多肽的制作方法
【專利摘要】本發明涉及包含其為普蘭林肽類似物的氨基酸序列的多肽、包含這些多肽的藥物組合物以及用作藥物的這些多肽。
【專利說明】多肽
發明領域
[0001]本發明涉及包含其為SEQ ID No:2(普蘭林肽)類似物的氨基酸序列的多肽、包含這些多肽的藥物組合物以及用作藥物的這些多肽。
[0002]發明背景
[0003]大量人類遭受糖尿病和肥胖，并且數量在增長。糖尿病是利用葡萄糖的能力部分或完全喪失的代謝病癥。
[0004]大量治療方案靶向過量的血糖，而其他方案則主要集中在體重減輕。用于降低血糖的最有效抗糖尿病劑是胰島素和其類似物。早已知道，當傳統的胰島素用于治療糖尿病時，其伴隨有體重增加。每天不得不皮下注射胰島素多達數次。
[0005]2型糖尿病通常在早期階段通過飲食和鍛煉進行治療。隨著狀況發展，添加各種口服抗糖尿病劑。注射的藥劑例如GLP-1類似物也可在該階段使用。通常這些藥劑在具有能夠釋放胰島素和胰島淀粉樣多肽的功能性β-細胞的患者中最有效。
[0006]人胰島淀粉樣多肽(SEQ ID No:1)是37個氨基酸長的多肽，其具有難以用作藥物的物理化學性質。具體而言，在體外和/或離體它具有原纖維生成(即，形成原纖維)的傾向，并且由于沉淀而變得無效。此外，胰島淀粉樣多肽難以配制，因為它化學不穩定并且在生理pH下沉淀。因此，它在酸性溶液中配制。
[0007]人胰島淀粉樣多肽與兩個不同的受體復合物結合。這兩個復合物包含降鈣素受體和受體活性修飾蛋白RAMPl或RAMP3。由降鈣素受體和胰島淀粉樣多肽受體之間的親密關系，可預期胰島淀粉樣多肽受體激動劑與降鈣素受體的一定的交叉反應性。作為實例，普蘭林肽對降鈣素受體具有一定的親和力，但對胰島淀粉樣受體更有效(14倍)。
[0008]降鈣素受體存在于全身的許多組織中，并且認為其與骨代謝的調節有關。目前鮭魚降鈣素以商品名Miacalcic?銷售。該產品用于對抗高鈣血癥、骨質疏松癥(包括更年期后骨質疏松癥和糖皮質激素相關的骨質疏松癥)、變形性骨炎(ostitis derforman)(佩吉特病)，并且每天一次通過注射給予或經鼻給予。降鈣素與骨膜、腎和中樞神經系統(CNS)的特定受體結合。鮭魚降鈣素的血漿半壽期是約45分鐘。
[0009]對降鈣素受體具有活性的多肽可用于治療高鈣血癥、骨質疏松癥、佩吉特病、肥胖或肥胖相關疾病，以及用于預防肥胖相關疾病。用目前使用的降鈣素制劑進行治療的缺點是，由于鮭魚降鈣素的血漿半壽期短，藥物必須一天給予數次，并且必須在臨近進餐前給予。
[0010]對降鈣素受體和胰島淀粉樣受體兩者具有雙活性的多肽可能是有利的。
[0011]普蘭林妝(SEQID No:2)是由 Amylin Phrmaceuticals 以Sym丨in?上市的藥物產品，其作為胰島素的附加物用于治療糖尿病。普蘭林肽是胰島淀粉樣多肽受體激動劑。它對降鈣素受體具有較低的活性(約1/14)。
[0012] 普蘭林肽的化學結構如下顯示，并且也顯示于圖1中。
[0013]
【權利要求】
1.包含氨基酸序列的多肽，所述氨基酸序列為SEQID No: 2的類似物，其中 所述類似物包含第14位的谷氨酸殘基； 其中所述類似物的氨基酸序列編號與SEQ ID No: 2的氨基酸序列編號一致；和條件是所述多肽不是N-α -(19-羧基十九烷酰基)-Glu-Glu-Arg-[Glul，Glul4,Hisl7, Glu31]_普蘭林肽；和 任選所述多肽具有與其氨基酸殘基中的至少一個連接的至少一個取代基。
2.權利要求1的多肽，其中所述類似物包含第17位的殘基，所述殘基獨立選自組氨酸、精氨酸、賴氨酸和纈氨酸中的任何一個；優選組氨酸和精氨酸；更優選精氨酸。
3.權利要求1和2中任一項的多肽，其中所述類似物包含第37位的殘基，所述殘基獨立選自脯氨酸和酪氨酸中的任何一個；優選脯氨酸。
4.前述權利要求中任一項的多肽，其中所述類似物包含第35位的殘基，所述殘基獨立選自組氨酸、精氨酸、賴氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、天冬酰胺和谷氨酰胺中的任一個；優選組氨酸、天冬酰胺和天冬氨酸；更優選組氨酸和天冬酰胺；更優選天冬酰胺。
5.前述權利要求中任一項的多肽，其中所述類似物包含其為谷氨酸的第14位氨基酸殘基、其為精氨酸的第17位殘基和其為脯氨酸的第37位殘基。
6.權利要求1的多肽，包含其為式⑴的SEQID No: 2類似物的氨基酸序列: Xaa1-Cys-Xaa3-Thr-Ala-Thr-Cys-Ala-Thr-Gln-Arg-Leu-Ala-Glu-Phe-Leu-Xaa17-Xaal8-Ser-Ser-Xaa21-Xaa22-Phe-Gly-Pro-Xaa26-Leu-Pro-Pro-Thr-Xaa31-Val-Gly-Ser-Xaa35-Thr_Xaa37 ； 式(I) (SEQ ID No:3) 其中 Xaa1 是缺失的或獨立選自 Ala、Cys、Glu、Gly、His、Arg、Ser 和 Lys ； Xaa3 獨立選自 Gly、His、Arg、Ser 和 Asn ； Xaa17 獨立選自 His、Arg、Lys 和 Val ； Xaa18 獨立選自 Arg、Lys 和 His ； Xaa21 獨立選自 Ala、Lys、Gin、Ser 和 Asn ； Xaa22 獨立選自 Glu、Gin、Ser、Thr 和 Asn ； Xaa26 獨立選自 Pro、Arg 和 Ile ；` Xaa31 獨立選自 Serλ Glu、Asp 和 Asn ； Xaa35 獨立選自 His、Arg、Lys、Asp 和 Glu ； Xaa37獨立選自Pro和Tyr ; 并且其中C-末端可任選被衍生化。
7.前述權利要求中任一項的多肽，其中至少一個取代基與所述多肽的至少一個氨基酸殘基連接。
8.前述權利要求中任一項的多肽，其中所述取代基選自表1(較早顯示)所示的取代基中的任何一個。
9.前述權利要求中任一項的多肽，其中取代基與N-末端氨基酸殘基的α-氨基連接，或與Lys殘基連接。
10.前述權利要求中任一項的多肽，其選自表9所不多肽中的任何一個。
11.前述權利要求中任一項的多肽，其中所述多肽為:^0-[(幻-4-羧基-4-(19-羧基十九烷酰基氨基)丁酰基]-[Glul4，Argl7，Pro37]-普蘭林肽[實施例53]。
12.前述權利要求中任一項的多肽，其用作藥物。
13.前述權利要求中任一項的多肽，其用于治療或預防高血糖癥、2型糖尿病、葡萄糖耐量降低、I型糖尿病、肥胖、高血壓、X綜合征、血脂障礙、認知障礙、動脈硬化、心肌梗塞、冠心病和其他心血管病癥、中風、炎性腸綜合征、消化不良和胃潰瘍，和/或用于減少食物攝入、減少β-細胞凋亡、增加β-細胞功能和β-細胞質量和/或用于恢復β-細胞的葡萄糖敏感性，高鈣血癥、骨質疏松癥和變形性骨炎。
14.藥物組合物，包含前述權利要求中任一項的多肽和藥學上可接受的賦形劑。
15.用于制備權利要求14的藥物組合物的方法，包括將前述權利要求中任一項的多肽與至少一種藥學上可接受的 賦形劑混合。
【文檔編號】A61K47/48GK103596973SQ201280028644
【公開日】2014年2月19日 申請日期:2012年6月8日 優先權日:2011年6月10日
【發明者】L.舍弗, T.克魯塞, H.托格森 申請人:諾沃—諾迪斯克有限公司