子、鋰離子、鎂離子、或鈣離子。
3.根據權利要求1至2的化合物，其中包含兩種式I化合物的異構體，所述兩種異構體占該化合物總重量的95%以上。
4.根據權利要求1至3的化合物，照高效液相色譜法測定，其在色譜圖中按出峰先后順序依次出現稱之為第一色譜峰和第二色譜峰的兩個主要色譜峰，所述第一色譜峰和第二色譜峰兩者的峰面積之和占總峰面積的95%以上。
5.根據權利要求1至4的化合物，照高效液相色譜法測定，其在色譜圖中按出峰先后順序依次出現稱之為第一色譜峰和第二色譜峰的兩個主要色譜峰，其中所述第一色譜峰峰面積是所述第二色譜峰峰面積的0.5^1.5倍。
6.根據權利要求5的化合物，其中所述第一色譜峰和第二色譜峰在所述高效液相色譜法測定條件下二者的分離度大于0.8。
7.根據權利要求1至6的化合物，其中高效液相色譜法具有使所述第一色譜峰和第二色譜峰能夠達到分離度大于0.8的高效液相色譜法測定條件。
8.根據權利要求1至7的化合物，其中所述高效液相色譜法測定是按包括如下“⑴色譜條件與系統適用性試驗”方式進行的: (i)色譜條件與系統適用性試驗:用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱，以0.05mol/L磷酸二氫鈉溶液(用磷酸調pH值至4.0)—甲醇(50:50)為流動相，檢測波長為288nm，柱溫為30° C ;取參比品水飛薊賓適量，加流動相溶解并稀釋制成每Iml中含水飛薊賓200 μ g的溶液，作為參比品貯備液；另取該參比品貯備液用流動相稀釋成20 μ g/ml的溶液，作為系統適用性試驗溶液，取該系統適用性試驗溶液20 μ I注入液相色譜儀，記錄色譜圖；該色譜圖中按出峰先后順序依次出現稱之為A峰和B峰的兩個主要色譜峰，調整A峰的保留時間在6-9min之間，并且A峰和B峰的分離度應大于1.0 (例如大于1.2，例如大于1.5,例如大于2)。
9.根據權利要求1至8的化合物，其中色譜純度和峰面積比測定的一個典型實例是按包括如下“(ii)色譜純度和峰面積比測定法”方式進行的: ( )色譜純度和峰面積比測定法:取本發明化合物適量，加流動相溶解并制成濃度為.0.5mg/ml的溶液，作為供試品溶液；精密量取1ml，置IOOml量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，作為對照溶液；采用本發明所述(i)色譜條件與系統適用性試驗中的方法，取對照溶液20 μ I注入液相色譜儀，調節檢測靈敏度，使主成分F色譜峰的峰高約為滿量程的20% ；精密量取供試品溶液和對照溶液各20 μ 1，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖至F色譜峰保留時間的2倍；供試品溶液色譜圖中任何小于對照溶液色譜圖中F色譜峰面積0.05倍的色譜峰忽略不計；記錄供試品溶液色譜圖中主峰E峰和F峰的峰面積以及各雜質峰面積，E峰和F峰的峰面積之和除以全部峰面積之和的百分數，即為本發明化合物色譜純度，另外以E峰峰面積除以F峰峰面積可以算得E峰和F峰的峰面積比。
10.根據權利要求1至9的化合物，照高效液相色譜法測定，以水飛薊賓為參比品，并以水飛薊賓的A峰作為計算相對保留時間的參比峰，本發明化合物的第一色譜峰的相對保留時間(RRt)為1.7 2.4，本發明化合物的第二色譜峰的相對保留時間(RRt)為1.85 2.55。
11.根據權利要求1至10的化合物，照高效液相色譜法測定，以水飛薊賓為參比品，并以水飛薊賓的A峰作為計算相對保留時間的參比峰，本發明化合物的第一色譜峰的相對保留時間(RRt)為1.7 2.4 (例如1.8 2.3，例如1.85 2.25，例如1.9 2.2，例如1.95 2.15)，本發明化合物的第二色譜峰的相對保留時間(RRt)為1.85 2.55(例如1.95 2.45，例如2.(Γ2.4，例如2.05^2.35，例如2.Γ2.3)，所述高效液相色譜法測定相對保留時間是按包括如下的方式進行的: (i)色譜條件與系統適用性試驗:用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱，以.0.05mol/L磷酸二氫鈉溶液(用磷酸調pH值至4.0)—甲醇(50:50)為流動相，檢測波長為288nm，柱溫為30° C ;取參比品水飛薊賓適量，加流動相溶解并稀釋制成每Iml中含水飛薊賓200 μ g的溶液，作為參比品貯備液；另取該參比品貯備液用流動相稀釋成20 μ g/ml的溶液，作為系統適用性試驗溶液，取該系統適用性試驗溶液20 μ I注入液相色譜儀，記錄色譜圖；該色譜圖中按出峰先后順序依次出現稱之為A峰和B峰的兩個主要色譜峰，調整A峰的保留時間在6-9min之間，并且A峰和B峰的分離度應大于1.0 (例如大于1.2，例如大于1.5,例如大于2)； (iii)相對保留時間(RRt)的測定:取本發明化合物適量，加流動相溶解并制成濃度為0.5mg/ml的溶液，作為供試品貯備液；精密量取供試品貯備液1ml，置IOml量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，制成包含本發明化合物濃度約為50 μ g/ml的溶液，作為供試品測試溶液I ;另精密量取供試品貯備液Iml和參比品貯備液2.5ml，置IOml量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，制成包含本發明化合物和參比品水飛薊賓濃度分別約為50μ g/ml的溶液，作為供試品測試溶液II ;精密量取20 μ I的供試品測試溶液II，注入液相色譜儀，記錄色譜圖至F色譜峰保留時間的2倍；記錄色譜圖中由水飛薊賓產生的兩個主要色譜峰A峰和B峰以及由本發明化合物產生的兩個主要色譜峰E峰和F峰的保留時間，用E峰的保留時間除以A峰的保留時間即為E峰的相對保留時間，用F峰的保留時間除以A峰的保留時間即為F峰的相對保留時間。
12.根據權利要求1至11的化合物,其為以下式I化合物中由12-位和13-位手性碳所形成的兩種異構體的組合:
13.根據權利要求1至12的化合物，其為以下式I化合物中由12-位和13-位手性碳所形成的兩種異構體的組合:
14.根據權利要求1至13的化合物，其為以下式I化合物中由12-位和13-位手性碳所形成的兩種異構體的組合:
15.一種藥物組合物，其中包含權利要求1-14任一項所述化合物以及任選的藥用輔料。
16.根據權利要求15的藥物組合物，其中包含作為活性成分的以下式I化合物中由.12-位和13-位手性碳所形成的兩種異構體以及任選的藥用輔料:
17.根據權利要求15至16的藥物組合物，其中包含作為活性成分的以下式I化合物中由12-位和13-位手性碳所形成的兩種異構體以及任選的藥用輔料:
18.根據權利要求15至17的藥物組合物，其中包含作為活性成分的以下式I化合物中由12-位和13-位手性碳所形成的兩種異構體以及任選的藥用輔料:
19.根據權利要求15至18的藥物組合物，，其照高效液相色譜法測定，不計輔料色譜峰，在色譜圖中按出峰先后順序依次出現稱之為第一色譜峰(其在本發明中可簡稱為E峰或Ε)和第二色譜峰(其在本發明中可簡稱為F峰或F)的兩個主要色譜峰，所述第一色譜峰和第二色譜峰兩者的峰面積之和占總峰面積的95%以上。
20.制備權利要求1至14任一項所述化合物的方法，其包括以下步驟: (a)酯化步驟:使下式所示水飛薊賓:
21.權利要求1至14任一項所述化合物在制備用于治療、改善或預防肝臟疾病的藥物中的用途。
22.根據權利要求21的用途，其中所述肝臟疾病選自:因鬼筆鵝膏引起的急性肝中毒，急慢性肝炎，初期肝硬化，中毒性肝損害，脂肪肝所致肝功能異常，酒精肝所致肝功能異常。
全文摘要
本發明涉及水飛薊賓二偏琥珀酸酯的活性異構體。具體地說，本發明提供了一種化合物，其為兩種或兩種以上的以下式I化合物異構體的組合其中各個X各自獨立地表示H或金屬離子。本發明還提供了制備所述化合物的方法以及所述化合物的制藥用途。本發明化合物具有積極的生物和/或物理和/或化學方面的效果。
文檔編號A61K31/357GK103172622SQ201310057129
公開日2013年6月26日 申請日期2013年2月22日 優先權日2013年2月22日
發明者曾韶輝, 王偉, 梅丹, 傅衛國, 甘劍征 申請人:西安安健藥業有限公司