使用聚乙二醇粘合劑的可生物吸收的止血裝置制造方法

使用聚乙二醇粘合劑的可生物吸收的止血裝置制造方法
【專利摘要】本發明公開了一種止血墊，其包含可生物吸收的支撐材料；凍干的凝血酶粉末、凍干的纖維蛋白原粉末以及能夠熔融的粘合劑粉末，所有的粉末均設置在所述可生物吸收的支撐材料上。能夠熔融的粘合劑諸如PEG將所述凍干的凝血酶粉末和所述凍干的纖維蛋白原粉末粘結到所述可生物吸收的支撐材料，以改善脆碎度、可潤濕性和使用性能，諸如針對傷口部位處的止血治療或封閉而言。
【專利說明】使用聚乙二醇粘合劑的可生物吸收的止血裝置
【技術領域】
[0001]本發明整體涉及用于促進止血和組織封閉的試劑和裝置，更具體地講，涉及包含攜帶凍干促止血蛋白(諸如纖維蛋白原和凝血酶)的可生物吸收的支架的止血墊。
【背景技術】
[0002]血液是液體組織，包含分散在液相中的紅細胞、白細胞、觸覺小體和血小板。液相是血漿，其包括酸、脂質、溶解的電解質和蛋白質。懸浮在液相中的一種特定蛋白是纖維蛋白原。當出血發生時，纖維蛋白原與水和凝血酶(一種酶)反應以形成血纖維蛋白，所述血纖維蛋白不溶于血液中并聚合以形成凝塊。
[0003]在廣泛多樣的情況下，動物包括人可遭受由于傷口或外科手術期間的出血。在一些情況下，出血是較少量的，并且除施加簡單急救之外的正常血液凝結功能均是需要的。在其他情況下，可發生大量出血。這些情況通常需要專門的設備和材料以及受過訓練的施用適當援助的人員。
[0004]在解決上述問題的努力中，已開發出用于控制過量出血的材料。可生物吸收的局部止血劑(TAH)廣泛應用于外科手術應用當中。TAH涵蓋基于各種織造或非織造織物或海綿的產品，通常由可至少部分地吸收性材料制成，范圍從天然聚合物到合成聚合物以及它們的組合，包括基于丙交酯 -乙交酯的共聚物，例如Polyglactin910、氧化纖維素(OC)、氧化再生纖維素(ORC)、明膠、膠原、幾丁質、殼聚糖等。為了改善止血性能，可將基于上述材料的支架與生物來源的凝血因子(例如凝血酶和/或纖維蛋白原)結合。
[0005]目前市場上可獲得的或處于開發中的多種止血制劑利用凍干纖維蛋白原，其通常與凍干凝血酶結合，并且止血制劑以干粉、半液體糊劑、液體制劑的形式施用或任選地設置在支承支架(例如可生物吸收的織物支架)上。
[0006]對于位于可生物吸收支架上的含有凍干凝血酶和纖維蛋白原的止血敷片或止血墊來說，需要提升裝置的性能和性質，具體地講需要與止血墊的改善的潤濕性相關的強化，以便凍干蛋白質能夠更快地重構并更快地止血；降低的脆碎度，即，在處理和/或切割止血墊的過程中，減少活性粉末脫落；以及改善的組織粘合和傷口封閉性質。
[0007]名稱為“Hemoactive compositions and methods for their manufacture anduse (止血活性組合物及其制造和使用方法)的美國專利N0.7，320，962公開了一種用于抑制出血或遞送試劑的干燥且具有止血活性的材料，其包含:在接觸血液時形成水凝膠的生物相容性的交聯聚合物；以及在接觸血液時增溶的生物相容性的非交聯聚合物；其中交聯聚合物分散在非交聯聚合物的干燥基質中。該參考文獻還公開了存在于至少非交聯聚合物中的增塑劑，并提出所述增塑劑選自聚乙二醇、山梨醇和甘油。
[0008]名稱為“Hemoactive compositions and methods for their mannfacture anduse” (止血活性組合物及其制造和使用方法)的美國專利N0.6，706，690公開了一種在接觸血液時形成水凝膠的干燥材料,所述材料包含:在接觸血液時形成水凝膠的生物相容性的交聯聚合物；在接觸血液時溶解的生物相容性的非交聯聚合物；存在于生物相容性的非交聯聚合物中的增塑劑；并且其中交聯聚合物分散在非交聯聚合物的干燥基質中，其中生物相容性的非交聯聚合物在與血液接觸時，將在15分鐘或更短的時間內溶解。該參考文獻還公開了以材料的I重量％至20重量％存在于非交聯聚合物中的增塑劑，并提出所述增塑劑選自聚乙二醇、山梨醇和甘油。
[0009]名稱為“FREE-STANDING BIODEGRADABLE PATCH” (自支撐的可生物降解敷片)的美國專利申請N0.201I/0071499A1公開了一種裝置，包括:含有固態纖維蛋白原和固態凝血酶的膜，其中該膜是自支撐的，并且被配置成在與水分接觸時形成血纖維蛋白敷片，并且還提出了所述膜還包含增塑劑。所述專利進一步公開了其中膜含有約5至約30重量％的
聚乙二醇的裝置。
[0010]名稱為“Hemostatic woven fabric”(止血織造織物)的美國專利申請N0.2009/0053288A1公開了一種具有改性蒺黎編織圖案并且還包含止血劑的織造織物。該參考文獻還公開了進一步包含選自甘油、丙二醇、聚乙二醇(PEG)、海藻糖以及它們的組合的防腐劑的織造織物。
[0011]名稱為“Hemostatictextile”(止血織物)的美國專利申請 N0.2007/0160653A1公開了一種止血織物，其包含:含有玻璃纖維和一種或多種次級纖維的材料，所述次級纖維選自絲纖維、聚酯纖維、尼龍纖維、陶瓷纖維、竹原纖維或再生竹纖維、棉纖維、人造絲纖維、亞麻纖維、丙交酯和/或乙交酯聚合物、丙交酯/乙交酯共聚物、凝血酶或含有凝血酶的成分；以及一種或多種止血劑，其選自RL血小 板、RL血細胞、血纖維蛋白和纖維蛋白原；所述止血織物能夠在施用于傷口時激活機體內的止血系統。該參考文獻還公開了進一步包含選自甘油、丙二醇、聚乙二醇(PEG)、海藻糖以及它們的組合的防腐劑的止血織物。
[0012]名稱為“COMPOSITION FOR SEALING WOUNDS”(用于封閉傷口的組合物)的 PCT專利公布N0.W01997028832A1公開了一種止血繃帶，其包含使用粘性的非水溶液型粘合劑(諸如粘性多糖、二醇或凡士林)附著至纖維質基質的粉末狀纖維蛋白原和凝血酶。所述非水溶液型粘合劑在繃帶被體液(諸如血液)潤濕之前阻止纖維蛋白原和凝血酶之間發生水解反應，并提出了該繃帶能夠被制出并長期儲存，在此期間保持止血活性。該參考文獻還公開了一種用于減少來自傷口的血液流動的組合物，其包含:載體；通過粘合劑附著至載體的凝血成分，所述粘合劑選自處于凝血酶與纖維蛋白原不相互作用以生成血纖維蛋白的PH下的水以及生物相容性的粘性非水溶液型粘合劑，所述凝血成分以足以治療的量存在，以便在組合物接觸體液從而激活血小板凝聚時，凝結并減少來自傷口的血液流動。該參考文獻還公開了其中在20°C下為非水液體的粘合劑將凝血成分附著至載體的組合物。該參考文獻還公開了一種組合物，其中所述非水溶液型粘合劑選自丙二醇、甘油、凡士林和聚乙二醇。
[0013]該參考文獻還提出了一種止血傷口敷料，其包含:適于作為施用的墊片放置在開放性流血傷口之上或插入其中的纖維質基質；存在于基質表面上的粉末狀凝血因子的混合顆粒的混合物，所述顆粒在暴露于處于生理PH下的含水介質時彼此充分緊密接觸以形成凝塊，所述顆粒通過粘性非水溶液型粘合劑(在20°C下的粘度為至少100厘泊)附著至基質，并且在其暴露于處于生理PH下的含水介質之前阻止在混合顆粒之間發生凝結反應。
[0014]該參考文獻還公開了一種止血傷口敷料，其包含:適于作為施用的墊片放置在開放性流血傷口之上或插入其中的纖維質基質；遍布基質存在的粉末狀凝血因子的混合顆粒的混合物，所述顆粒在暴露于處于生理pH下的含水介質時充分緊密接觸以形成凝塊，所述顆粒通過粘性非水溶液型粘合劑附著至基質，所述粘性非水溶液型粘合劑在顆粒暴露于處于生理pH下的含水介質之前阻止在混合顆粒之間發生凝結反應，其中所述粘合劑選自多糖、聚乙二醇、丙二醇、甘油和凡士林，所述粘合劑已采用液體的形式(包含不到3重量％的水)被施用于基質。

【發明內容】

[0015]簡言之，在一個實施例中，本發明涉及具有改善的脆碎度和潤濕性的止血墊以及制造這種止血墊的方法，所述止血墊包含:可生物吸收的或生物吸收性支撐材料；凍干的凝血酶粉末、凍干的纖維蛋白原粉末以及聚乙二醇粉末(PEG)，它們全部設置在可生物吸收的支撐材料上；其中PEG粉末將凍干的凝血酶粉末與凍干的纖維蛋白原粉末粘結到可生物吸收的支撐材料，但不完全包裹住凍干的凝血酶粉末和/或凍干的纖維蛋白原粉末顆粒。“可生物吸收的”和“生物吸收性”在本文可互換使用，意指可被機體分解且不需要機械移除的材料。
[0016]在一個實施例中，本發明涉及一種制造止血墊的方法，包括以下步驟:(a)在非水流體中形成凍干凝血酶粉末、凍干纖維蛋白原粉末和聚乙二醇粉末的懸浮液；(b)將懸浮液涂覆到由生物吸收性材料制成的支架上；(C)讓流體蒸發，使支架攜帶凝血酶粉末、纖維蛋白原粉末和聚乙二醇粉末的一部分；(d)將支架加熱至超過聚乙二醇熔點，但不超過使凝血酶和纖維蛋白原明顯變性的溫度；(e)將支架冷卻至環境溫度以形成止血墊。
[0017]在一個實施例中，本發明涉及一種向傷口部位提供止血治療或組織封閉的方法，包括以下步驟:(a)形成如上所述的止血墊，(b)將止血墊施用于傷口部位。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0018]圖1示出了組織剝離測試數據和PEG添加劑的效果。
[0019]圖2示出了若干測試體系的滲漏測試數據。
[0020]圖3示出了采用不同濃度PEG3進行測試的脆碎度結果。
【具體實施方式】
[0021]簡言之，在一個實施例中，本發明涉及具有改善的脆碎度和潤濕性的止血墊以及制造這種止血墊的方法，所述止血墊包含:可生物吸收的支撐材料；凍干的凝血酶粉末、凍干的纖維蛋白原粉末以及聚乙二醇粉末，它們全部設置在可生物吸收的支撐材料上；其中PEG粉末將凍干的凝血酶粉末與凍干的纖維蛋白原粉末粘結到可生物吸收的支撐材料，但不完全包裹住凍干的凝血酶和凍干的纖維蛋白原粉末顆粒。
[0022]根據本發明的一個實施例，使用能夠熔融的PEG (任選地在CMC的存在下)形成凍干的蛋白質與可生物吸收的支撐材料的更強效粘合以及所得止血墊的更好潤濕性/粘合性，由此熔化并重新固化的PEG將近側顆粒或粉末與支架纖維粘結，但不會將粉末/顆粒完全覆蓋或包裹住，以便允許水分進入且易于在外科手術環境中將這些生物試劑活化。這產生了使脆碎度降低，伴隨組織粘合和封閉性改善的低成本解決方案。
[0023]在一個實施例中，本發明涉及一種止血或組織封閉材料或墊片。在另一個實施例中，本發明還涉及一種向傷口部位提供止血治療或組織封閉的方法，包括以下步驟:(a)形成如上所述的止血或組織封閉材料或墊片，以及(b)將所述止血或組織封閉材料施用于傷口部位。
[0024]包含凍干的纖維蛋白原和凝血酶的Ih血墊
[0025]根據一個實施例，本發明涉及一種位于可生物吸收支架或基質上的包含凍干的促止血試劑(任選地凍干)的止血墊。優選的止血支架是天然的或經基因工程改造的可生物吸收的聚合物或合成的可生物吸收的聚合物，或它們的混合物。
[0026]天然的或經基因工程改造的可生物吸收的聚合物的例子是蛋白質、多糖以及它們的組合。多糖包括但不限于:纖維素、氧化纖維素、氧化再生纖維素(ORC)、烷基纖維素如甲基纖維素、烷基羥烷基纖維素、羥烷基纖維素、纖維素硫酸酯、羧甲基纖維素的鹽、羧甲基纖維素、羧乙基纖維素、甲殼質、羧甲基甲殼質、透明質酸、透明質酸的鹽、藻酸鹽、藻酸、丙二醇藻酸鹽、糖原、葡聚糖、硫酸葡聚糖、凝膠多糖、果膠、普魯蘭多糖、黃原膠、軟骨素、硫酸軟骨素、羧甲基葡聚糖、羧甲基殼聚糖、殼聚糖、淀粉、直鏈淀粉、支鏈淀粉、聚-N-葡糖胺、聚甘露糖醛酸、聚葡糖醛酸、聚古洛糖醛酸，以及任何上述物質的衍生物。
[0027]合成的可生物吸收的聚合物的例子是聚酯聚合物、共聚物和/或它們的組合。聚酯通常在單體的開環聚合反應中合成，所述單體包括但不限于乳酸、丙交酯(包括L-、D-、內消旋和D，L混合物)、乙醇酸、乙交酯、ε-己內酯、對二氧雜環己酮(1，4_ 二氧六環-2-酮)和三亞甲基碳酸酯(1，3-二氧雜環己烷-2-酮)。
[0028]促止血試劑包括蛋白質、前凝血酶、凝血酶、纖維蛋白原、血纖維蛋白、纖連蛋白、肝素酶、因子X/Xa、因子VII/VIIa、因子IX/IXa、因子XI/XIa、因子XII/XIIa、組織因子、巴曲酶、安克洛酶、蛇靜脈酶、血管性血友病因子、膠原、彈性蛋白、白蛋白、明膠、血小板表面糖蛋白、加壓素、加壓素類似物、腎上腺素、選擇素、促凝血毒液、纖溶酶原激活物抑制劑、血小板活化劑、具有止血活性的合成肽和/或它們的組合。
[0029]本發明的實驗測試中使用的在可生物吸收的支架上包含凍干的凝血酶和纖維蛋白原的止血墊被稱為增強的包含止血生物制劑的墊子，其由已被針刺進ORC背襯層的Polyglactin910 (PG910)纖維的復合基質組成。基質的PG910側涂覆有處于干燥的未反應狀態的人纖維蛋白原和凝血酶粉末。當將增強的包含止血生物制劑的墊子施用于出血部位時，蛋白質易于水化(在幾秒鐘內)，導致纖維蛋白原轉變為血纖維蛋白，進而形成血纖維蛋白凝塊。在組織表面上形成血纖維蛋白促進止血以及與組織的粘合。重要的是，蛋白質在施用于組織之前保持未反應狀態。由于在生產或存儲期間暴露于水而使纖維蛋白原過早地轉變為血纖維蛋白(提前活化)可能對性能和穩定性產生負面影響。
[0030]授予Shetty 等人的名稱為 “Reinforced bioabsorable multilayered fabricfor use in medical devices”(用于醫療裝置的增強型可生物吸收的多層織物)的美國專利7，666，803出于所有目的其全文以引用方式并入本文中，并提出了一種多層織物，該多層織物包含第一可生物吸收的非織造織物和包含氧化多糖的第二可生物吸收的織造或針織織物。
[0031]授予Gorman 等人的名稱為 “REINFORCED B10ABS0RBABLE MULTILAYEREDHEMOSTATIC WOUND DRESSING”(增強型可生物吸收的多層止血傷口敷料)的美國專利申請公布2009/0246238A1出于所有目的其全文以引用方式并入本文中，并提出了一種制備多層傷口敷料的方法，該多層傷口敷料具有第一可生物吸收的非織造織物、一層或多層第二可生物吸收的織造或針織織物、凝血酶和/或纖維蛋白原，該方法包括以下步驟:(a)將可生物吸收的聚合物纖維或紗線卷曲，使其在約10至30個卷曲/英寸的范圍內；(b)將卷曲的纖維或紗線切割至介于約0.1和2.5英寸之間的短纖維長度；(c)梳理所述短纖維，以形成第一可生物吸收的非織造織物，同時在約15至24°C的室溫下將濕度控制到約20至60%;(d)將第一可生物吸收的非織造織物附接到第二可生物吸收的織造或針織織物；(e)將凝血酶和/或纖維蛋白原施加到第一可生物吸收的非織造織物。該參考文獻還公開了一種制備包含可生物吸收的非織造織物、凝血酶和/或纖維蛋白原的傷口敷料的方法，包括以下步驟:(a)將凝血酶和/或纖維蛋白原懸浮在全氟烴中以形成懸浮液；以及(b)將所述懸浮液施加到可生物吸收的非織造織物。
[0032 ]授予Gorman等人的名稱為“Methodfor making an bioabsorable hemostat”(用于制備可生物吸收的止血器的方法)的歐洲專利公布EP2，052，746A2出于所有目的其全文以引用方式并入本文，并公開了一種制備傷口敷料的方法，其特征在于所述方法包括:將凝血酶和/或纖維蛋白原粉末懸浮在全氟烴載流體中，其中粉末不溶解，然后將所得的懸浮液施加到第一可生物吸收的非織造織物。
[0033]授予Gorman 等人的名稱為 “Method for making an absorbable hemostat”(制備可吸收止血器的方法)的已公布美國專利申請2006/0088589A1出于所有目的其全文以引用方式并入本文中，并公開了一種制備傷口敷料的方法，其特征在于所述方法包括:將凝血酶和/或纖維蛋白原粉末懸浮在全氟烴載流體中，其中粉末不溶解，然后將所得的懸浮液施加到第一可吸收的非織造織物。
[0034]在實踐本發明所實施的實驗中使用如上述參考文獻所述制備的包含止血生物制劑的墊子。
[0035]包含止血生物制劑的墊子的基質組分由位于一層Polyglactin910(PG910)非織造纖維下的針織ORC背襯層構組成。在制造基質的過程中，將PG910纖維粗疏成絮狀并針刺進ORC背襯層中，以制備增強的包含止血生物制劑的墊子的基質。
[0036]包含止血生物制劑的墊子的生物組分優選地為凍干形式的人纖維蛋白原和人凝血酶藥物物質。纖維蛋白原和凝血酶物質可以作為一種選擇從非人類動物來源獲得，或者采用已知的方式合成得到。根據下文呈現的數據，實驗中使用的含有止血生物制劑的墊子的組成將清晰明了。除如下所述量的活性粉末之外，本發明的包含止血生物制劑的墊子任選地還涂覆有不同量的PEG3000和CMC，如稍后將在文中所述。包含纖維蛋白原的墊子的生物組分優選地為凍干形式的人纖維蛋白原和人凝血酶。它們分別包含生物活性成分纖維蛋白原和凝血酶，以及其他賦形劑。施用于包含纖維蛋白原的墊子的人纖維蛋白原和人凝血酶的組成為2-20mg/cm2纖維蛋白原和l_1501U/cm2凝血酶。包含止血生物制劑的墊子的支架或基質組分的組成為約5-30mg/cm2的ORC (作為背襯層);和5-30mg/cm2的PG910 (作為載體層)，總基質的重量為約10-60mg/cm2。
[0037]施用于包含止血生物制劑的墊子的人纖維蛋白原和人凝血酶的組成為約2_20mg/cm2纖維蛋白原和l-150IU/cm2凝血酶，且存在其他賦形劑，諸如氯化鈣，任選的精氨酸、甘氨酸、白蛋白、甘露醇、緩沖鹽以及通常存在于血漿衍生產品中的其他任選蛋白質組分。
[0038]實例1:包含止血.生物制劑的墊子的測試樣品的制造[0039]隨后的工序與上文引用的美國專利申請公布2009/0246238A1和歐洲專利公布EP2, 052，746A2中所述的類似，將聚(乙交酯-共-丙交酯)(PGLA，90/lOmol/mol)熔紡成纖維。將80旦尼爾的復絲紗線合并成800旦尼爾的合并紗線。在大約110°C下將合并紗線卷曲。將卷曲的紗線切割成長度為約1.25英寸的短纖維，精確稱量20克卷曲的短纖維并均勻地鋪設在多輥粗梳機的進料傳送帶上。控制環境條件(溫度:21°C /55% RH)。隨后梳理短纖維，以形成非織造絮狀物。然后將該絮狀物從拾取輥中取出，并切割成4等分。將這些等分垂直于收集方向重新送入粗梳機。在該第二次通過之后，對絮狀物進行稱量(19.Sg:織物收率99% )，然后將其壓制成氈。將該緊湊的氈精確地鋪設到ORC織物上，然后經由針刺法將它們牢固地附接。修剪該多層織物，并在三個分立的異丙醇浴中對其進行洗滌以除去紡織油劑和任何機油。將經洗滌的多層織物置于烘箱中在70°C下干燥30分鐘，冷卻并稱量。
[0040]隨后將經洗滌的多層織物切割成4X4英寸的小片。將1.70克比活性(Clauss法)為0.3g/g的BAC-2 (歐姆瑞克斯生物醫藥有限公司(Omrix Biopharmaceuticals,Inc.)),0.30克含凝血酶的粉末(同樣來自歐姆瑞克斯生物醫藥有限公司(OmrixBiopharmaceuticals, Inc))以及任選地0.40克聚乙二醇(PEG)和任選地0.30克羧甲基纖維素(CMC)粉末與約14毫升的非水流體氫氟醚HFE-7000充分混合。將漿液傾入凹槽稍大于4X4英寸的托盤中，以供容納織物之用。隨后將織物置于漿液中浸涂，以使粉末充分沉積在織物上。將所得的多層止血墊風干至少15分鐘。
[0041 ] 隨后，使含有PEG的測試樣品(有些樣品還任選地包含CMC)在超過PEG熔點的溫度下經受熱處理。將樣品放置在溫度設定為65-70°C的標準真空烘箱中，并加熱大約15分鐘。通過加熱至超過PEG 熔點的溫度，涂覆在可生物吸收的支架上的凍干凝血酶和纖維蛋白原顆粒以及任選地CMC顆粒將熔合到支架。隨后使測試樣品冷卻至室溫。
[0042]氧氣釀(HFE)流體為3M Novec? 工程流體 HFE-7000 (3M Novec? EngineeredFluid HFE-7000)，其為可商購自3M公司的1-甲氧基七氟丙烷。HFE-7000是一種惰性、不易燃、低沸點的流體。在制造期間，HFE-7000用作凝血酶和纖維蛋白原以及任選地PEG和/或CMC粉末的惰性遞送載體，并且在制造過程中通過蒸發可基本上完全除去。在本發明的止血墊的制造過程中，任何其他惰性、不易燃、低沸點的非水流體也可用作凝血酶和纖維蛋白原以及任選地PEG和/或CMC粉末的惰性遞送載體。
[0043]任何能夠熔融的具有生物相容性并可生物吸收的粉末也可用于實踐本發明，前提條件是其在環境溫度下為固體并且熔融溫度低于凍干蛋白質明顯變性的溫度。優選的粘合劑為平均分子量為1000至20，000道爾頓的PEG，更優選地為PEG3000至8000。當前的例子使用得自福魯卡公司(Fluka)的PEG3000，其熔點為約56-59°C，且數均粒度為45微米。在優選的實施例中，按粘合劑顆粒的數量計，該顆粒的至少95%的粒度在約25-60微米的范圍內，更優選地在35-55微米的范圍內。
[0044]CMC (30, 000ΡΑ,澄清且穩定)得自陶氏沃爾夫纖維素公司(Dow WolffCellulosics)，并具有20微米的平均粒度。
[0045]BAC-2 (生物活性組分2)是一種血液衍生產品，主要包含纖維蛋白原，其余部分包含白蛋白、緩沖鹽以及通常存在于血漿衍生產品中的其他蛋白質組分。
[0046]根據上述過程制造了三類包含止血生物制劑的墊子的樣品，然后對其進行實驗測試:
[0047]a)含有纖維蛋白原和凝血酶的包含止血生物制劑的墊子；
[0048]b)含有纖維蛋白原、凝血酶和PEG的包含止血生物制劑的墊子；
[0049]c)含有纖維蛋白原、凝血酶、PEG和CMC的包含止血生物制劑的墊子。
[0050]含有少量PEG的包含止血生物制劑的墊子出乎意料地表現出改善的性質，包括改善的剝離強度、脆碎度和潤濕性。這些改善在功能上的結果是封閉性和組織粘合性得到了增強，伴隨著活性物質脆碎度的下降。
[0051]實例2:組織剝離測試
[0052]使用了活性組分的以下可變的濃度水平:
[0053]含有BAC-2纖維蛋白原的粉末:每4X4英寸包含止血生物制劑的墊子樣品含有
5.0和6.7mg/cm2的纖維蛋白原或1.27克和1.7克的含有纖維蛋白原的BAC-2粉末。
[0054]含有凝血酶的粉末:每4X4英寸包 含止血生物制劑的墊子樣品含有300mg含有凝血酶的粉末。
[0055]PEG:每4英寸X4英寸包含止血生物制劑的墊子樣品含有0mg、100mg、400mg。
[0056]CMC:每4英寸X4英寸包含止血生物制劑的墊子樣品含有0mg、300mg。
[0057]組織剝離測試按以下步驟進行。將寬0.75英寸、長約4英寸的包含止血生物制劑的墊子的測試樣品放置在潮濕的牛真皮組織上。立即將施加180mm Hg壓力的加壓砝碼放置在包含止血生物制劑的墊子的測試樣品上方，然后在附著至組織的情況下進行三分鐘孵育。孵育后將砝碼移除，將包含止血生物制劑的墊子樣品夾持在十字頭上，然后以90度角將其從真皮組織剝離，并使用張力計測量剝離力。
[0058]現在參見表1和圖1，其呈現了組織剝離測試的結果。
[0059]表1:組織剝離測試結果
[0060]





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~20FIro 300>003007100
^241T270 Iloo [400 |300 |11￥68
[0061]對表1呈現數據的分析表明，PEG3000以IOOmg至400mg范圍內的量存在顯著地提升了包含止血生物制劑的墊子的組織剝離強度，且PEG越多，剝離強度越高。對所述數據的進一步分析表明，類似地，除一組測試外，CMC30k以300mg的量存在提升了包含止血生物制劑的墊子的組織剝離強度。
[0062]現在參見圖1，其中組織剝離測試的單個數據點以及平均值明確地示出了 400mg的PEG對組織剝離的作用。圖表呈現了具有標稱量的纖維蛋白原和凝血酶(分別為1700mg和300mg)的包含止血生物制劑的墊子相對于另外具有400mg PEG3000的包含止血生物制劑的墊子的數據。對數據的分析表明，PEG3000的存在顯著地提升了包含止血生物制劑的墊子的組織剝離強度。
_3] 實施3:滲漏測試
[0064]滲漏測試按以下步驟進行:使包含止血生物制劑的墊子的測試樣品在處于加壓砝碼下方的同時于豬血漿中經受三分鐘孵育。然后將樣品放置在具有4.5mm孔的平坦金屬夾具上，并將具有匹配孔的透明塑料蓋夾持在包含止血生物制劑的墊子之上。隨后使樣品經受作為以恒定流速遞送穿過所述孔的液壓流體的豬血漿。因此，滲漏是允許的唯一一種失效模式，并且將峰值壓力記錄為輸出。
[0065]現在參見表2和圖2，其呈現了兩種不同量的BAC2的滲漏測試的結果:每4X4英寸包含止血生物制劑的墊子樣品包含1.7g和1.27g含有纖維蛋白原的BAC-2粉末；0mg和400mg PEG3000 ;以及Omg和300mg CMC30k ;所有量均針對每4英寸X 4英寸包含止血生物制劑的墊子樣品計。
[0066]表2:滲漏測試結果
[0067]
【權利要求】
1.一種止血墊，包含: a)可生物吸收的支撐材料； b)凍干的凝血酶粉末， c)凍干的纖維蛋白原粉末，和 d)能夠熔融的粘合劑粉末， 其中所述凝血酶和纖維 蛋白原粉末設置在所述可生物吸收的支撐材料上，并且所述能夠熔融的粘合劑粉末將所述凝血酶粉末和所述纖維蛋白原粉末粘結到所述可生物吸收的支撐材料。
2.根據權利要求1所述的止血墊，其中所述能夠熔融的粘合劑不完全包裹所述凍干的凝血酶粉末和/或所述凍干的纖維蛋白原，并且其中所述能夠熔融的粘合劑為具有約25°C至約100°C的熔點的親水性、生物相容性和可生物吸收的材料。
3.根據權利要求2所述的止血墊，其中所述能夠熔融的粘合劑包含平均分子量為約1500道爾頓至約20，000道爾頓的聚乙二醇聚合物。
4.根據權利要求2所述的止血墊，其中所述能夠熔融的粘合劑基本上由平均分子量為約2500道爾頓至約8000道爾頓、更優選地約2500道爾頓至約4000道爾頓的聚乙二醇聚合物組成。
5.根據權利要求4所述的止血墊，其中用于所述粘合劑粉末的所述聚乙二醇聚合物的平均分子量為約3000道爾頓。
6.根據權利要求3所述的止血墊，其中所述粘合劑顆粒的數均粒度為約45微米。
7.根據權利要求3所述的止血墊，其中所述凍干的凝血酶粉末的重量分數為約10%-15%，所述凍干的纖維蛋白原粉末的重量分數為約55%-85%，并且所述聚乙二醇的重量分數為2%-20%，各重量分數均相對于所述止血墊上的所述凝血酶、纖維蛋白原和聚乙二醇粉末的總重量計。
8.根據權利要求3所述的止血墊，其中所述可生物吸收的支撐材料為織造的或非織造的合成的或天然的可生物吸收材料或它們的組合。
9.根據權利要求3所述的止血墊，其中所述可生物吸收的支撐材料為雙層材料，其包含一層非織造的Polyglactin 910纖維，所述纖維已被針刺進一層針織的氧化再生纖維素中，其中所述粉末僅設置在非織造Polyglactin 910纖維的所述層上。
10.根據權利要求3所述的止血墊，其中通過將所述止血墊的溫度升高至高于所述聚乙二醇聚合物的熔點的點，將所述凍干的凝血酶粉末和所述凍干的纖維蛋白原粉末粘結到所述可生物吸收的支撐材料。
11.根據權利要求3所述的止血墊，其中所述止血墊包含每平方英寸所述止血墊中約200-600IU的凝血酶,如施用時所測得,所述止血墊以每平方英寸所述止血墊中約20-80mg的量包含纖維蛋白原，如施用時所測得，并且所述聚乙二醇以每平方英寸所述止血墊中約6-25mg的量存在。
12.根據權利要求3所述的止血墊，還包含CMC粉末。
13.根據權利要求12所述的止血墊，其中所述CMC粉末的數均粒度為約20微米，并且其中所述CMC粉末以每平方英寸所述止血墊中約15-20mg的量存在。
14.一種制造止血墊的方法，所述方法包括以下步驟:(a)形成凍干的凝血酶粉末、凍干的纖維蛋白原粉末和聚乙二醇粉末的非水懸浮液； (b)將所述懸浮液涂覆到由生物吸收性材料制成的支架上 (C)使所述流體蒸發，同時所述支架攜帶所述凝血酶粉末、所述纖維蛋白原粉末和所述聚乙二醇粉末的一部分； (d)將所述支架加熱至超過所述聚乙二醇粉末熔點的溫度； (e)將所述支架冷卻至低于所述聚乙二醇的熔點的溫度以形成所述止血墊。
15.根據權利要求14所述的方法，其中所述步驟(d)和(e)導致所述聚乙二醇熔化以及所述聚乙二醇固化，以將所述凍干的凝血酶粉末和所述凍干的纖維蛋白原粉末粘結到所述支架上。
16.根據權利要求14所述的方法，其中所述粘合劑粉末基本上由平均分子量為約1500道爾頓至約20，000道爾頓、更優選地約2500道爾頓至約4000道爾頓的聚乙二醇粉末組成，并且所述可生物吸收的支撐材料為織造的或非織造的合成的或天然的可生物吸收材料或它們的組合，并且所述聚乙二醇粉末的數均粒度為約45微米。
17.根據權利要求14所述的方法，其中所述可生物吸收的支撐材料為雙層材料，其包含一層非織造的Polyglactin 910纖維，所述纖維已被針刺進一層針織的氧化再生纖維素中，并且其中所述粉末僅設置在非織造Polyglactin 910纖維的所述層上。
18.根據權利要求14所述的方法，其中所述非水懸浮液包含HFE-7000，并且通過將所述支架浸入所述懸浮液中 或將所述懸浮液噴涂到所述支架上來進行將所述懸浮液涂覆到所述支架上的所述步驟。
19.根據權利要求14所述的方法，其中所述懸浮液還包含CMC粉末顆粒。
20.一種向傷口部位提供止血治療或組織封閉的方法，所述方法包括將根據權利要求1所述的止血墊施用于所述傷口部位上。
【文檔編號】A61L15/26GK103957947SQ201280058779
【公開日】2014年7月30日 申請日期:2012年11月28日 優先權日:2011年12月2日
【發明者】A.D.佩斯內爾, G.拉諾斯 申請人:伊西康公司