專利名稱：一種五味子丙素凍干粉針劑的制備方法
技術領域：
本發明涉及ー種五味子丙素凍干粉針劑的制備方法，是以甘露醇做賦形劑，并加入凍干保護劑海藻糖及少量叔丁醇，運用真空冷凍干燥エ藝獲得高純度五味子丙素凍干粉針劑。
ニ背景技術：
木蘭科植物五味子的干燥成熟果實含有多種木脂素成分，其中五味子甲、こ素對肝損傷有一定保護作用(中醫藥學報，2011，36(6) :104-106)，針對二者的藥效、藥理和毒理研究開展的得較為廣泛。與之相比，五味子丙素(schisandrin C or wuweizisu C)相關研究十分匱乏。最近針對小鼠巨噬細胞RAW 264. 7的研究表明，五味子丙素具有顯著的抗炎及抗肝毒作用(biosci. biotechno I. biochem, 2010 74 (2) 285-291 )。可以預見，五味子丙 素的藥理和毒理學研究將會進一歩開展。同ロ服用藥相比，注射方法的優勢在于通過肌肉或靜注，藥效迅速，是從事該類研究的首選方法。傳統的水針劑穩定性通常較差，而凍干粉針劑以玻璃態粉末形式存在，具有起效快、生物利用度高、穩定性高、便于運輸貯藏、便于使用等優點，是水針劑的理想替代品。目前市售五味子丙素均以結晶形式出現，為便于開展進一步的藥學實驗，迫切需要獲得其注射用凍干粉針制劑。鑒于凍干分散系的復雜性，要想高效快速獲取滿足注射要求的粉針劑并非易事，至今尚未形成凍干配方選取的成熟理論，針對不同凍干對象其凍干配方和凍干程序都是參 照類似物質的成功案例并反復實驗后確定。其中凍干配方中賦形劑及其它添加劑會和主藥發生相互作用，配方的種類和濃度會顯著影響體系的凍結固化和升華脫水行為，如最大凍結濃縮玻璃化轉變溫度(衡量干燥時是否塌陷的重要指標)、最低凍結溫度、降溫速率、凍結退火時間等。此外，添加劑的種類和濃度還會顯著影響干燥階段的時間及最終產品的性狀。中國專利200910175342. 6公開了ー種中藥凍干注射劑的制備方法，其凍結最低溫度可在-2(T-40°C變化，預凍時間2飛小時，升華干燥時間在2(Γ35小時，解吸干燥階段在3 8小時；中國專利200510117539. 6公開了毛冬青凍干粉針劑的制備方法，其對凍結速率及真空度未加說明，是在_40°C預凍12小吋，升溫至-10°C減壓干燥10小吋，升溫至0°C減壓干燥6小時，再升溫至35°C減壓干燥10小時；中國專利200310111036. 9公開了清開靈凍干粉針劑的制備方法，是將樣品降溫到-35°C ^-60°C，保持I飛小吋，開啟真空，使真空度達到30Pa以下，按每小時升高0. 5 2°C的速度緩緩給制品加熱，直至制品溫度達到-5°C'10°C，再按每小時升高2飛。C的速度給制品加熱，直至制品溫度達到30°C，保持2 8小吋。從中不難發現(1)不同干燥對象其凍干配方和エ藝流程差異較大，缺乏對エ藝參數的精確說明；
(2)凍干時間長，如批量生產能耗較大；(3)通常使用甘露醇作為賦形劑；(4)均以產出干粉為唯一目標，即只關注凍干過程中及凍干結束時藥物穩定性問題，缺乏對凍干粉的貯藏條件及保質期的說明。由于目前尚檢索不到五味子丙素凍干的專利和文獻，發明人嘗試套用現有類似藥物的凍干參數進行實驗，其結果不夠理想，這也說明此類發明的專屬性較高。
發明內容
本發明g在提供ー種五味子丙素凍干粉針劑的制備方法，所要解決的技術問題是在制備過程中避免五味子丙素凍干時間長、塌陷、出現泡坑及殘余水含量不達標等問題。五味子丙素的脂溶性晶體幾乎不溶于水，易溶于こ醇等有機溶剤，但こ醇的凝固點很低，凍干機的冷阱無法捕獲。叔丁醇具有凝固點較高，升華快無殘留等特性(中國藥劑學雜志，2006 :4 (3)，113-118)，有望解決五味子丙素的溶解及凍干速凍慢的問題。此夕卜，處于無定形態的凍干粉其玻璃化溫度越高，相同保存溫度下其穩定性就越好。而常用的甘露醇的玻璃化溫度較低，不利于室溫下的穩定性。本發明以國家自然科學基金項目(No. 20803016，線性多元醇及其水溶液的玻璃化轉變規律與結構松弛規律研究)為依托，利用熱分析技木精確測定了凍干分散系熱化學參數，并在此基礎上經反復實驗，解決了套用現有常規凍干配方導致的凍干時間長、凍干產物塌陷、出現泡坑及殘余水含量不達標等問 題，給出了ー組合理的凍干配方和相應的最優凍干エ藝參數，最終高效快速制備出滿足要求的凍干粉針制劑。本發明五味子丙素凍干粉針劑的制備方法，包括混料、中和、吸附除雜、冷凍和干燥各單元過程所述混料是將五味子丙素、甘露醇和海藻糖按照質量比I :2-4 :2_3的比例混合并加質量體積濃度為15-30% (g/mL)的叔丁醇水溶液攪拌至甘露醇和海藻糖完全溶解得到混合料；所述中和是攪拌下向混合料中加入NaOH溶液至五味子丙素完全溶解，然后用HCl溶液調PH值7-8得到中和液；所述吸附除雜是向中和液中加質量體積濃度為15-30% (g/mL)的叔丁醇水溶液使五味子丙素的質量體積濃度為O. 5-1% (g/mL)，然后加入針用活性炭吸附除雜，經微孔鈦過濾器減壓粗濾脫炭，再用正壓法O. IMPa下經O. 22 μ m微孔濾膜除菌過濾后收集濾液；所述冷凍是將濾液以O. 5-re /min的降溫速率降溫至-45 _27°C，等溫2小吋，預置冷阱溫度-55'38°C ；所述干燥包括升華干燥和解吸干燥過程；所述升華干燥是保持干燥箱的壓カ13-36Pa、溫度-22'13°C下干燥6_10小時；所述解吸干燥是升華干燥后將干燥箱溫度升溫至25-30°C，直至干燥箱壓カ降至IPa以下，大約12-16小時；取出后在無菌條件下密封保存。制備條件為五味子丙素稀溶液(O. 5%)配方時的參數混料過程中五味子丙素、甘露醇和海藻糖的質量比I :2 :2，叔丁醇水溶液的質量體積濃度為15% (g/mL)；吸附除雜過程中向中和液中加質量體積濃度為15% (g/mL)的叔丁醇水溶液使五味子丙素的質量體積濃度為O. 5% (g/mL)；冷凍過程中是將濾液以1°C /min的降溫速率降溫至-45 _41°C，等溫2小吋，預置冷阱溫度-55'51°C ；升華干燥過程中保持干燥箱的壓カ13_36Pa、溫度-22 _18°C下干燥8-10小時；解吸干燥過程中將干燥箱溫度升溫至25°C，直至干燥箱壓カ降至IPa以下，取出后在無菌條件下密封保存；
或者制備條件為五味子丙素濃溶液(1%)配方時的參數混料過程中五味子丙素、甘露醇和海藻糖的質量比I :4 :3，叔丁醇水溶液的質量體積濃度為30% (g/mL)；吸附除雜過程中向中和液中加質量體積濃度為30% (g/mL)的叔丁醇水溶液使五味子丙素的質量體積濃度為1% (g/mL)；
冷凍過程中是將濾液以O. 50C /min的降溫速率降溫至_33'27°C，等溫2小吋，預置冷阱溫度-42'38°C ；升華干燥過程中保持干燥箱的壓カ13_36Pa、溫度-17 _13°C下干燥6_8小時；解吸干燥過程中將干燥箱溫度升溫至30°C，直至干燥箱壓カ降至IPa以下，取出后在無菌條件下密封保存；五味子丙素的濃度介于稀溶液和濃溶液之間時，冷凍、升華干燥和解吸干燥的參數根據五味子丙素稀溶液和濃溶液兩種極限濃度條件下的參數按線性插值法確定。本發明除了采用甘露醇作為賦形劑外，還采用海藻糖作為凍干保護劑，不僅低溫保護效果明顯，而且其玻璃化溫度比蔗糖高45°C，保證了干粉室溫下的貯藏穩定性，使其可以常溫儲存。配方中添加一定量的叔丁醇，不僅具有一定的助溶作用，而且和水相互作用后的針狀結晶升華迅速，升華后留下的管狀結構是解吸干燥階段水蒸氣的良好通道，明顯縮短了凍干時間，可將凍干時間縮減至未添加叔丁醇對照系的70%左右，對于批量生產的節能降耗具有重要意義。本發明解決了套用現有凍干エ藝參數導致的產品塌陷、出現泡坑及殘余水含量不達標的問題，凍干粉針劑質地蓬松，復水迅速，加注射用水搖勻約20秒鐘既得澄明液，如僅用甘露醇作為賦形劑，得到的凍干粉的密度較大，復水后3分鐘仍能觀察到懸浮顆粒。本發明所得凍干粉經氣相色譜儀檢測無叔丁醇殘留，符合注射粉針劑的要求。
具體實施例方式下述實施例用于舉例說明本發明注射用五味子丙素凍干粉的制備方法，包括但不限于下列實施例。實施例I :凍干粉組成五味子丙素2g，甘露醇4g，海藻糖4g。制備180瓶粉針劑。制備方法I、稱取五味子丙素、甘露醇和海藻糖，加15%(g/mL)叔丁醇水溶液80ml攪拌均勻。2、加2M的氫氧化鈉溶液45ml，攪拌至完全溶解，然后用2M的鹽酸溶液調pH值至7. 5,加15% (g/mL)叔丁醇水溶液至400ml,使五味子丙素的濃度為O. 5% (g/mL)。3、加O. 05% (g/mL)的針用活性炭，攪拌10分鐘，微孔鈦過濾器減壓粗濾，脫炭，檢查含量及PH值(介于7-8之間)后，再經O. 22 μ m微孔濾膜終端除菌過濾后收集濾液，分裝于IOml西林瓶中，每瓶裝2-3ml，共180瓶。4、將濾液以1°C /min的速率降溫至_43°C，耗時約I小時，擱板溫度維持_43°C 2小吋，完成冰晶熟化過程，冷凍過程中對冷阱同時供冷，使其降溫至_53°C。5、升華干燥階段擱板溫度維持在_20°C，干燥箱壓カ維持在36Pa，升華時間為8小時，之后緩慢升高擱板溫度至30°C進行解吸干燥，直至系統壓カ降至IPa后凍干過程結束，耗時約12小時，無菌條件下加蓋膠塞，軋蓋，常溫保存。實施例2 凍干粉組成五味子丙素2g，甘露醇Sg，海藻糖6g。制備80瓶粉針劑。制備方法I、稱取五味子丙素、甘露醇和海藻糖，加30%(g/mL)叔丁醇水溶液80ml攪拌均勻。2、加2M的氫氧化鈉溶液45ml，攪拌至完全溶解，然后用2M的鹽酸溶液調pH值至7. 5,加30% (g/mL)叔丁醇水溶液至200ml,使五味子丙素的濃度為1% (g/mL)。3、加O. 05% (g/mL)的針用活性炭，攪拌10分鐘，微孔鈦過濾器減壓粗濾，脫炭，檢查含量及PH值(介于7-8之間)后，再經O. 22 μ m微孔濾膜終端除菌過濾后收集濾液，分裝 于IOml西林瓶中，每瓶裝2-3ml，共80瓶。4、將濾液以O. 50C /min的速率降溫至_30°C，耗時約2小時，擱板溫度維持_30°C 2小吋，完成冰晶熟化過程，冷凍過程中對冷阱同時供冷，使其降溫至_40°C。5、升華干燥階段擱板溫度維持在_15°C，干燥箱壓カ維持在20Pa，升華時間為8小時，之后緩慢升高擱板溫度至30°C進行解吸干燥，直至系統壓カ降至IPa后凍干過程結束，耗時約20小時，無菌條件下加蓋膠塞，軋蓋，常溫保存。
權利要求
1.ー種五味子丙素凍干粉針劑的制備方法，包括混料、中和、吸附除雜、冷凍和干燥各單元過程，其特征在干 所述混料是將五味子丙素、甘露醇和海藻糖按照質量比I :2-4 :2-3的比例混合并加質量體積濃度為15-30%的叔丁醇水溶液攪拌至甘露醇和海藻糖完全溶解得到混合料； 所述中和是攪拌下向混合料中加入NaOH溶液至五味子丙素完全溶解，然后用HCl溶液調PH值7-8得到中和液； 所述吸附除雜是向中和液中加質量體積濃度為15-30%的叔丁醇水溶液使五味子丙素的質量體積濃度為O. 5-1%，然后加入針用活性炭吸附除雜，經微孔鈦過濾器減壓粗濾脫炭，再用正壓法O. IMPa下經O. 22 μ m微孔濾膜除菌過濾后收集濾液； 所述冷凍是將濾液以O. 5-rC /min的降溫速率降溫至_45'27°C，等溫2小吋，預置冷阱溫度-55 -38°C ； 所述干燥包括升華干燥和解吸干燥過程；所述升華干燥是保持干燥箱的壓カ13-36Pa、溫度-22'13°C下干燥6-10小時；所述解吸干燥是升華干燥后將干燥箱溫度升溫至25-30°C，直至干燥箱壓カ降至IPa以下，大約12-16小時；取出后在無菌條件下密封保存。
2.根據權利要求I所述的制備方法，其特征在于 制備條件為五味子丙素稀溶液配方 混料過程中五味子丙素、甘露醇和海藻糖的質量比I :2 :2，叔丁醇水溶液的質量體積濃度為15% ； 吸附除雜過程中向中和液中加質量體積濃度為15%的叔丁醇水溶液使五味子丙素的質量體積濃度為O. 5% ； 冷凍過程中是將濾液以1°C /min的降溫速率降溫至-45 _41°C，等溫2小吋，預置冷阱溫度-55 -51 °C ； 升華干燥過程中保持干燥箱的壓カ13-36Pa、溫度-22 _18°C下干燥8_10小時；解吸干燥過程中將干燥箱溫度升溫至25°C，直至干燥箱壓カ降至IPa以下，取出后在無菌條件下密封保存。
3.根據權利要求I所述的制備方法，其特征在于 制備條件為五味子丙素濃溶液配方 混料過程中五味子丙素、甘露醇和海藻糖的質量比I :4 :3，叔丁醇水溶液的質量體積濃度為30% ； 吸附除雜過程中向中和液中加質量體積濃度為30%的叔丁醇水溶液使五味子丙素的質量體積濃度為1% ; 冷凍過程中是將濾液以O. 5°C /min的降溫速率降溫至_33'27°C，等溫2小吋，預置冷阱溫度-42 -38°C ； 升華干燥過程中保持干燥箱的壓カ13-36Pa、溫度-17 -13°C下干燥6_8小時；解吸干燥過程中將干燥箱溫度升溫至30°C，直至干燥箱壓カ降至IPa以下，取出后在無菌條件下密封保存。
全文摘要
本發明公開了一種五味子丙素凍干粉針劑的制備方法，凍干配方采用甘露醇、海藻糖和叔丁醇的組合，結合精確的凍干工藝參數控制，解決了套用常規凍干配方和工藝參數導致的產品塌陷及出現泡坑的問題，獲得的五味子丙素干粉無不良殘留、穩定性好且復水迅速，滿足注射粉針劑的要求。配方中添加的海藻糖提高了五味子丙素干粉的室溫穩定性，而添加的少量叔丁醇能明顯改變冰晶的形狀，可將凍干時間縮減至未添加叔丁醇對照系的70%左右。
文檔編號A61K47/26GK102727450SQ201210193280
公開日2012年10月17日 申請日期2012年6月13日 優先權日2012年6月13日
發明者王能飛, 陶安發, 韓坤, 高才 申請人:合肥工業大學