專利名稱：一種金針菇甾醇提取物脂質體制劑及其制備方法
技術領域：
本發明屬于納米醫藥領域，涉及從食用菌中提取的水不溶性有效部位及其有效成分加工的制劑，確切地說是一種金針菇留醇提取物脂質體制劑。
背景技術：
金針燕(Flammulina velutipes (ff. Curt. :Fr.) Singer)，又名金錢菌、樸蕈、冬燕、毛柄金錢菌，屬真菌門(Eumycota),擔子菌亞門(Basidiowyeotina),層菌綱(Hymenomycetes)，傘菌目(Agaricales), 口蘑科(Tricholomataceae),小火焰菌屬(Flammulina)、或金錢菌屬(Collybia),是古今中外著名的食用菌之一 {參％ .郭美英主編，《中國金針菇生產》，北京:中國農業出版社，2000·)。
金針菇富含糖類、蛋白質、膳食纖維和礦物質等營養物質。近些年來，學者們已從金針菇中分離得到許多種蛋白質和多糖類活性物質，這些物質具有抗腫瘤，抗病毒，抗蟲，抗真菌，抗人的免疫缺陷病毒(HIV)，降低血清膽固醇，降低血壓，提高機體免疫力，以及保護肝臟等廣泛藥理活性。已經報道的蛋白質類成分主要包括真菌免疫調節蛋白，金針菇毒素，火 素，火燕蛋白原，酶，凝集素，以及Flammulin、Velutin、Flammin和Velin等四種核糖體失活蛋白等。多糖類成分包括PA3DE、PA5DE, EA3> EA5, EAf^P EA7, SFAl, FVP2，胞外多糖，盧-葡聚糖，木甘露聚糖以及甘露巖藻半乳聚糖等(參見Yaqi Wang, Li Bao,Xiaoli Yang， e tc. Bioac ti ve sesqui terpenoids from the solid cul ture of theedible mushroom flammulina velutipes growing on cooked rice[J]. Food Chemistry,2012，132(3): 1346-1353· Hui-Hsin Chang, Kuang-Yang Hsieh，Chen-Hao Yeh，etc·Oral administration of an enoki mushroom protein fve activates innate andadaptive iwmuni ty and induces anti-tumor activity against murine hepatocellularcarcinoma [J]· International Inmunopharmacology, 2010, 10: 239-246· ) 0除此之外，留醇、脂肪酸、黃酮、萜類以及核苷等小分子物質也被從中發現。目前關于這些小分子物質的生物活性報道主要集中在抗菌、抗氧化方面(參見 '方玉梅，張春生，譚萍，etc·金針菇黃酮類化合物的抗氧化性作用[J].食品研究與開發，2012，33(3): 15-18 ； K K Tereshina, A S. Memorskaya. Adaptation of flammulinavelutipes to hypothermia in natural environments the role of lipids andcarbohydrates [J]. Microbiology，2005，74 (3): 279-283. ) 0留醇(Sterol)是一類重要的三胳類(Triterpenes)化合物，它們廣泛存在于植物，動物和真菌當中。根據來源不同，留醇可分為動物留醇和植物留醇(Plant sterols,PS)。膽固醇是動物體內的主要留醇，其中游離膽固醇有穩定細胞膜的作用。植物留醇是植物細胞膜的重要組成部分，與膽固醇類似，自由植物留醇有助于穩定植物細胞膜中的磷脂雙層，它們結構與膽固醇相似，但在C-24位有一個甲基或乙基基團。在高等植物中，最常見的PS是豆甾醇(Stigmasterol)、々-谷甾醇{β -sitosterol)和菜油留醇(Campesterol)，它們有一個共同特點是在留核的C_5，6位有一個雙鍵，這種植物留醇稱為Phytosterols。在十字花科植物中主要存在另外一種甾醇-菜籽甾醇(Brassicasterol)。飽和PS,也稱為植物甾燒醇(Phytostanols),是在甾
核中沒有雙鍵的。在過去的15年里，植物留醇(PS)已經被證明具有降低血清總膽固醇和低密度脂蛋白(LDL)膽固醇濃度的功效，被納入功能性食品的范疇。許多臨床研究顯示，Γ3克/天PS的劑量能夠顯著降低血漿LDL膽固醇的濃度。植物留醇還可用于輔助治療，與他汀類藥物聯合使用的效果超過他汀類藥物加倍劑量的效果。現在已經有40多個關于PS產品的專利，超過 15 個 PS 產品行銷全世界(參見( . Garcia-Lla tas, Μ. T. Rodriguez-Estrada.Current and new insights on phytosterol oxides in plant sterol-enrichedfoodfjj. Chem Phys Lipids, 2011, 164(6): 607-624.) 0關于植物甾醇降低膽固醇作用的確切機制尚不清楚，目前認為存在以下幾種可能(1)由于植物留醇比膽固醇具有更強的疏水性，因此植物留醇可以取代膽固醇進入混合微粒(Mixed micelles)中。這種取代作用使微粒中的膽固醇含量下降,從而減少膽固醇的吸收。(2)植物留醇可以減緩膽固醇在腸上皮細胞中的酯化速度。由于酯化后的固醇·易于進入乳糜微粒中，而未酯化的固醇則較難進入乳糜微粒，因此植物留醇可以減少乳糜微粒中膽固醇的總量。(3)植物甾醇可能通過ATP結合盒(ATP-binding cassette, ABC)轉運體家族影響膽固醇的吸收。ABCG作為ABC的一個亞族，其中兩個基因ABCG5和ABCG8與人體對留醇的選擇性吸收有關，也與膽汁中固醇的分泌有關{參％·.周曉星，蘇宜香.植物甾醇降膽固醇作用的研究現狀[J].國外醫學衛生學分冊，2007，34(2): 101-105·)。目前已經從金針菇的子實體以及菌絲體中得到17種包括麥角留類和豆留類的甾醇化合物(2覽，24/P) -ergosta-7, 22-diene_3盧，5 σ，6 σ，9 σ -tetrol (I)，(22Ε, 24/P)-ergosta-7, 22-diene_3β ,5 α ,ββ -triol (2), (245) -ergosta-7-ene-3β ,5a ,ββ -triol (3), 5 σ , 8 σ -epidioxy- (22/ , 2AR) -ergosta-6, 22-diene_3/ _ol (4) , 5 σ , 8 σ -epidioxy- (2451) -ergost-6-ene~3β _ol (5), (22/ , 24/P) -ergosta-5, 7, 9(11), 22-tetraene-3/ -oI (6), (2451) -ergosta-7-ene-3β ~o\ (7), ergosta-5, 8, 22-triene-3/ -ol (8)，ergosterol (9), ergosta-5, 7-diene-3/ -oI (10), ergosta-7, 22-diene-3/ -ol (11)，ergosta-30 -D-glucopyranoside (12), ergosta-7, 22-diene_5，6-epoxy-3_ol (13),5 a -stigmastan-3, 6-dione (14)，(24/P) -stigmast-4-ene-3_one (15)，ergosta-4, 6, 8 (I4), 22-tetraene-3-one (16), ergosta-8(14)-ene~3β -ol (17)。上述的化合物9 (ergosterol,麥角甾醇)是金針燕所含甾醇類物質的主要成分之一，在植物界也廣泛存在，其抗腫瘤活性已經得到了多次實驗的證實，作用機制亦部分被揭示。Takaku等從姬松鸞中分離出ergosterol,400和800 mg · kg4的劑量連續20 d 口服給予肉瘤180小鼠，可以顯著抑制腫瘤的生長，而且還沒有化療藥物通常所引起的如體重、附睪脂肪組織、胸腺、脾臟重量和白細胞數降低等副作用。進一步研究表明，ergosterol能夠直接抑制基底膜誘導的新生血管形成，因此它是通過直接抑制實體瘤誘導的血管生成來發揮抑瘤活性的{參見..Takeshi Takaku, Yoshiyuki Kimura, HiromichiOkuda. Isolati on of an antitumor compound from agaricus blazei muri11 and itsmechanism of action [J]. Biochemical and Molecular Action of Nutrients, 2001,131 (5): 1409-1413.)。Yazawa等從Polyporus醇提物中分離出ergosterol,它對5%糖精鈉(SodiumSaccharin)、0· 01%N_ 丁基-N-(4-輕基丁基)亞硝胺(BHBN)、3%DL_ 色氛酸(Trp)、2% 丁基化羥基苯甲醚(BHA)等誘導的Wistar大鼠膀胱癌，有很好的治療作用{參UasuharuYazawa, Masami Yoko ta, Kiyoshi Sugiyama. An ti tumor promo ting effect of an activecomponent of polyporus, ergosterol and re la ted compounds on rat urinary bladdercarcinogenesis in a short-term test with concana valin A[J], Bi ol. Pharm. Bull.,2000, 23(11): 1298-1302.)。P21是細胞周期素依賴性激酶抑制因子(Cyclin-dependent kinase inhibitor,CDKI )的一種，屬于細胞周期負性調節因子，它可通過抑制細胞周期素依賴性激酶(Cyclin-dependent kinase, CDK) CDK2、CDK4的活性，使細胞不能跨越G期檢查點，從而阻滯細胞周期的進行，抑制細胞增殖，是腫瘤預防和治療一個靶點。張嫻等發現ergosterol在5(T200可以抑制!fepG2細胞增殖，機制可能與增高Ρ21 mRNA和蛋白表達相關。在 ergosterol 作用 48 h 和 72 h 后，100、200 μ g *mL 1 組 P21 mRNA 的表達明顯增高。24h后P21蛋白已經有升高趨勢,48 h、72 h后明顯升高,提示P21可能是ergosterol的作用靶點。{參％ .張嫻，黃羽’曾星·麥角留醇對肝癌細胞H印G2增殖及P21表達的影響 /77-中藥藥理與臨床,2011，27(5): 26-29.)
高虹等人采用小鼠S180移植瘤實驗研究了巴西燕子實體中ergosterol的體內抗腫瘤活性。結果表明，巴西燕子實體中提取的ergosterol在劑量10、50和100 mg · kg—1 · cf1時的瘤重抑制率分別為62. 75%,76. 61%和79. 18%，說明ergosterol有較強的抑瘤活性，并且認為其抑瘤活性不是通過細胞毒作用發揮，而是通過抑制腫瘤血管增生來扼殺腫瘤(參見·.高虹，史德芳，楊德，etc.巴西菇麥角留醇抗腫瘤活性及作用機理初探/77.中國食用菌，2011, 30(6): 35-39. ) 然而，室溫條件下游離的植物留醇在水和油中的溶解度均很小，在人體內的吸收率亦很低，約為 2% 5% (參見-.I. Rudkowska. Plant sterols and stanols for heal thyageing [J]· Maturi tas, 2010，66(2): 75 -似.)。為了擴寬植物甾醇的應用范圍，提高其溶解度是當務之急。目前主要有兩種方法，其一是利用留核上重要的活性基團——C-3位羥基，可與脂肪酸化合形成留醇酯，植物留醇酯比游離植物留醇在油中的溶解度增加約10倍；其二是利用乳化劑的乳化增溶作用和高壓均質技術，使植物留醇在水相中分散成納米級的分散體，增加它的溶解度。脂質體(Liposome)是一種將藥物包封于類脂質雙分子層的超微型球狀載體制齊U。它們由天然或合成的磷脂和膽固醇制成，與脂質單層結構不同，它們是雙層結構，分為親水性基團和疏水性基團。雙層脂質的親水性基團伸向水相(外部和內部)，疏水性基團則伸向另一端，形成一個薄膜狀的內核。脂質體的這一特點使得親水性和疏水性藥物都能夠被包封，親水性藥物包埋在內部水相中，水難溶性和油溶性藥物駐留在脂雙層中。脂質體的大小取決于材料組成和制備方法，直徑從50 nm左右至超過I μπι。1971年,Rymen等人開始將脂質體用作藥物載體，通過減低毒性提高藥效以改善藥物治療指數。由于具有納米粒徑，良好的生物相容性，生物可降解性，疏水性和親水性，低毒性和免疫原性等許多優點，在所有納米藥物平臺中，脂質體是最早建立起來的平臺之一。時至今日，脂質體對腫瘤治療已經產生了重大影響，美國FDA已批準多個配方用于癌癥治療(參見A Yang, C. Jin,Y. Jiang，etc. Liposome based deli very systems in pancreatic cancer treatment:From bench to bedside [J], Cancer Treat Rev, 2011, 37(8): 633-642.)。經過四十多年的發展，脂質體的應用范圍從腫瘤化療和真菌感染延伸至疫苗和最近的基因治療。盡管脂質體在基因治療中還處于基礎研究階段，但它具有低毒，低免疫反應，低致癌性，攜帶基因大小類型不受限制，易于制備和質量控制等顯著優勢，在未來基因治療中具有廣闊的發展前景(參見-X Zheng, J. Lu, L. Deng, etc. Preparation and characterizationof magnetic cationic liposome in gene delivery [J]· Int J Pharm, 2009，366(1-2):211-217.)。盡管作為藥物載體有上述優勢，但由于在血液里面循環時間短，體內穩定性和靶向性差，是未經修飾脂質體的缺點(圖1A)。為了增加脂質體在目標組織和細胞內的積累，在脂質體表面附加配體(抗體以及它們的片段，葉酸，肽類或轉鐵蛋白等基團)能夠識別和綁定特定的細胞(圖1B)。然而，大多數的免疫脂質體仍在肝臟等部位的網狀內皮系統細胞中迅速被消除。聚乙二醇(Polyethylene glycol, PEG)常用于修飾納米粒子以達到增加穩定性和延長循環時間。聚乙二醇化脂質體(又稱為隱形脂質體)不僅可以減少巨噬細胞的吞噬，還可以穩定和延長體內循環時間，通過EPR效應選擇性地積聚在腫瘤部位，來增強一些配方的治療效果(圖1C)。為制備長循環免疫脂質體，抗體可以被連接到脂質 體的表面，或接枝聚乙二醇鏈的遠端。其中后者是更好的抗體目標耦合方法，因為沒有PEG鏈帶來的干擾(圖1D)。除了包封藥物，脂質體還可以裝載帶磁性納米粒以增強磁靶向性，和(或)膠體金、銀納米粒或熒光分子用于診斷和微觀分析(圖1E)。磁性脂質體當進入體內后，在體外磁場的作用下引導藥物在體內定位集中和定向移動，靶向給藥效果更好。腫瘤部位的PH值，溫度，血管內皮細胞通透性或間質壓力均不同于正常組織，pH敏感脂質體和熱敏脂質體能使藥物大量聚集在目標組織，如圖I所示(參見'Vladimir P. Torchilin.Recent advances with liposomes as pharmaceutical carriers [J]. Nature ReviewsDrug Discovery 2005，4: 145-160.)。金針菇留醇提取物是將金針菇子實體粉碎后用醇溶液提取，通過濃縮、萃取、皂化反應、結晶等步驟得到的不皂化物。研究證明，該提取物具有體外抑制人肝癌細胞(HepG2)、人胃腺癌細胞(SGC)、人膠質瘤細胞(U251)和人肺腺癌細胞(A549)等腫瘤細胞生長的活性，可用于制備抗腫瘤藥物(參見·.金針菇中具有抗腫瘤作用的不皂化提取物及其制法和用途[P]，專利申請號:201110364098. 5)。它主要包含ergosterol,22, 23-dihydroergosterol, ergosta-5, 8, 22-triene~3-ol 和 ergost-8 (14) -ene-3β -οI等四種成分。它易溶于乙醚、氯仿以及熱乙醇等有機溶劑，室溫下極難溶于水和油，具備植物甾醇的一般性質。目前尚未有以金針菇留醇提取物為原料藥，制備成脂質體制劑，以達到提高該提取物溶解度和生物利用度的研究報道。
發明內容
本發明的目的在于提供一種金針菇留醇提取物的脂質體制劑，將難溶于水的金針菇甾醇提取物制備成脂質體制劑，提高它的溶解度，改善它在體內的生物利用度極低的缺點。本發明的另一目的是提供這種金針菇留醇提取物脂質體制劑的制備方法。為實現上述目的，本發明采用的技術方案是
一種金針菇留醇提取物脂質體制劑，它是包含具有抗腫瘤作用的金針菇留醇提取物的脂質體，它主要由以下質量組分組成金針菇留醇提取物I份；磷脂1(Γ20份；膽固醇0. 5^2份；肉豆蘧酸異丙酯f 10份；膽酸鈉f 10份。所述的金針菇留醇提取物是將金針菇子實體用醇溶液提取，通過濃縮、萃取、皂化反應、結晶等步驟得到(參見專利申請號CN 201110364098.5)。它主要包括ergosterol，22, 23-dihydroergosterol, ergosta-5, 8, 22-triene-3/ -οI 和 ergost-8 (14) -ene-3β -οI等四種成分，其中前面二種成分含量較高。所述的一種金針菇留醇提取物脂質體制劑的制備方法，其特征在于包括以下步驟
(1)在圓底燒瓶中按上述配方稱取金針菇留醇提取物和磷脂，倒入無水乙醇，乙醇的用量為每克金針菇留醇提取物加無水乙醇2(Γ40毫升，在4(T60°C下超聲促使金針菇甾醇提取物和磷脂溶解；
(2)將步驟(I)所得的混合物蒸發，使每克金針菇留醇提取物用量蒸發至:TlO毫升， 加入上述配方量的膽固醇、肉豆蘧酸異丙酯和膽酸鈉，再加入無水乙醇，無水乙醇加入的量為每克金針菇留醇提取物用量加5(Γ100毫升，超聲溶解后，旋轉蒸發，使完全揮去乙醇，在圓底燒瓶壁上形成固態殘留物；
(3)加入蒸餾水或磷酸鹽緩沖液水合，加入的量為每克金針菇留醇提取物用量添加100^200毫升，直至圓底燒瓶壁上的固態殘留物被洗脫，水合后即得金針菇留醇提取物脂質體制劑。一種上述的金針菇留醇提取物脂質體制劑的前體，它是將上述脂質體溶液滴入支撐劑水溶液中，或將支撐劑加入所述脂質體中，通過冷凍干燥法、噴霧干燥法或烘干法制成前體脂質體。上述的金針菇留醇提取物脂質體制劑的前體脂質體，將其加入水中，攪拌，即恢復得到金針菇留醇提取物脂質體制劑。上述的金針菇留醇提取物脂質體制劑的前體脂質體，所述的支撐劑是甘露醇、蔗糖、右旋糖酐、山梨醇、葡萄糖或海藻糖，或者是它們的混合物。上述的金針菇留醇提取物脂質體制劑的前體脂質體的制備方法，其進一步包括下述步驟將上述脂質體溶液滴入支撐劑水溶液中，或將支撐劑加入所述脂質體中，通過冷凍干燥法、噴霧干燥法或烘干法制成前體脂質體。上述的金針菇留醇提取物脂質體制劑的前體脂質體的制備方法，其中所述支撐劑選自甘露醇、蔗糖、右旋糖酐、山梨醇、葡萄糖、海藻糖及其混合物。本發明的脂質體的外觀呈淺黃色澄清透明狀，平均粒徑為108 nm，包封率為(71. 3土 O. 1)%。該脂質體制劑極大地提高了水難溶性藥物金針菇留醇提取物的溶解度，有利于改善其在體內生物利用度極低的缺點，而且制備方法簡單，易于工業化大生產。所述的金針菇留醇提取物脂質體還可以加入支撐劑干燥制成前體脂質體，制成各種劑型。有益效果
本發明具有以下的有益效果
1、本發明解決了金針菇留醇提取物溶解度低的問題，極大地增大藥物的溶解度，提高了藥物的生物利用度；
2、本發明采用的配方和方法簡單可行，無需特殊設備，便于大規模工業化生產。
圖I為脂質體的發展過程示意圖。(A)早期傳統的脂質體，溶于水的藥物(a)包封在內部水相中，親脂性藥物(b)鑲嵌在脂質雙層膜當中；(B)抗體免疫脂質體，抗體共價偶聯在膜的活性磷脂上(C)，或疏水基團經過初步修飾后固定在脂質膜上(d);(C)連接有保護性聚合物(如PEG)的長循環脂質體，可以阻斷脂質體表面與吞噬蛋白(f)相互作用；(D)長循環免疫脂質體同時附有保護聚合物和抗體，它們可以連接到脂質體表面(g)，或更好的鏈接在接枝聚合物鏈的末端(h);(E)新一代脂質體，表面可以通過不同的方式被修改(分別或同時)。比如保護性聚合物(i)，保護性聚合物和靶向配體，如抗體(j)，附帶診斷標記(k),納入帶正電荷脂質(I),與DNA絡合產生Iipoplex結構(m),納入對刺激敏感的脂質(η)，附帶對刺激敏感的聚合物(O)，附加細胞穿透肽(P)，連上病毒成分(q)，除了藥物，脂質體還可裝載磁性微粒(r)以增強磁靶向性，和(或)膠體金、銀納米粒或熒光分子(S)用于微觀分析。圖2為實施例5制備的金針菇甾醇提取物脂質體制劑的透射電鏡照片(X500 k)。圖3為實施例5制備的金針菇留醇提取物脂質體制劑的粒徑分布圖。
圖4為實施例5制備的金針菇甾醇提取物脂質體制劑平均血藥濃度-時間曲線圖(η=5) ο
具體實施例方式 以下所列實施例有助于本領域技術人員更好地理解本發明，但不以任何方式限制本發明。實施例I金針菇留醇提取物脂質體制劑
在圓底燒瓶中按下表稱取金針菇甾醇提取物、磷脂，溶于20 mL無水乙醇中，在40°C下超聲促使金針菇留醇提取物和磷脂溶解；蒸去大部分乙醇至3毫升，加入膽固醇、肉豆蘧酸異丙酯和膽酸鈉，再加入無水乙醇50 mL，超聲溶解后，旋轉蒸發，使完全揮去乙醇，在圓底燒瓶壁上形成固態殘留物；加入蒸餾水水合，直至圓底燒瓶壁上的固態殘留物被洗脫，水合后即完成。
組分I質量/體積
金針菇留醇提取物
磷脂_JLOg_
膽固醇_O- 5g
1 異丙酯 ig
膽酸納_Ig_
蒸餾水IlOOmL實施例2金針菇留醇提取物脂質體制劑前體
在圓底燒瓶中按下表稱取金針菇甾醇提取物、磷脂，溶于20 mL無水乙醇中，在40°C下超聲促使金針菇留醇提取物和磷脂溶解；蒸去大部分乙醇至3毫升，加入膽固醇、肉豆蘧酸異丙酯和膽酸鈉，再加入無水乙醇50 mL，超聲溶解后，旋轉蒸發，使完全揮去乙醇，在圓底燒瓶壁上形成固態殘留物；加入蒸餾水水合，直至圓底燒瓶壁上的固態殘留物被洗脫，即得到金針菇留醇提取物脂質體制劑。然后加入過100目篩的蔗糖粉末，置_20°C冰箱中放置2h后，冷凍干燥，粉碎，即得粉末狀的金針菇留醇提取脂質體制劑前體。將金針菇留醇提取脂質體制劑前體加水攪拌，即恢復成金針菇留醇提取脂質體制劑。
組分I質量/體積
金針菇留醇提取物Ilg
權利要求
1.一種金針菇留醇提取物脂質體制劑，其特征是它是包含具有抗腫瘤作用的金針菇甾醇提取物的脂質體，它主要由以下質量組分組成金針菇留醇提取物I份；磷脂1(Γ20份；膽固醇O. 5^2份；肉豆蘧酸異丙酯f 10份；膽酸鈉f 10份。
2.一種制備權利要求I所述的金針菇留醇提取物脂質體制劑的方法，其特征是包括以下步驟 (1)在圓底燒瓶中按上述配方稱取金針菇留醇提取物和磷脂，倒入無水乙醇，乙醇的用量為每克金針菇留醇提取物加無水乙醇2(Γ40毫升，在4(T60°C下超聲促使金針菇甾醇提取物和磷脂溶解； (2)將步驟(I)所得的混合物蒸發，使每克金針菇留醇提取物用量蒸發至:TlO毫升，加入上述配方量的膽固醇、肉豆蘧酸異丙酯和膽酸鈉，再加入無水乙醇，無水乙醇加入的量為每克金針菇留醇提取物用量加5(Γ100毫升，超聲溶解后，旋轉蒸發，使完全揮去乙醇，在圓底燒瓶壁上形成固態殘留物； (3)加入蒸餾水或磷酸鹽緩沖液水合，加入的量為每克金針菇留醇提取物用量添加100^200毫升，直至圓底燒瓶壁上的固態殘留物被洗脫，水合后即完成。
3.—種權利要求I所述的金針菇留醇提取物脂質體制劑的前體，其特征是它是將權利要求I所述脂質體溶液滴入支撐劑水溶液中，或將支撐劑加入所述脂質體中，通過冷凍干燥法、噴霧干燥法或烘干法制成前體脂質體。
4.根據權利要求3所述的金針菇留醇提取物脂質體制劑的前體脂質體，所述的支撐劑是甘露醇、蔗糖、右旋糖酐、山梨醇、葡萄糖或海藻糖，或者是它們的混合物。
5.一種權利要求3所述的金針菇留醇提取物脂質體制劑的前體的制備方法，其特征是將權利要求2制得的脂質體制劑滴入支撐劑水溶液中，或將支撐劑加入所述脂質體制劑中，通過冷凍干燥法、噴霧干燥法或烘干法制成前體脂質體。
6.根據權利要求5所述的金針菇留醇提取物脂質體制劑的前體脂質體的制備方法，其特征是所述的支撐劑選自甘露醇、蔗糖、右旋糖酐、山梨醇、葡萄糖或海藻糖，或者是它們的混合物。
全文摘要
一種金針菇甾醇提取物脂質體制劑，它是包含具有抗腫瘤作用的金針菇甾醇提取物的脂質體，主要由以下質量組分組成金針菇甾醇提取物1份；磷脂10~20份；膽固醇0.5~2份；肉豆蔻酸異丙酯1~10份；膽酸鈉1~10份。本發明的脂質體的外觀呈淺黃色澄清透明狀，平均粒徑為108nm，包封率為(71.3±0.1)%。該脂質體制劑極大地提高了水難溶性藥物金針菇甾醇提取物的溶解度，有利于改善其在體內生物利用度極低的缺點，而且制備方法簡單，易于工業化大生產。所述的金針菇甾醇提取物脂質體還可以加入支撐劑干燥制成前體脂質體，制成各種劑型。本發明公開了其制法。
文檔編號A61K36/06GK102940606SQ20121038594
公開日2013年2月27日 申請日期2012年10月12日 優先權日2012年10月12日
發明者徐希明, 易承學, 余江南 申請人:江蘇大學