防治骨質疏松的中藥制劑及其制備方法
【專利摘要】本發明公開了一種防治骨質疏松的中藥制劑，是由下列重量份的原料藥制成的藥劑：海龍1-10份；淫羊藿10-50份；菟絲子10-50份。本發明中藥制劑經藥效學研究表明，能顯著改善雌激素缺失骨質疏松大鼠骨骼生理狀態和增強骨的強度和韌性；能明顯促進成骨細胞骨形成能力；能顯著抑制破骨細胞骨吸收能力，從而具有明顯的防治絕經后骨質疏松作用。本發明還公開了前述防治絕經后骨質疏松的中藥制劑的制備方法。
【專利說明】防治骨質疏松的中藥制劑及其制備方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種防治骨質疏松的中藥制劑；此外，本發明還涉及該中藥制劑的制
備方法。
【背景技術】
[0002]骨質疏松是絕經后婦女和老年人常見病之一。近年來，骨質疏松的患病率和死亡率不斷上升，給整個社會帶來巨大的負擔。而臨床治療骨質疏松藥物多存在較大毒副作用和價格高的缺點。中醫學認為“腎虛”是骨質疏松發生的基本病理因素。因此，科學家們不斷致力于從資源豐富的補腎中藥資源中開發新藥。
【發明內容】
[0003]本發明所要解決的技術問題在于提供一種工藝穩定、質量可控、療效確切、無毒副作用的治療骨質疏松癥的中藥制劑，并提供其制備方法。
[0004]海龍為海龍科動物刁海龍、擬海龍或尖海龍的干燥體,收載于《中華海洋本草》具溫腎壯陽、散結消腫功效， 研究發現海龍水提取物能顯著改善去卵巢骨質疏松大鼠、骨密度、骨鈣含量和骨斷裂力。
[0005]淫羊藿和菟絲子均收載于《中華人民共和國藥典》2010版(一部)，淫羊藿為小檗科植物淫羊藿、心葉淫羊藿或箭葉淫羊藿的干燥莖葉，善補腎陽，強筋骨，祛風濕。菟絲子為旋花科植物菟絲子或大菟絲子的干燥種子，具補益肝腎，固精縮尿等功效。
[0006]前述三種中藥均具有補腎功效，經常一起出現在臨床補腎壯陽的方劑中，它們的組合物也是民間常用的補腎壯陽經驗方。本發明經研究發現，這三味藥組方具有明顯的抗骨質疏松作用。
[0007]根據實施例，本發明提供的一種防治骨質疏松的中藥制劑，其創新點在于，該中藥制劑是由如下重量份的原料藥制成的藥劑:海龍1-10份；淫羊藿10-50份；菟絲子10-50份。
[0008]根據實施例，本發明提供的另一種防治骨質疏松的中藥制劑，其創新點在于，該中藥制劑是由如下重量份的原料藥制成的藥劑:海龍干粉1-10份；淫羊藿提取物2-10份；菟絲子提取物2-10份。
[0009]根據實施例，本發明提供的再一種防治骨質疏松的中藥制劑，其創新點在于，該中藥制劑是由如下重量份的原料藥制成的藥劑:海龍干粉1-10份；總黃酮質量分數達50%的淫羊藿提取物1-5份；總黃酮質量分數達50%的菟絲子提取物1-5份。
[0010]根據實施例，本發明提供的又一種防治骨質疏松的中藥制劑，其創新點在于，該中藥制劑是由如下重量份的原料藥制成的藥劑:海龍提取物0.01-0.1份；總黃酮質量分數達50%的淫羊藿提取物1-5份；總黃酮質量分數達50%的菟絲子提取物1-5份。
[0011]根據實施例，本發明前述防治骨質疏松的中藥制劑為片劑、膠囊劑、顆粒劑、泡騰片、口含片或口服液。[0012]根據實施例，本發明提供的一中防治骨質疏松的中藥制劑的制備方法，包括如下步驟:
[0013]按配比稱取海龍，粉碎，過60目篩，攪拌均勻，制得海龍干粉，備用；
[0014]按配比稱取淫羊藿葉，加10-20倍重量體積夫人水煎煮2-4次，每次1_2小時，過濾，合并濾液，減壓干燥成固體，粉碎，過60目篩，制得淫羊藿提取物，備用；
[0015]按配比稱取菟絲子，粉碎，過40目篩，粉末加10-20倍重量體積夫人水提取2-4次，每次1-2小時，過濾，合并濾液，減壓干燥成固體，粉碎，過60目篩，制得菟絲子提取物，備用;
[0016]將海龍干粉、淫羊藿提取物和菟絲子提取物混勻，加入賦形劑制成臨床可接受的片劑、膠囊劑、顆粒劑、泡騰片、口含片或口服液。
[0017]根據實施例，本發明提供的另一種防治骨質疏松的中藥制劑的制備方法，包括如下步驟:
[0018]按配比稱取海龍，粉碎，過60目篩，攪拌均勻，制得海龍干粉，備用；海龍干粉用10-20倍重量、體積濃度為20-95%的乙醇提取1-3次，每次1_2小時，過濾，合并濾液，減壓干燥成固體，粉碎，過60目篩，制得到海龍提取物，備用；
[0019]按配比稱取淫羊藿葉粉末或菟絲子粉末，過40目篩，用10-20倍重量的水煎煮2-4次，每次1-2小時，過濾，合并濾液，將濾液減壓濃縮至相對密度為1.00-1.05，加入體積濃度為60% -95%的乙醇浸泡12-48h，取上清液回收乙醇至無醇味；用DM301大孔吸附樹脂精制回收乙醇后的上清液 :取無醇味的上清液上柱，用10-15倍上樣量的蒸餾水洗去雜質，然后用體積濃度為40% -80%的乙醇洗脫，收集洗脫液，干燥成固體，粉碎，過60目篩，制得總黃酮質量分數達50%的淫羊藿提取物或總黃酮質量分數達50%的菟絲子提取物；
[0020]將海龍干粉或海龍提取物、總黃酮質量分數達50%的淫羊藿提取物和總黃酮質量分數達50%的菟絲子提取物混勻，加入賦形劑制成臨床可接受的片劑、膠囊劑、顆粒劑、泡騰片、口含片或口服液。
[0021]本發明前述防治骨質疏松的中藥制劑的制備方法中，大孔吸附樹脂條件為:徑高比1:5-20 ;樹脂量和上樣量之比為1-4:1 ;洗脫溶劑和上樣量之比為5-20:1 ;洗脫速度為
0.5-2.0mL/min。
[0022]本發明中藥制劑(以下稱龍仙組方)經藥效學研究表明，能顯著改善雌激素缺失骨質疏松大鼠和老年骨質疏松大鼠骨骼生理狀態，包括提高骨密度、改善骨微細結構和提高骨組織的生物力學等，同時促進成骨細胞骨形成和抑制破骨細胞骨吸收能力，從而具有顯著的抗骨質疏松作用。因此，本發明中藥制劑具有可開發為抗骨質疏松藥物的潛力和應用前景。
【具體實施方式】
[0023]下面結合具體實施例，進一步闡述本發明。這些實施例應理解為僅用于說明本發明而不用于限制本發明的保護范圍。在閱讀了本發明記載的內容之后，本領域技術人員可以對本發明作各種改動或修改，這些等效變化和修飾同樣落入本發明權利要求所限定的范圍。
[0024]實施例1 (制備龍仙組方)[0025]稱取海龍粗粉(過60目篩)0.5kg，攪拌均勻，即海龍干粉。然后稱取淫羊藿葉和菟絲子各0.5kg,分別加10倍重量體積夫人水煎煮3次，每次2小時，過濾，合并濾液，加入海龍干粉，混勻，減壓干燥成固體，粉碎，過60目篩，得龍仙組方。
[0026]實施例2 (制備龍仙組方)
[0027]稱取海龍粗粉(過60目篩)0.5kg，攪拌均勻，即海龍干粉。再用10倍量70%乙醇浸泡，700C回流提取3次，每次2小時，得到提取液；將所得到的提取液抽濾，合并濾液，減壓回收乙醇，繼續濃縮至60°C相對密度0.8-1.2kg/L，得海龍提取物濃縮液。稱取淫羊藿葉和菟絲子各0.5kg,分別加20倍重量體積夫人水煎煮2次，每次I小時，過濾，合并濾液，加入海龍干粉或海龍提取物濃縮液，混勻，減壓干燥成固體，粉碎，過60目篩，得龍仙組方。
[0028]實施例3 (制備龍仙組方)
[0029]稱取海龍粗粉(過80目篩)0.5kg，攪拌均勻，即海龍干粉。再用20倍量50%乙醇浸泡，80°C回流提取3次，每次I小時，得到提取液；將所得到的提取液抽濾，合并濾液，減壓回收乙醇，繼續濃縮至60°C相對密度0.8-1.2kg/L，得海龍提取物濃縮液。稱取淫羊藿葉和菟絲子各0.5kg，分別加10倍重量體積夫人水煎煮3次，每次I小時,過濾,合并濾液,加入海龍干粉或海龍提取物濃縮液，混勻，減壓干燥成固體，粉碎，過80目篩，得龍仙組方。
[0030]實施例4 (制備龍仙組方)
[0031]稱取海龍粗粉(過60目篩)0.5kg，攪拌均勻，即海龍干粉。用10倍量95%乙醇浸泡，70°C回流提取3次，每次I小時，得到提取液，過濾，合并濾液，減壓回收乙醇，繼續濃縮至60°C相對密度0.8-1.2kg/L，得海龍提取物濃縮液。淫羊藿葉或菟絲子粉末(過40目篩)，加10倍重量體積夫人水煎煮3次，每次2小時，過濾，合并濾液，濾液減壓濃縮至密度為1.00-1.05，加95%的乙醇浸泡12-48h，取上清液回收乙醇至無醇味。用DM301大孔吸附樹脂精制方法:取一定量的濾液`上柱，用15倍量(上樣量)的純化水洗去雜質，然后用50%的乙醇洗脫總黃酮(大孔樹脂條件:徑高比1:5樹脂量(g)和上樣量(mL) 1-1，洗脫溶劑和上樣量5:20，洗脫速度0.5mL/min)。收集洗脫液，干燥成固體，粉碎，過60目篩，得到總黃酮質量分數達50%淫羊藿提取物或總黃酮質量分數達50%菟絲子提取物。將上述海龍干粉或海龍提取物濃縮液與淫羊藿、菟絲子提取物粉末混勻，得到龍仙組方。
[0032]實施例5 (制備龍仙組方)
[0033]稱取海龍粗粉0.5kg，過60目篩，即海龍干粉，用20倍量70%乙醇浸泡，80°C回流提取2次，每次2小時，得到提取液，過濾，合并濾液，減壓回收乙醇，濃縮至無乙醇味，60°C減壓干燥成固體，粉碎，過60目篩，得海龍提取物。淫羊藿葉或菟絲子粉末(過40目篩)，加20倍重量體積夫人水煎煮2次，每次I小時，過濾，合并濾液，濾液減壓濃縮至密度為
1.00-1.05，加95%的乙醇浸泡12-48h，取上清液回收乙醇至無醇味。用DM301大孔吸附樹脂精制方法:取一定量的濾液上柱，用10倍量(上樣量)的純化水洗去雜質，然后用70%的乙醇洗脫總黃酮(大孔樹脂條件:徑高比1:5樹脂量(g)和上樣量(mL) 1-1，洗脫溶劑和上樣量5:20，洗脫速度0.5mL/min)，收集洗脫液，干燥成固體，粉碎，過60目篩，得到總黃酮質量分數達50%淫羊藿提取物或總黃酮質量分數達50%的菟絲子提取物。將上述海龍干粉或海龍提取物與淫羊藿、菟絲子提取物粉末混勻，得到龍仙組方。
[0034]實施例6 (制備龍仙組方膠囊劑)
[0035]按實施例1-5的制備方法制備得到龍仙組方；加入賦形劑淀粉后，再將其制成膠囊1000粒。
[0036]實施例7 (制備龍仙組方膠囊劑)
[0037]按實施例1-5的制備方法制備得到龍仙組方；加入賦形劑羥基纖維素鈉后，再將其制成膠囊1000粒。
[0038]以下通過藥理實驗具體說明本中藥組方防治骨質疏松的藥效。
[0039]實驗例I (龍仙組方對去卵巢骨質疏松大鼠的影響)
[0040]1.實驗材料
[0041]動物:SD大鼠由上海斯萊克實驗動物有限公司提供。許可證號:SCXK(滬)2007-0005 ;動物分籠飼養于空調溫室內，溫度25±2° C，濕度40~60% ;用顆粒飼料喂養，自由飲水。
[0042]藥材及試劑:尼爾雌醇，上海華聯制藥有限公司(批號:960301);藥材:隨機選取實施例1-5制備得到的龍仙組方，100% (按生藥計)，使用時以蒸餾水溶解稀釋。
[0043]2.實驗方法
[0044]動物分組:將雌性SD大鼠60只(180-220g),按體重隨機分為6組，每組10只，一組作為給生理鹽水的假手術組(SHAM，10ml/kg)，其它5組大鼠進行卵巢切除手術，為骨質疏松模型組(0VX，給生理鹽水10ml/kg)，尼爾雌醇陽性對照組(Nyl，lmg/kg/w)和龍仙組方(1.8g/kg、3.6g/kg和7.2g/kg)3個劑量組。后恢復5天后，連續灌胃給藥3個月。
[0045]造模方法:各組大鼠用10%水合氯醛350mg/kg腹腔注射麻醉，在腹部切開1.5cm大小的切口，分離腹部肌肉，暴漏腹膜，剪開腹膜后取出雙側卵巢。假手術組切開腹部后將不做任何處理，縫合創口，消毒；手術組將雙側卵巢結扎后切除，縫合創口，消毒。
[0046]觀察指標:
[0047](I)體重:每周稱量大鼠一次體重。
[0048](2)臟器系數:大鼠處死后，迅速剝離其心、肝、脾、肺、腎和子宮的附屬組織及脂肪，隨即進行稱重。臟器系數公式:臟器系數=臟器重量(mg)/體重(g)
[0049](3)血鈣、血磷、血清雌二醇及堿性磷酸酶
[0050]眼眶取血，置于抗凝劑肝素鈉管中，以3000轉離心10分鐘，分離血清，凍于-80° C備用。依據試劑盒方法檢測。
[0051](4)骨密度
[0052] 大鼠處死后，剝離左側股骨，剔除骨周圍附屬組織，用生理鹽水擦洗干凈，用錫箔紙包好，-80° C凍存，用于檢測骨密度。
[0053]( 5 )骨組織形態計量學
[0054]取脛骨近心端，沿脛骨粗隆行額狀面切開暴露骨髓腔，置于10%的磷酸福爾馬林緩沖液中固定24h，乙醇逐級脫水，二甲苯脫脂，用甲基丙烯酸甲酯進行不脫鈣骨包埋。4 μ m切片經Goldner’ s Trichrome染色,考察骨組織形態計量學靜態參數.[0055](6)骨力學指標
[0056]大鼠處死后，剝離右側股骨，剔除骨周圍附屬組織，用生理鹽水擦洗干凈，用于三點力學彎曲實驗檢測。將股骨置于WD-1型電子萬能實驗機作三點彎曲力學實驗，跨距25mm,加載速度2mm/min,記錄載荷-變形曲線。從曲線上計算最大載荷、最大燒度、抗彎剛度、能量吸收。[0057]3.實驗結果
[0058]3.1對體重和臟器系數的影響
[0059]如表1所示，去卵巢模型組大鼠體重增加值明顯高于Sham組，陽性藥尼爾雌醇組與空白組接近，顯著改善去卵巢模型組增加的體重重量，龍仙組方的體重增加量與模型組相比較無顯著性差異。
[0060]如表1所示，去卵巢模型組大鼠各主要臟器系數(心、肝、脾、肺、腎)明顯低于Sham組，陽性藥尼爾雌醇組能使降低的臟器系數基本恢復到Sham組水平，龍仙組方組與模型組相比較主要臟器系數(心、肝、脾、肺、腎)無顯著性變化。子宮系數在NYL干預下基本恢復正常水平，顯示了明顯的子宮增生副作用，龍仙組方沒有出現這樣的現象。
[0061]表1.龍仙組方對去卵巢大鼠主要臟器系數的影響
[0062]
【權利要求】
1.一種防治骨質疏松的中藥制劑，其特征在于，該中藥制劑是由如下重量份的原料藥制成的藥劑:海龍1-10份；淫羊藿10-50份；菟絲子10-50份。
2.一種防治骨質疏松的中藥制劑，其特征在于，該中藥制劑是由如下重量份的原料藥制成的藥劑:海龍干粉1-10份；淫羊藿提取物2-10份；菟絲子提取物2-10份。
3.一種防治骨質疏松的中藥制劑，其特征在于，該中藥制劑是由如下重量份的原料藥制成的藥劑:海龍干粉1-10份；總黃酮質量分數達50%的淫羊藿提取物1-5份；總黃酮質量分數達50%的菟絲子提取物1-5份。
4.一種防治骨質疏松的中藥制劑，其特征在于，該中藥制劑是由如下重量份的原料藥制成的藥劑:海龍提取物0.01-0.1份；總黃酮質量分數達50%的淫羊藿提取物1-5份；總黃酮質量分數達50%的菟絲子提取物1-5份。
5.根據權利要求1-4中任何一項所述的防治骨質疏松的中藥制劑，其特征在于，該中藥制劑為片劑、膠囊劑、顆粒劑、泡騰片、口含片或口服液。
6.權利要求1或2所述的防治骨質疏松的中藥制劑的制備方法，其特征在于，該方法包括如下步驟: 按配比稱取海龍，粉碎，過60目篩，攪拌均勻，制得海龍干粉，備用； 按配比稱取淫羊藿葉，加10-20倍重量體積夫人水煎煮2-4次，每次1-2小時，過濾，合并濾液，減壓干燥成固體，粉碎，過60目篩，制得淫羊藿提取物，備用； 按配比稱取菟絲子，粉碎，過40目篩，粉末加10-20倍重量體積夫人水提取2-4次，每次1-2小時，過濾，合并濾液，減壓干燥成固體，粉碎，過60目篩，制得菟絲子提取物，備用；` 將海龍干粉、淫羊藿提取物和菟絲子提取物混勻，加入賦形劑制成臨床可接受的片劑、膠囊劑、顆粒劑、泡騰片、口含片或口服液。
7.權利要求3或4所述的防治骨質疏松的中藥制劑的制備方法，其特征在于，該方法包括如下步驟: 按配比稱取海龍，粉碎，過60目篩，攪拌均勻，制得海龍干粉，備用；海龍干粉用10-20倍重量、體積濃度為20-95%的乙醇提取1-3次，每次1-2小時，過濾，合并濾液，減壓干燥成固體，粉碎，過60目篩，制得到海龍提取物，備用； 按配比稱取淫羊藿葉粉末或菟絲子粉末，過40目篩，用10-20倍重量的水煎煮2-4次，每次1-2小時，過濾，合并濾液，將濾液減壓濃縮至相對密度為1.00-1.05，加入體積濃度為60% -95%的乙醇浸泡12-48h，取上清液回收乙醇至無醇味；用DM301大孔吸附樹脂精制回收乙醇后的上清液:取無醇味的上清液上柱，用10倍上樣量的蒸餾水洗去雜質，然后用體積濃度為40% -80%的乙醇洗脫，收集洗脫液，干燥成固體，粉碎，過60目篩，制得總黃酮質量分數達50%的淫羊藿提取物或總黃酮質量分數達50%的菟絲子提取物； 將海龍干粉或海龍提取物、總黃酮質量分數達50%的淫羊藿提取物和總黃酮質量分數達50%的菟絲子提取物混勻，加入賦形劑制成臨床可接受的片劑、膠囊劑、顆粒劑、泡騰片、口含片或口服液。
8.根據權利要求7所述的防治骨質疏松的中藥制劑的制備方法，其特征在于，大孔吸附樹脂條件為:徑高比1:5-20 ;樹脂量和上樣量之比為1-4:1 ;洗脫溶劑和上樣量之比為5-20:1 ;洗脫速度為 0.5-2.0mL/min。
【文檔編號】A61P19/10GK103655670SQ201210359162
【公開日】2014年3月26日 申請日期:2012年9月17日 優先權日:2012年9月17日
【發明者】秦路平, 蔣益萍, 薛黎明, 黃寶康 申請人:中國人民解放軍第二軍醫大學