一種抗血栓的中藥制劑及其的新用途
【專利摘要】本發明公開了一種抗血栓的中藥制劑及其的新用途。該抗血栓的中藥制劑采用益母草、紅花、人參、白芍等中藥組成。上述中藥原料藥通過煎煮、水蒸氣蒸餾、醇沉等方法，使其有效成分充分發揮作用。本發明制劑具有顯著的降低血液高凝狀態、減少血栓形成及降低繼發性纖溶的作用。
【專利說明】一種抗血栓的中藥制劑及其的新用途
【技術領域】
[0001 ] 本發明涉及一種中藥制劑及其新用途，特別是涉及一種中藥組合物及其在制備抗血栓藥物中的應用。
【背景技術】
[0002]有研究表明，惡性腫瘤并發靜脈血栓的比率可達2.74%~12.1%,其中以胰腺癌、肺癌NSCLC和胃腸癌的發生率最高，不但影響患者的生活質量，而且延誤抗腫瘤治療。Donati (RicciS,Ant onuz zoA,Gall L，et al.Gemcitabine monotherapy in eld erlypatient s with advanced non small cell lung cancer:a maticen ter phase study.Lung Cancer, 2000，27(2):7580)研究顯示:在腫瘤患者的死亡原因中，血栓及相關并發癥僅次于腫瘤本身位居第二。靜脈血栓栓塞、肺栓塞和輕度的DIC的發生是常見的表現(Rickies FR, Levine M, Edwards RL.Hemostatic alterations in cancer patients.Cancer Metastasis Rev.1992;11:237-248.Buller HR, van Doormaal FF, van SluisGL, Kamphuisen PW.Cancer and thrombosis: from molecular mechanisms to clinicalpresentations.J Thromb Haemost.2007; 5 (Suppll):246_254)。凝血紊亂是惡性腫瘤疾病常見的并發癥，主要表現為血液高凝導致血栓形成。本發明口服液，在臨床應用中具有治療血栓的作用。
【發明內容】
[0003]本發明的目的在 于提供一種抗血栓作用的中藥制劑。
[0004]本發明的目的在于公開一種中藥制劑在抗血栓作用中的新用途。
[0005]本發明的目的在于公開一種中藥制劑在減少肺臟、肝臟及腸系膜組織血栓的應用。
[0006]本發明的目的是通過如下技術方案實現的:
[0007]本發明所述中藥制劑采用如下原料藥制成(按重量份計):
[0008]益母草100-180重量份紅花10-40重量份花椒10_40重量份
[0009]水蛭10-40重量份當歸20-60重量份蘇木10_40重量份
[0010]三棱10-40重量份兩頭尖10-40重量份川芎10_40重量份
[0011]降香10-40重量份香附10-40重量份人參30_75重量份
[0012]高良姜10-40重量份姜黃8-25重量份沒藥10_40重量份
[0013]苦杏仁10-40重量份大黃40-90重量份紫蘇子10_40重量份
[0014]小茴香10-40重量份桃仁10-40重量份五靈脂10_40重量份
[0015]蛇蟲10-40重量份鱉甲100-180重量份丁香10_40重量份
[0016]延胡索10-40重量份白芍20-60重量份蒲黃10_40重量份
[0017]乳香10-40重量份干漆10-40重量份吳茱萸10_40重量份
[0018]阿魏10-40重量份肉桂10-40重量份艾葉10_40重量份[0019]熟地黃20-60重量份麝香10-40重量份。
[0020]本發明所述中藥制劑采用如下原料藥制成(按重量份計):
[0021]益母草130-150重量份紅花15-20重量份花椒15_20重量份
[0022]水蛭15-20重量份當歸30-40重量份蘇木15_20重量份
[0023]三棱15-20重量份兩頭尖15-20重量份川芎15_20重量份
[0024]降香15-20重量份香附15-20重量份人參50_55重量份
[0025]高良姜15-20重量份姜黃8-15重量份沒藥15_20重量份
[0026]苦杏仁20-30重量份大黃60-80重量份紫蘇子15_20重量份
[0027]小茴香20-30重量份桃仁20-30重量份五靈脂15_20重量份
[0028]虻蟲15-20重量份鱉甲130-150重量份丁香15_25重量份
[0029]延胡索15-20重量份白芍30-40重量份蒲黃15_20重量份 [0030]乳香15-20重量份干漆15-20重量份吳茱萸15_20重量份
[0031]阿魏15-20重量份肉桂15-20重量份艾葉15_20重量份
[0032]熟地黃30-40重量份。
[0033]所述中藥制劑的原料藥優選為:
[0034]益母草140重量份紅花17.5重量份花椒(炭)17.5重量份
[0035]水蛭(制)17.5重量份當歸35重量份蘇木17.5重量份
[0036]三棱(醋炙)17.5重量份兩頭尖17.5重量份川芎17.5重量份
[0037]降香17.5重量份香附(醋炙)17.5重量份人參52.5重量份
[0038]高良姜17.5重量份姜黃10.5重量份沒藥(醋炙)17.5重量份
[0039]苦杏仁(炒)26.25重量份大黃70重量份紫蘇子17.5重量份
[0040]小茴香(鹽炒)26.25重量份桃仁26.25重量五靈脂(醋炎)17.5重量份
[0041]虻蟲17.5重量份鱉甲140重量份丁香21.25重量份
[0042]延胡索(醋炙)17.5重量份白芍35重量份蒲黃(炭)17.5重量份
[0043]乳香(醋炙)17.5重量份干漆(煅)17.5重量份
[0044]吳茱萸(甘草水炙)17.5重量份
[0045]阿魏17.5重量份肉桂17.5重量份艾葉(炙)17.5重量份
[0046]熟地黃35重量份。
[0047]以原料藥量計算，相當于IOg原料藥的所述組合物中大黃素、大黃酚的總量不少于 0.28mg。
[0048]上述中藥原料可按常規工藝加入常規輔料制成片劑、膠囊、口服液、丸劑、顆粒劑等臨床可接受的劑型。
[0049]以生藥材(原料藥)量計算，相當于IOg生藥的所述組合物制劑中大黃素、大黃酚的總量不得少于0.28mg。
[0050]人參皂苷Rgl、Re總量計不低于100 μ g、人參皂苷Rb1不低于50 μ g ;水蘇堿不低于50 μg ;吳茱萸堿、吳茱萸次堿總量計不低于100 μ g ;芍藥苷50 μ g。
[0051]中藥組合物的口服液制備方法，其特征在于該方法包括如下步驟:
[0052]步驟1:鱉甲加水煎煮2-4次，每次2-4小時，合并提取液，濾過，濾液濃縮為鱉甲煎液；[0053]步驟2:當歸、川彎、姜黃、高良姜、肉桂、丁香、阿魏、降香水蒸氣蒸餾提取5-7小時，收集揮發油與蒸餾液，
[0054]步驟3:步驟2水蒸氣蒸懼提取剩余的藥洛與其余原藥材加水煎煮2-4次,每次1-3小時,合并煎液,濾過,濾液濃縮至清膏I,
[0055]步驟4:步驟3的清膏I加乙醇至含醇量達60-80%，調節pH值為7.5~8.0，靜置，濾過,濾液回收乙醇,加水得清膏2，
[0056]步驟5:步驟4中的清膏2步驟I的鱉甲煎液，煮沸，放冷，加步驟2的揮發油與蒸餾液及口服液的常規輔料，加水攪拌使溶解，靜置，濾過，濾液經常規工藝制成口服液；
[0057]所述步驟2和/或4的靜置為:0~5°C靜置；
[0058]所述步驟5中加入口服液的常規輔料為:1-5重量份聚山梨酯80、1_5重量份甜蜜素。
[0059]所述制備方法還包括步驟6:大黃素、大黃酚的總量的含量測定；和/或下述鑒別A、B、C任——種或幾種。
[0060]本發明還提供該組合物口服液的制備方法，該方法包括如下步驟:
[0061]鱉甲加水煎煮2-4次，每次2-4小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至適量；當歸、川芎、姜黃、高良姜、肉桂、丁香、阿魏、降香水蒸氣蒸餾提取5-7小時，收集揮發油與蒸餾液適量，藥渣及其余二十五味 加水煎煮2-4次，每次1-3小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度約1.15 (50~60°C)的清膏，加乙醇使含醇量達60-80%，調節pH值為7.5~8.0，靜置(O~5°C) 10-40小時，濾過，濾液回收乙醇，加水至相對密度約1.06 (50~60°C )的清膏，再加入鱉甲煎液，煮沸10-30分鐘，放冷，加揮發油與蒸餾液及1-5重量分聚山梨酯80、1-5重量分甜蜜素,加水攪拌使溶解,靜置(O~5°C) 24~48小時,濾過,濾液加水至1000體積份，灌封，滅菌，即得；所述體積份與重量份的關系為g/ml。
[0062]所述中藥口服液的制備方法優選為:
[0063]以上三十四味，鱉甲加水煎煮3次，每次3小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至適量；當歸、川芎、姜黃、高良姜、肉桂、丁香、阿魏、降香水蒸氣蒸餾提取6小時，收集揮發油與蒸餾液適量，藥渣及其余二十五味加水煎煮3次，每次2小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度約1.15 (50~60°C)的清膏，加乙醇使含醇量達60-80%，調節pH值為7.5~8.0，靜置24小時，濾過，濾液回收乙醇，加水至相對密度約1.06 (50~60°C)的清膏，再加入鱉甲煎液，煮沸20分鐘，放冷，加揮發油與蒸餾液及2重量分聚山梨酯80、甜蜜素2重量分，加水攪拌使溶解，靜置24~48小時，濾過，濾液加水至1000體積份，灌封，滅菌，即得。
[0064]本發明所述組合物口服液的制備方法，該方法包括如下步驟:
[0065]選取如下原料藥:
[0066]益母草140g紅花17.5g花椒(炭)17.5g
[0067]水蛭(制)17.5g當歸35g蘇木17.5g
[0068]三棱(醋炙)17.5g兩頭尖17.5g川芎17.5g
[0069]降香17.5g香附(醋炙)17.5g人參52.5g
[0070]高良姜17.5g姜黃10.5g沒藥(醋炙)17.5g
[0071]苦杏仁(炒)26.25g大黃70g紫蘇子17.5g
[0072]小茴香(鹽炒)26.25g桃仁26.25g五靈脂(醋炙)17.5g[0073]虻蟲17.5g 鱉甲 140g 丁香 21.25g
[0074]延胡索(醋炙)17.5g白芍35g蒲黃(炭)17.5g
[0075]乳香(醋炙)17.5g干漆(煅)17.5g吳茱萸(甘草水炙)17.5g
[0076]阿魏17.5g 肉桂 17.5g 艾葉(炙)17.5g
[0077]熟地黃35g ；
[0078]鱉甲加加9倍水煎煮3次，每次3小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至160_200ml ;當歸、川；、姜黃、高良姜、肉桂、丁香、阿魏、降香加12倍水，水蒸氣蒸餾提取6小時，收集揮發油與蒸餾液40-60ml，藥渣及其余二十五味加水煎煮三次，第一次加水12倍量煎煮2小時，第二、三次分別加水10倍、8倍，煎煮各1.5小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至50~60°C相對密度為1.15的清膏，加乙醇使含醇量達70%，調節pH值為7.5~8.0，O~5°C靜置20-30小時,濾過,濾液回收乙醇,加水至50~60°C相對密度為1.06的清膏，再加入鱉甲煎液，煮沸20分鐘，放冷，加揮發油與蒸餾液及聚山梨酯80、甜蜜素，加水攪拌使溶解，O~5°C靜置24~48小時,濾過,濾液加水,灌封，105°C滅菌60min。
[0079]本發明進一步提供上述的中藥制劑在制備抗血栓藥物中的應用。所述血栓為抑制靜脈血栓或微血栓。
[0080]本發明進一步提供上述的中藥制劑在制備降低血液高凝狀態或降低微血栓形成后繼發性纖溶亢進藥物中的應用。
[0081 ] 本發明口服液在大鼠血栓模型中具有顯著的降低血液高凝狀態、減少血栓形成及降低繼發性纖溶的作用。在高凝狀態中會存在繼發性纖溶亢進，從而表現為FDP和D- 二聚體水平的升高。本研究中，我們觀察到兩個治療組的共30個數據中約83.3% (10/12)的數據與對照組相比有明顯差異。通過組織病理學分析，在對照組及兩個治療組中均發現明顯的血管微血栓形成。我們觀察到給予本發明服液灌胃處理后兩個治療組大鼠中的肺臟、肝臟及腸系膜組織中微血栓的數量均明顯減少。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0082]圖1:各組大鼠血小板檢測值；
[0083]*P<0.05與空白組比較；ΛΡ〈0.05與對照組比較；ΑΡ〈0.05與治療組A比較
[0084]圖2-1:正常大鼠肺臟顯微鏡圖；
[0085]圖2-2:大鼠肺臟微血栓顯微鏡圖；
[0086]圖2-3:正常大鼠肝臟顯微鏡圖；
[0087]圖2-4:大鼠肝臟微血栓顯微鏡圖；
[0088]圖2-5:正常大鼠腸系膜顯微鏡圖；
[0089]圖2-6:大鼠腸系膜微血栓顯微鏡圖
[0090]圖3:大鼠肝、肺、腸系膜組織內高倍視野下微血栓數量
[0091]*Ρ<0.05與對照組比較
[0092]實驗例 1:
[0093]I材料與方法
[0094]1.1 動物
[0095]使用體質量為180_220g的雄性SD大鼠，7~9周齡(由中國醫學科學院實驗動物中心提供)。在溫度控制室內飼養(室溫24±1°C，濕度不得低于40%)，保持12h的明/暗循環，所有大鼠均提供飲水及食物。空白組、對照組、治療A組(造模后給予實施例1 口服液)和治療B組(造模前3天及造模后均給予實施例1 口服液)各包括10只大鼠。
[0096]1.2實驗儀器與試劑
[0097]角叉菜膠(SIGMAALDAICH，USA),電子天平(Sartorius，型號:BS423S)，顯微鏡，全自動血液分析儀(型號:LH750,美國Beckman公司)；全自動凝血分析儀(型號:Acl_Top,美國IL公司)。
[0098]1.3實驗動物分組
[0099]將SD大鼠隨機分為4組，即空白組、對照組、治療A組和治療B組，每組10只。
[0100]1.4制作大鼠血栓模型
[0101]取SD雄性大鼠，角叉菜膠用生理鹽水配制成2% (20mg/mL)濃度,皮下注射(20mg/kg)，注射部位為后肢足跖部。注射后置于室溫下，多數動物尾尖部出現暗紅色血栓形成區，并逐漸向尾根部擴大。48~72h后局部從發紺變為黑色，隨后尾部干細斷落。評價:24h實驗動物尾部小靜脈和毛細血管內含有大量纖維素和少量白細胞及血小板，血管內皮細胞核濃縮呈骰子狀，血管內壁中性粒細胞靠邊。72h可見較大血管呈炎癥改變，伴有混合性血栓形成。
[0102]1.5實驗方案
[0103]4組大鼠均觀察72小時。觀察期間，治療A組大鼠皮下注射角叉菜膠后72h內均給予實施例1 口服液灌胃處理(2mL/100g體質量，I次/8h)。治療B組大鼠在注射角叉菜膠前72h即給予實施例1 口服液灌胃處理(2mL/100g體質量，I次/8h)，注射角叉菜膠后72h內亦給予實施例1 口服液灌胃處理(2mL/100g體質量，I次/8h)。分別在注射角叉菜膠后24h、48h、72h三個時間點取血標本行血常規、凝血(PT、APTT, INR、FIB、PTA), D- 二聚體含量、纖維蛋白原(fibrinogen, FIB)、纖維蛋白降解產物(fibrin degradation product,FDP)檢查。在注射角叉菜膠后72h分離出大鼠的肺臟、肝臟及腸系膜組織使用10%的福爾馬林固定。標本進行脫水后再用石蠟包埋。分別取大鼠左肺上葉、右半肝部及中段小腸系膜進行切片，制成切片后(4 μ m厚)用蘇木精和伊紅染色并進行組織病理學分析，10倍鏡下尋找并選取微血栓數量最多的視野，在40倍鏡下計數微血栓個數。由于標本或技術的原因，部分大鼠標本檢測失敗，我們均嚴格按照隨機原則重復進行實驗并補充缺失數據。
[0104]1.6統計分析
[0105]每組數據均用?士s表示。采用SAS9.1 (血液化驗指標)及SPSS9.1 (微血栓個數)統計軟件來比較組間差異的統計學意義。其中對各組血液化驗指標進行正態性檢驗后分別采取welch檢驗、Kruskal-wallis檢驗、SNK檢驗來進行統計學分析。各組微血栓數量采用Bonferroni檢驗來進行統計學分析。P〈0.05為有統計學意義。
[0106]2 結果
[0107]2.1各組大鼠血凝指標變化
[0108]對照組大鼠三個時間點的PT、APTT值均比空白組明顯縮短，PTA檢測值則明顯升高(表1，P〈0.05);空白組與對照組的INR值之間無統計學差異；對照組的48小時、72小時FIB值檢測值與空白組相比明顯升高(表1，P〈0.05)。以上結果表明對照組大鼠血液處于高凝狀態。[0109]與空白組相比:兩個治療組24小時、48小時PT檢測值與其無差異，而72小時PT檢測值則明顯縮短。治療A組、治療B組的三個時間點的PT結果均比對照組明顯延長(表1，P〈0.05)，提示兩個治療組大鼠的血液高凝狀態均比對照組明顯改善。兩個治療組之間的PT結果均無差異。
[0110]與空白組相比:只有治療B組的72小時的APTT檢測值與之無統計學差異(表1，P>0.05)。治療A組、治療B組的48小時、72小時的APTT結果均比對照組明顯延長(表1，P〈0.05)。兩個治療組之間相比，只有治療A組的72小時APTT值比治療B組明顯延長。
[0111]兩個治療組的INR檢測值中除治療A組的24小時的INR值與對照組無統計學差異外，均比對照組明顯增大(表1，P〈0.05)。與空白組相比除治療A組的24小時檢測值外均明顯增大。兩個治療組之間的INR結果均無差異。
[0112]兩個治療組中，除治療A組的72小時FIB值、治療B組的24小時FIB值外，其余均比對照組明顯降低(表1，P〈0.05)。與空白組相比均無統計學差異。兩個治療組中，只有治療B組72小時FIB值比治療A組明顯降低。
[0113]兩個治療組中只有治療A組的48小時PTA值與對照組相比明顯升高，余均無統計學差異(表1，P>0.05)。兩個治療組與空白組相比均明顯升高。兩個治療組之間只有治療A組48小時PTA值比治療B組明顯升高。
[0114]以上結果表明兩個治療組大鼠的血液血凝指標絕大多數均比對照組明顯改善。
[0115]表1各組大鼠血凝指標結果
[0116]
【權利要求】
1.一種抗血栓中藥制劑，其特征在于該中藥制劑是采用如下原料藥制成:益母草100-180重量份紅花10-40重量份花椒10-40重量份水蛭10-40重量份當歸20-60重量份蘇木10-40重量份三棱10-40重量份兩頭尖10-40重量份川芎10-40重量份降香10-40重量份香附10-40重量份人參30-75重量份高良姜10-40重量份姜黃8-25重量份沒藥10-40重量份苦杏仁10-40重量份大黃40-90重量份紫蘇子10-40重量份小茴香10-40重量份桃仁10-40重量份五靈脂10-40重量份虻蟲10-40重量份麝香10-40重量份鱉甲100-180重量份丁香10-40重量份延胡索10-40重量份白芍20-60重量份蒲黃10-40重量份乳香10-40重量份干漆10-40重量份吳茱萸10-40重量份阿魏10-40重量份肉桂10-40重量份艾葉10-40重量份熟地黃20-60重量份。
2.如權利要求1所述的中藥制劑，其特征在于該中藥制劑是采用如下原料藥制成:益母草130-150重量份紅花15-20重量份花椒15-20重量份水蛭15-20重量份當歸30-40重量份蘇木15-20重量份三棱15-20重量份兩頭尖15-20重量份川芎15-20重量份降香15-20重量份香附15-20重量份人參50-55重量份高良姜15-20重量份姜黃8-15重量份沒藥15-20重量份苦杏仁20-30重量份大黃60-80重量份紫蘇子15-20重量份小茴香20-30重量份桃仁20-30重量份五靈脂15-20重量份虻蟲15-20重量份鱉甲130-150重量份丁香15-25重量份延胡索15-20重量份白芍30-40重量份蒲黃15-20重量份乳香15-20重量份干漆15-20重量份吳茱萸15-20重量份阿魏15-20重量份肉桂15-20重量份艾葉15-20重量份熟地黃30-40重量份。
3.如權利要求1所述的中藥制劑，其特征在于該中藥制劑是采用如下原料藥制成:益母草140重量份紅花17.5重量份炭制花椒17.5重量份制水蛭17.5重量份當歸35重量份蘇木17.5重量份醋炙三棱17.5重量份兩頭尖17.5重量份川芎17.5重量份降香17.5重量份醋炙香附17.5重量份人參52.5重量份高良姜17.5重量份姜黃10.5重量份醋炙沒藥17.5重量份炒苦杏仁26.25重量份大黃70重量份紫蘇子17.5重量份鹽炒小茴香26.25重量份桃仁26.25重量份醋炙五靈脂17.5重量份虻蟲17.5重量份鱉甲140重量份丁香21.25重量份醋炙延胡索17.5重量份白芍35重量份炭蒲黃17.5重量份醋炙乳香17.5重量份煅干漆17.5重量份甘草水炙吳茱萸17.5重量份阿魏17.5重量份肉桂17.5重量份炙艾葉17.5重量份 熟地黃35重量份； 以原料藥量計算，相當于IOg原料藥的所述組合物中大黃素、大黃酚的總量不少于.0.28mg0
4.如權利要求1-3任一所述的中藥制劑，其特征在于該中藥制劑可按常規工藝制成臨床可接受的劑型。
5.如權利要求4所述的中藥制劑，其特征在于所述的劑型為片劑、膠囊、口服液、丸劑或顆粒劑。
6.如權利要求1-4任一所述的中藥制劑在制備抗血栓藥物中的應用。
7.如權利要求6所述的應用，其特征在于所述血栓為抑制靜脈血栓或微血栓。
8.如權利要求6所述的應用，其特征在于在制備抑制肺臟或肝臟血栓藥物中的應用。
9.如權利要求6所述的應用，其特征在于在制備抑制腸系膜血栓藥物中的應用。
10.如權利要求1-4任一所述的中藥制劑在制備降低血液高凝狀態或降低微血栓形成后繼發性纖溶 亢進藥物中的應用。
【文檔編號】A61K35/24GK103961639SQ201310052149
【公開日】2014年8月6日 申請日期:2013年2月18日 優先權日:2013年1月24日
【發明者】姚華, 王軍, 杜軍, 郭潔, 李芳
申請人:成都地奧集團天府藥業股份有限公司