膳食補充劑的制作方法
【專利摘要】本發明涉及一種膳食補充劑及其使用方法。更具體地說，本發明涉及一種（特別地但不排他地）用于管理腸道健康或用于治療或預防消化功能障礙、胃腸病癥或其癥狀的組合物，該組合物包含一種獼猴桃提取物與一種淀粉酶抑制劑和/或一種雙功能蛋白酶-淀粉酶抑制劑的組合。
【專利說明】膳食補充劑
發明領域
[0001]本發明涉及一種膳食補充劑及其使用方法。更具體地說，本發明涉及一種(特別地但不排他地)用于管理腸道健康或用于治療或預防消化功能障礙、胃腸病癥和/或其癥狀的組合物，該組合物包含一種獼猴桃提取物與一種淀粉酶抑制劑和/或一種雙功能蛋白酶-淀粉酶抑制劑的組合。
[0002]發明背景
[0003]眾所周知纖維對于健康腸功能是必不可少的，并且富含纖維的飲食降低了多種腸問題的風險。當纖維穿過腸時它吸收水，因此它增大了廢物物質的體積。這還使廢物變軟并且增大它穿過腸的速度和容易度。包含大量膳食纖維并且可以每日服用以幫助消化過程的纖維補充劑是已知的。然而，已知的纖維配制物可能是令人不適的且食用起來不可口的。而且，單獨纖維對于消化系統的完全起作用是不足夠的。
[0004]腸道微生物菌群也是消化功能中的一個重要因素。在人類中，腸道微生物菌群包括500種以上對人類健康具有重大代謝影響的不同物種的細菌。腸道微生物菌群可以被分成潛在有害的物種和潛在促進健康的物種。例如，一些梭狀芽胞桿菌(Clostridium)種和蛋白水解擬桿菌(Bacteriodes )種由于它們與某些急性和慢性胃腸病有關聯而被認為是潛在有害的。它們的代謝終產物是有毒的并且可引起腸中的細胞破壞。另一方面，雙歧桿菌(Bifidobacterium)種和乳酸菌、特別是乳酸桿菌(Lactobaci I Ius)種被認為通過它們對潛在病原體的拮抗活性、免疫調節活性、短鏈脂肪酸的產生以及在致癌物和基因毒素的產生中所涉及的微生物菌群 相關性酶活性的降低而在健康腸道生態系統中起重要作用。
[0005]稱為益生元的食物成分的食用可以幫助治療或預防消化功能障礙或胃腸病癥。益生元是促進消化系統中的一種或多種細菌的生長和/或活性的一種不可消化的食物成分，該食物成分可以有益地影響宿主，從而改善宿主健康。已知的益生元包括可溶性膳食纖維如菊糖和乳果糖，這些可溶性膳食纖維能夠在消化過程中存留下來并且選擇性地刺激結腸中的腸道微生物菌群的有益成員，如雙歧桿菌。
[0006]含有益生菌或益生元或其組合的其他組合物也是可供使用的。這些組合物中的一些可能具有不想要的副作用如過多氣體產生、不舒適的胃氣脹(bloating)，或可能不能被接受者所忍受。其他組合物是基于合成材料或化合物，并且因此可能與其他藥物相沖突。天然或有機產品變得越來越受消費者歡迎。
[0007]酶也在消化過程中起作用。在人胃腸系統中，蛋白水解酶通過將長鏈肽或蛋白質分解成更短的鏈或單個氨基酸(然后它們可以進入內襯小腸的細胞中)來發揮作用。這些更簡單的化合物可以用于身體的生長和維持或可以被轉化成能量。存在于食物中的一些維生素僅在它們周圍的材料被分解的情況下可供于被胃腸內層吸收。例如，如果蛋白質基質沒有首先被水解，那么紅肉中的大部分維生素B12將是不可供使用的。
[0008]典型地，人體產生有效消化所需的大部分但不是所有的酶。一些病癥、飲食或生活方式也可以導致某些酶的缺乏。這類酶可以(例如)通過我們所吃的食物或通過使用膳食補充劑來進行補充。然而，身體可以產生抑制或分解益生酶的消化化合物(如唾液和腸道以及低pH胃酸中的蛋白水解酶)，從而使身體難以獲得有效消化所需的酶的完全平衡。當試圖通過口服給予藥物、膳食補充劑或其他有益的生物產品如益生元酶(prebiotic enzyme)來維持或改善消化功能時，這些消化化合物的存在是一個問題，因為它降低功效。
[0009]獼猴桃屬(Actinidia)，一種主要為其果實(獼猴桃)而培植的植物屬，在不同國家生長。該果實的組分半胱氨酸蛋白酶，獼猴桃素，是顯示增強體外胃蛋白消化的一種酶(里德(Reid)，2004)。Zyactinase?是源自獼猴桃的一種凍干粉，該粉含有酶、獼猴桃素、植物
多酚類、膳食纖維、碳水化合物、以及低聚糖包括半乳葡甘露聚糖(一種類型的低聚糖)，該粉末已經從稱猴桃分離(施羅德(Schroder)等人,2001)。
[0010]獼猴桃具有高密度的維生素C、維生素E、鉀鹽以及鎂鹽，并且還是一種極佳的膳食纖維來源。它還是低脂肪的、不包含膽固醇、具有高抗氧化劑潛力并且特別富含兩種氨基酸:精氨酸和谷氨酸。包含來自物種美味獼猴桃(Actinidia deliciosa)的果實的獼猴桃提取物的組合物已經顯示具有益生元效果并且包含纖維和酶。這類提取物提供關于消化系統的健康和消化功能障礙和/或胃腸病癥的治療和預防方面的益處(PCT/NZ2008/000098)。
[0011]前述包含獼猴桃提取物的組合物已經以膠囊形式配制用于口服攝取。這樣具有以下益處:消化酶不能作用于該提取物直到軟明膠殼已經在胃中被分解。然而，用于口服遞送的其他配制物是令人希望的，因為膠囊可能具有多個缺點。這些缺點包括:
[0012]風味一膠囊不允許風味劑組分有效地添加至該組合物中。
[0013]可口性和方便性一許多消費者反感不得不服用膠囊或發現難以吞服膠囊。味道和與吞服膠囊有關的問題是在提供適合于兒童的配制物時特別重要的考慮因素。
[0014]成本一許多制藥和營養食品公司不具有填充軟膠囊所需的設備并且不得不運輸這些組合物以對它們進行處理，從而增加成本。這種成本可能增加消費者所支付的價格。
[0015]水分一軟膠囊是極度水溶性的，這有助于它們溶解于身體中。然而，這意味著軟膠囊對熱量和濕度非常敏感。在炎熱或潮濕氣候下，膠囊可能在使用之前粘在一起或甚至裂開。
[0016]飲食限制一軟膠囊可能是由明膠制成，明膠傳統上是由動物材料制成。許多群體，如素食者，具有飲食禁止，這些飲食禁止阻止他們食用這些動物產品。明膠膠囊還可能違反遵守習俗的猶太人、穆斯林、佛教徒以及印度教徒的宗教飲食限制。
[0017]劑量一能夠在特定體積的膠囊中遞送的劑量經常小于使用其他劑型可能遞送的劑量。與這些其他形式相比，這有效地降低單個膠囊劑量的功效，從而要求服用更多的膠囊來實現有效劑量。這對于服用膳食補充劑的個人來說可能是不方便的和困難的，從而導致該個人不能遵守具體的治療方案。
[0018]本發明的一個目的是提供克服或改進現有技術的至少一個缺點的一種或多種組合物和/或用途或至少為公眾提供有用的選`擇。
[0019]發明概述
[0020]諸位發明人已經進行了廣泛研究并且已經配制了一種組合物，該組合物可以解決上述多個問題。在這個研究過程中，諸位發明人發現當將獼猴桃提取物暴露于消化酶、特別是存在于口中的那些(如淀粉酶)時，該提取物中的一種或多種益生酶的活性被降低并且因此該組合物在腸道中的功效也可能被折衷。由諸位發明人設計的組合物可以被暴露于消化酶，同時仍在腸道中保持所希望的水平的酶活性和有益功能。[0021]在一個第一方面,本發明提供一種包含一種稱猴桃提取物與一種淀粉酶抑制劑和/或一種雙功能蛋白酶-淀粉酶抑制劑的組合的組合物，該組合物還可任選地包含一種或多種適合的稀釋劑、載體和/或賦形劑。
[0022]在一個實施例中，該獼猴桃提取物包含至少一種半胱氨酸蛋白酶。
[0023]在一個實施例中，該至少一種半胱氨酸蛋白酶包含獼猴桃素。
[0024]在一個實施例中，該獼猴桃提取物包含具有大致1500U/g至大致6000U/g、在一個實施例中大致3000U/g至5000U/g的酶活性的獼猴桃素。
[0025]在一個實施例中，該獼猴桃提取物包含至少一種半胱氨酸蛋白酶以及纖維和/或一種益生元組分。
[0026]在一個實施例中，該獼猴桃提取物是通過如W02008/1366899中所描述的一種提
取方法得來的。
[0027]在一個實施例中，該獼猴桃提取物具有W02008/1366899、NZ554991或US8057831的主題中所描述的獼猴桃提取物的定義特征。
[0028]在一個實施例中，該獼猴桃提取物具有品牌名稱為Zyaciinase?、并且更優選Zyactinase? 45的一種獼猴桃酶復合物的定義特征。
[0029]在一個實施例中，該獼猴桃提取物是具有品牌名稱Zyactinase?、并且更優選Zyactinase* 45的一種獼猴桃酶復合物。
[0030]在一個實施例中，該淀粉酶抑制劑和/或雙功能蛋白酶-淀粉酶抑制劑是如下文所描述的。
[0031]在一個具體實施例中，該淀粉酶抑制劑和/或雙功能蛋白酶-淀粉酶抑制劑是從白蕓豆提取的。在一個實施例中，該淀粉酶抑制劑和/或該雙功能蛋白酶-淀粉酶抑制劑是作為一種白蕓豆提取物來提供的。
[0032]在一個具體實施例中，來自白蕓豆的提取物具有StarehUtew的定義特征。
[0033]在一個具體實施例中，來自白蕓豆的提取物是StarchLite?。
[0034]在一個實施例中，該淀粉酶抑制劑和/或該雙功能蛋白酶-淀粉酶抑制劑是以大約0.5% (w/w)的最小濃度并且以大約50% (w/w)、大約40%、大約30%、大約20%、大約10%、大約5%、大約2%、或大約1%的最大濃度存在于該組合物中。
[0035]在一個實施例中，該獼猴桃提取物是以大約99.5%的最大濃度并且以大約50%、大約60%、大約70%、大約80%、大約90%、大約95%、大約98%、或大約99%的最小濃度存在于該組合物中。
[0036]在某些實施例中，獼猴桃提取物:淀粉酶抑制劑和/或雙功能蛋白酶-淀粉酶抑制劑的比例是在大約200:1與1: 1、大約99:1與1: 1、大約49:1與1: 1、大約35:1與1:1、大約30:1與1: 1、大約28:1與1: 1、大約19:1與1: 1、大約10:1與1: 1、大約9:1與1: 1、大約4:1與1:1之間或是大約1:1。
[0037]在其他實施例中，獼猴桃提取物:淀粉酶抑制劑和/或雙功能蛋白酶-淀粉酶抑制劑的比例是大約34.9:1、大約27.5:1或大約9.6:1，[0038]在某些具體實施例中，該組合物包含濃度為大約98%至99.5%(w/w)的獼猴桃提取物和大約0.5%至2.0% (w/w)的淀粉酶抑制劑、或大約98.5%至99.5%的獼猴桃提取物和大約0.5%至1.5% (w/w)的淀粉酶抑制劑、或大約98%至99%的獼猴桃提取物和大約1.0%至2.0% (w/w)的淀粉酶抑制劑、或大約99%的獼猴桃提取物和大約1%的淀粉酶抑制劑。
[0039]在某些具體實施例中，該組合物包含:
[0040]a)濃度為大約97.5%至99.5% (w/w)的獼猴桃提取物和
[0041]b)濃度為大約0.5%至2.5% (w/w)的雙功能蛋白酶-淀粉酶抑制劑；或
[0042]a)濃度為大約98%至99.5% (w/w)的獼猴桃提取物和
[0043]b)濃度為大約0.5%至2.0% (w/w)的雙功能蛋白酶-淀粉酶抑制劑；或
[0044]a)大約98.5%至99.5%的獼猴桃提取物和
[0045]b)濃度為大約0.5%至1.5% (w/w)的雙功能蛋白酶-淀粉酶抑制劑；或
[0046]a)大約98%至99%的獼猴桃提取物和
[0047]b)濃度為大約1.0%至2.0% (w/w)的雙功能蛋白酶-淀粉酶抑制劑；或
[0048]a)大約99%的獼猴桃提取物和
[0049]b)濃度為大約1%的雙功能蛋白酶-淀粉酶抑制劑。
[0050]在其他具體實施例中，該淀粉酶抑制劑是以大約1.98% (w/w)存在于該組合物中并且該獼猴桃提取物是以大約69.15%存在，該淀粉酶抑制劑是以大約2% (w/w)存在于該組合物中并且該獼猴桃提取物是以大約55%存在，或者該淀粉酶抑制劑是以大約1.6% (w/w)存在于該組合物中并且該獼猴桃提取物是以大約15.38%存在。
[0051 ] 在一個具體實施例中，該組合物包含
[0052]a)濃度為大約1.98% (w/w)的雙功能蛋白酶-淀粉酶抑制劑和
[0053]b)大約69.15%的獼猴桃提取物；
[0054]或
[0055]a)濃度為大約2% (w/w)的雙功能蛋白酶-淀粉酶抑制劑和
[0056]b)大約55%的獼猴桃提取物；
[0057]或
[0058]a)濃度為大約1.6% (w/w)的雙功能蛋白酶-淀粉酶抑制劑和
[0059]b)大約15.38%的獼猴桃提取物。
[0060]在其他具體實施例中，適合的稀釋劑、載體和/或賦形劑可以選自下組，該組包括:壓片糖(例如來自美國佛羅里達州(Florida),多米諾特殊配料公司(Domino Specialty
Ingredients)的D1-Pac 壓片糖)、熱帶風味劑、天然強力甜味劑、硬脂酸鎂、二氧化娃、濃縮鹿汁、大米糖衆/大米糖衆固體、果糖、向日葵卵磷脂、天然風味劑、玉米淀粉、甘油、向日葵油、來自葉綠素的天然色素、壓片糖、蘋果粉、檸檬酸、檸檬粉、三氯蔗糖、葉綠素銅、熱帶風味粉、具有天然抗氧化劑的天然獼猴桃(kiwi) /草莓風味劑、葉綠素銅鈉。
[0061 ] 在一個實施例中，該組合物是以選自下組的形式進行配制，該組由以下各項組成:片劑形式、咀嚼片劑形式、軟咀嚼物形式、粉末形式、用于懸浮在液體中的粉末形式、膠囊形式、液體形式或軟凝膠形式。
[0062]在一個具體實施例中，該組合物被配制為一種片劑并且這些適合的稀釋劑、載體和/或賦形劑可以選自下組，該組包括:壓片糖、熱帶風味劑、天然甜味劑、硬脂酸鎂、以及二氧化硅。
[0063]在一個具體實施例中，該組合物被配制為一種用于懸浮在液體中的粉末并且這些適合的稀釋劑、載體和/或賦形劑可以選自下組，該組包括:蘋果粉、檸檬酸、果糖、檸檬粉、三氯蔗糖、葉綠素銅、以及熱帶風味粉。
[0064]在一個具體實施例中，該組合物被配制為一種軟咀嚼物并且這些適合的稀釋劑、載體和/或賦形劑可以選自下組，該組包括:濃縮蔗汁、果糖、具有天然抗氧化劑的天然獼猴桃/草莓風味劑、葉綠素銅鈉、甘油、大米糖漿/大米糖漿固體、向日葵卵磷脂/向日葵油。
[0065]在一個具體實施例中，該組合物被配制為一種片劑并且淀粉酶抑制劑是以大約1.98% (w/w)存在于該組合物中，并且獼猴桃提取物是以大約69.15%存在。
[0066]在一個具體實施例中，該組合物被配制為一種片劑并且該組合物包含
[0067]a)濃度為大約1.98% (w/w)的雙功能蛋白酶-淀粉酶抑制劑和
[0068]b)大約69.15%的獼猴桃提取物。
[0069]在一個具體實施例中，該組合物被配制為一種用于懸浮在液體中的粉末并且淀粉酶抑制劑是以大約2% (w/w)存在于該組合物中，并且獼猴桃提取物是以大約55%存在。
[0070]在一個具體實施例中，該組合物被配制為一種用于懸浮在液體中的粉末并且該組合物包含
[0071]a)濃度為大約2% (w/w)的雙功能蛋白酶-淀粉酶抑制劑和
[0072]b)大約55%的獼猴桃提取物。
`[0073]在一個具體實施例中，該組合物被配制為一種軟咀嚼物并且淀粉酶抑制劑是以大約1.6% (w/w)存在于該組合物中，并且獼猴桃提取物是以大約15.38%存在。
[0074]在一個具體實施例中，該組合物被配制為一種軟咀嚼物并且該組合物包含
[0075]a)濃度為大約1.6% (w/w)的雙功能蛋白酶-淀粉酶抑制劑和
[0076]b)大約15.38%的獼猴桃提取物。
[0077]在一個第二方面，本發明提供一種治療或預防消化功能障礙、胃腸病癥、和/或與消化病癥或胃腸病癥相關的一種或多種癥狀的方法，該方法包括向受試者給予如在該第一方面中描述的一種組合物。
[0078]在一個實施例中，該消化功能障礙或胃腸病癥選自下組，該組包括:便秘、一種炎癥性腸病、消化不良、胃反流、胃氣脹、脹氣(gas)、腹痛、腹瀉、胃灼熱、腸易激綜合征、或與任何這些病狀相關的一種或多種癥狀。
[0079]在一個第三方面，本發明提供一種改變、維持和/或恢復受試者的腸微生物菌群的平衡的方法，該方法包括向該受試者給予如在該第一方面中描述的一種組合物。
[0080]在一個實施例中，該腸微生物菌群是腸細菌并且該平衡被改變以促進有益菌的量、生長或功效。
[0081]在多個具體實施例中,這些有益菌是選自下組,該組包括:益生菌。
[0082]在多個另外具體實施例中，這些有益菌是選自下組，該組包括:雙歧桿菌和乳酸桿菌。
[0083]在多個另外具體實施例中，這些有益菌是選自下組，該組由以下各項組成:羅伊氏乳酸桿菌(Lactobacillus reuteri)、嗜酸乳酸桿菌(Lactobacillus acidophilus)、乳酸片球菌(Pediococcus acidilactici)、以及植物乳酸桿菌(Lactobacillus plantarum)。
[0084]在一個實施例中，腸微生物菌群是腸細菌并且該平衡被改變以降低病原性腸道細菌的量、生長或功效。
[0085]在一個實施例中，這些病原性腸道細菌是選自下組，該組包括:擬桿菌(Bacteroides)、梭狀芽孢桿菌(Clostridia)、大腸菌(coliforms)、以及硫酸鹽還原菌。一些實例包括大腸桿菌(Escherichia coli)、大腸桿菌(E.coli) 0157:H7、鼠傷寒沙門氏菌(Salmonella typhimurium)、以及金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)。
[0086]在一個第四方面，本發明提供一種維持和/或改善胃腸健康的方法，該方法包括向受試者給予如在第一方面中描述的一種組合物。
[0087]在一個具體實施例中，受試者的胃腸健康是通過預防或治療在第五方面中描述的任何消化功能障礙、胃腸病癥、和/或其一種或多種癥狀和/或以下各項中的一種或多種得以維持和/或改善:
[0088]a.自發性排便的增加
[0089]b.完全自發性排便的增加
[0090]c.腹部不適或腹痛的減少
[0091]d.腸胃氣脹(flatulence)的減少
[0092]e.腸便急的減少
[0093]f.腸氣(wind)或打嗝的減少
[0094]g.胃氣脹的減少
[0095]在一個第五方面，本發明提供根據第一方面的一種組合物在制造用于治療或預防消化功能障礙、胃腸病癥、和/或與消化功能障礙或胃腸病癥相關的一種或多種癥狀的一種藥劑中的用途。
[0096]在一個實施例中，該功能障礙或胃腸病癥選自下組，該組包括:便秘、一種炎癥性腸病、消化不良、胃反 流、胃氣脹、脹氣、腹痛、腹瀉、胃灼熱、腸易激綜合征、或與任何這些病狀相關的一種或多種癥狀。
[0097]在一個第六方面，本發明提供根據第一方面的一種組合物在制造用于改變、維持和/或恢復受試者的腸微生物菌群的平衡的一種藥劑中的用途。
[0098]在一個實施例中，該微生物菌群是腸細菌并且該平衡被改變以促進有益菌的量、生長或功效。
[0099]在多個具體實施例中,這些有益菌是選自下組,該組包括:益生菌。
[0100]在多個另外具體實施例中，這些有益菌是選自下組，該組包括:雙歧桿菌和乳酸桿菌。
[0101]在多個另外具體實施例中，這些有益菌是選自下組，該組由以下各項組成:羅伊氏乳酸桿菌、嗜酸乳酸桿菌、乳酸片球菌、以及植物乳酸桿菌。
[0102]在一個實施例中，腸細菌的平衡被改變以減少病原性腸道細菌的量、生長或功效。
[0103]在一個實施例中，這些病原性腸道細菌是選自下組，該組包括:擬桿菌、梭狀芽孢桿菌、大腸菌、以及硫酸鹽還原菌。一些實例包括大腸桿菌、大腸桿菌0157:H7、鼠傷寒沙門氏菌、以及金黃色葡萄球菌。
[0104]在一個第七方面，本發明提供根據第一方面的一種組合物在制造用于維持和/或改善胃腸健康的一種藥劑中的用途。
[0105]在一個具體實施例中，受試者的胃腸健康是通過預防或治療在第五方面中描述的任何消化功能障礙、胃腸病癥、和/或其一種或多種癥狀和/或以下各項中的一種或多種得以維持和/或改善:
[0106]a.自發性排便的增加
[0107]b.完全自發性排便的增加
[0108]c.腹部不適或腹痛的減少
[0109]d.腸胃氣脹的減少
[0110]e.腸便急的減少
[0111]f.腸氣或打嗝的減少 [0112]g.胃氣脹的減少
[0113]本發明也可以被廣義地認為包括本申請的說明書中單獨或共同地提及的或指示的部分、要素以及特征，其處于所述部分、要素或特征中的兩個或更多個的任何或所有組合的形式，并且其中在此提及特定整體，這些整體在本發明所涉及的領域中具有已知等效物，這類已知等效物應被認為如同單獨地提出一樣結合在此。
[0114]附圖簡要說明
[0115]圖1示出在本發明的組合物的一個四周試驗內自發性排便的數目。
[0116]圖2示出在本發明的組合物的一個四周試驗內完全自發性排便的數目。
[0117]圖3示出在本發明的組合物的一個四周試驗內腹部不適的程度
[0118]圖4示出在本發明的組合物的一個四周試驗內腸胃氣脹的程度
[0119]圖5示出在本發明的組合物的一個四周試驗內的腸便急
[0120]發明詳細說明
[0121]以下是以一般含義給出的本發明的說明，包括其多個優選實施例。本發明進一步根據以下在標題“實例”下給出的披露來闡明，該披露提供支持本發明的實驗數據、本發明的不同方面的具體實例、以及進行本發明的裝置。
[0122]如在此所用，術語“治療(treatment) ”或“治療(treat) ”或類似的應以它們最廣泛的含義來理解。這些術語不一定意味著治療一位受試者直到完全恢復。因此，這些術語包括一種具體病狀的癥狀或嚴重性的改進或預防或以另外的方式降低發展一種具體病狀的風險。
[0123]如在此提及的“受試者”是指任何動物，優選哺乳動物并且包括人類。
[0124]“益生元材料”是指獼猴桃提取物的任何不可消化的組分，這些組分通過選擇性地促進腸道中的一種或多種促進健康的微生物菌群(例如細菌)的生長和/或活性來有益地影響宿主。
[0125]如在此提及的“雙功能蛋白酶-淀粉酶抑制劑”是具有能夠至少抑制或延遲一種或多種淀粉酶和一種或多種蛋白酶的功能或活性的雙功能的任何組合物、提取物或組合物。本領域技術人員將會理解，一種蛋白酶的功能或活性的抑制或延遲可能在與一種淀粉酶的功能或活性的抑制或延遲的同一時間或不同時間發生。該抑制劑的雙功能功能可能是一種提取物或組合物中的一種單一化合物或兩種或更多種化合物的結果。術語“抑制劑”的使用不應被認為意味著一種淀粉酶和/或蛋白酶被完全抑制，但是這可能是優選的。[0126]“與一種消化病癥或一種胃腸病癥相關的癥狀”應被認為包括(例如)腹部不適或腹痛、腸胃氣脹、腸便急、腸氣或打嗝、胃氣脹、腸習慣的改變、便秘、腹瀉、排便減少、不完全排空感、肛門灼燒、硬便、以及胃灼熱。
[0127]在整個說明書中，除非上下文另外要求，否則所提供的百分比是百分比w/w。
[0128]多種不同的化合物與一種獼猴桃提取物結合進行測試以便確定它們是否影響該獼猴桃提取物的酶活性，這些化合物可能影響該提取物維持健康的胃腸道的能力。在這個研究過程中，諸位發明人發現吃獼猴桃不具有與食用一種包膠囊的獼猴桃提取物相同的有益作用。鑒于這一點，他們假設一種或多種唾液酶在益生酶到達胃之前降低這些益生酶的功效。唾液包含可能會引起這種作用的多種酶，包括0-淀粉酶化03.2.1.1)、舌脂肪酶、溶菌酶、唾液乳過氧化物酶、乳鐵蛋白、免疫球蛋白A、唾液酸磷酸酶A+B、N-乙酰胞壁酰基(acetylmuramoyl) -L-丙氨酸酰胺酶、NAD(P)H脫氫酶(醌)、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽轉移酶、3類醛脫氫酶、葡糖-6-磷酸異構酶、以及組織激肽釋放酶(博龍(Boron)，2008)。
[0129]對獼猴桃提取物的分析顯示它包含發現在提供有益健康影響方面有協同作用的三種主要組分:可溶性纖維、益生元組分以及一種或多種半胱氨酸蛋白酶。
[0130]膠囊劑型在防護該提取物免受唾液酶影響方面是有效的，諸位發明人已經顯示這些唾液酶降解這些益生酶并且降低總體治療功效。然而，如前面所指出，不同于膠囊的劑型可能是令人希望的。
[0131]在存在唾液的情況下獼猴桃提取物的測試(實例3)顯示一種白豆提取物增加該獼猴桃提取物的酶活性。諸位發明人預期該發現可以通過該白豆提取物免受存在的唾液淀粉酶和/或唾液蛋白酶的一種保護功能來解釋。白豆提取物包含一種有效的淀粉酶抑制劑，諸位發明人認為該淀粉酶抑制劑可以防止該益生元組分因為唾液淀粉酶的作用而分解。
[0132]關于以上作用，諸位發明人出人意料地發現白豆提取物還在不存在唾液的情況下增強該獼猴桃提取物中的一種或多種酶的活性(參見實例I和2)。此外，諸位發明人發現本發明的組合物具有高穩定性。
[0133]不希望受理論束縛，諸位發明人相信，如果該白豆提取物包含如一種蛋白酶抑制劑和一種淀粉酶抑制劑兩者的雙功能酶活性，那么這些出人意料的作用就可以得到解釋。蛋白酶抑制劑如絲氨酸蛋白酶抑制劑表現出與在該獼猴桃提取物中發現的半胱氨酸蛋白酶有一些結構同源性。假設在不存在該白豆提取物的情況下，半胱氨酸蛋白酶活性分解該獼猴桃提取物酶復合物的組分和其他組分并且降低它的功效和活性。諸位發明人相信在存在白豆提取物的情況下，絲氨酸蛋白酶抑制劑松散地結合半胱氨酸蛋白酶，從而暫時抑制半胱氨酸蛋白酶活性，從而產生該獼猴桃酶復合物的更大的穩定性并且因此產生更長的保質期。當該獼猴桃提取物單獨被配制為一種膠囊而無白豆提取物時，該獼猴桃提取物中的一種或多種半胱氨酸蛋白酶可能分解該膠囊和Zyactinase?的其他組分，從而導致保質期減少。
[0134]此外，諸位發明人預期該獼猴桃提取物增加的酶活性可以通過以下來解釋:白豆提取物中松散結合的絲氨酸蛋白酶抑制劑由于在進入胃時的更低PH與該獼猴桃提取物中的半胱氨酸蛋白酶脫附(如在實例I至3中的酶測定過程中所模擬的)。諸位發明人相信這引起該酶復合物的活性結合位點的變化，該變化進而又修改反應機制，并且因此改變該反應的活化能，從而產生增加的獼猴桃提取物酶復合物功效和活性。[0135]雖然諸位發明人已經證明了使用一種白豆提取物實現的作用，但設想當一起或單獨地提供時，任何淀粉酶抑制劑和/或一種雙功能蛋白酶-淀粉酶抑制劑將會具有類似的作用并且是在本發明的范圍內。
[0136]本發明至少在一定程度上解決了該獼猴桃提取物中的益生酶在進入胃腸道之前或過程中的抑制或分解的問題，并且進一步增強了該獼猴桃提取物的酶活性。
[0137]本發明提供一種包含一種獼猴桃提取物與一種淀粉酶抑制劑和/或一種雙功能蛋白酶-淀粉酶抑制劑的組合的組合物，其中該組合物還可以進一步包含一種或多種適合的稀釋劑、載體和/或賦形劑。
[0138]如在此提及的“獼猴桃提取物”是來自包含至少一種半胱氨酸蛋白酶的獼猴桃的完整果實的一種提取物。在一個實施例中，該至少一種半胱氨酸蛋白酶包含獼猴桃素。在一個實施例中，當使用如在此實例2中描述的Vital Foods (維特食品)方法測量時，該獼猴桃提取物包含具有大致1500U/g至大致6000U/g、優選大致3000U/g至5000U/g的酶活性的獼猴桃素。在一個實施例中，該獼猴桃提取物包含一種或多種半胱氨酸蛋白酶、纖維以及一種益生元組分。雖然存在這些組分的有益作用，但還可能希望去除該纖維組分和或一種益生元組分，并且預期該獼猴桃提取物除至少一種半胱氨酸蛋白酶之外可以包含這些中的任何一種或多種。在一個實施例中，該提取物是源自獼猴桃科中的一種獼猴桃或其雜交種。在一個具體實施例中，該稱猴桃為以下物種:美味稱猴桃(Actinidia deliciosa)(之前被分類為中華稱猴桃(Actinidia chinensis))、中華稱猴桃、軟率稱猴桃(Actinidia arguta)或源自這些物種中的一種或多種的雜交種。
[0139]在一個另外的實施例中，本發明的組合物包含已經被加工成包含另外的、增加或減少比例的一種或多種組分的獼猴桃提取物。例如這類組分可以包括:源自獼猴桃的酶、纖維或益生元組分；源自不同提取物包括植物和細菌提取物的組分，如酶；益生菌(在此定義了其實例)；另外合成產生的組分，包括酶。
[0140]在一個實施例中，在此提及的獼猴桃提取物是由獼猴桃果肉(即無種子或外皮的獼猴桃)制備的一種提取物。在一個另外的實施例中，該獼猴桃提取物是根據W02008/136689或W02006/118476中提出的一種或多種方法來制備的。在一個實施例中，該獼猴桃提取物具有W0136689或W02006/118476的主題中所描述的獼猴桃提取物的定
義特征。在一個替代實施例中，該獼猴桃提取物具有品牌名稱為Zyactinase?、并且更優選Zyactinase? 45的一種獼猴桃酶復合物的定義特征。在一個具體實施例中，該獼猴桃提取物是具有品牌名稱Zyactinase?、并且更優選Zyactinase? 45的獼猴桃酶復合物。Zyactinase?是由新西蘭(New Zealand)維特食品加工有限公司(Vital Food Processors
Limited)生產并且從其可獲得的Phloe?膠囊中存在的主要活性成分。
[0141]雖然在此限定的實驗和優選比例的組合物使用根據上述方法提取的獼猴桃提取物，但應理解根據其他方法提取的獼猴桃提取物也涵蓋在本發明之內。
[0142]從廣義上說，“淀粉酶抑制劑”是引起一種或多種淀粉酶的功能或活性的至少一些抑制或延遲的一種化合物、提取物或組合物。術語“抑制劑”的使用不應被認為意味著該淀粉酶活性被完全抑制，但這可能是優選的。在一個實施例中，該淀粉酶抑制劑是一種蛋白質。淀粉酶抑制劑還可以例如通過在拉希莫娃(Rakhimova)等人(2008)、沙瑪(Sharma)和古普塔(Gupta) (2001)以及莫索洛夫(Mosolov)等人(2001)中描述的方法，通過它們在抑制α-淀粉酶的活性中的作用來鑒別。
[0143]一些研究已經顯示淀粉酶抑制劑在降低胃腸道所有部分中的淀粉消化方面是有效的(在Obiro (奧比羅)、張以及江中綜述的(2008))。這個研究指示淀粉酶抑制劑對整個胃腸道中的唾液淀粉酶和胰淀粉酶是具有活性的。因此，諸位發明人預期本發明還可應用于在胃中或進一步沿胃腸道釋放的包膠囊的獼猴桃提取物。
[0144]熟練技術人員將容易地理解在本發明中有用的淀粉酶抑制劑。然而，僅作為舉例，可以從若干類型的植物、尤其是豆科中的那些植物提取淀粉酶抑制劑。目前可用的α -淀粉酶抑制劑通常是從白蕓豆(菜豆(Phaseolus vulgaris))或小麥(小麥(Triticum aestivum))提取的，但也可以在兵豆(Lens culinaris)、四棱豆(Psophocarpustetragonolobus)、鷹嘴豆(Cicer arietinum)、烏頭葉 5工豆(Vigna aconitifolia)、燕麥、高粱、黑麥、大麥、芒果籽、獼猴桃籽、以及土豆中發現它們。淀粉酶抑制劑的商業制劑的一個實例是由新澤西州(New Jersey )法爾瑪化學實驗室有限公司(PharmaChemLaboratories Inc.)生產的StarchLite? (第7頁，Obiro、張以及江(2008))。這一制劑具有美國食品和藥品監督管理局在聯邦食品、藥品及化妝品法案的章節201 (s)和409下頒布的“一般認為安全”(GRAS)狀態。
[0145]雖然淀粉酶抑制劑已經在減肥產品中使用，但它們先前還未被用于或假定為有效用于增強用于管理腸道健康或用于治療或預防多種胃腸疾病的獼猴桃提取物的功效。
[0146]如以上所提及，本發明可以使用一種雙功能蛋白酶-淀粉酶抑制劑來進行。在一個實施例中，它是一種絲氨酸蛋白酶-淀粉酶抑制劑、或一種胰蛋白酶-淀粉酶抑制劑。“雙功能蛋白酶-淀粉酶抑制劑” 在以上進行了定義并且可以包括具有一種蛋白酶-淀粉酶抑制活性的任何適合的化合物、提取物或組合物。
[0147]熟練技術人員將容易地理解在本發明中有用的雙功能淀粉酶抑制劑。然而，僅作為舉例，這些雙功能淀粉酶抑制劑可以從若干類型的植物、尤其是豆科中的那些植物、從白蕓豆(菜豆)、小麥(小麥)、兵豆、四棱豆、鷹嘴豆、烏頭葉豇豆、燕麥、高粱、黑麥、大麥、芒果籽、獼猴桃籽、以及土豆中提取。
[0148]雙功能蛋白酶-淀粉酶抑制劑可以例如通過在拉希莫娃等人(2008)、沙瑪和古普塔(2001)以及莫索洛夫等人(2001)中描述的方法，通過它們在抑制胰蛋白酶和α-淀粉酶的活性中的作用來鑒別。
[0149]在一個實施例中，該雙功能蛋白酶-淀粉酶抑制劑是白豆提取物，在一個具體實施例中，它是具有Starchlite?的定義特征的一種白豆提取物。在一個具體實施例中，它是Suirchlild
[0150]如在此所用，短語“適合的稀釋劑、載體和/或賦形劑”旨在包括這樣的物質:它們在制備一種組合物中是有用的、可以與本發明的組合物共同給予同時允許它執行它的預期功能、并且通常是安全的、無毒的且既不是生物上不合希望的也不是另外方式不合希望的。適合的稀釋劑、載體和/或賦形劑包括適合用于獸醫使用以及人類使用的那些。適合的稀釋劑、載體和/或賦形劑的實例包括溶液、溶劑、分散介質、延遲劑、乳劑等。
[0151]本領域普通技術人員將容易地理解可以在本發明的組合物中采用的多種適合的稀釋劑、載體和/或賦形劑。然而，作為舉例，供使用的適合的稀釋劑、載體和/或賦形劑可以選自下組，該組包括:壓片糖(例如來自美國佛羅里達州，多米諾特殊配料公司的D1-Pac?.壓片糖)、熱帶風味劑、天然強力甜味劑、硬脂酸鎂、二氧化硅、濃縮蔗汁、大米糖衆/大米糖衆固體、果糖、向日葵卵磷脂、天然風味劑、玉米淀粉、甘油、向日葵油、來自葉綠素的天然色素、壓片糖、蘋果粉、檸檬酸、檸檬粉、三氯蔗糖、葉綠素銅、熱帶風味粉、具有天然抗氧化劑的天然獼猴桃/草莓風味劑、葉綠素銅鈉。
[0152]以片劑形式供使用的適合的稀釋劑、載體和/或賦形劑的實例包括壓片糖(例如來自美國佛羅里達州，多米諾特殊配料公司的D1-Pac? 片糖)、熱帶風味劑、天然強力甜味劑、硬脂酸鎂、以及二氧化硅。
[0153]以軟咀嚼物形式供使用的適合的稀釋劑、載體和/或賦形劑的實例包括濃縮蔗汁、大米糖漿、果糖、向日葵卵磷脂、天然風味劑、玉米淀粉、甘油、向日葵油、以及來自葉綠素的天然色素。
[0154]以膠囊形式供使用的適合的稀釋劑、載體和/或賦形劑的實例包括異麥芽糖醇、
硬脂酸鎂、二氧化硅。
[0155]以用于懸浮在液體中的粉末形式供使用的適合的稀釋劑、載體和/或賦形劑的實例包括蘋果粉、檸檬酸、凍干的檸檬、果糖、三氯蔗糖、葉綠素銅、以及熱帶風味劑。
[0156]此外，預期根據本發明的一種組合物可以與一種或多種另外的成分(包括例如著色劑、調味劑或活性成分)一起配制，這一種或多種另外的成分可能在特定情況下對受試者 有益。
[0157]鑒于所希望的劑型，根據本發明的這個實施例鑒別的成分可以按照如本領域技術人員將知曉和理解的標準程序與一種或多種適合的載體、稀釋劑和/或賦形劑一起配制。應理解用于產生該配制物的工藝應減少可能使該組合物中的活性酶變性的加熱或其他步驟。可以用于生產一種軟咀嚼配制物的示例性方法在US6，517，886和6，482，465中予以描述。
[0158]本發明的另外實施例可以包含被制成液體組合物或包含在食品和飲料中的提取物。例如，本發明的組合物可以并入冷凍或冷藏甜品中；與糖混合或制備為用于在早餐谷物食品和水果上使用的產品上的噴撒物(sprinkle);并入多種多樣的飲品和飲料中；與牛奶或奶油混合；與酸奶或冰淇淋混合；裝入膠囊并且口服或作為一種栓劑給予；壓制成用于口服給予的片劑形式或形成為用于口服給與的灌服藥(drench)。
[0159]存在于該組合物中的獼猴桃提取物、雙功能化合物和/或淀粉酶抑制劑的最佳量可以根據具體的劑型和所要求的單位劑量而不同。
[0160]在一個實施例中，該淀粉酶抑制劑和/或該雙官能蛋白酶-淀粉酶抑制劑是以0.5% (w/w)的最小濃度并且以大約50%、大約40%、大約30%、大約20%、大約10%、大約5%、大約2%、或大約1%的最大濃度存在于該組合物中。
[0161]在一個實施例中，該獼猴桃提取物是以大約99.5%的最大濃度并且以大約50%、大約60%、大約70%、大約80%、大約90%、大約95%、大約98%、或大約99%的最小濃度存在于該組合物中。
[0162]在一個具體實施例中，該組合物包含濃度為大約98%至99.5%(w/w)的獼猴桃提取物和大約0.5%至2.0% (w/w)的淀粉酶抑制劑、或大約98.5%至99.5%的獼猴桃提取物和大約0.5%至1.5% (w/w)的淀粉酶抑制劑、或大約98%至99%的獼猴桃提取物和大約1.0%至2.0% (w/w)的淀粉酶抑制劑、或大約99%的獼猴桃提取物和大約1%的淀粉酶抑制劑。
[0163]在一個具體實施例中，該組合物包含:
[0164]a)濃度為大約97.5%至99.5% (w/w)的獼猴桃提取物和
[0165]b)濃度為大約0.5%至2.5% (w/w)的雙功能蛋白酶-淀粉酶抑制劑；
[0166]或
[0167]a)濃度為大約98%至99.5% (w/w)的獼猴桃提取物和
[0168]b)濃度為大約0.5%至2.0% (w/w)的雙功能蛋白酶-淀粉酶抑制劑；
[0169]或
[0170]a)大約98.5%至99.5%的獼猴桃提取物和
[0171]b)濃度為大約0.5%至1.5% (w/w)的雙功能蛋白酶-淀粉酶抑制劑；或
[0172]a)大約98%至99%的獼猴桃提取物和
[0173]b濃度為大約1.0%至2.0% (w/w)的雙功能蛋白酶-淀粉酶抑制劑；
[0174]或
[0175]a)大約99%的獼猴桃提取物和
[0176]b)濃度為大約1%的雙功能蛋白酶-淀粉酶抑制劑。
[0177]在某些實施例中，獼猴桃提取物:淀粉酶抑制劑和/或雙功能蛋白酶-淀粉酶抑制劑的比例是在大約200:1與1: 1、大約99:1與1: 1、大約49:1與1: 1、大約35:1與1:1、大約30:1與1: 1、大約28:1與1: 1、大約19:1與1: 1、大約10:1與1: 1、大約9:1與1: 1、大約4:1與1:1之間、或是大約1:1。
[0178]在其他實施例中，獼猴桃提取物:淀粉酶抑制劑和/或雙功能蛋白酶-淀粉酶抑制劑的比例是大約34.9:1、大約27.5:1或大約9.6:1。
[0179]在一個具體實施例中，該淀粉酶抑制劑是以大約1.98% (w/w)存在于該組合物中并且該獼猴桃提取物是以大約69.15%存在，該淀粉酶抑制劑是以大約2% (w/w)存在于該組合物中并且該獼猴桃提取物是以大約55%存在，或該淀粉酶抑制劑是以大約1.6% (w/w)存在于該組合物中并且該獼猴桃提取物是以大約15.38%存在。
[0180]在一個具體實施例中，該組合物包含
[0181]a)濃度為大約1.98% (w/w)的雙功能蛋白酶-淀粉酶抑制劑和
[0182]b)大約69.15%的獼猴桃提取物；
[0183]或
[0184]a)濃度為大約2% (w/w)的雙功能蛋白酶-淀粉酶抑制劑和
[0185]b)大約55%的獼猴桃提取物；
[0186]或
[0187]a)濃度為大約1.6% (w/w)的雙功能蛋白酶_淀粉酶抑制劑和
[0188]b)大約15.38%的獼猴桃提取物。 [0189]獼猴桃提取物在治療或預防消化功能障礙、胃腸病癥、和/或其一種或多種癥狀方面是有效的。獼猴桃提取物在治療便秘方面特別有用。獼猴桃提取物中存在的益生元材料可以影響胃腸細菌的平衡，優選促進有益菌的生長并且同時減少有害細菌的生長(PCT/NZ2008/000098)。獼猴桃提取物還有用于胃腸健康的維持或改善。
[0190]本發明提供可以用于以下的一種改進的組合物:用于治療或預防消化功能障礙、胃腸病癥、和/或其一種或多種癥狀；用于改變、維持和/或恢復受試者的腸微生物菌群的平衡；用于維持和/或改善受試者的胃腸健康。該獼猴桃提取物中的酶的活性得到增強并且限制該提取物的酶活性的唾液和胰腺物質被減少。這些作用產生與已知組合物的功效相比具有用于以上用途的增大的功效的一種組合物。
[0191]本發明可以用于治療的消化功能障礙和/或胃腸病癥包括但不限于:便秘、炎癥性腸病癥、消化不良、胃反流、胃氣脹、脹氣、腹痛、腹瀉、胃灼熱、腸易激綜合征、或與任何這些病狀相關的癥狀。
[0192]維持和/或改善受試者的胃腸健康可以涉及預防或治療以上所指出的消化功能障礙、胃腸病癥、和/或其癥狀中的任一種，并且還可以涉及促進以下各項中的一種或多種:
[0193]a.自發性排便的增加
[0194]b.完全自發性排便的增加
[0195]c.腹部不適或腹痛的減少
[0196]d.腸胃氣脹的減少
[0197]e.腸便急的減少
[0198]f.腸氣或打嗝的減少`
[0199]g.胃氣脹的減少
[0200]根據美國胃腸病協會，在健康人群中，排便的頻率可以從一天三次排便至每周三次不同。如果在排出硬化的大便時存在困難或疼痛或如果在排便之間經過大于三天，那么可以懷疑便秘。導致便秘的因素包括:
[0201]。性別(是女性)
[0202]。年齡(年齡較大)
[0203]。飲食
[0204]。生活方式選擇
[0205]。某些藥物的使用
[0206]。腸習慣
[0207]腸易激綜合征(IBS)是以慢性腹痛、不適、胃氣脹、以及腸習慣的改變為特征的一種基于癥狀的診斷。作為一種功能性腸病癥，IBS沒有已知的器質性病因。便秘或腹瀉還可以在任一個占主導的情況下發生，或它們可以交替發生。雖然對于IBS不存在治愈，但存在嘗試減輕癥狀的治療，包括飲食調整、藥物和心理干預。
[0208]IBS在腸變得受刺激時發生并且導致引起腹痛的痙攣。便秘導致排便減少、不完全排空感、肛門灼燒、以及硬便。特別是在長期使用瀉藥的情況下的長期便秘可以隨時間的推移引起導致IBS的炎癥。IBS還可能由胃感染過程中的損傷造成,這是Zyactinase?的益生元組分通過促進有益菌的生長來減輕IBS的原因。
[0209]便秘與IBS之間的關鍵區別是腹痛的存在。在臨床試驗結果(實例7)中，測量到腹痛并且顯示本發明的組合物在減輕腹痛方面具有臨床上顯著的效果。腹痛經常是由脹氣和胃氣脹引起，因此該研究的結果指示這些方面也得以治療。此外，當使用本發明的組合物時，腸胃氣脹和打嗝(統稱為，脹氣)得到減少。當使用本發明的組合物時，指示腹瀉的腸便急也得到減少。
[0210] 諸位發明人還具有初步結果指示本發明的組合物在治療消化不良和胃反流中具有特定功效。
[0211]通過本發明的組合物治療的癥狀還是炎癥性腸病癥、胃灼熱以及IBS的癥狀。如此，由諸位發明人呈現的結果提供了強有力的證據，即本發明的組合物促進排便，因而治療便秘以及減輕在此提及的IBS和其他胃腸病癥的癥狀。
[0212]在提供用于改變、維持和/或恢復受試者的腸微生物菌群(例如細菌)的平衡的一種組合物中，本發明可以維持或刺激腸道中的至少一種有益菌的生長和/或抑制或壓制腸道中的至少一種有害菌或病原菌的生長。優選地，這些有益菌是選自下組，該組包括:益生菌。更優選地，這些有益菌是選自下組，該組包括:雙歧桿菌和乳酸桿菌。一些實例包括羅伊氏乳酸桿菌、嗜酸乳酸桿菌、乳酸片球菌、以及植物乳酸桿菌。優選地，這些有害菌是選自下組，該組包括:病原菌。更優選地，這些有害菌是選自下組，該組包括:擬桿菌、梭狀芽孢桿菌、大腸菌、以及硫酸鹽還原菌。一些實例包括大腸桿菌(例如大腸桿菌0157: H7)、鼠傷寒沙門氏菌、以及金黃色葡萄球菌。最優選地，這些有害菌是選自下組，該組包括:革蘭氏陰性病原菌。用于分析有益的腸道細菌和病原性腸道細菌的水平和身份的材料和方法在NZ554991中找到，該文獻通過引用結合在此。
[0213]該受試者的胃腸健康可以通過與一種或多種胃腸病癥相關的癥狀的發生率來評定，這一種或多種胃腸病癥包括但不限于便秘、炎癥性腸病、消化不良、胃反流、胃氣脹、脹氣、腹痛、腹瀉、胃灼熱、以及腸易激綜合征。
[0214]所提供的劑量和給藥計劃的長度可以取決于(例如)治療要求、胃腸病癥的嚴重性、受試者的年齡和/或總體健康而不同。然而，作為舉例，可以每天給予375mg至llg、例如500mg至3g劑量范圍的獼猴桃提取物。對于輕度消化功能障礙和/或胃腸病癥、對于改變、維持和/或恢復受試者的腸微生物菌群的平衡、以及對于維持和/或改善受試者的胃腸健康來說，劑量可以包括(例如)每天大約1000至1300mg、例如1150mg的劑量。對于更嚴重的消化功能障礙和/或胃腸病癥來說，例如，可以每天給予大約2.5g的獼猴桃提取物。應理解，每日所希望的劑量可以按單一劑量或兩個或更多個分開的劑量進行遞送。在一個實施例中，該組合物是以1150mg的每日劑量、每次575mg的兩個單位劑量來給予的。優選地，該組合物是在食物之前給予。
[0215]現在將僅通過舉例參考以下實例和實驗來描述本發明。
[0216]實例
[0217]在以下實例中提及的獼猴桃提取物是Zyactinase?，并且是根據W02008/136689或TO2006/118476中提出的一種或多種方法制備的。白豆提取物是如在上文中提及的StarehLite?。
[0218]實例I
[0219]對大量商業上可獲得的膳食補充劑和自制制劑與獼猴桃提取物組合針對協同活性進行測試。大量這些提取物含有諸位發明人假設將會增強Zyactinase?酶的活性的蛋白酶。這一點被證明并非總是如此，并且反而添加另外的蛋白酶似乎阻斷Zyactinase⑩活性。根據這些實驗，諸位發明人出人意料地發現淀粉酶抑制劑(其被假定是保護這些蛋白酶而不是補充它們)白豆提取物在增強該獼猴桃提取物的酶活性方面是突出有效的。對這一提取物進行進一步測試并且在以下進行詳述。
[0220]方法
[0221]該獼猴桃提取物的酶活性根據以下詳述的方法進行分析。
[0222]制備以下試劑:8%三氯乙酸、2M NaOH以及含有IOmM EDTA的50mM檸檬酸鹽緩沖劑。檸檬酸鹽緩沖劑是使用1.05g檸檬酸+80ml去離子水+添加的Iml的IM EDTA儲備溶液進行制備；通過添加2N NaOH使pH為6.25并且通過去離子水補足至100ml。
[0223]偶氮酪蛋白底物溶液(5mg/ml)是使用水和含有IOmM EDTA的50mM檸檬酸鹽緩沖齊LK對于每IOOmg底物,各IOml) 二者進行制備。稱猴桃提取物樣品溶液(50mg/ml)是使用溶解于2ml檸檬酸鹽緩沖劑(含有IOmM EDTA的50mM檸檬酸鹽緩沖劑)和2ml蒸餾水中的0.2g獼猴桃提取物進行制備。
[0224]以下方法用于分析獼猴桃素酶活性:1)在4個離心管(1.5ml容量)中添加0.25ml獼猴桃提取物樣品溶液，兩個活性和兩個空白。2)在2個空白管中添加0.5ml的8%三氯乙酸以便校準零點讀數。3)在所有4個管中添加0.5ml底物溶液。4)將所有這些管在35ο下孵育120分鐘。5)將0.5ml的8%三氯乙酸添加至兩個活性管中。6)離心5分鐘。7)將兩批0.75ml上清液移至離心管中；添加0.1ml的2N NaOH。8)在石英池中通過紫外-可見分光光度計測量在420nm下的吸光度(光程長度:10mm)。初始吸光度用空白歸零并且然后添加活性樣品并且記下吸光度。9)單位每毫克中的酶活性計算如下
[0225]在420nm下的吸光度
[0226]-----------------------------------------=U/g
[0227]校準系數X溶液中的獼猴桃提取物的濃度(g)
[0228]將白豆提取物以2%、5%、10%、20%以及50%濃度(w/w)添加至獼猴桃提取物中。獼猴桃提取物以互反百分比量存在。對照樣品是使用0%白豆提取物抑制劑進行制備。所使用的白豆提取物是由新澤西州法爾瑪化學實驗室有限公司生產的Starchlite?。無唾液被
添加至這些溶液中。
[0229]結果
[0230]
【權利要求】
1.包含一種獼猴桃提取物與一種淀粉酶抑制劑和/或一種雙功能蛋白酶-淀粉酶抑制劑的組合的一種組合物，該組合物還可任選地包含一種或多種適合的稀釋劑、載體和/或賦形劑。
2.如權利要求1所述的組合物，其中該獼猴桃提取物包含至少一種半胱氨酸蛋白酶。
3.如權利要求2所述的組合物，其中該至少一種半胱氨酸蛋白酶包含獼猴桃素。
4.如權利要求2或3所述的組合物，其中該獼猴桃提取物進一步包含纖維和/或益生元組分。
5.如以上權利要求中任一項所述的組合物，其中該獼猴桃提取物具有在大致1500U/g至大致6000U/g的范圍內的獼猴桃素酶活性。
6.如以上權利要求中任一項所述的組合物，其中該獼猴桃提取物具有品牌名稱為Zyactinase?、并且更優選Zyactinasee 45的獼猴桃酶復合物的定義特征。
7.如權利要求6所述的組合物，其中該獼猴桃提取物是具有品牌名稱Zyacdnase"、并且更優選Zyactinase? 45的獼猴桃酶復合物。
8.如以上權利要求中任一項所述的組合物，其中該淀粉酶抑制劑和/或雙功能蛋白酶-淀粉酶抑制劑是從豆科中的一種植物提取的。
9.如以上權利要求中 任一項所述的組合物，其中該淀粉酶抑制劑和/或雙功能蛋白酶-淀粉酶抑制劑是從一種選自以下各項的植物提取的:白蕓豆、小麥、兵豆、四棱豆、鷹嘴豆、烏頭葉豇豆、燕麥、高粱、黑麥、大麥、芒果籽、獼猴桃籽、以及土豆。
10.如以上權利要求中任一項所述的組合物，其中該淀粉酶抑制劑和/或雙功能蛋白酶-淀粉酶抑制劑具有StarchLite?的定義特征。
11.如以上權利要求中任一項所述的組合物，其中該淀粉酶抑制劑和/或雙功能蛋白酶-淀粉酶抑制劑包含白豆提取物或StarchLite?+。
12.如以上權利要求中任一項所述的組合物，其中該雙功能蛋白酶-淀粉酶抑制劑是絲氨酸蛋白酶-淀粉酶抑制劑、或胰蛋白酶-淀粉酶抑制劑。
13.如以上權利要求中任一項所述的組合物，其中該雙功能蛋白酶-淀粉酶抑制劑抑制胰蛋白酶和α-淀粉酶的活性。
14.如以上權利要求中任一項所述的組合物，其中該淀粉酶抑制劑和/或雙功能蛋白酶-淀粉酶抑制劑是以大約0.5% (w/w)的最小濃度并且以大約50% (w/w)的最大濃度存在于該組合物中。
15.如以上權利要求中任一項所述的組合物，其中該獼猴桃提取物是以大約99.5%的最大濃度并且以大約50%的最小濃度存在于該組合物中。
16.如以上權利要求中任一項所述的組合物，其中獼猴桃提取物:淀粉酶抑制劑和/或雙功能蛋白酶-淀粉酶抑制劑的比例是在大約200:1與大約1:1之間。
17.如以上權利要求中任一項所述的組合物，其中獼猴桃提取物:淀粉酶抑制劑和/或雙功能蛋白酶-淀粉酶抑制劑的比例是大約34.9:1、大約27.5:1或大約9.6:1。
18.如以上權利要求中任一項所述的組合物，其中該獼猴桃提取物是以大約98%至.99.5% (w/w)的濃度存在于該組合物中并且淀粉酶抑制劑是以大約0.5%至2.0% (w/w)的濃度存在于該組合物中。
19.如以上權利要求中任一項所述的組合物，其中該組合物包含濃度為大約97.5%至.99.5% (w/w)的獼猴桃提取物和濃度為大約0.5%至2.5% (w/w)的雙功能蛋白酶-淀粉酶抑制劑。
20.如以上權利要求中任一項所述的組合物,其中該組合物包含大約1.98% (w/w)的淀粉酶抑制劑和大約69.15% (w/w)的獼猴桃提取物。
21.如以上權利要求中任一項所述的組合物，其中該組合物包含大約2%(w/w)的淀粉酶抑制劑和大約55% (w/w)的獼猴桃提取物。
22.如以上權利要求中任一項所述的組合物，其中該組合物包含大約1.6% (w/w)的淀粉酶抑制劑和大約15.38% (w/w)的獼猴桃提取物。
23.如以上權利要求中任一項所述的組合物，其中該組合物包含濃度為大約1.98%(w/w)的雙功能蛋白酶-淀粉酶抑制劑和大約69.15% (w/w)的獼猴桃提取物。
24.如以上權利要求中任一項所述的組合物，其中該組合物包含濃度為大約2%(w/w)的雙功能蛋白酶-淀粉酶抑制劑和大約55% (w/w)的獼猴桃提取物。
25.如以上權利要求中任一項所述的組合物，其中該組合物包含濃度為大約1.6% (w/w)的雙功能蛋白酶-淀粉酶抑制劑和大約15.38% (w/w)的獼猴桃提取物。
26.如以上權利要求中任一項所述的組合物，其中該組合物是以一種選自下組的形式進行配制的，該組由以下各項組成:片劑形式、咀嚼片劑形式、軟咀嚼物形式、粉末形式、用于懸浮在液體中的粉末形式、膠囊形式、液體形式或軟凝膠形式。
27.一種治療或預防消化功能障礙、胃腸病癥、和/或與一種消化病癥或一種胃腸病癥相關的一種或多種癥狀的方法，該方法包括向一位受試者給予如權利要求1至26中任一項所描述的組合物。
28.如權利要求1至26中任一項所述的組合物在制造用于治療或預防消化功能障礙、胃腸病癥、和/或與一種消化病癥或一種胃腸病癥相關的一種或多種癥狀的藥劑中的用途。
29.如權利要求27所述的方法或如權利要求28所述的用途，其中該消化功能障礙、胃腸病癥、和/或其一種或多種癥狀是選自下組，該組包括:便秘、炎癥性腸病、消化不良、胃反流、胃氣脹、脹氣、腹痛、腹瀉、胃灼熱、腸易激綜合征、或與任何這些病狀相關的癥狀。
30.一種改變、維持和/或恢復一位受試者的腸微生物菌群的平衡的方法，該方法包括向該受試者給予如權利要求1至26中任一項所描述的組合物。
31.如權利要求1至26中任一項所述的組合物在制造用于改變、維持和/或恢復一位受試者的腸微生物菌群的平衡的藥劑中的用途。
32.如權利要求30所述的方法或如權利要求31所述的用途，其中該腸微生物菌群是腸細菌并且該平衡被改變以促進有益菌的量、生長或功效。
33.如權利要求32所述的方法或用途，其中這些有益菌包含益生菌。
34.如權利要求32或33所述的方法或用途，其中這些有益菌是選自下組，該組包括:雙歧桿菌和乳酸桿菌。
35.如權利要求32至34中任一項所述的方法或用途，其中這些有益菌是選自下組，該組由以下各項組成:羅伊氏乳酸桿菌、嗜酸乳酸桿菌、乳酸片球菌、以及植物乳酸桿菌。
36.如權利要求30所述的方法或如權利要求31所述的用途，其中該腸微生物菌群是腸細菌并且該平衡被改變以減少病原性腸道細菌的量、生長或功效。
37.如權利要求36所述的方法或用途，其中這些病原性腸道細菌是選自下組，該組由以下各項組成:擬桿菌、梭狀芽孢桿菌、大腸菌、硫酸鹽還原菌、大腸桿菌、大腸桿菌0157:H7、鼠傷寒沙門氏菌、以及金黃色葡萄球菌。
38.一種維持和/或改善胃腸健康的方法，該方法包括向一位受試者給予如權利要求1至26中任一項所述的組合物。
39.如權利要求1至26中任一項所述的組合物在制造用于維持和/或改善胃腸健康的藥劑中的用途。
40.如權利要求38所述的方法或如權利要求39所述的用途，其中該受試者的胃腸健康是通過預防或治療在權利要求29中描述的這些病狀或癥狀中的任一種和/或促進以下各項中的一種或多種得以維持和/或改善: a.自發性排便的增加 b.完全自發性排便的增加 c.腹部不適或腹痛的減少 d.脹胃氣脹的減少 e.腸便急的減少 f.腸氣或打嗝的減少` g.胃氣脹的減少
41.如權利要求1所述的組合物，該組合物基本上如以上具體地參考任何一個或多個這些實例和/或圖所描述。
42.如權利要求27所述的方法，該方法基本上如以上具體地參考任何一個或多個這些實例和/或圖所描述。
43.如權利要求28所述的用途，該用途基本上如以上具體地參考任何一個或多個這些實例和/或圖所描述。
44.如權利要求38所述的方法，該方法基本上如以上具體地參考任何一個或多個這些實例和/或圖所描述。
45.如權利要求39所述的用途，該用途基本上如以上具體地參考任何一個或多個這些實例和/或圖所描述。
【文檔編號】A61K36/185GK103619344SQ201280030787
【公開日】2014年3月5日 申請日期:2012年5月16日 優先權日:2011年5月16日
【發明者】卡瓦爾·馬莎茹, 艾奧娜·韋爾 申請人:維特食品加工有限公司