一種抗炎鎮痛口服制劑及其制備方法和用途

一種抗炎鎮痛口服制劑及其制備方法和用途
【專利摘要】本發明公開了一種抗炎鎮痛的口服制劑及制備工藝方法與用途。所述口服制劑包含祖師麻提取物和藥學上可接受的輔料，所述祖師麻提取物是以中藥祖師麻為原料藥經過提取純化得到的。本發明的抗炎鎮痛口服制劑的制備方法，進一步簡化了制備工藝步驟，節約溶劑，縮短生產周期；保留了部分脂溶性成分，增強了提取物的抗炎活性，工藝先進，生產操作簡單，劑量準確，生物利用度高、作用時間持久，作用溫和，無毒副作用。用于治療風濕、類風濕性關節炎以及各種原因引起的腫痛。
【專利說明】一種抗炎鎮痛口服制劑及其制備方法和用途
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種抗炎鎮痛口服制劑及其制備方法和用途，具體涉及一種用于治療風濕、類風濕病及各種原因引起的腫痛的中藥口服制劑及其制備方法和用途。
【背景技術】
[0002]風濕病是醫學領域中最龐大的一類疾患。在中國，風濕性關節炎、類風濕性關節炎患者占人口總數的15%，其發病率可達18%，其中重病患者有5000萬人。我國50歲以上人群中半數患骨關節炎；65歲以上人群中90%的女性及80%的男性患骨關節炎。同時由于跌打損傷及各種關節骨病同樣是嚴重影響人們健康的疾病。
[0003]雖然目前臨床上有許多治療風濕骨痛、關節骨病、跌打損傷的中藥制劑，但大多存在一定的缺陷，例如酊劑在運輸、攜帶時玻璃容器易損，瓶塞若封閉不嚴溶媒易揮發，有時產生渾濁或沉淀；橡皮膏劑膏層較薄，載藥量少，藥效維持時間較短，對皮膚刺激性大等等，都嚴重影響了該類藥物的應用。口服制劑使用方便、安全、起效快、適用于全身疾病的治療。
[0004]中藥祖師麻為瑞香科(Thymelaeaceae)瑞香屬植物黃瑞香(Daphne giraldiiNitsche.)、甘肅瑞香(Daphne tangutica Maxim.)或凹葉瑞香(Daphne retusa Hemsl.)的干燥莖皮及根皮，分布于陜西、甘肅、四川、青海等地，其根皮及莖皮入藥，具有祛風通絡、祛瘀止痛之功效，常用于治療關節風濕痛等癥。民間用于治療頭痛、牙痛、風濕性關節炎、跌打損傷、胃痛、肝區痛及支氣管炎等癥，俗稱“打的滿地上爬，離不開祖師麻”。
[0005]中藥祖師麻及其提取物主要有片劑、注射劑、巴布膏、橡膠膏等制劑，廣泛用于風濕痹痛、關節炎、類風濕性關節炎等。由于此類疾病的發生存在急性期和慢性期，在不同時期對于疾病的治療，藥物作用特點有所不同。比如急性發作時，需要快速緩解患者疼痛或腫脹等癥狀，需要藥物作用迅速顯著；慢性期需要堅持鞏固療效，需要藥物作用和緩持久。現有的祖師麻制劑療效顯著，由于活性成分種類及制劑類型的原因，其抗炎鎮痛作用明顯、起效快，但作用時間短，因此僅適用于急性病癥的治療；或由于采用藥材粗提取物為原料，存在不同程度的刺激過敏等毒副作用，這極大地限制了中藥祖師麻及其提取物在患者中的應用。

【發明內容】

[0006]本發明的目的在于提供一種抗炎鎮痛口服制劑及其制備方法與用途。
[0007]本發明的目的之一是提供一種口服制劑，該口服制劑包含祖師麻提取物和藥學上可接受的輔料，所述祖師麻提取物是通過包括下述步驟的方法得到的:
[0008]a)將祖師麻藥材粉碎成粗粉，以水或I~95體積％的乙醇水溶液作溶劑進行提取，優選為20~70體積％的乙醇水溶液，制得浸膏；
[0009]b)將浸膏與固體稀釋劑混合，加入有機溶劑中進行提取，回收溶劑得到固體提取物；或者將浸膏加水懸浮，加入有機溶劑進行萃取，回收溶劑得到固體提取物；
[0010]c)將固體提取物加水懸浮，采用大孔吸附樹脂層析，首先以水或乙醇水溶液為流動相淋洗除雜質，然后以乙醇水溶液洗脫，收集洗脫液，回收溶劑得到浸膏，將浸膏真空干燥，得到祖師麻提取物。本發明的上述方法進一步簡化了制備工藝步驟，節約溶劑，縮短生產周期；保留了部分脂溶性成分，如瑞香辛、丁香苷、DaphgiIin-7-Ο-β -D-葡萄糖苷、瑞香素 _7，8- 二 _0_β -D-葡萄糖昔、daphnodorin A、daphnodorin C、daphnodorin B、完花素-5-0- β -D-匍萄糖苷、木禪草素-5-0- β -D-匍萄糖苷、芫花素等，增強了提取物的抗炎活性，適合長期病癥的治療。
[0011]優選地，
[0012]所述提取方法為回流或滲漉；
[0013]所述固體稀釋劑為淀粉、微粉硅膠、硅藻土、高嶺土、活性炭和白陶土中的一種或多種；
[0014]所述有機溶劑為醋酸乙酯、正丁醇和/或水飽和正丁醇；
[0015]所述大孔吸附樹脂為苯乙烯、苯乙烯-丙烯酸酯、二苯乙烯、丙烯酸酯和甲基丙烯酸酯型樹脂中的一種或多種，例如 D101、D201、DA201、HPD300、HPD400、HPD800、FL_1、FL-2和/或ΑΒ-8樹脂，優選為苯乙烯型或苯乙烯-丙烯酸酯型大孔吸附樹脂；
[0016]淋洗用的乙醇水溶液的濃度為I~50體積％，優選為I~20體積％ ；
[0017]洗脫用的乙醇水溶液的濃度為20~90體積％，優選為20~50體積％。
[0018]在本發明一個優選的方面，提供了一種口服制劑，其中所述祖師麻提取物包含按提取物的總重量計，75重量％-96重量％的祖師麻總香豆素，優選75.3重量％_95.5重量％的祖師麻總香豆素。
[0019]優選地，所述祖師麻總香豆素包含祖師麻甲素、祖師麻乙素、瑞香素-8-0-葡萄糖苷、7-0Η-香豆素和瑞香辛。
[0020]優選地，在所述祖師麻提取物中按所述祖師麻提取物的總重量計，所述祖師麻甲素的含量為7重量％-51重量％、所述祖師麻乙素的含量為2重量％-41重量％、所述瑞香素-8-0-匍萄糖昔的含量為3重量％_41重量％、所述7-0Η-香?素的含量為5重量％_31重量％以及所述瑞香辛的含量為0.2重量％-1.3重量％。更優選地，在所述祖師麻提取物中按所述祖師麻提取物的總重量計，所述祖師麻甲素的含量為7.5重量％-50.2重量％、所述祖師麻乙素的含量為2.8重量％-40.2重量％、所述瑞香素-8-0-葡萄糖苷的含量為3.1重量％-40.5重量％、所述7-0Η-香豆素的含量為5.2重量％_30.1重量％以及所述瑞香辛的含量為0.28重量％-1.23重量％。
[0021]優選地，所述祖師麻總香豆素還包含丁香苷、DaphgiIin-7-Ο-β-D-葡萄糖苷、瑞香素 _7，8- 二 _0_β -D-葡萄糖昔、daphnodorin A、daphnodorin C、daphnodorin B、完花素-5-0-β -D-葡萄糖苷、木樨草素-5-0-β -D-葡萄糖苷和芫花素。
[0022]所述輔料選自淀粉、糊精、PEG-4000、PEG-6000、微晶纖維素、乳糖和硬質酸鎂等。
[0023]根據本發明的口服制劑，所述口服制劑為片劑、膠囊劑或丸劑。
[0024]本發明的目的之一是提供一種制備本發明所述口服制劑的方法。該方法包括以下步驟:將所述祖師麻提取物與藥學上可接受的輔料混合均勻，制成口服制劑。
[0025]本發明所述的口服制劑在制備抗炎鎮痛藥物中的用途。該用途包括在制備治療風濕、類風濕病和各種腫痛的藥物中的用途。
[0026]經藥效學實驗表明，本發明具有良好的鎮痛、抗炎及活血化淤作用。作用迅速持久，尤其適用于長期病癥及外用制劑無法達到的部位病癥的治療。
[0027]風濕骨痛大多由于風寒濕邪侵襲人體，閉阻經絡，氣血運行不暢所致，而跌打損傷可致瘀血痹阻經絡，這兩種情形在臨床上通常導致以肌肉、筋骨、關節發生酸痛、麻木、重著、腫脹、屈伸不利等癥狀，因此，本發明人根據“通則不痛、痛則不通”的中醫理論，針對上述疾病的病因機理，制定了“消腫止痛、活血化瘀、驅風通絡、祛寒化濕”的治療原則，篩選出組方。本發明所述的口服制劑是用于治療風濕、類風濕病及各種原因引起的腫痛的制劑。
[0028]本發明采用現代工藝技術提取祖師麻提取物制成口服制劑，用于治療風濕、類風濕病及各種原因引起的腫痛。很好的克服了上述制劑的缺點，吸收快速，使用方便。同時通過現代的制備工藝對藥材進行提取純化，去除了毒性成分，避免了普通片劑對胃腸道的刺激性，減少了服用量，提高了療效，顯著降低了祖師麻制劑的毒副作用和刺激性。與其他祖師麻口服制劑相比，本發明的口服制劑吸收好，作用持久，適合長期病癥的治療，如風濕性關節炎、類風濕性關節炎等；同時可以用于外用制劑無法達到的部位病癥的治療，如胃痛、牙痛等。
[0029]本發明的抗炎鎮痛口服制劑制備方法，進一步簡化了制備工藝步驟，節約溶劑，縮短生產周期；保留了部分脂溶性成分，增強了提取物的抗炎活性，工藝先進，生產操作簡單，劑量準確，生物利用度高。 在制備過程中，無粉塵，衛生條件容易控制。
[0030]以下通過實施例對本發明作進一步說明。以下實施例僅用于說明本發明，而不用于限定本發明的范圍。
【具體實施方式】
[0031]實施例1
[0032]取祖師麻藥材1.0kg,以20%(體積/體積)乙醇水溶液回流提取3次，濾過，合并濾液回收乙醇,拌入淀粉中，用水飽和正丁醇回流提取，回收溶劑，固體物質加水吸附于D201樹脂，以水洗去雜質,再用20% (體積/體積)乙醇水溶液洗脫，收集洗脫液,回收乙醇得到浸膏，將浸膏真空干燥，得到祖師麻提取物。
[0033]按照高效液相色譜法進行測定:
[0034]精密稱取祖師麻提取物50mg，置于50mL量瓶中，加50% (體積/體積)甲醇水溶液適量使之溶解并稀釋至刻度，搖勻，然后精密吸取2mL所得溶液，置于IOmL量瓶中，加50%(體積/體積)甲醇水溶液稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液；分別以祖師麻甲素、祖師麻乙素、瑞香素-8-0-葡萄糖苷、7-OH-香豆素及瑞香辛的甲醇溶液為對照品溶液；色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，25:75 (體積/體積)的甲醇-0.5%醋酸水溶液為流動相；檢測波長為327nm。
[0035]按提取物總重量計，祖師麻甲素7.5% (重量)，祖師麻乙素31.2% (重量)，瑞香素-8-0-葡萄糖苷14.2% (重量)、7-OH-香豆素5.2% (重量)及瑞香辛0.28% (重量)。
[0036]按照紫外分光光度法進行測定:
[0037]分別將上述供試品溶液及祖師麻乙素對照品溶液稀釋至適當體積，按照紫外-可見分光光度法，在310nm波長處測定吸收度，計算。
[0038]按提取物總重量計，祖師麻總香豆素的含量為78.9% (重量)。
[0039]實施例2[0040]取祖師麻藥材1.0kg,以30% (體積/體積)乙醇水溶液滲漉提取，滲漉液減壓回收乙醇，拌入微粉硅膠中，用乙酸乙酯滲漉提取，回收溶劑，固體物質加水吸附于D201樹脂，以10% (體積/體積)乙醇水溶液洗去雜質，再用30% (體積/體積)乙醇水溶液洗脫，收集洗脫液，回收乙醇得到浸膏，60°C減壓回收乙醇，將浸膏真空干燥，得到祖師麻提取物。
[0041]按照實施例1所述的高效液相色譜法進行測定:
[0042]按提取物總重量計，祖師麻甲素8.7% (重量)，祖師麻乙素23.8% (重量)，瑞香素-8-0-葡萄糖苷17.0% (重量)、7-OH-香豆素5.5% (重量)及瑞香辛0.39% (重量)。
[0043]按照實施例1所述的紫外分光光度法進行測定:
[0044]按提取物總重量計，祖師麻總香豆素的含量為77.4% (重量)。
[0045]實施例3
[0046]取祖師麻藥材1.0kg,以40% (體積/體積)乙醇水溶液回流提取，提取液減壓回收乙醇，拌入硅藻土中，用正丁醇滲漉提取，回收溶劑，固體物質加水吸附于DlOl樹脂，以20%(體積/體積)乙醇水溶液洗去雜質,再用40% (體積/體積)乙醇水溶液洗脫，收集洗脫液，回收乙醇得到浸膏，將浸膏真空干燥，得到祖師麻提取物。
[0047]按照實施例1所述的高效液相色譜法進行測定:
[0048]按提取物總重量計，祖師麻甲素15.7% (重量)，祖師麻乙素12.2% (重量)，瑞香素-8-0-葡萄糖苷40.5% (重量)、7-OH-香豆素9.7% (重量)及瑞香辛0.58% (重量)。 [0049]按照實施例1所述的紫外分光光度法進行測定:
[0050]按提取物總重量計，祖師麻總香豆素的含量為90.1% (重量)。
[0051]實施例4
[0052]取祖師麻藥材1.0kg,以50% (體積/體積)乙醇水溶液滲漉提取，滲漉液減壓回收乙醇，拌入活性炭中，用醋酸乙酯回流提取，回收溶劑，固體物質加水吸附于FL-2樹脂，以30% (體積/體積)乙醇水溶液洗去雜質，再用50% (體積/體積)乙醇水溶液洗脫，收集洗脫液，60°C減壓回收乙醇得到浸膏，將浸膏真空干燥，得到祖師麻提取物。
[0053]按照實施例1所述的高效液相色譜法進行測定:
[0054]按提取物總重量計，祖師麻甲素19.7% (重量)，祖師麻乙素26.9% (重量)，瑞香素-8-0-葡萄糖苷16.8% (重量)、7-OH-香豆素15.2% (重量)及瑞香辛0.72% (重量)。
[0055]按照實施例1所述的紫外分光光度法進行測定:
[0056]按提取物總重量計，祖師麻總香豆素的含量為91.3% (重量)。
[0057]實施例5
[0058]取祖師麻藥材1.0kg,以60% (體積/體積)乙醇水溶液回流提取，提取液減壓回收乙醇，拌入高嶺土中，用正丁醇回流提取，回收溶劑，固體物質加水吸附于AB-8樹脂，以40%(體積/體積)乙醇水溶液洗去雜質,再用60% (體積/體積)乙醇水溶液洗脫，收集洗脫液，回收乙醇得到浸膏，將浸膏真空干燥，得到祖師麻提取物。
[0059]按照實施例1所述的高效液相色譜法進行測定:
[0060]按提取物總重量計，祖師麻甲素45.2% (重量)，祖師麻乙素7.7% (重量)，瑞香素-8-0-葡萄糖苷5.8% (重量)、7-OH-香豆素23.4% (重量)及瑞香辛0.88% (重量)。
[0061]按照實施例1所述的紫外分光光度法進行測定:
[0062]按提取物總重量計，祖師麻總香豆素的含量為88.7% (重量)。[0063]實施例6
[0064] 取祖師麻藥材1.0kg,以70% (體積/體積)乙醇水溶液滲漉提取，滲漉液減壓回收乙醇，拌入白陶土中，用醋酸乙酯回流提取，回收溶劑，固體物質加水吸附于AB-8和DlOl復合樹脂，以50% (體積/體積)乙醇水溶液洗去雜質，再用70% (體積/體積)乙醇水溶液洗脫，收集洗脫液，60°C減壓回收乙醇得到浸膏，將浸膏真空干燥，得到祖師麻提取物。
[0065]按照實施例1所述的高效液相色譜法進行測定:
[0066]按提取物總重量計，祖師麻甲素50.2% (重量)，祖師麻乙素2.8% (重量)，瑞香素-8-0-葡萄糖苷3.1% (重量)、7-OH-香豆素30.1% (重量)及瑞香辛0.96% (重量)。
[0067]按照實施例1所述的紫外分光光度法進行測定:
[0068]按提取物總重量計，祖師麻總香豆素的含量為95.5% (重量)。
[0069]實施例7
[0070]取祖師麻藥材1.0kg,以80% (體積/體積)乙醇水溶液回流提取，提取液減壓回收乙醇，拌入硅藻土:白陶土(重量比=1:1)中，用正丁醇回流提取，回收溶劑，固體物質加水吸附于DlOl和D201復合樹脂，以20% (體積/體積)乙醇水溶液洗去雜質，再用90% (體積/體積)乙醇水溶液洗脫，收集洗脫液，回收乙醇得到浸膏，將浸膏真空干燥，得到祖師麻提取物。
[0071]按照實施例1所述的高效液相色譜法進行測定:
[0072]按提取物總重量計，祖師麻甲素18.9% (重量)，祖師麻乙素8.2% (重量)，瑞香素-8-0-葡萄糖苷?.3% (重量)、7-OH-香豆素15.7% (重量)及瑞香辛0.75% (重量)。
[0073]按照實施例1所述的紫外分光光度法進行測定:
[0074]按提取物總重量計，祖師麻總香豆素的含量為75.3% (重量)。
[0075]實施例8
[0076]取祖師麻藥材1.0kg,以40% (體積/體積)乙醇水溶液滲漉提取，提取液減壓回收乙醇，拌入高嶺土中，用醋酸乙酯滲漉提取，回收溶劑，固體物質加水吸附于AB-8和D201復合樹脂，以20% (體積/體積)乙醇水溶液洗去雜質，再用40% (體積/體積)乙醇水溶液洗脫，收集洗脫液，回收乙醇得到浸膏，將浸膏真空干燥，得到祖師麻提取物。
[0077]按照實施例1所述的高效液相色譜法進行測定:
[0078]按提取物總重量計，祖師麻甲素13.5% (重量)，祖師麻乙素20.2% (重量)，瑞香素-8-0-葡萄糖苷28.6% (重量)、7-OH-香豆素10.2% (重量)及瑞香辛0.82% (重量)。
[0079]按照實施例1所述的紫外分光光度法進行測定:
[0080]按提取物總重量計，祖師麻總香豆素的含量為88.6% (重量)。
[0081]實施例9
[0082]取祖師麻藥材1.0kg,以50% (體積/體積)乙醇水溶液回流提取，提取液減壓回收乙醇，拌入硅藻土中，用水飽和正丁醇回流提取，回收溶劑，固體物質加水吸附于FL-1樹月旨，以水洗去雜質，再用30% (體積/體積)乙醇水溶液洗脫，收集洗脫液，60°C減壓回收乙醇得到浸膏，將浸膏真空干燥，得到祖師麻提取物。
[0083]按照實施例1所述的高效液相色譜法進行測定:
[0084]按提取物總重量計，祖師麻甲素7.6% (重量)，祖師麻乙素40.2% (重量)，瑞香素-8-0-葡萄糖苷16.5% (重量)、7-OH-香豆素5.5% (重量)及瑞香辛0.63% (重量)。[0085]按照實施例1所述的紫外分光光度法進行測定:
[0086]按提取物總重量計，祖師麻總香豆素的含量為85.5% (重量)。
[0087]實施例10
[0088]取祖師麻藥材1.0kg,以60% (體積/體積)乙醇水溶液滲漉提取，提取液減壓回收乙醇，拌入高嶺土中，用醋酸乙酯滲漉提取，回收溶劑，固體物質加水吸附于AB-8樹脂，以10% (體積/體積)乙醇水溶液洗去雜質,再用50% (體積/體積)乙醇水溶液洗脫，收集洗脫液，回收乙醇得到浸膏，將浸膏真空干燥，得到祖師麻提取物。
[0089]按照實施例1所述的高效液相色譜法進行測定:
[0090]按提取物總重量計，祖師麻甲素20.2% (重量)，祖師麻乙素16.3% (重量)，瑞香素-8-0-葡萄糖苷18.7% (重量)、7-OH-香豆素11.3% (重量)及瑞香辛0.57% (重量)。
[0091]按照實施例1所述的紫外分光光度法進行測定:
[0092]按提取物總重量計，祖師麻總香豆素的含量為93.5% (重量)。
[0093]實施例U
[0094]取祖師麻藥材1.0kg,以水回流提取3次，濾過，合并濾液濃縮，用水飽和正丁醇萃取，回收溶劑，固體物質加水吸附于AB-8與D201復合樹脂，以水洗去雜質，再用30% (體積/體積)乙醇水溶液洗脫，收集洗脫液得到浸膏，將浸膏真空干燥，得到祖師麻提取物。
[0095]按照實施例1所述的高效液相色譜法進行測定:
[0096]按提取物總重量計，祖師麻甲素15.6% (重量)，祖師麻乙素20.2% (重量)，瑞香素-8-0-葡萄糖苷15.7% (重量)、7-OH-香豆素5.4% (重量)及瑞香辛0.55% (重量)。
[0097]按照實施例1所述的紫外分光光度法進行測定:
[0098]按提取物總重量計，祖師麻總香豆素的含量為75.6% (重量)。
[0099]實施例12
[0100]取祖師麻藥材1.0kg,以30% (體積/體積)乙醇水溶液滲漉提取，滲漉液減壓回收乙醇，用乙酸乙酯萃取，回收溶劑，固體物質加水吸附于HPD-300樹脂，以10% (體積/體積)乙醇水溶液洗去雜質，再用40% (體積/體積)乙醇水溶液洗脫，收集洗脫液,60°C減壓回收乙醇得到浸膏，將浸膏真空干燥，得到祖師麻提取物。
[0101]按照實施例1所述的高效液相色譜法進行測定:
[0102]按提取物總重量計，祖師麻甲素15.3% (重量)，祖師麻乙素20.2% (重量)，瑞香素-8-0-葡萄糖苷16.3% (重量)、7-OH-香豆素8.5% (重量)及瑞香辛0.67% (重量)。
[0103]按照實施例1所述的紫外分光光度法進行測定:
[0104]按提取物總重量計，祖師麻總香豆素的含量為80.2% (重量)。
[0105]實施例13
[0106]取祖師麻藥材1.0kg,以70% (體積/體積)乙醇水溶液滲漉提取，滲漉液減壓回收乙醇，用醋酸乙酯萃取，回收溶劑，固體物質加水吸附于HPD-400樹脂，以20% (體積/體積)乙醇水溶液洗去雜質，再用50% (體積/體積)乙醇水溶液洗脫，收集洗脫液,60°C減壓回收乙醇得到浸膏，將浸膏真空干燥，得到祖師麻提取物。
[0107]按照實施例1所述的高效液相色譜法進行測定:
[0108]按提取物總重量計，祖師麻甲素30.8% (重量)，祖師麻乙素8.5% (重量)，瑞香素-8-0-葡萄糖苷7.9% (重量)、7-OH-香豆素15.8% (重量)及瑞香辛0.86% (重量)。[0109]按照實施例1所述的紫外分光光度法進行測定:
[0110]按提取物總重量計，祖師麻總香豆素的含量為75.9% (重量)。
[0111]實施例14
[0112]取祖師麻藥材1.0kg,以80% (體積/體積)乙醇水溶液回流提取，提取液減壓回收乙醇，用水飽和正丁醇萃取，回收溶劑，固體物質加水吸附于HPD-800樹脂，以30% (體積/體積)乙醇水溶液洗去雜質，再用60% (體積/體積)乙醇水溶液洗脫，收集洗脫液,回收乙醇得到浸膏，將浸膏真空干燥，得到祖師麻提取物。
[0113]按照實施例1所述的高效液相色譜法進行測定:
[0114]按提取物總重量計，祖師麻甲素40.6% (重量)，祖師麻乙素8.8% (重量)，瑞香素-8-0-葡萄糖苷8.0% (重量)、7-OH-香豆素20.2% (重量)及瑞香辛1.23% (重量)。
[0115]按照實施例1所述的紫外分光光度法進行測定:
[0116]按提取物總重量計，祖師麻總香豆素的含量為85.5% (重量)。
[0117]實施例15
[0118]取祖師麻藥材1.0kg,以1% (體積/體積)乙醇水溶液回流提取，提取液減壓回收乙醇，用水飽和正丁醇萃取，回收溶劑，固體物質加水吸附于D-101樹脂，以水洗去雜質，再用50% (體積/體積)乙醇水溶液洗脫，收集洗脫液，回收乙醇得到浸膏，將浸膏真空干燥，得到祖師麻提取物。
[0119]按照實施例1所述的高效液相色譜法進行測定:
[0120]按提取物總重量計，祖師麻甲素10.8% (重量)，祖師麻乙素22.3% (重量)，瑞香素-8-0-葡萄糖苷17.4% (重量)、7-OH-香豆素10.3% (重量)及瑞香辛0.48% (重量)。
[0121]按照實施例1所述的紫外分光光度法進行測定:
[0122]按提取物總重量計，祖師麻總香豆素的含量為83.2% (重量)。
[0123]實施例16
[0124]取祖師麻藥材1.0kg,以95% (體積/體積)乙醇水溶液回流提取，提取液減壓回收乙醇，拌入硅藻土，用水飽和正丁醇萃取，回收溶劑，固體物質加水吸附于AB-8樹脂，以30%(體積/體積)乙醇水溶液洗去雜質,再用70% (體積/體積)乙醇水溶液洗脫，收集洗脫液，回收乙醇得到浸膏，將浸膏真空干燥，得到祖師麻提取物。
[0125]按照實施例1所述的高效液相色譜法進行測定:
[0126]按提取物總重量計，祖師麻甲素28.2% (重量)，祖師麻乙素13.4% (重量)，瑞香素-8-0-葡萄糖苷11.6% (重量)、7-OH-香豆素18.1% (重量)、瑞香辛0.86% (重量)。
[0127]按照實施例1所述的紫外分光光度法進行測定:
[0128]按提取物總重量計，祖師麻總香豆素的含量為82.7% (重量)。
[0129]實施例17
[0130]取實施例1制備的祖師麻提取物，加淀粉350g，乳糖500g，以60%乙醇制粒，干燥，壓片，得片劑。
[0131]實施例18
[0132]取實施例3制備的祖師麻提取物，加淀粉250g，乳糖200g，以80%乙醇制粒，干燥，壓片，得片劑。
[0133]實施例19[0134]取實施例4制備的祖師麻提取物，加淀粉50g，乳糖100g，以90%乙醇制粒，干燥，壓片，得片劑。
[0135]實施例20
[0136]取實施例7制備的祖師麻提取物，加微晶纖維素200g，乳糖550g，以10%聚維酮乙醇制粒，干燥，填充于膠囊，得膠囊劑。
[0137]實施例21
[0138]取實施例10制備的祖師麻提取物，加徽晶纖維素100g，乳糖250g，以10%PVP乙醇制粒，干燥，填充于膠囊，得膠囊劑。
[0139]實施例22
[0140]取實施例11制備的祖師麻提取物，加糊精800g，以水制成丸，干燥，得水丸。
[0141]實施例23
[0142]取實施例13制備的祖師麻提取物，加糊精200g，淀粉200g，以蜜水(含10%蜂蜜的水溶液)制成丸，干燥，得水蜜丸。
[0143]實施例24
[0144]取實施例14 制備的祖師麻提取物，加PEG6000400g、PEG4000200g,制成滴丸，干燥。
[0145]藥效學試驗
[0146]對照藥:
[0147]消炎痛:廈門中藥廠，批號101201
[0148]氫化可的松:哈爾冰制藥三廠，批號110228
[0149]對照樣品17
[0150]取祖師麻藥材1.0kg,以20% (體積/體積)乙醇水溶液回流提取3次，濾過，合并濾液回收乙醇，拌入淀粉中，用水飽和正丁醇回流提取，回收溶劑，固體物質加水吸附于D201樹脂，以水洗去雜質，再用20% (體積/體積)乙醇水溶液洗脫，收集洗脫液，前半部分回收乙醇，固體備用；后半部分回收乙醇，固體物質加水懸浮,用醋酸乙酯萃取,有機層回收溶劑得到固體，合并兩部分洗脫液處理后得到的固體物質，干燥，得到祖師麻提取物；加淀粉350g，乳糖500g，以60%乙醇制粒，干燥，壓片，得片劑。
[0151]按照高效液相色譜法進行測定:
[0152]精密稱取祖師麻提取物50mg，置于50mL量瓶中，加50% (體積/體積)甲醇水溶液適量使之溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密吸取2mL置于IOmL量瓶中，加50% (體積/體積)甲醇水溶液稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液；分別以祖師麻甲素、祖師麻乙素、瑞香素-8-0-葡萄糖苷及7-OH-香豆素的甲醇溶液為對照品溶液；色譜柱用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，25:75(體積/體積)的甲醇-0.5%醋酸水溶液為流動相；檢測波長為327nm。
[0153]按提取物總重量計，祖師麻甲素3.8% (重量)，祖師麻乙素40.6% (重量)，瑞香素-8-0-匍萄糖昔18.4% (重量)及7-OH-香?素2.4% (重量)。
[0154]按照紫外分光光度法進行測定:
[0155]分別將上述供試品溶液及祖師麻乙素對照品溶液稀釋至適當體積，按照紫外-可見分光光度法，在310nm波長處測定吸收度，計算。
[0156]按提取物總重量計，祖師麻總香豆素的含量為73.6% (重量)。[0157]對照樣品18
[0158] 取祖師麻藥材1.0kg,以40% (體積/體積)乙醇水溶液回流提取，提取液減壓回收乙醇，拌入硅藻土中，用正丁醇滲漉提取，回收溶劑，固體物質加水吸附于DlOl樹脂，以20%(體積/體積)乙醇水溶液洗去雜質,再用40% (體積/體積)乙醇水溶液洗脫，收集洗脫液，前半部分回收乙醇，固體物質備用；后半部分回收乙醇，固體物質加水懸浮,用醋酸乙酯萃取，有機層回收溶劑得到固體，合并兩部分洗脫液處理后得到的固體物質，真空干燥，得到祖師麻提取物；加淀粉250g，乳糖200g，以80%乙醇制粒，干燥，壓片，得片劑。按照對照樣品17中所述的高效液相色譜法進行測定:
[0159]按提取物總重量計，祖師麻甲素10.5% (重量)，祖師麻乙素14.6% (重量)，瑞香素_8-0-甸萄糖昔48.6% (重量)及7-OH-香?素4.4% (重量)。
[0160]按照對照樣品17中所述的紫外分光光度法進行測定:
[0161]按提取物總重量計，祖師麻總香豆素的含量為87.4% (重量)。
[0162]對照樣品19
[0163]取祖師麻藥材1.0kg,以50% (體積/體積)乙醇水溶液滲漉提取，滲漉液減壓回收乙醇，拌入活性炭中，用醋酸乙酯回流提取，回收溶劑，固體物質加水吸附于FL-2樹脂，以30% (體積/體積)乙醇水溶液洗去雜質，再用50% (體積/體積)乙醇水溶液洗脫，收集洗脫液，前半部分60°C減壓回收乙醇，固體物質備用；后半部分60°C減壓回收乙醇，固體物質加水懸浮，用正丁醇萃取，有機層回收溶劑得到固體，合并兩部分洗脫液處理后得到的固體物質，真空干燥，得到祖師麻提取物；加淀粉50g，乳糖100g，以90%乙醇制粒，干燥，壓片，得片劑。
[0164]按照對照樣品17中所述的高效液相色譜法進行測定:
[0165]按提取物總重量計，祖師麻甲素14.2% (重量)，祖師麻乙素32.3% (重量)，瑞香素-8-0-葡萄糖苷20.1% (重量)及7-OH-香豆素8.5% (重量)。
[0166]按照對照樣品17中所述的紫外分光光度法進行測定:
[0167]按提取物總重量計，祖師麻總香豆素的含量為90.6% (重量)。
[0168]對照樣品20
[0169]取祖師麻藥材1.0kg,以80% (體積/體積)乙醇水溶液回流提取，提取液減壓回收乙醇，拌入硅藻土:白陶土(重量比=1:1)中，用正丁醇回流提取，回收溶劑，固體物質加水吸附于DlOl和D201復合樹脂，以20% (體積/體積)乙醇水溶液洗去雜質，再用90% (體積/體積)乙醇水溶液洗脫，收集洗脫液，前半部分回收乙醇，固體物質備用；后半部分回收乙醇，固體物質加水懸浮，用乙酸乙酯萃取，有機層回收溶劑得到固體，合并兩部分洗脫液處理后得到的固體物質，真空干燥，得到祖師麻提取物；加微晶纖維素200g，乳糖550g，以10%聚維酮乙醇制粒，干燥，填充于膠囊，得膠囊劑。
[0170]按照對照樣品17中所述的高效液相色譜法進行測定:
[0171]按提取物總重量計，祖師麻甲素15.2% (重量)，祖師麻乙素10.1% (重量)，瑞香素_8-0-甸萄糖昔8.6% (重量)及7-OH-香?素10.6% (重量)。
[0172]按照對照樣品17中所述的紫外分光光度法進行測定:
[0173]按提取物總重量計，祖師麻總香豆素的含量為67.6% (重量)。
[0174]對照樣品21[0175]取祖師麻藥材1.0kg,以60% (體積/體積)乙醇水溶液滲漉提取，提取液減壓回收乙醇，拌入高嶺土中，用醋酸乙酯滲漉提取，回收溶劑，固體物質加水吸附于AB-8樹脂，以10% (體積/體積)乙醇水溶液洗去雜質,再用50% (體積/體積)乙醇水溶液洗脫，收集洗脫液，前半部分回收乙醇，固體物質備用；后半部分回收乙醇，固體物質加水懸浮,用正丁醇萃取，有機層回收溶劑得到固體，合并兩部分洗脫液處理后得到的固體物質，真空干燥，得到祖師麻提取物；加徽晶纖維素100g，乳糖250g，以10%PVP乙醇制粒，干燥，填充于膠囊，得膠囊劑。
[0176]按照對照樣品17中所述的高效液相色譜法進行測定:
[0177]按提取物總重量計，祖師麻甲素14.3% (重量)，祖師麻乙素20.6% (重量)，瑞香素-8-0-葡萄糖苷25.2% (重量)及7-OH-香豆素5.7% (重量)。
[0178]按照對照樣品17中所述的紫外分光光度法進行測定:
[0179]按提取物總重量計，祖師麻總香豆素的含量為90.2% (重量)。 [0180]對照樣品22
[0181]取祖師麻藥材1.0kg,以20%(體積/體積)乙醇水溶液回流提取3次，濾過，合并濾液回收乙醇,用水飽和正丁醇萃取，回收溶劑，固體物質加水吸附于AB-8與D201復合樹脂，以水洗去雜質,再用30% (體積/體積)乙醇水溶液洗脫，收集洗脫液,前半部分回收乙醇，固體備用；后半部分回收乙醇，固體物質加水懸浮，用醋酸乙酯萃取，有機層回收溶劑得到固體，合并兩部分洗脫液處理后得到的固體物質，干燥，得到祖師麻提取物；加糊精800g，以水制成丸，干燥，得水丸。
[0182]按照高效液相色譜法進行測定:
[0183]按提取物總重量計，祖師麻甲素10.8% (重量)，祖師麻乙素30.5% (重量)，瑞香素-8-0-葡萄糖苷25.2% (重量)及7-OH-香豆素1.5% (重量)。
[0184]按照紫外分光光度法進行測定:
[0185]按提取物總重量計，祖師麻總香豆素的含量為75.5% (重量)。
[0186]對照樣品23
[0187]取祖師麻藥材1.0kg,以70% (體積/體積)乙醇水溶液滲漉提取，滲漉液減壓回收乙醇，用醋酸乙酯萃取，回收溶劑，固體物質加水吸附于HPD-400樹脂，以20% (體積/體積)乙醇水溶液洗去雜質，再用50% (體積/體積)乙醇水溶液洗脫，收集洗脫液,前半部分60°C減壓回收乙醇，固體物質備用；后半部分60°C減壓回收乙醇，固體物質加水懸浮,用正丁醇萃取，有機層回收溶劑得到固體，合并兩部分洗脫液處理后得到的固體物質，真空干燥，得到祖師麻提取物；加糊精200g，淀粉200g，以蜜水(含10%蜂蜜的水溶液)制成丸，干燥，得水蜜丸。
[0188]按照對照樣品17中所述的高效液相色譜法進行測定:
[0189]按提取物總重量計，祖師麻甲素25.2% (重量)，祖師麻乙素10.1% (重量)，瑞香素_8-0-甸萄糖昔8.6% (重量)及7-OH-香?素10.6% (重量)。
[0190]按照對照樣品17中所述的紫外分光光度法進行測定:
[0191]按提取物總重量計，祖師麻總香豆素的含量為68.6% (重量)。
[0192]對照樣品24
[0193]取祖師麻藥材1.0kg,以80% (體積/體積)乙醇水溶液回流提取，提取液減壓回收乙醇，用水飽和正丁醇萃取，回收溶劑，固體物質加水吸附于HPD-800樹脂，以30% (體積/體積)乙醇水溶液洗去雜質,再用60% (體積/體積)乙醇水溶液洗脫,收集洗脫液,前半部分回收乙醇，固體物質備用；后半部分回收乙醇，固體物質加水懸浮,用乙酸乙酯萃取,有機層回收溶劑得到固體，合并兩部分洗脫液處理后得到的固體物質，真空干燥，得到祖師麻提取物；加PEG6000400g、PEG4000200g，制成滴丸，干燥。
[0194]按照對照樣品17中所述的高效液相色譜法進行測定:
[0195]按提取物總重量計，祖師麻甲素30.8% (重量)，祖師麻乙素10.2% (重量)，瑞香素-8-0-葡萄糖苷10.5% (重量)及7-OH-香豆素15.3% (重量)。
[0196]按照對照樣品17中所述的紫外分光光度法進行測定:
[0197]按提取物總重量計，祖師麻總香豆素的含量為78.2% (重量)。
[0198]本發明對所得到的祖師麻提取物的口服制劑進行了如下的藥效學試驗:
[0199](I)對小鼠水浴甩尾的影響
[0200]試驗選用閾值合格的70只小鼠，隨機分成7組，每組10只，雌雄各半。每日給藥I次，連續給藥3天。于試驗前及末次給藥后I小時、3小時及12小時分別將小鼠尾尖1.5cm浸入恒溫水浴中(55±0.5°C)，用Casio秒表記錄鼠尾自浸入水中到出現甩尾動作的時間，作為甩尾反應的潛伏期。將各給藥組的平均甩尾潛伏期與對照組平均甩尾潛伏期比較，進行統計學測驗，結果見表1。
[0201]表1本發明的祖師麻提取物的口服制劑對小鼠水浴甩尾的影響
[0202]
【權利要求】
1.一種抗炎鎮痛口服制劑，該口服制劑包含祖師麻提取物和藥學上可接受的輔料，所述祖師麻提取物是通過包括下述步驟的方法得到的: a)將祖師麻藥材粉碎成粗粉，以水或I~95體積％的乙醇水溶液作溶劑進行提取，優選為20~70體積％的乙醇水溶液，制得浸膏； b)將浸膏與固體稀釋劑混合，加入有機溶劑中進行提取，回收溶劑得到固體提取物；或者將浸膏加水懸浮，加入有機溶劑進行萃取，回收溶劑得到固體提取物； c)將固體提取物加水懸浮，采用大孔吸附樹脂層析，首先以水或乙醇水溶液為流動相淋洗除雜質，然后以乙醇水溶液洗脫，收集洗脫液，回收溶劑，得到浸膏，將浸膏真空干燥，得到祖師麻提取物。
2.根據權利要求1所述的口服制劑，其特征在于，所述的提取方法為回流或滲漉； 所述固體稀釋劑為淀粉、微粉硅膠、硅藻土、高嶺土、活性炭和白陶土中的一種或多種； 所述有機溶劑為醋酸乙酯、正丁醇和/或水飽和正丁醇； 所述大孔吸附樹脂為苯乙烯、苯乙烯-丙烯酸酯、二苯乙烯、丙烯酸酯和甲基丙烯酸酯型樹脂中的一種或多種，例如 D101、D201、DA201、HPD300、HPD400、HPD800、FL-1、FL-2 和 /或AB-8樹脂，優選為苯乙烯型或苯乙烯-丙烯酸酯型大孔吸附樹脂； 淋洗用的乙醇水溶液的濃度為I~50體積％，優選為I~20體積％ ； 洗脫用的乙醇水溶液的濃度為20~90體積％，優選為20~50體積％。
3.根據權利要求1或2所述的口服制劑，其特征在于，所述祖師麻提取物包含按提取物的總重量計75重量％-96重量％的祖師麻總香豆素，優選包含按提取物的總重量計75.3重量％-95.5重量％的祖師麻總香豆素。
4.根據權利要求3所述的口服制劑，其特征在于，所述祖師麻總香豆素包含祖師麻甲素、祖師麻乙素、瑞香素-8-0-葡萄糖苷、7-OH-香豆素和瑞香辛。
5.根據權利要求4所述的口服制劑，其特征在于，在所述祖師麻提取物中按所述祖師麻提取物的總重量計，所述祖師麻甲素的含量為7重量％-51重量％、所述祖師麻乙素的含量為2重量％-41重量％、所述瑞香素-8-0-葡萄糖苷的含量為3重量％-41重量％、所述7-OH-香豆素的含量為5重量％-31重量％以及所述瑞香辛的含量為0.2重量％-1.3重量％ ;優選地，在所述祖師麻提取物中按所述祖師麻提取物的總重量計，所述祖師麻甲素的含量為7.5重量％-50.2重量％、所述祖師麻乙素的含量為2.8重量％-40.2重量％、所述瑞香素-8-0-匍萄糖昔的含量為3.1重量％_40.5重量％、所述7-OH-香?素的含量為5.2重量％-30.1重量％以及所述瑞香辛的含量為0.28重量％-1.23重量％。
6.根據權利要求3所述的口服制劑，其特征在于，所述祖師麻總香豆素還包含丁香苷、DaphgiIin-7-O-β -D-葡萄糖苷、瑞香素-7，8- 二 _0_β -D-葡萄糖苷、daphnodorin A、daphnodorin C、daphnodorin B、完花素-5-0-β-D-葡萄糖昔、木禪草素-5-0-β-D-葡萄糖昔和完花素。
7.根據權利要求1~6中任一項所述的口服制劑，其特征在于，所述藥學上可接受的輔料選自淀粉、糊精、PEG-4000、PEG-6000、微晶纖維素、乳糖和硬質酸鎂。
8.根據權利要求1~7中任一項所述的口服制劑，其特征在于，所述口服制劑為片劑、膠囊劑或丸劑。
9.一種制備權利要求1~8中任一項所述的口服制劑的方法，該方法包括以下步驟:將所述祖師麻提取物與藥學上可接受的輔料混合均勻，制成口服制劑。
10.權利要求1~8中任一項所述的口服制劑在制備抗炎鎮痛藥物中的用途。
11.根據權利要求10所述的用途，其特征在于，所述用途包括在制備治療風濕、類風濕病及各種原因引起 的腫痛的藥物中的用途。
【文檔編號】A61K36/83GK103933232SQ201310023223
【公開日】2014年7月23日 申請日期:2013年1月22日 優先權日:2013年1月22日
【發明者】馬莉, 韓鋒, 申秀萍, 侯文彬, 高靜, 劉靜, 胡金芳 申請人:天津藥物研究院