專利名稱：一種具有治療糖尿病功效的中藥活性成分的制作方法
技術領域：
本發明屬于中藥學、內分泌學和分子藥理學相結合的領域，具體涉及中藥桅子的活性成分桅子苷(geniposide),桅子苷作為一種胰高血糖素樣肽-I受體(GLP-IR)激動劑，通過特異性激活GLP-IR信號通路，通過保護胰島細胞生存，進而達到實現降低糖尿病模型小鼠血糖水平的功效，在此基礎上可進一步開發出含桅子苷的治療糖尿病的藥物。
背景技術：
近年來糖尿病(DiabetesMellitus),尤其是 2 型糖尿病(Type 2DiabetesMellitus, T2DM)已成為與心血管疾病，腫瘤并列的發病率和死亡率最高的三大非傳染性疾 病之一。β細胞衰竭是糖尿病致病機制的核心環節，是糖尿病發生、發展的病理生理基礎，β細胞再生及功能修復成為近年來糖尿病研究領域的重要方向。桅子別名黃桅子、山桅、白蟾，是茜草科植物桅子的果實。目前，桅子的果實是傳統中藥，屬衛生部頒布的第I批藥食兩用資源，具有護肝、利膽、降壓、鎮靜、止血、消腫等作用，在中醫臨床常用于治療黃疸型肝炎、扭挫傷、高血壓、糖尿病等癥。桅子中含有40余種生理活性物質，其中為國內外所公認的中藥桅子有效成分為環烯醚萜類物質。桅子所含的環烯醚萜類物質包括桅子苷、京尼平苷、羥異桅子苷、桅子苷酸等，其中活性成分最高的是桅子苷和京尼平苷。桅子苷的化學式
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€11,近年來腸促胰素(incretin)的發現極大地拓寬了人們對2型糖尿病發病和治療的理念，開辟了全新的研究空間。腸促胰素是一類腸源性激素，包括胰高血糖素樣肽I(GLP-1)、葡萄糖依賴性促胰島素多肽(GIP)等。其中GLP-I是近年來2型糖尿病治療新靶點。GLP-I在腸道L細胞內合成并分泌，通過與其受體結合激活下游信號通路，主要生理作用是刺激胰島β細胞分泌胰島素，抑制胰高血糖素分泌，從而降低餐后血糖。GLP-I對β細胞的直接保護作用備受關注，它能夠上調胰島素基因表達，直接減少β細胞凋亡，促進β細胞增殖再生，促進胰島素合成作用，有益于改善β細胞功能。然而，內源性GLP-I和GIP的半衰期很短，通常在數分鐘內就會被體內二肽基肽酶4 (DPP-4)降解。GLP-I受體激動劑，DPP-4抑制劑的研發成為治療T2DM的新策略。基于GLP-I的藥物近年來在我國陸續進入臨床應用。目前已在中國上市的GLP-I受體激動劑如艾塞那肽和利拉魯肽，DPP-4抑制劑類有例如西格列汀、沙格列汀及維格列汀。基于GLP-I效應的新藥研發依舊是目前糖尿病治療藥物研發熱點。
發明內容
本發明要解決的技術問題已知中藥桅子能用于糖尿病的治療，但是其作用機制一直未被揭示，本發明則通過大量的研究，解決了如下長期困惑了糖尿病治療領域的問題中藥桅子的降糖功效是通過其活性成分桅子苷，而桅子苷則是潛在的一種GLP-I受體激動劑，具有保護胰島β細胞、降低血糖功效的特性。本發明解決了長期以來學術界一直對桅子治療T2DM作用機理未知的技術問題，在作用機理明確以后，即可以在進一步的工業化生產中大規模的生產出含桅子苷的治療2型糖尿病特效藥物。本發明采用的技術方案·一種來源于中藥桅子的具有治療糖尿病功效的藥物，其有效成分為從中藥桅子提取出的桅子苷，將桅子苷作為GLP-I受體激動劑，通過特異性激活GLP-IR信號通路的途徑來保護胰島β細胞，從而實現降低體內血糖水平的功效。本發明的有益效果中國糖尿病患者最新數量已近I億，是世界上糖尿病患者人數最多的國家。現有治療藥物存在各種不足例如促進胰島素分泌劑磺脲類易發生低血糖、雙胍類輕者有消化道胃腸反應重者乳酸性酸中毒、α葡萄糖苷酶抑制劑不宜用于胃腸道功能紊亂者、胰島素增敏劑有全身水腫的副作用故心力衰竭者慎用。而中醫藥治療糖尿病歷史悠久，療效確切，價格便宜，服用安全，因此本發明對從天然中藥中尋找出新型抗糖尿病活性化合物具有重要意義。
圖I為桅子苷對糖尿病模型小鼠的降糖作用(con對照組，con/gen對照+桅子苷組，diabetes糖尿病模型組，diab/gen糖尿病+桅子苷組)。圖2為顯微鏡下純化后培養的小鼠胰島細胞團。圖3為分離純化培養的小鼠胰島β細胞在不同培養條件下增殖與凋亡比例(5. 5=5. 5mM 葡萄糖，33. 3=33. 3mM 葡萄糖，ILIF=IL-I β +IFN-Y )。圖4為scramble siRNA及siGLP_lR處理的Insl細胞中GLP-1R基因及下游信號通路主要成員Akt激活表達水平的比較。圖5為桅子苷分別刺激scramble siRNA及siGLP_lR處理的小鼠胰島細胞增殖與凋亡比例數據圖。
具體實施例方式實施例I. 2型糖尿病模型動物降糖作用實驗采用SPF級C57/BL6小鼠，重量18-20克，隨機分為4組，每組6只。動物實驗分組情況見表I。表I.動物實驗分組設計(為單次實驗設計數量，共重復3次)
權利要求
1.一 種來源于中藥桅子的具有治療糖尿病功效的藥物，其有效成分為從中藥桅子提取出的活性成分桅子苷，其特征為將桅子苷作為GLP-I受體激動劑，通過特異性激活GLP-IR信號通路的途徑來保護胰島β細胞，從而實現降低體內血糖水平的功效。
全文摘要
本發明為梔子苷作為GLP-1受體激動劑發揮保護胰島β細胞作用，屬于中藥學、內分泌學和分子藥理學相結合的領域，是具體涉及梔子苷通過特異性激活胰高血糖素樣肽-1受體(GLP-1R)信號通路，從而促進胰島β細胞生存，進而實現其降糖功效。本發明采用降糖中藥梔子活性成分梔子苷培養小鼠原代胰島β細胞，能顯著促進β細胞增殖，抑制其凋亡，同時降低高糖或炎癥因子環境下β細胞凋亡率。通過siRNA實驗降低GLP-1R在β細胞表達，梔子苷對β細胞的保護作用被抑制。本發明揭示了梔子苷作為GLP-1R激動劑，通過特異性激活GLP-1R通路實現保護胰島細胞作用，闡明梔子治療糖尿病的分子藥理機制，為中醫藥治療糖尿病提供理論依據。
文檔編號A61P3/10GK102895364SQ201210437549
公開日2013年1月30日 申請日期2012年11月6日 優先權日2012年11月6日
發明者舒孌, 賈曉斌, 韋英杰 申請人:江蘇省中醫藥研究院