專利名稱：一種高生物活性靈芝孢子油及其超臨界制備方法
技術領域：
本發明涉及一種高生物活性的靈芝孢子油，屬于中藥領域。還涉及靈芝孢子粉的高能納米沖擊磨破壁方法及該靈芝孢子油的超臨界C02提取和分子蒸餾純化的制備方法。
背景技術：
靈芝孢子是靈芝的有性生殖細胞，含有靈芝的全部遺傳活性物質，具有抗腫瘤、降血糖和免疫調節等作用，在藥理和臨床上都有應用，也是一種良好的天然保健品原材料。靈芝孢子含有豐富的多糖、三萜類化合物、多肽、核酸、有機鍺等抗腫瘤物質，而靈芝三萜類化合物是抗腫瘤的主要功能成分。靈芝三萜類化合物存在于靈芝孢子油中，具有廣泛的生理和藥理活性，它的開發與應用具有廣闊的市場前景。但是靈芝孢子壁有兩層，內部含有1-2
個油滴，外壁是由一層堅硬的幾丁質殼、不溶性纖維和木質素組成，有很強的耐酸堿性，阻止了溶劑對靈芝孢子油的提取。靈芝三萜類化合物存在于靈芝孢子油，是靈芝孢子的主要功能成分，靈芝孢子破壁是靈芝孢子相關產品的必經工序。目前靈芝孢子油的提取方法多采用酸堿法，酶法，缺陷是靈芝孢子破壁率低，靈芝孢子油得率低，同時還會破壞靈芝孢子油的三萜類等有效成分；此外，還有微波法、超聲波法、液氮淬冷法，這些方法雖然能提高靈芝孢子油得率，但是加工效率低，成本高，僅適用于實驗室操作，難以實現工業化生產。另外，靈芝孢子油極易氧化酸敗。在濕度大，與空氣接觸時，破壁靈芝孢子粉在2-4天內就會氧化酸敗，過氧化值超過60mmol/kg,酸價超過30mgK0H/kg,大大超出國家植物油脂的標準，失去營養價值。而有些專利采用擠壓膨化技術，膨化溫度達到80°C以上，破壁后孢子粉內的脂類物質暴露在空氣中，存在氧化哈敗的情況。膨化前用水將食用粉和靈芝孢子粉混合，干燥過程會加速靈芝孢子粉的氧化酸敗。靈芝孢子油在低溫下易結晶，達不到國家食用油的冷凍透明實驗要求(> 5. 5h)，影響產品外觀，目前還沒有專利改善這一狀況。為了克服以上缺點，需要尋找更加合理高效的靈芝孢子粉破壁方法和靈芝孢子油的制備方法，進一步優化生產工藝，既提高靈芝孢子油中有效成分的含量和純度，又保護其不被破壞，提聞油脂得率，并減少能耗，提聞效率，進行規I旲化生廣。
發明內容
本發明的目的是公開一種高生物活性靈芝孢子油及其制備方法，屬中藥領域。該方法采用高能納米沖擊磨將靈芝孢子粉破壁，再結合超臨界CO2萃取和分子蒸餾純化的制備方法。本方法操作過程在無水環境中進行，減少了孢子油在加工過程中的氧化現象，得到的產品性質穩定。采用該方法制得的靈芝孢子油冷凍透明試驗時間超過5. 5小時；測定不飽和脂肪酸組成在60-80%之間，總三萜含量在2-3%，總麥角留醇含量2-4mg/g，靈芝酸A含量大于lmg/g,過氧化值低于5mmol/kg,酸價低于IOmg KOH/g。技術方案一種高生物活性靈芝孢子油制備過程見圖1，工藝要點如下
A精選靈芝孢子粉在50°C干燥8h以上,然后放入高能納米沖擊磨破壁,得破壁靈芝孢子粉。B破壁后的靈芝孢子粉添加食用粉或糊精干法制粒。C將靈芝孢子粉顆粒放置于CO2萃取釜中，加入夾帶劑，進行超臨界萃取。D從萃取釜中取出萃取物，經分子蒸餾除去水分及其他雜質，得到精制靈芝孢子油。具體地講，步驟A中靈芝孢子粉是采用高能納米沖擊磨破壁至230nm左右得到破壁靈芝孢子粉； 步驟B中破壁的靈芝孢子粉添加1-5%的食用粉或糊精，然后采用干法制粒，制得
5-20目的顆粒；步驟C中進行超臨界CO2萃取時，以底層和上層加濾紙及中間層夾脫脂棉放入萃取釜中的濾板處，防止孢子粉進入萃取釜中。萃取壓力25-40MPa，溫度35-45°C，萃取1_2小時，再加入水或乙醇作為夾帶劑，繼續萃取1-2小時；分離釜I中分離壓力8-9MPa，溫度40-500C ;分離釜II中分離壓力5-7MPa，溫度30_40°C。步驟D的具體過程是放出萃取物，經分子蒸餾進一步純化，蒸餾溫度150-180°C，轉速120-200r/min,進樣速率l-4ml/min,得到精制靈芝孢子油。本發明具有以下優點I.靈芝孢子粉在50°C下干燥8h以上再進行粉碎，可有效減少靈芝孢子粉分離時的損失達5%以上。2.優化了破壁工藝，采用磨介大珠中珠小珠比為I : I : 1，孢子粉與磨介比為1:1-1: 3，得到的靈芝孢子粉采用X射線小角散射測定，平均粒徑達到230納米，小于傳統的破壁方法。3.將靈芝孢子粉與1-5%的食用粉或糊精混合均勻，采用制粒機在2_5MPa下干法壓制成5-20目的顆粒。既避免濕法制粒導致靈芝孢子粉酸化腐敗，又能制成較大顆粒。4.超臨界CO2萃取，工藝簡單，溫度低無毒性，且能抑制萃取中孢子油的氧化酸敗。采用濾紙和脫脂棉的夾層處理可有效阻止萃取時孢子粉穿過濾板影響孢子油的透明度。萃取壓力25-40MPa，溫度35_45°C，萃取1_2小時，再加入水或乙醇作為夾帶劑，繼續萃取1-2小時；分離釜I中分離壓力8-9MPa，溫度40_50°C;分離釜II中分離壓力5_7MPa，溫度30-40°C。采用不同的分離溫度和分離壓力可以提高油脂得率，減少處理時間，并能減少孢子油的受熱時間，降低生物活性成分的影響。5.靈芝孢子油中的三萜類化合物極性較強，CO2是非極性的萃取劑，因此需要加入夾帶劑來增加三萜類化合物在溶劑中溶解度。夾帶劑改變溶劑的極性和密度，從而增加溶質對溫度、壓力的敏感度，增大其在溶劑中的溶解度。經試驗，以10-30%的乙醇或水作為夾帶劑，靈芝孢子油的得率提高5-10 %，且三萜化合物及留醇類含量比不加夾帶劑有顯著提高 l_2mg/kg。6.從分離釜放出的萃取物，放入分子蒸餾釜中，經蒸餾溫度150_180°C，轉速120-200r/min,進樣速率l_4ml/min，可進一步純化靈芝孢子油，得到純度高，過氧化值在5mmol/kg以下,酸價在10mgK0H/kg,大大低于傳統的孢子制備方法。
圖I是一種高生物活性靈芝孢子油制備過程示意圖
具體實施例方式實施例I稱取300g靈芝孢子粉，在50°C下干燥8h，然后裝入罐體。按球料比2 1，大珠中珠小珠的比例為I : I : 1，處理時間5h，結束后取出，分離磨介，得到破壁孢子粉。將破壁孢子粉與2%的玉米淀粉混合，放入干壓制粒機，制成15目的顆粒，放入超臨界C02萃取釜中，將濾紙中間夾脫脂棉放入萃取釜中的濾板處，萃取壓力35MPa，溫度40°C，萃取90min ；再添加20%的無水乙醇為夾帶劑，萃取90min ;分離釜I，壓力為5. 5MPa，溫度為35°C;分離釜II壓力為6. 5MPa，溫度為30°C，從分離釜中取出萃取物，得到淡黃色的油狀液體，旋轉蒸發回收夾帶劑。將靈芝孢子油放入分子蒸餾釜中，經蒸餾溫度170°C，轉速140r/min，蒸餾得到精制靈芝孢子油。檢測得到，靈芝孢子粉破壁率94. 59%，油脂得率為29. 36%，其中三萜化合物含量為2. 8 %，麥角甾醇含量2. 65mg/g,靈芝酸A含量2. 01mg/g,過氧化值5. 5mmol. kg,酸價IOmmg KOH/g,冷凍透明時間大于5. 5h。實施例2稱取400g靈芝孢子粉，在50°C下干燥8h，然后裝入罐體。按球料比2. 5 1，大珠中珠小珠的比例為I : I : 1，處理時間6h，結束后取出，分離磨介，得到破壁孢子粉。將破壁孢子粉與3 %的玉米淀粉混合，放入干壓制粒機，制成20目的顆粒，放入超臨界C02萃取釜中，將濾紙中間夾脫脂棉放入萃取釜中的濾板處，萃取壓力30MPa，溫度30°C，萃取IOOmin ;再添加25%的無水乙醇為夾帶劑，萃取90min ;分離釜I，壓力為5MPa，溫度為38°C;分離釜II壓力為6MPa，溫度為32°C，從分離釜中取出萃取物，得到淡黃色的油狀液體，旋轉蒸發回收夾帶劑。將靈芝孢子油放入分子蒸餾釜中，經蒸餾溫度160°C，轉速120r/min，蒸餾得到精制靈芝孢子油。檢測得到，靈芝孢子粉破壁率90. 59%，油脂得率為28. 36%，其中三萜化合物含量為3. I %，麥角甾醇含量2. 85mg/g,靈芝酸A含量2. 21mg/g,過氧化值7. 5mmol. kg,酸價12mmg KOH/g,冷凍透明時間大于5. 5h。實施例3稱取500g靈芝孢子粉，在50°C下干燥10h，然后裝入罐體。按球料比3 1，大珠中珠小珠的比例為I : I : 1，處理時間7h，結束后取出，分離磨介，得到破壁孢子粉。將破壁孢子粉與5%的玉米淀粉混合，放入干壓制粒機，制成10目的顆粒，放入超臨界C02萃取釜中，將濾紙中間夾脫脂棉放入萃取釜中的濾板處，萃取壓力38MPa，溫度35°C，萃取IlOmin ；再添加30%的無水乙醇為夾帶劑，萃取60min ;分離釜I，壓力為5MPa，溫度為40°C;分離釜II壓力為6MPa，溫度為35°C，從分離釜中取出萃取物，得到淡黃色的油狀液體，旋轉蒸發回收夾帶劑。將靈芝孢子油放入分子蒸餾釜中，經蒸餾溫度180°C，轉速160r/min，蒸餾得到精制靈芝孢子油。檢測得到，靈芝孢子粉破壁率91. 43%，油脂得率為27. 36%，其中三萜化合物含量為2. 6 %，麥角甾醇含量2. 48mg/g，靈芝酸A含量I. 79mg/g，過氧化值4. 5mmol. kg，酸價9. Ommg KOH/g，冷凍透明時間大于5. 5h。
權利要求
1.一種靈芝孢子油的制備方法，其特征在于采用高能納米沖擊磨將靈芝孢子粉破壁，干法制粒，超臨界CO2萃取，再結合分子蒸餾純化的制備靈芝孢子油方法。
2.根據權利要求I所述的靈芝孢子油制備方法，其特征在于該方法包括以下幾個步驟 A將精選靈芝孢子粉在50°C干燥8h以上，然后放入高能納米沖擊磨破壁，得破壁靈芝孢子粉。
B破壁后的靈芝孢子粉添加食用粉或糊精干法制粒。
C將靈芝孢子粉顆粒放置于CO2萃取釜中，加入夾帶劑，進行超臨界萃取。
D從萃取釜中取出萃取物，經分子蒸餾除去水分及其他雜質，得到精制靈芝孢子油。
3.根據權利要求2所述的靈芝孢子油制備方法，其特征在于靈芝孢子粉在50°C下先干燥8h以上再進行粉碎。
4.根據權利要求2所述的靈芝孢子油的制備方法，其特征在于步驟A中，采用高能納米沖擊磨粉碎5-8h，孢子粉與磨介比為I : 1-1 3，靈芝孢子粉的平均粒徑達到230納米。
5.根據權利要求2所述的靈芝孢子油的制備方法，其特征在于步驟B中將靈芝孢子粉與1-5%的食用粉或糊精混合均勻，在2-5MPa下，采用制粒機干法壓制成5-20目的顆粒，食用粉包括玉米粉、糯米粉、高粱粉、小米粉、大米粉或者淀粉中的一種或者是它們的任何比例混合物。
6.根據權利要求2所述的靈芝孢子油的制備方法，其特征在于所述步驟C中進行超臨界CO2萃取時，萃取壓力25-40MPa，溫度35_45°C，萃取1_2小時，再加入水或乙醇作為夾帶齊U，繼續萃取1-2小時；分離釜I中分離壓力8-9MPa，溫度40-50°C ;分離釜II中分離壓力5-7MPa，溫度 30-40 °C。
7.根據權利要求2所述的靈芝孢子油的制備方法，其特征在于所述步驟D的具體過程是放出萃取物，經分子蒸餾進一步純化，蒸餾溫度150-180°C，轉速120-200r/min，進樣速率l-4ml/min,得到精制靈芝孢子油。
8.根據權利要求2所述的靈芝孢子油的制備方法，其特征在于采用該方法制得的靈芝孢子油冷凍透明試驗時間超過5. 5小時；測定不飽和脂肪酸組成在60-80%之間，總三萜含量在2-3%,總麥角甾醇含量2-5mg/g,靈芝酸A含量大于lmg/g,過氧化值低于5mmol/kg,酸價低于IOmg KOH/g。
全文摘要
本發明的目的是公開一種高生物活性靈芝孢子油及其制備方法，屬中藥領域。該方法采用高能納米沖擊磨將靈芝孢子粉破壁，干法制粒，超臨界CO2萃取，再結合分子蒸餾純化的制備靈芝孢子油方法；該方法操作過程在無水環境中進行，減少了孢子油在加工過程中的氧化現象，得到的產品性質穩定；該方法制得的靈芝孢子油冷凍透明試驗時間超過5.5小時；測定不飽和脂肪酸組成在60-80％之間，總三萜含量在2-3％，總麥角甾醇含量2-5mg/g，靈芝酸A含量大于1mg/g，過氧化值低于5mmol/kg，酸價低于10mg KOH/g。
文檔編號A61P3/10GK102973616SQ20121056674
公開日2013年3月20日 申請日期2012年12月25日 優先權日2012年12月25日
發明者劉元法, 張新新, 李進偉, 王興國 申請人:江南大學