專利名稱：腦栓通膠囊作為單胺氧化酶b抑制劑在臨床治療疾病的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一組中藥復(fù)方在臨床上的應(yīng)用，由蒲黃，赤芍，郁金，天麻，漏蘆五種中藥組成的中藥復(fù)方制劑腦栓通膠囊作為單胺氧化酶B抑制劑在臨床治療抑郁癥，老年性癡呆和帕金森氏綜合癥的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
腦栓通膠囊是由蒲黃，赤芍，郁金，天麻，漏蘆五種中藥組成的中藥復(fù)方制劑，已經(jīng)獲得國家食品藥品管理局批文(國藥準(zhǔn)字Z20040093)，由廣東華南藥業(yè)有限公司生產(chǎn)上市，該藥的功效主治為“活血通絡(luò)，祛風(fēng)化痰.用于風(fēng)痰瘀血痹阻脈絡(luò)引起的缺血性中風(fēng)病中經(jīng)絡(luò)急性期和恢復(fù)期.癥見半身不遂，口舌不歪斜，脈沉細(xì)或弦細(xì)，弦沒.腦梗塞上見述表現(xiàn)者。”腦栓通膠囊的主要藥理作用有①有效降低甘油三酯和總膽固醇含量，顯著抗動(dòng)脈粥樣硬化作用；②明顯降低血液粘度，抑制血小板聚集；③延長血栓形成時(shí)間，抑制血栓形成；④促進(jìn)大腦血液循環(huán)，改善腦部供血不足，增加大腦血流量，降低腦血管通透性；⑤降低血壓作用；⑥清除自由基，抗氧化作用。腦栓通膠囊臨床常用于風(fēng)痰瘀血痹阻脈絡(luò)引起的缺血性中風(fēng)病中經(jīng)絡(luò)急性期和恢復(fù)期；但對(duì)單胺氧化酶的活性是否有 影響，一直沒有見文獻(xiàn)報(bào)道，本課題組研究發(fā)現(xiàn)，腦栓通膠囊對(duì)單胺氧化酶有明顯的抑制作用，特別是對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的單胺氧化酶B有非常顯著的抑制作用，可用于治療單胺氧化酶B活性高導(dǎo)致的各組臨床疾病，如抑郁癥，老年性癡呆和帕金森氏綜合癥等疾病。單胺氧化酶(monoamine oxidase, MAO),是一種線粒體膜復(fù)合酶,可在大腦和周圍神經(jīng)組織中催化一些生物體產(chǎn)生的胺，氧化脫氨產(chǎn)生過氧化氫.根據(jù)底物選擇性和對(duì)抑制劑的靈敏度，單胺氧化酶被分為A和B兩種。單胺氧化酶A對(duì)底物血清素(5-HT)、去甲腎上腺素(NE)、多巴胺(DA)和抑制劑clorgyline具有高親和性；而單胺氧化酶B則對(duì)苯乙基胺(PEA)、苯甲胺和抑制劑cbprenyl具有高親和性.單胺氧化酶B活力的變化則與帕金森氏綜合癥有關(guān)，已證明在老年人神經(jīng)組織內(nèi)單胺氧化酶B水平升高3倍，阿爾采默茨病(AD)患者單胺氧化酶B活性比正常者高，患者腦組織內(nèi)單胺氧化酶A和單胺氧化酶B的mRNA水平也明顯升高，單胺氧化酶抑制劑是一類由于單胺氧化酶活性過高導(dǎo)致的疾病如抑郁癥，帕金森病和老年性癡呆等疾病具有預(yù)防和治療作用的藥物，如治療抑郁癥的苯乙肼、異唑肼、異丙肼、苯壞丙胺、嗎氯貝胺、溴法羅明、尼亞拉胺、托洛沙酮、德弗羅沙酮，治療帕金森病藥司立吉蘭，治療高血壓的優(yōu)降寧，抗菌藥物呋喃唑酮、灰黃霉素、異煙肼，抗腫瘤藥物甲基芐肼，復(fù)方藥物益康寧等。這些藥物在臨床應(yīng)用多年，取得一定的療效，但對(duì)老年性神經(jīng)元退行性疾病如阿爾采默茨病、帕金森病和抑郁癥的治療還是存在許多困難，主要是這些藥物長期服用均有一些較嚴(yán)重的不良反應(yīng)，影響這些疾病的治療，目前急需尋找一些副作用少的，可以長期服用的保健食品，或藥品，解決這些疾病的治療難題。發(fā)明內(nèi)容由廣東華南藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，由蒲黃，赤芍，郁金，天麻，漏蘆五種中藥組成的腦栓通膠囊(國藥準(zhǔn)字Z20040093)，對(duì)單胺氧化酶B有明顯抑制的藥理學(xué)作用，可用于治療單胺氧化酶B活性高導(dǎo)致的各組臨床疾病，如抑郁癥，老年性癡呆和帕金森氏綜合癥等疾病。實(shí)施例一腦栓通膠囊對(duì)癡呆小鼠腦組織單胺氧化酶B的影響
I材料和方法I. I實(shí)驗(yàn)動(dòng)物昆明小鼠36只，雌雄各半，體重18 22g，由廣州穗北實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司提供，合格證號(hào)SCXK(京)2002-0003。動(dòng)物適應(yīng)性飼養(yǎng)I周后，開始正式實(shí)驗(yàn)。I. 2藥品與試劑腦栓通膠囊(O. 4g/粒)，由廣東華南藥業(yè)集團(tuán)有限公司提供(批準(zhǔn)文號(hào)國藥準(zhǔn)字Z20040093，產(chǎn)品批號(hào)100101)，由蒲黃、赤芍、郁金、天麻、漏蘆五味中藥組成。吡拉西坦片(O. 4g)，由廣東華南藥業(yè)集團(tuán)有限公司提供(批準(zhǔn)文號(hào)國藥準(zhǔn)字H44020779)。D-半乳糖(20100105349，Amresco公司)，單胺氧化酶B試劑盒(南京建成生物工程研究所)，HE染液試劑盒(南京建成生物工程研究所)，其它試劑為市售分析純(天津市大茂化學(xué)試劑廠提供)。
I. 3 儀器Leica 石臘切片機(jī)(Leica2I55, Ieica 公司)；顯微鏡(Nikon eclipse 80i,Japan) JJ500型電子分析天平(MC，江蘇常熟市雙杰測(cè)試儀器廠)；酶標(biāo)儀(Biotek，USA);離心機(jī)(eppendorf, centrifuge 5810 R);游潤混合器(Maxi mix II, Barnstead/Thermolyne);微量移液器；電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱(GZX-9070MBE，上海博迅實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠)；智能水浴鍋(ZKSY-6，鞏義市予華儀器有限責(zé)任公司)；微量Dounce手動(dòng)勻漿器；超純水系統(tǒng)(MILLIPORE QB，美國)。I. 4 方法將36只小鼠隨機(jī)均分為正常對(duì)照組(η = 10)、模型組(η = 10)、腦栓通膠囊組(η = 10)和陽性對(duì)照腦復(fù)康組(η = 6)。模型組、腦栓通膠囊組、腦復(fù)康組每天皮下注射D-半乳糖(120mg/kg)，連續(xù)注射6周，每周稱重一次。正常對(duì)照組每天皮下注射同等體積的生理鹽水。模型對(duì)照組與正常對(duì)照組每天灌胃生理鹽水，腦栓通膠囊組每天灌胃I. 35粒/kg-ld-Ι，腦復(fù)康組0.36g/kg*d-l。于造模給藥第42天，眼球取血處死動(dòng)物。在4°C冰浴條件下迅速取腦，去除嗅球、小腦及腦干，生理鹽水清洗后濾紙吸干于電子分析天平稱重，記錄腦總重量。分開左右腦，右腦放置于密封袋中置冰箱中保存待測(cè)生化指標(biāo)，左腦泡10 %中性福爾馬林固定待腦切片觀察海馬形態(tài)改變。稱右腦加9倍冰生理鹽水制成10%腦勻漿備用，并按照南京建成生物工程研究所單胺氧化酶B試劑盒說明用酶標(biāo)儀測(cè)定腦組織的單胺氧化酶B活性。4d后取左腦海馬常規(guī)脫水、透明、浸蠟、石蠟包埋，冠狀切片，片厚5 μ m,制好片于60°C烘烤Ih后HE染色，染色方法按照南京建成生物工程研究所HE染液試劑盒說明書進(jìn)行染色。染好色后顯微鏡觀察不同倍數(shù)下海馬的組織學(xué)改變，本實(shí)驗(yàn)選取海馬CA1、CA2、CA3及齒狀回各區(qū)進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察。I. 5統(tǒng)計(jì)學(xué)處理使用SPSS軟件進(jìn)行分析，數(shù)據(jù)用均數(shù)土標(biāo)準(zhǔn)差(X土s)表示，組間比較用t檢驗(yàn)，以P < O. 05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2 結(jié)果2. I腦栓通膠囊對(duì)小鼠體重的影響腦栓通膠囊對(duì)小鼠體重的影響見表I :表I腦栓通膠囊對(duì)小鼠體重的影響組別第I周(g) 第2周(g) 第3周(g) 第4周(g)第5周(g)第6周(g)
止常組29. 43±3. 63 28. 46±2. 57 29. 24±3. 12 29. 5±3. 13 29. 69±3. 14 29. 69±3. 29
模型組28. 5±2. 59 27. 52±3. 17 27. 03±3. 62 27. 39±2. 95 27. 76±2. 66 28. 15±2. 39
腦栓通膠囊組 30. 99 + 4. 24 31. 46±4. IIa 30. 64土4. 31A 30. 04士3. 69 29. 49±3. 57 30. 58±3· 06腦復(fù)康組 31. 09±3. 77 30·51±3. 65 30. 03±3. 74 30. 17±3. 51 30. 72±4. 07 29. 51±4. 33注*與正常組比較，P < O. 05 ;厶與模型組比較，P < O. 05，；**與正常組比較，P
<O. 01，△△與模型組組比較，P < O. 01。由表I的結(jié)果可見，正常組前2周體重輕度下降，第3周開始體重有所回升并趨于平衡。模型組前3周體重下降較明顯，第4周開始體重有所回升但不明顯，整個(gè)給藥期間這 一組的體重都比其它組輕。腦栓通膠囊組前2周體重上升，第3周開始至第5周體重下降得較明顯，其間與模型組比較體重有增加的趨勢(shì)，第六周開始體重有所回升。腦復(fù)康組體重變化不大，整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程在Ig范圍內(nèi)波動(dòng)。2. 2腦栓通膠囊對(duì)小鼠腦總重量的影響腦栓通膠囊對(duì)小鼠腦總重量的影響表2 表2腦栓通膠囊對(duì)小鼠腦總重量的影響(x±S)
組別例數(shù)(只)劑量腦組織的總重量(g)
正常組10 —.O. 3±0.02
模型組10 -O, 28 士 0.017*
腦栓通膠囊組101.35 粒/Icg1Cl1O. 297土0·016Λ
腦復(fù)康組' 60.36g I kg*d-l0.29±0.018注*與正常組比較，P < O. 05 ;厶與模型組比較，P < O. 05，；**與正常組比較，P
<O. 01，ΛΛ與模型組組比較，P < O. 01。由表2可見，模型組腦重減輕，與正常組比較有顯著差異(P <0.05);經(jīng)腦栓通膠囊治療后腦重增加，與模型組比較有顯著差異(P <0.05);腦復(fù)康組與正常組、模型組比較未見顯著差異。2. 3腦栓通膠囊對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠腦勻漿單胺氧化酶B的影響腦栓通膠囊對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠腦勻漿單胺氧化酶B的影響表3 表3腦栓通膠囊對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠腦勻漿單胺氧化酶B的影響(X土S)
權(quán)利要求
1.腦栓通膠囊作為單胺氧化酶B抑制劑在臨床治療抑郁癥，老年性癡呆和帕金森氏綜合癥的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及一組中藥復(fù)方在臨床上的應(yīng)用，該中藥復(fù)方是由蒲黃，赤芍，郁金，天麻，漏蘆五種中藥組成的腦栓通膠囊，該中藥復(fù)方腦栓通膠囊作為單胺氧化酶B抑制劑在臨床治療抑郁癥，老年性癡呆和帕金森氏綜合癥的應(yīng)用。實(shí)驗(yàn)研究證明腦栓通膠囊對(duì)單胺氧化酶B的活性有明顯的抑制作用，可以作為單胺氧化酶B抑制劑用于預(yù)防和治療憂郁癥，帕金森氏病和老年性癡呆等疾病。
文檔編號(hào)A61P25/24GK102824597SQ20121018336
公開日2012年12月19日 申請(qǐng)日期2012年5月24日 優(yōu)先權(quán)日2012年5月24日
發(fā)明者吳鐵, 盧旱云, 崔燎, 鄭志明 申請(qǐng)人:廣東醫(yī)學(xué)院, 湛江廣醫(yī)醫(yī)藥科技開發(fā)有限公司