專利名稱：治療消化道潰瘍用的美洲大蠊提取物的提取方法
技術領域：
本發明涉及醫藥技術領域，尤其涉及一種治療消化道潰瘍用的美洲大蠊提取物的提取方法。
背景技術：
美洲大蠊(Periplaneta americana)是蜚蠊科中體積最大的昆蟲,成蟲體長29 35毫米，紅褐色，翅長于腹部末端。觸角很長，前胸背板中間有較大的蝶形褐色斑紋，斑紋的后緣有完整的黃色帶紋，原產于南美洲，食性廣泛、喜食糖和淀粉、污染食物。美洲大蠊是傳統的中藥材，以成蟲入藥。性寒味咸，有毒，有辛辣味、有散瘀、消積、解毒、利水、消腫等功能。現代研究發現，美洲大蠊表皮含有鞏膜質、甲殼質、溴、鋅、鎳、猛、鉀、鈣、鈦、氯、硫、硅、鋁、鎂等元素，肌肉水解13種氨基酸，身體貯藏微生素BI、B2、煙酸和·抗壞血酸等，淋巴含海藻糖、海藻糖酶、糖蛋白、肌醇、原兒茶酸葡萄甙等，全體含麥角硫因、龍蝦肌堿、胡蘆巴堿、甘氨酸、甜菜堿、肛堿、三甲胺、腺嘌呤等。美洲大蠊干燥蟲體提取物，含有WHF(多元醇類、表皮生長因子)、粘氨酸、粘糖氨酸及多種氨基酸等活性物質，具有抗炎、消腫、促進細胞增殖和新生肉芽組織增長，加速病損組織修復，加快壞死組織脫落，提高機體免疫功能等作用。美洲大蠊目前在治療燒燙傷、口腔潰瘍、胃潰瘍、痔瘡、肛裂、胃炎和消化性胃潰瘍、胃潰瘍性結腸炎、婦科疾病、尿布疹、過敏性鼻炎、抗腫瘤等方面均有應用，但是，目前的應用多為傳統中藥應用方式，部分應用是干燥成蟲作為藥物組方的一部分，部分是將其提取物與其他藥物配伍使用。雖然對美洲大蠊提取物的提取方法有一些公開，但是，美洲大蠊所含成份較多，不同的提取方式得到的成份也有所差異，所得提取物對不同的疾病也有不同的效果。但是，目前公開的技術，對于美洲大蠊特定有效成份提取用于治療某種疾病的技術工藝尚不成熟，針對治療特定疾病所進行的深加工和深度提取將成為新的發展趨勢。
發明內容
本發明的目的是提供一種治療消化道潰瘍用的美洲大蠊提取物的提取方法，所采用的工藝路線可使美洲大蠊中對治療消化道潰瘍的特定有效成份聚集，從而提高單純美洲大蠊提取物對治療消化道潰瘍的治療效果。本發明采用以下技術實現上述目的
治療消化道潰瘍用的美洲大蠊提取物的提取方法，包括以下步驟
A、粉碎將干燥的美洲大蠊蟲體粉碎，過24目篩，制得美洲大蠊粗粉；
B、浸泡將步驟A所得美洲大蠊粗粉用濃度90% 95%的乙醇浸泡，使乙醇液面高出粗粉液面5 IOcm密閉保存，制得粗粉混合液；
C、提取將步驟B所得粗粉混合液在70 85°C的溫度下進行3 5次回流提取，對粗粉混合液進行第一次提取時，加粗粉重量5 8倍量濃度90% 95%的乙醇，提取時間為4 6小時；第二次以后每次提取加粗粉重量3 6倍量濃度90% 95%的乙醇，提取時間為3 5小時；合并提取液，過濾得乙醇提取液；
D、一級濃縮將步驟C所得乙醇提取液在真空度-O.05 -O. 06MPa、溫度50 60°C的條件下減壓濃縮，至比重為I. 05 I. 15時，得乙醇濃縮液；
E、脫脂將步驟D所得乙醇濃縮液加入乙醇濃縮液重量7 10倍量的純化水，邊攪拌邊升溫至85 95 °C后，攪拌10 60分鐘，攪拌速度為20 60轉/分，然后保溫靜置I 5小時使油水分層；
F、二級濃縮將步驟E所得下層水液放出，經濾紙過濾后，濾液在溫度60 80°C、真空度-O. 05 -O. 06MPa條件下減壓濃縮，濃縮至比重為I. 25 I. 35時，得治療消化道潰瘍用的美洲大蠊提取物。優選地，步驟C可以采用以下技術方案將步驟B所得粗粉混合液在75 80°C的·溫度下進行4次回流提取，對粗粉混合液進行第一次提取時，加粗粉5倍量濃度92%的乙醇，提取時間為5小時；第二次以后每次提取加粗粉4倍量濃度92%的乙醇，提取時間為4小時，合并三次提取液，過濾得乙醇提取液。更優選地，步驟E可以采用以下技術方案將步驟D所得乙醇濃縮液加入乙醇濃縮液重量8倍量的純化水，邊攪拌邊升溫至85 95°C后，攪拌40分鐘，攪拌速度為40轉/分，然后保溫靜置4小時使油水分層。本發明的有益效果
本發明所述方法致力于由純中藥應用向特定疾病、特定有效成份應用方向發展，所采用的工藝路線可使美洲大蠊中對治療消化道潰瘍的特定有效成份聚集，從而提高單純美洲大蠊提取物對治療消化道潰瘍的治療效果。具體技術具有的有益效果如下
I、采用本工藝路線進行提取，可有效去除美洲大蠊中含有的大量蛋白質，除脂率高，得到的提取物油脂含量(石油醚提取物)以A (吸收度)/W (重量)計不得過O. 30。2、用濃度90% 95%的乙醇浸泡粗粉，不僅可防止微生物繁殖導致美洲大蠊粗粉腐敗變質，延長保存時間，而且可以提高治療消化道潰瘍的特定有效成份得率。3、采用本發明所述工藝流程，治療消化道潰瘍的特定有效成份得率含量可高達13% 22%，而采用本提取物制備的治療消化道潰瘍的藥物，其對消化道潰瘍的治愈率可達55% 70%，總有效率可達97% 99%。其中，對口腔潰瘍治愈率可達60% 75%，總有效率可達99%以上；對胃及十二指腸潰瘍治愈率可達45% 65%，總有效率可達95%以上。4、采用本發明所述工藝路線進行提取，因各工藝參數控制合理，故可防止提取物中對治療消化道潰瘍的活性物質水解，提高其藥物療效。5、本發明所用工藝路線簡短，可以降低生產成本，提高生產效率。6、取上述發明所得美洲大蠊提取物，加入適量藥劑輔料，可以制成臨床上適用的制劑(片劑、膠囊、合劑、口服液、微丸劑、滴丸劑、噴霧劑、氣霧劑、凝膠劑等)，用于消化道潰瘍(內服或噴涂)的治療。
具體實施例實施例I
治療消化道潰瘍用的美洲大蠊提取物的提取方法，包括以下步驟A、粉碎將200Kg干燥的美洲大蠊蟲體粉碎，過24目篩，制得美洲大蠊粗粉；
B、浸泡將步驟A所得美洲大蠊粗粉用濃度95%的乙醇浸泡，使乙醇液面高出粗粉液面5cm密閉保存，制得粗粉混合液；
C、提取將步驟B所得粗粉混合液投入提取罐內，在70 85°C的溫度下進行3次回流提取，對粗粉混合液進行第一次提取時，加IOOOKg濃度95%的乙醇，提取時間為4小時；第二次以后每次提取加600Kg濃度95%的乙醇，提取時間為3小時；合并提取液，過濾得乙醇提取液；
D、一級濃縮將步驟C所得乙醇提取液放入單效濃縮器，在真空度-O.05 -O. 06MPa、溫度50 60°C的條件下減壓濃縮，至比重為I. 08時，得乙醇濃縮液；
E、脫脂將步驟D所得乙醇濃縮液移入脫脂罐內，加入380Kg純化水，邊攪拌邊升溫至85 95°C后，攪拌10分鐘，攪拌速度為60轉/分，然后保溫靜置I小時使油水分層；·
F、二級濃縮將步驟E所得下層水液放出，經濾紙過濾后，濾液移入濃縮器，在溫度60 80°C、真空度-O. 05 -O. 06MPa條件下減壓濃縮，濃縮至比重為I. 28時，得治療消化道潰瘍用的美洲大蠊提取物25. 2Kg。采用上述工藝流程，主要用于生產治療(口腔潰瘍、胃及十二指腸潰瘍)的藥物提取物，提取收率達12. 6%，各工藝對治療(口腔潰瘍、胃及十二指腸潰瘍)的特定有效成份得率含量可高達16. 3%，其對(口腔潰瘍、胃及十二指腸潰瘍)的治愈率可達63. 4%，總有效率可達98. 9%。油脂含量(石油醚提取物)以A/W計為O. 24。實施例2
治療消化道潰瘍用的美洲大蠊提取物的提取方法，包括以下步驟
A、粉碎將200Kg干燥的美洲大蠊蟲體粉碎，過24目篩，制得美洲大蠊粗粉；
B、浸泡將步驟A所得美洲大蠊粗粉用濃度92%的乙醇浸泡，使乙醇液面高出粗粉液面8cm密閉保存，制得粗粉混合液；
C、提取將步驟B所得粗粉混合液投入提取罐內，在70 85°C的溫度下進行4次回流提取，對粗粉混合液進行第一次提取時，IOOOKg濃度92%的乙醇，提取時間為5小時；第二次以后每次提取加SOOKg濃度92%的乙醇，提取時間為4小時；合并提取液，過濾得乙醇提取液；
D、一級濃縮將步驟C所得乙醇提取液放入單效濃縮器，在真空度-O.05 -O. 06MPa、溫度50 60°C的條件下減壓濃縮，至比重為I. 11時，得乙醇濃縮液；
E、脫脂將步驟D所得乙醇濃縮液移入脫脂罐內，加入416Kg純化水，邊攪拌邊升溫至85 95°C后，攪拌40分鐘，攪拌速度為40轉/分，然后保溫靜置4小時使油水分層；
F、二級濃縮將步驟E所得下層水液放出，經濾紙過濾后，濾液移入濃縮器，在溫度60 80°C、真空度-O. 05 -O. 06MPa條件下減壓濃縮，濃縮至比重為I. 32時，得治療消化道潰瘍用的美洲大蠊提取物31. 4Kg。采用上述工藝流程，主要用于生產治療(口腔潰瘍、胃及十二指腸潰瘍)的藥物提取物，提取收率達15. 7%，各工藝對治療(口腔潰瘍、胃及十二指腸潰瘍)的特定有效成份得率含量可高達17. 1%，其對(口腔潰瘍、胃及十二指腸潰瘍)的治愈率可達59. 5%，總有效率可達97. 2%。油脂含量(石油醚提取物)以A/W計為O. 19。實施例3治療消化道潰瘍用的美洲大蠊提取物的提取方法，包括以下步驟
A、粉碎將200Kg干燥的美洲大蠊蟲體粉碎，過24目篩，制得美洲大蠊粗粉；
B、浸泡將步驟A所得美洲大蠊粗粉用濃度90%的乙醇浸泡，使乙醇液面高出粗粉液面IOcm密閉保存，制得粗粉混合液；
C、提取將步驟B所得粗粉混合液投入提取罐內，在70 85°C的溫度下進行5次回流提取，對粗粉混合液進行第一次提取時，1600Kg濃度90%的乙醇，提取時間為6小時；第二次以后每次提取加1200Kg濃度90%的乙醇，提取時間為5小時；合并提取液，過濾得乙醇提取液；
D、一級濃縮將步驟C所得乙醇提取液放入單效濃縮器，在真空度-O.05 -O. 06MPa、溫度50 60°C的條件下減壓濃縮，至比重為I. 14時，得乙醇濃縮液；
E、脫脂將步驟D所得乙醇濃縮液移入脫脂罐內，加入430Kg純化水，邊攪拌邊升溫至·85 95°C后，攪拌60分鐘，攪拌速度為20轉/分，然后保溫靜置5小時使油水分層；
F、二級濃縮將步驟E所得下層水液放出，經濾紙過濾后，濾液移入濃縮器，在溫度60 80°C、真空度-O. 05 -O. 06MPa條件下減壓濃縮，濃縮至比重為I. 26時，得治療消化道潰瘍用的美洲大蠊提取物32. IKgo采用上述工藝流程，主要用于生產治療(口腔潰瘍、胃及十二指腸潰瘍)的藥物提取物，提取收率達16. 1%，各工藝對治療(口腔潰瘍、胃及十二指腸潰瘍)的特定有效成份得率含量可高達15. 7%，其對(口腔潰瘍、胃及十二指腸潰瘍)的治愈率可達63. 8%，總有效率可達99. 1%。油脂含量(石油醚提取物)以A/W計為O. 21。實施例4
治療消化道潰瘍用的美洲大蠊提取物制備的藥物及治療病例
取上述(實施例I)美洲大蠊提取物7g，加甘油100ml、苯甲酸鈉2. 5g，加純化水至800ml，加熱至沸騰，攪拌，趁熱過濾，濾液再加水1000ml。灌裝成IOOml/瓶的合劑，或IOml/支的口服液。病例資料及分組79例，經胃纖維內鏡確診為胃潰瘍或胃與十二指腸復合性潰瘍；均無并發癥；分為治療組45例和對照組34例。治療組男28例，女17例；年齡15 62歲；病程6個月 17年；胃潰瘍38例(84. 4%)，復合性潰瘍7例(15. 6%)。對照組男20例，女14例，年齡16 60歲；病程6個月 15年；胃潰瘍26例(76. 5%)，復合性潰瘍8例(23. 5%)ο方法對照組采用三聯療法(1999年海南全國幽門螺桿菌科研協作會議推薦的三聯療法方案)奧美拉唑20mg+阿莫西林Ig+替硝唑O. 5g，每日2次，早、晚飯前服用。治療組在對照組治療基礎上加上述口服液IOm服用，每日3次，早晚飯前及睡前各I次，與前三聯藥物間隔至少40分鐘服用。兩組病例用藥均為2周，服藥期間忌煙、酒及酸辣刺激性食物。治療結束后4周及I年進行復查。療效判斷標準(I)治愈自覺癥狀及體征消失，潰瘍面愈合；(2)好轉自覺癥狀和體征明顯減輕，潰瘍面縮小50%以上；(3)無效自覺癥狀及體征未見減輕，潰瘍面未見縮小；(4)復發治愈或好轉后出現治療前的部分或全部癥狀，并經胃纖維內鏡檢查病變陽性者。(I)治愈加(2)好轉為有效。結果:治療組治愈30例(66. 7%)，好轉14例(31. 1%)，無效I例(2.2%)，有效率97. 8%。對照組治愈15 M (44. 1%)，好轉13例(38. 2%)，無效6例(17. 6%)，有效率82. 4%。治療組治愈率高于對照組。實施例5
治療消化道潰瘍用的美洲大蠊提取物制備的藥物及治療病例
取上述(實施例2)美洲大蠊提取物140g，加淀粉670g、糊精220g，加適當濃度酒精制軟材，制粒，干燥，加硬脂酸鎂2g整粒，得顆粒lOOOg，按每粒裝O. 25g填充膠囊。病例資料及分組62例，經胃鏡檢查確診為胃潰瘍，其中男性例41，女性21例，發病年齡17 70歲，病程3月 7年。臨床表現口燥咽干，饑不欲食，院部隱痛，大便干結，小便短少，噯氣吞酸，舌紅少津，脈細而數，辨證屬胃陰虛證型消化性潰瘍。隨機分為治療組35例和對照組27例。方法治療組給予上述膠囊口服，每次2粒，每日3次，對照組給予法莫替丁片，每·次20mg，早晚各I次。而對HP陽性的患者均加服阿莫西林，每次lg，每日2次，痢特靈每次
O.lg，每日2次。青霉素過敏者未列人本觀察范圍。兩組均治療4周為I療程，I療程結束后進行胃鏡復查。療效判斷標準胃鏡療效(1)治愈潰瘍及周圍炎癥全部消失；(2)好轉潰瘍消失，仍有炎癥；(3)有效潰瘍面積縮小> 50% ； (4)無效潰瘍無改變或縮小< 50%。臨床癥候療效治療后臨床癥狀、體征消失或基本消失，證候積分較治療前減少> 95%為臨床痊愈；治療后臨床癥狀明顯改善，證候積分減少> 70%為顯效；治療后臨床癥狀好轉,證候積分減少> 30%為有效；治療后臨床癥狀無明顯改善，證候積分減少不足30%為無效。結果治療組和對照組在中醫癥候療效比較上無顯著差異(P > O. 05)。表明兩藥在中醫證候療效改善方面均有顯著作用，見下表I。兩組在胃鏡療效比較上，治療組總有效率達94. 9%，對照組總有效率為85. 2%，治療組明顯高于對照組，見表2。表I兩組中醫癥候療效比較
i且別卜I臨床疫愈(％) I顯效(％)I有效(％) I無效(％) I總有效率(％)—
治療組 ~9(25·7%)T6~(45.7%) ~9 (25.7%) 1(2.9%) 97. 1%^
對照組丨27|6 (22.2%)|l0 (37.0%) |θ (33.3%) \2 (7.4%) \92.6%^
表2兩組病人胃鏡療效比較
別In I臨床疫愈(％) I顯效(％)I有效(％)I無效(％)I總有效率(％)
^療組(51.4%)~(28.6%).5(14.3%) 2(5.7%)94~9%
it 照組丨27丨13 (48. 1%)丨6 (22.2%)丨4(14.8%) 丨4 (14.8%)|δ5.2%
權利要求
1.治療消化道潰瘍用的美洲大蠊提取物的提取方法，其特征在于包括以下步驟 A、粉碎將干燥的美洲大蠊蟲體粉碎，過24目篩，制得美洲大蠊粗粉； B、浸泡將步驟A所得美洲大蠊粗粉用濃度90% 95%的乙醇浸泡，使乙醇液面高出粗粉液面5 IOcm密閉保存，制得粗粉混合液； C、提取將步驟B所得粗粉混合液在70 85°C的溫度下進行3 5次回流提取，對粗粉混合液進行第一次提取時，加粗粉重量5 8倍量濃度90% 95%的乙醇，提取時間為4 6小時；第二次以后每次提取加粗粉重量3 6倍量濃度90% 95%的乙醇，提取時間為3 5小時；合并提取液，過濾得乙醇提取液； D、一級濃縮將步驟C所得乙醇提取液在真空度-O.05 -O. 06MPa、溫度50 60°C的條件下減壓濃縮，至比重為I. 05 I. 15時，得乙醇濃縮液； E、脫脂將步驟D所得乙醇濃縮液加入乙醇濃縮液重量7 10倍量的純化水，邊攪拌邊升溫至85 95°C后，攪拌10 60分鐘，攪拌速度為20 60轉/分，然后保溫靜置I 5小時使油水分層； F、二級濃縮將步驟E所得下層水液放出，經濾紙過濾后，濾液在溫度60 80°C、真空度-O. 05 -O. 06MPa條件下減壓濃縮，濃縮至比重為I. 25 I. 35時，得治療消化道潰瘍用的美洲大蠊提取物。
2.根據權利要求I所述的治療消化道潰瘍用的美洲大蠊提取物的提取方法，其特征在于，所述步驟C可以采用以下技術方案將步驟B所得粗粉混合液在75 80°C的溫度下進行4次回流提取，對粗粉混合液進行第一次提取時，加粗粉5倍量濃度92%的乙醇，提取時間為5小時；第二次以后每次提取加粗粉4倍量濃度92%的乙醇，提取時間為4小時，合并三次提取液，過濾得乙醇提取液。
3.根據權利要求I或2所述的治療消化道潰瘍用的美洲大蠊提取物的提取方法，其特征在于，所述步驟E可以采用以下技術方案將步驟D所得乙醇濃縮液加入乙醇濃縮液重量8倍量的純化水，邊攪拌邊升溫至85 95°C后，攪拌40分鐘，攪拌速度為40轉/分，然后保溫靜置4小時使油水分層。
全文摘要
本發明提供一種治療消化道潰瘍用的美洲大蠊提取物的提取方法，包括步驟A、粉碎；B、浸泡；C、提取；D、一級濃縮；E、脫脂；F、二級濃縮。采用方法提取，可有效去除美洲大蠊中含有的大量蛋白質，除脂率高；且用濃度90%～95%的乙醇浸泡粗粉，既延長保存時間，又提高了治療消化道潰瘍的特定有效成份得率。因各工藝參數控制合理，可防止提取物中對治療消化道潰瘍的活性物質水解，提高其藥物療效。采用本發明工藝，生產成本低、生產效率高。取上述發明所得美洲大蠊提取物，加入適量藥劑輔料，可以制成臨床上適用的制劑(片劑、膠囊、合劑、口服液、微丸劑、滴丸劑、噴霧劑、氣霧劑、凝膠劑等)，用于消化道潰瘍(內服或噴涂)的治療。
文檔編號A61P1/04GK102885857SQ201210446618
公開日2013年1月23日 申請日期2012年11月10日 優先權日2012年11月10日
發明者何道峰, 郝振平 申請人:昆明賽諾制藥有限公司