一種恩替卡韋高密度脂蛋白包封制劑及其制備方法和用途
【專利摘要】本發明公開了一種恩替卡韋高密度脂蛋白包封制劑及其制備方法和用途。所述恩替卡韋高密度脂蛋白包封制劑含有恩替卡韋（Entecavir），磷脂，膽固醇，和載脂蛋白A1（ApoA1）；恩替卡韋、磷脂、膽固醇和載脂蛋白A1的重量比為5∶7∶3∶5-20。
【專利說明】一種恩替卡韋高密度脂蛋白包封制劑及其制備方法和用途
【技術領域】
[0001]本發明涉及藥物脂質體領域，尤其涉及一種恩替卡韋高密度脂蛋白包封制劑及其制備方法和用途。
【背景技術】
[0002]目前，已有12種以上的納米材料載藥系統(nanoparticle drug deliverysystem)獲得FDA的臨床批文而上市，所有這些已上市的納米材料載藥系統都不具備器官革巴向性(organ-specific targeting)。[0003]世界上共有7種已上市(FDA)的抗乙肝藥物，兩種是干擾素和PEG化的干擾素，另外5種是核苷酸的類似物，其中PEG化的干擾素，tenofovir,恩替卡韋(entecavir)這三種藥將在未來占主導作用。entecavir在中國的抗乙肝藥物場銷售額每年遞增，2008年我國恩替卡韋(entecavir)銷售行業年銷售額達到了 8.56億元，同比增加了 19.1%, 2009年1-11月，我國恩替卡韋行業銷售額達到了 11.24億元，同比增長了 31.3%, 2010年，研制抗乙肝藥物entecavir的美國制藥公司百時美施貴寶公布了恩替卡韋的年全球銷售額，為
9.31億美元，2011年，恩替卡韋的年全球銷售額為12億美元，由此可見，抗乙肝藥物市場發展潛力大，遠未飽和。
[0004]然而現在已上市的口服抗乙肝藥物entecavir在人體中60%_70%經腎臟排除，造成了 entecavir腎毒性的藥物副作用，小于1%的entecavir由感染乙肝病毒的器官肝臟吸收，因此，99%左右的entecavir到了不該去的人體器官。
[0005]因此，本領域迫切需要提供一種可有效達至肝靶向部位的抗乙肝藥物entecavir。
【發明內容】
[0006]本發明旨在提供一種恩替卡韋高密度脂蛋白包封制劑。
[0007]本發明的另一個目的是提供所述恩替卡韋高密度脂蛋白包封制劑的制備方法。
[0008]本發明的再一個目的是提供所述恩替卡韋高密度脂蛋白包封制劑的用途。
[0009]在本發明的第一方面，提供了一種恩替卡韋高密度脂蛋白包封制劑，所述恩替卡韋聞密度脂蛋白包封制劑含有恩替卡韋(Entecavir),憐脂，膽固醇，和載脂蛋白Al(ApoAl)；
[0010]恩替卡韋、磷脂、膽固醇和載脂蛋白Al的重量比為5: 7: 3: 5-20。
[0011]在另一優選例中，所述恩替卡韋高密度脂蛋白包封制劑的粒徑為30_50nm ;優選30_40nm。
[0012]在另一優選例中，恩替卡韋、磷脂、膽固醇和載脂蛋白Al的重量比為5:7:3: 8-10。
[0013]在另一優選例中，所述的磷脂是氫化大豆磷脂。
[0014]在另一優選例中，所述恩替卡韋高密度脂蛋白包封制劑的包封率為85 - 99% ;優選 90 — 99%。[0015]在本發明的第二方面，提供了一種如上所述的本發明提供的恩替卡韋高密度脂蛋白包封制劑的制備方法，所述方法包括步驟:
[0016](1)將膽固醇、磷脂和緩沖液I混合，通過超臨界流體反應釜得到裝載緩沖液I的高密度脂蛋白顆粒前體；
[0017](2)將裝載緩沖液I的聞密度脂蛋白顆粒如體和載脂蛋白Al混合，超聲處理使聞密度脂蛋白顆粒粒徑為30-50nm ；
[0018](3)步驟(2)得到的高密度脂蛋白顆粒過分子篩，用緩沖液2洗脫得到溶液，其中憐脂的內相是緩沖液I，外相是緩沖液2 ;和
[0019](4)將恩替卡韋和步驟(3)得到的溶液混合，在50_60°C孵育得到如上所述的本發明提供的恩替卡韋高密度脂蛋白包封制劑。
[0020]在另一優選例中，所述的緩沖液I是銨鹽緩沖液，所述的緩沖液2是磷酸緩沖液，緩沖液2的pH值高于緩沖液I的pH值，差值大于等于3。
[0021]在另一優選例中，步驟(1)中超臨界流體反應釜壓力為200_240bar ;優選200-220bar。
[0022]在另一優選例中，步驟(1)中，以混合物的總體積計，其中磷脂濃度為0.28g/ml-0.35g/ml ;優選 0.30g/ml_0.32g/ml。
[0023]在本發明的第三方面，提供了一種如上所述的本發明提供的恩替卡韋高密度脂蛋白包封制劑的用途，用于制備治療乙肝的藥物。
[0024]據此，本發明提供了一種可有效達至肝靶向部位的抗乙肝藥物entecavir的制劑。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0025]圖1顯示了本發明得到的恩替卡韋高密度脂蛋白包封制劑中恩替卡韋在納米材料載藥系統中形成的獨特的復合物結晶。
[0026]圖2顯示了制備實施例1和2分別得到的恩替卡韋高密度脂蛋白包封制劑和包封于脂質體中的恩替卡韋的體外釋放情況；其中，
[0027]曲線A是恩替卡韋高密度脂蛋白包封制劑的釋放曲線，
[0028]曲線B是包封于脂質體中的恩替卡韋的釋放曲線。
[0029]圖3顯示了游離的熒光標記藥物恩替卡韋口服(I小時)后在小鼠的各種器官的分布情況。
[0030]圖4顯示了本發明得到的恩替卡韋高密度脂蛋白包封制劑中熒光標記藥物恩替卡韋靜脈注射(I小時)后在小鼠的各種器官的分布情況。
[0031]圖5顯示了注射制備實施例1得到的恩替卡韋高密度脂蛋白包封制劑和口服游離恩替卡韋的抑制乙肝病毒DNA復制曲線；其中，
[0032]曲線A是注射恩替卡韋高密度脂蛋白包封制劑(0.005mg/kg)的抑制乙肝病毒DNA復制曲線，
[0033]曲線B是口服游離的恩替卡韋(0.05mg/kg)的抑制乙肝病毒DNA復制曲線。【具體實施方式】[0034]發明人經過廣泛而深入的研究，使用高密度脂蛋白(HDL)包封恩替卡韋獲得一種納米級恩替卡韋高密度脂蛋白包封制劑，包封工藝中將超臨界流體技術、利用PH梯度差的主動載藥方式和超聲處理有機結合，獲得的恩替卡韋高密度脂蛋白包封制劑包封率高，并且大幅度提高了恩替卡韋的安全性和有效性。
[0035]如本文所用，“恩替卡韋”的結構如式I所示:
【權利要求】
1.一種恩替卡韋高密度脂蛋白包封制劑，其特征在于，所述恩替卡韋高密度脂蛋白包封制劑含有恩替卡韋(Entecavir),磷脂,膽固醇,和載脂蛋白Al (ApoAl)； 恩替卡韋、磷脂、膽固醇和載脂蛋白Al的重量比為5: 7: 3: 5-20。
2.如權利要求1所述的恩替卡韋高密度脂蛋白包封制劑，其特征在于，所述恩替卡韋高密度脂蛋白包封制劑的粒徑為30-50nm ;優選30_40nm。
3.如權利要求1所述的恩替卡韋高密度脂蛋白包封制劑，其特征在于，恩替卡韋、磷月旨、膽固醇和載脂蛋白Al的重量比為5: 7: 3: 8-10。
4.如權利要求1-3任一所述的恩替卡韋高密度脂蛋白包封制劑，其特征在于，所述的磷脂是氫化大豆磷脂。
5.如權利要求1所述的恩替卡韋高密度脂蛋白包封制劑，其特征在于，所述恩替卡韋高密度脂蛋白包封制 劑的包封率為85 — 99% ;優選90 — 99%。
6.一種如權利要求1-5任一所述的恩替卡韋高密度脂蛋白包封制劑的制備方法，其特征在于，所述方法包括步驟: (1)將膽固醇、磷脂和緩沖液I混合，通過超臨界流體反應釜得到裝載緩沖液I的高密度脂蛋白顆粒前體； (2)將裝載緩沖液I的高密度脂蛋白顆粒前體和載脂蛋白Al混合，超聲處理使高密度脂蛋白顆粒粒徑為30-50nm ； (3)步驟(2)得到的高密度脂蛋白顆粒過分子篩，用緩沖液2洗脫得到溶液，其中磷脂的內相是緩沖液I，外相是緩沖液2 ； (4)將恩替卡韋和步驟(3)得到的溶液混合，在50-60°C孵育得到如權利要求1-5任一所述的恩替卡韋高密度脂蛋白包封制劑。
7.如權利要求6所述的制備方法，其特征在于，所述的緩沖液I是銨鹽緩沖液，所述的緩沖液2是磷酸緩沖液，緩沖液2的pH值高于緩沖液I的pH值，差值大于等于3。
8.如權利要求6所述的制備方法，其特征在于，步驟(1)中超臨界流體反應釜壓力為200-240bar ;優選 200_220bar。
9.如權利要求6所述的制備方法，其特征在于，步驟(1)中，以混合物的總體積計，其中磷脂濃度為 0.28g/ml-0.35g/ml ;優選 0.30g/ml_0.32g/ml。
10.一種如權利要求1-7任一所述的恩替卡韋高密度脂蛋白包封制劑的用途，其特征在于，用于制備治療乙肝的藥物。
【文檔編號】A61K9/14GK103655477SQ201210321702
【公開日】2014年3月26日 申請日期:2012年9月3日 優先權日:2012年9月3日
【發明者】唐為鋼 申請人:唐為鋼